1,721,006 research outputs found
Indagini genetiche per la caratterizzazione di derivati di Cannabis Sativa ad alta concentrazione di tetraidrocannabinolo (THC)
No full textLa specie botanica Cannabis Sativa L. è ampiamente diffusa in molti paesi del mondo
per il largo uso che da migliaia di anni gli esseri umani fanno dei suoi prodotti: le tante
varietà (o sottospecie) di questa pianta, che derivano dalla sua plasticità genetica ma
anche dall’effetto dell’ambiente e dalla manipolazione dell’uomo, ne consentono usi
molto differenti (industriale, alimentare, ricreazionale, medicamentoso).
La capacità di sintetizzare cannabinoidi, tra cui il principale è il delta
tetraidrocannabinolo (THC), è propria delle varietà da resina, caratterizzate da un potere
stupefacente variabile in base a fattori genetici e ambientali, di cui i primi predominanti
in condizioni ambientali stabili [1].
I divieti legislativi imposti da molti Stati in merito a coltivazione, distribuzione e
consumo delle varietà di cannabis con proprietà stupefacenti hanno quindi determinato
un crescente coinvolgimento della comunità forense, tradizionalmente dedicata alla
caratterizzazione chimica dei reperti sequestrati sul mercato clandestino ma più
recentemente interessata anche all’applicabilità, in questo ambito, di metodi analitici
biomolecolari.
Diversi approcci di indagine genetica sono stati ad esempio proposti per l’identificazione
di un campione come appartenente alla specie Cannabis mediante analisi di sequenza (ITS
1 e ITS 2 [2], DNA ribosomale nucleare [3], sequenze nucleotidiche tra i geni trn L e trn F
del DNA cloroplastici), e per l’eventuale individuazione della origine del campione
mediante analisi di polimorfismi (RAPDs: randomly amplified polymorphic DNA [4,5]
AmpFLPs: amplified fragment length polymorphisms [6,7] i microsatelliti o STRs: short
tandem repeats [8-12]).
Questi strumenti di indagine genetica - benché potenzialmente utili da un punto di vista
investigativo - non consentono tuttavia di spiegare un fenomeno di recente osservazione
e che suscita grande apprensione nella collettività in termini di possibili danni alla
salute, quale quello del notevole incremento del potere stupefacente dei derivati di
Cannabis oggetto di sequestro giudiziario.
Infatti, al di là delle imprecise, spesso allarmanti, informazioni fornite dalla stampa a
carattere divulgativo italiana [13] ed europea [14], la pertinente letteratura scientifica
internazionale [15, 22] come pure l’esperienza dei laboratori nazionali di tossicologia
forense [16] e le relazioni di monitoraggio degli organismi politici competenti in
materia di tossicodipendenze [17], indicano in effetti un preoccupante aumento della
concentrazione di THC (attualmente superiore al 20% rispetto al range dell’1,5% - 5%
da sempre registrato [18-21]) della cannabis destinata all’uso voluttuario.
Il motivo di questo incremento di ‘potenza’ della cannabis resta comunque ancora
sconosciuto.
Esso potrebbe, secondo alcuni pareri [22,23] essere legato a sofisticate tecniche di
coltivazione basate ad esempio su creazione e selezione di nuove varietà della pianta,
ovvero su colture idroponiche effettuate in ambienti a luce e calore controllati.
L’avanzare delle conoscenze nel campo della biologia molecolare vegetale lascia,
d’altra parte, spazio ad ipotesi concernenti possibili manipolazioni genetiche.
Le biotecnologie applicate all’agricoltura hanno infatti negli ultimi decenni aperto
ampie prospettive allo sviluppo di nuove varietà vegetali destinate sia alla produzione di
alimenti ma anche di fibre tessili, farmaci e legno .
Le tecnologie del DNA ricombinante si sono evolute in modo esponenziale
perfezionando i protocolli di trasformazione, individuando nuovi vettori di
trasformazione e proponendo tecniche di trasformazione avanzate per l’ottenimento di
piante transgeniche marker free o migliorate nel controllo dell’espressione transgenica.
Per quanto concerne la cannabis ad elevata produzione di THC non si è attualmente a
conoscenza della realizzazione di possibili modifiche trangeniche. Tuttavia alcuni
studiosi [24] hanno proposto l’applicazione di tecniche di ingegneria genetica anche a
piante dotate di tessuti ghiandolari, come lo è la Cannabis Sativa, al fine di
implementare la produzione e l’accumulo di alcune sostanze chimiche di interesse. Il
THC è noto infatti per essere un prodotto terpenico di specifici tessuti ghiandolari (i
tricomi, deputati alla produzione ed all’accumulo di oli essenziali e resine) la cui
produzione può, in astratto, essere aumentata mediante l’uso di tecniche di ingegneria
genetica.
E’ stato inoltre osservato come il gene preposto alla codifica dell’enzima che sintetizza
il THC (THCA sintetasi), di recente isolato e sequenziato [25], sia ubicato nei tricomi
ghiandolari della pianta laddove si ritiene avvenga la produzione e l’accumulo del THC.
La ricerca esposta in questa tesi è stata allora indirizzata dapprima alla tracciabilità di
sequenze transgeniche in campioni di cannabis sequestrati sul mercato clandestino;
secondariamente allo studio quantitativo e di espressione del gene THCA sintetasi.
Per quanto concerne l’applicazione, per campioni di cannabis, di metodi analitici di
tracciabilità di sequenze trangeniche, la strategia individuata è stata ovviamente quella
di escludere approcci di tipo ELISA non avendo alcuna informazione sull’eventuale
presenza di nuove proteine, derivanti da trasformazione genetica, nei nostri campioni
mentre è stato scelto un approccio analitico di tipo PCR per tracciare specifiche
sequenze nucleotidiche. Poiché, però, non si aveva alcuna conoscenza a priori
dell’eventuale presenza di sequenze transgeniche, si è deciso di operare uno screening
di sequenze ricorrenti nei vettori comunemente usati per la trasformazione genetica.
E’ stata quindi selezionata la sequenza del promotore 35S del virus a mosaico del
cavolfiore come quella più comunemente impiegata per il controllo dell’espressione di
transgeni, così come la sequenza del terminatore NOS di Agrobacterium tumefaciens,
ricorrente nella maggior parte dei vettori di trasformazione presenti commercialmente.
Tra i geni marker, introdotti in concomitanza con il transgene per consentire un rapido
screening delle piante effettivamente trasformatesi, si sono scelte la sequenza del gene
nptII, codificante per resistenza a kanamicina ed il gene reporter GUS.
La scelta di tracciare questo pool di sequenze ha consentito di operare uno screening
realistico sui campioni di cannabis disponibili, nell’ipotesi di una loro eventuale
modifica genetica.
Quanto allo studio del gene THCA sintetasi, condotto sia su derivati di cannabis in
sequestro giudiziario che su piante fresche coltivate sperimentalmente (previa
autorizzazione del Ministero della Salute n. SP/254), sono state effettuate con PCR
Real-Time misurazioni del numero di copie del suddetto gene mediante confronto con
un gene endogeno avente la caratteristica di essere presente con lo stesso numero di
copie in tutte le piante di cannabis alto e basso produttrici, usato quindi come
riferimento per la quantificazione del gene target; mediante Reverse Transcriptase in
PCR RealTime è stata poi verificata l’espressione della THCA sintetasi in piante di
cannabis da resina e da fibra.not availabl
Developing a Data-Driven Approach in Order to Improve the Safety and Quality of Patient Care
Get PDFObjective: To improve the safety and quality of patient care in hospitals by shaping clinical pathways throughout the patient journey.
Study Setting: A risk model designed for healthcare organizations in the context of the challenges arising from comorbidity and other treatment-related complexities.
Study Design: The core of the model is the patient and his intra-hospital journey, which is analyzed using a data-driven approach. The structure of a predictive model to support organizational and clinical decision-making activities is explained. Data relating to each step of the intra-hospital journey (from hospital admission to discharge) are extracted from clinical records.
Principal Findings: The proposed approach is feasible and can be used effectively to improve safety and quality. It enables the evaluation of clinical risks at each step of the patient journey.
Conclusion: Based on data from real cases, the model can record and calculate, over time, variables and behaviors that affect the safety and quality of healthcare organizations. This provides a greater understanding of healthcare processes and their complexity which can, in turn, advance research relating to clinical pathways and improve strategies adopted by organizations
Trigemino-Cardiac Reflex as Lethal Mechanism in a Suicidal Fire Death Case
No full textIn the vast majority of immediate fire deaths, the mechanism of death is inhalation of toxic gases (especially carbon monoxide), direct thermal injury, or neurogenic shock due to the redistribution of the body's blood volume produced by surface heat on the skin. We present a suicidal case that is unusual because the mechanism of immediate fire death could arguably be explained in terms of a primitive autonomic reflex/the trigemino-cardiac reflex. Although this reflex is well known to surgeons and anesthetists, with possible lethal consequences in the course of invasive surgical procedures on the head and neck region, it is much less familiar to forensic pathologists
Use of oxygen-ozone therapy to improve the effectiveness of antibiotic treatment on infected arthroplasty: protocol for a superiority, open-label, multicentre, randomised, parallel trial
Get PDFIntroduction Surgical site infections still remain a major public health challenge and have become an increasing universal risk, especially for the implantation of orthopaedic devices. Unfortunately, the discovery and increasingly widespread use (especially the misuse) of antibiotics have led to the rapid appearance of antibiotic-resistant strains today; more and more infections are caused by microorganisms that fail to respond to conventional treatments. Oxygen ozone therapy has been extensively used and studied for decades across various potential medical applications and has provided consistent effects with minimal side effects. This study aims to determine the superiority of oxygen ozone therapy in combination with oral antibiotic therapy in patients with wound infections after an orthopaedic device implantation when compared with antibiotic therapy alone. Methods and analysis This is an open-label, multicentre, randomised, parallel group study that aims to assess the efficacy and safety of oxygen ozone therapy in combination with oral antibiotic therapy to treat infections in patients (male or female aged >= 18 years) having undergone surgery for the implant of an orthopaedic device. Patients must have at least one (but no more than three) postoperative wounds in the site of surgery (ulcers, eschars and sores) and at least one symptom (pain, burning, redness and malodour) and at least one sign (erythema, local warmth, swelling and purulent secretion) of infection of at least moderate intensity (score >= 2) in the target lesion at the screening visit (patients with wounds without signs of localised infection or with undermining wounds will be excluded). Patients (n=186) will be recruited from five Italian hospitals and studied for 7 weeks. All will be assigned to one of the two treatment groups according to a web based, centralised randomisation procedure and placed into either the (1) intervention: oxygen ozone therapy 2-3 times a week for 6 weeks (for a maximum of 15 sessions) simultaneously with an appropriate oral antibiotic therapy prescribed at baseline or (2) control: oral antibiotic therapy prescribed at baseline. The primary outcome is the efficacy and superiority of the treatment (ozone and oral antibiotic therapies); secondary outcomes include the resolution of signs and symptoms, modifications in lesion size and the treatment's safety and tolerability. Ethics and dissemination This study has been reviewed and approved by the responsible Independent Ethics Committee (IEC) of COMITATO ETICO CAMPANIA NORD, located at 'Azienda Ospedaliera San Giuseppe Moscati di Avellino'. After completion of the study, the project coordinator will prepare a draft manuscript containing the final results of the study on the basis of the statistical analysis. The manuscript will be derived by the co-authors for comments, and after revision, it will be sent to a major scientific journal. Findings will be disseminated via online and print media, events and peer-reviewed journals. Trial registration number NCT04787575
A Fatal Mediastinitis Due to a Neck Trauma from an Undeclared Assault
No full textHistory of neck trauma should be promptly investigated in patients with severe infections of the chest as mediastinitis. We present a forensic case of a death due to a mediastinitis in a patient with an undetected fracture of the superior horn of the thyroid cartilage that was exclusively revealed at autopsy examination. Histological analyses of the neck tissues showed signs of pharyngeal mucosal microperforation caused by the fracture and surrounded by an inflammatory reaction. The fracture was caused by a not declared manual strangulation attempt, happened several days before medical evaluations. We share our experience to emphasize the importance of revealing the etiologies of fatal infections of the mediastinum both for clinical and forensic purposes
Death secondary to a donkey's bites
No full textWe present a unique case of death due to the assault and bites of a donkey on a
65-year-old man. The farmer, found dead in his farmyard, had a very deep wound in
the anterior region of the neck, with a sharp transection of the trachea and
severe bleeding by several minor vessels wall disruptions. The cause of death was
established to be massive bleeding combined with asphyxia due to aspiration of
the blood. Moreover, multiple contusions with associated skin abrasions and
perforations were present. The general impression of the injuries was consistent
with an animal's bite marks. Herbivorous or omnivorous bite attacks on humans are
rare; instead, these animals attack by kicking, trampling, and kneeling,
resulting in secondary blunt injuries. The donkey is usually a docile animal, but
its behavior can be aggressive during the mating season, and the possibility of
biting should not be underestimated, as illustrated by the 2 cases published
previously as well as by the case presented here
Is blockchain the breakthrough we are looking for to facilitate genomic data sharing? The European Union perspective
Get PDFThe recent progress of genomics research is providing unprecedented insight into human genetic variance, susceptibility to disease and risk stratification. Current trends predict that a massive amount of genomic data will be produced in the upcoming years which, when coupled with the fast-paced development of the field, will create new social, ethical, and legal challenges. In the complex legislative environment of the European Union, genomic data sharing policies will have to weigh the benefits of scientific discovery against the ethical risks posed by the act of sharing sensitive data. In this complex, interconnected environment, blockchain provides a unique and novel solution to accountability, traceability, and transparency issues regarding genomic data sharing. Implementing a distributed ledger technology-based database could empower both patients and citizens to responsibly use genomic data pertaining to them because it allows for a higher degree of control over the recipients of their data and their uses. The blockchain technology will engage both data owners and policymakers to address the multiple issues of genomic data sharing and allow us to redefine the way we look at genomics
Research Ethics Committee Auditing: The Experience of a University Hospital.
No full textThe authors report the first Italian experience of a research ethics committee (REC) audit focused on the evaluation of the REC's compliance with standard operating procedures, requirements in insurance coverage, informed consent, protection of privacy and confidentiality, predictable risks/harms, selection of subjects, withdrawal criteria and other issues, such as advertisement details and justification of placebo. The internal audit was conducted over a two-year period (March 2009-February 2011) divided into quarters to better value the influence of the new insurance coverage regulation that came into effect in March 2010 (Ministerial Decree of 14 July, 2009) and expand the requirements to safeguard participants in clinical drug trials including other critical items as information and consent and the risks to benefits ratio. Out of a total of 639 REC's opinions and research studies, 316 were reviewed. Regarding the insurance policy requirements, Auditor/REC non-compliance occurred only in one case. The highest number of Auditor/REC non-compliance was in regard to information and consent, which should have incurred a suspended decision rather than a favorable opinion. This internal audit shows the importance and the difficulty of the review process. For this reason, specific courses for members of the research ethics committee and for those who aspire to become auditors will be provided. There may also be efforts to improve the standard operating procedures already in plac
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