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    Caratterizzazione genotipica di mutanti di genome editing di specie vegetali

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    Le piante sono organismi affascinanti in grado di percepire prontamente stimoli endogeni ed ambientali, integrarli e reagire con una rete complessa di risposte fisiologiche. Il concepimento di metodiche innovative di laboratorio è fondamentale per migliorare la conoscenza di questi processi e ideare strategie utili in molteplici settori, come la moderna agricoltura sostenibile e la bioenergia. FISIOLOGIA VEGETALE APPLICATA a cura di Vincenzo Lionetti e Daniela Bellincampi, forti della loro lunga esperienza in campo didattico, sono riusciti a scrivere un testo che sarà di grande aiuto agli studenti e, perché no, anche a curiosi e appassionati, per l’attività pratica di ricerca in laboratorio e per approfondire le procedure analitiche alla base degli studi attuali più rilevanti nel campo della Fisiologia vegetale, curando vari aspetti come la biologia cellulare, la biologia molecolare, la biochimica, l’elettrofisiologia, l’ingegneria genetica e varie applicazioni biotecnologiche. I contenuti sono stati adeguati alle esigenze dei recenti ordinamenti didattici dei corsi di laurea in Scienze biologiche, in Biotecnologie e in Agraria

    Organogenesi somatica in vitro

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    Le piante sono organismi affascinanti in grado di percepire prontamente stimoli endogeni ed ambientali, integrarli e reagire con una rete complessa di risposte fisiologiche. Il concepimento di metodiche innovative di laboratorio è fondamentale per migliorare la conoscenza di questi processi e ideare strategie utili in molteplici settori, come la moderna agricoltura sostenibile e la bioenergia. FISIOLOGIA VEGETALE APPLICATA a cura di Vincenzo Lionetti e Daniela Bellincampi, forti della loro lunga esperienza in campo didattico, sono riusciti a scrivere un testo che sarà di grande aiuto agli studenti e, perché no, anche a curiosi e appassionati, per l’attività pratica di ricerca in laboratorio e per approfondire le procedure analitiche alla base degli studi attuali più rilevanti nel campo della Fisiologia vegetale, curando vari aspetti come la biologia cellulare, la biologia molecolare, la biochimica, l’elettrofisiologia, l’ingegneria genetica e varie applicazioni biotecnologiche. I contenuti sono stati adeguati alle esigenze dei recenti ordinamenti didattici dei corsi di laurea in Scienze biologiche, in Biotecnologie e in Agraria

    Caratterizzazione genotipica e fenotipica di mutanti inserzionali di Arabidopsis: movimenti stomatici

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    Le piante sono organismi affascinanti in grado di percepire prontamente stimoli endogeni ed ambientali, integrarli e reagire con una rete complessa di risposte fisiologiche. Il concepimento di metodiche innovative di laboratorio è fondamentale per migliorare la conoscenza di questi processi e ideare strategie utili in molteplici settori, come la moderna agricoltura sostenibile e la bioenergia. FISIOLOGIA VEGETALE APPLICATA a cura di Vincenzo Lionetti e Daniela Bellincampi, forti della loro lunga esperienza in campo didattico, sono riusciti a scrivere un testo che sarà di grande aiuto agli studenti e, perché no, anche a curiosi e appassionati, per l’attività pratica di ricerca in laboratorio e per approfondire le procedure analitiche alla base degli studi attuali più rilevanti nel campo della Fisiologia vegetale, curando vari aspetti come la biologia cellulare, la biologia molecolare, la biochimica, l’elettrofisiologia, l’ingegneria genetica e varie applicazioni biotecnologiche. I contenuti sono stati adeguati alle esigenze dei recenti ordinamenti didattici dei corsi di laurea in Scienze biologiche, in Biotecnologie e in Agraria

    Extracellular H2O2 induced by oligogalacturonides is not ivolved in the inhibition of the auxin-regulated rolB gene expression in tobacco leaf explants

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    a-1,4-Linked oligogalacturonides (OGs) inhibit auxin-regulated transcriptional activation of a rolB-b-glucuronidase (GUS) gene fusion in tobacco (Nicotiana tabacum) leaf explants (D. Bellincampi, M. Cardarelli, D. Zaghi, G. Serino, G. Salvi, C. Gatz, F. Cervone, M.M. Altamura, P. Costantino, G. De Lorenzo [1996] Plant Cell 8: 477–487). In this paper we show that inhibition by OGs is very rapid, with a short lag time, and takes place even after rolB promoter activation has initiated. OGs also induce a transient and catalase-sensitive accumulation of H2O2 in the leaf explant culture medium. OGs with a degree of polymerization from 12 to 15 are required for both the inhibition of the auxin-induced rolB-driven accumulation of GUS and the induction of H2O2 accumulation. However, OG concentration for half-maximal induction of H2O2 accumulation is approximately 3-fold higher than that for halfmaximal inhibition of rolB promoter activity. The inhibition of rolB promoter activity is not influenced by the addition of catalase or superoxide dismutase, suggesting that H2O2 and superoxide are not involved in this effect. A fungal oligo-b-glucan elicitor induces extracellular H2O2 accumulation at comparable or higher levels than those observed with OGs, but does not prevent the auxininduced accumulation of GUS. We conclude that H2O2 produced upon treatment with OGs is not involved in the inhibition of the auxin-induced expression of the rolB gene

    Stimulation of growth in Daucus carota L. cell cultures by Brassinosteroid.

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    In Daucus corota L. cell culture, the steroid hormone 24-epibrassinolide (BR) induces cell enlargement at 10−6 M, without having any effect on cell multiplication when tested on suspension cultured cells, and increases the plating efficiency when diluted cell suspensions are plated onto agarized culture medium. This improvement of the plating efficiency may be a direct consequence of cell enlargement

    Evidence for the presence of a second conditioning factor in plant cell cultures.

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    Plating efficiency (P.E.) of Daucus carota cells in culture is strongly dependent on cell density, either in the absence or presence of a conditioning factor (CF) previously described. The decrease of plating efficiency with cell dilution is not abolished by an increase of CF concentration or by CFs produced from different species. The dependence of the multiplication on cellular density is unchanged also after addition of Brassinosteroid, a hormone which increases the plating efficiency synergistically with CF. Direct contact of seeded cells with callus cultures, separated by a dialysis membrane, completely abolishes the phenomenon providing evidence for the presence of a second conditioning factor

    Transgenic expression of pectin methylesterase inhibitors limits tobamovirus spreading in tobacco and Arabidopsis

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    Plant infection by a virus is a complex process influenced by virus-encoded factors and host components which support replication and movement. Critical factors for a successful tobamovirus infection are the viral movement protein (MP) and the host pectin methylesterase (PME), an important plant counterpart that cooperates with MP to sustain viral spread. The activity of PME is modulated by endogenous protein inhibitors (pectin methylesterase inhibitors, PMEIs). PMEIs are targeted to the extracellular matrix and typically inhibit plant PMEs by forming a specific and stable stoichiometric 1:1 complex. PMEIs counteract the action of plant PMEs and therefore may affect a plant’s susceptibility to a virus. To test this hypothesis, we overexpressed genes encoding two well-characterized PMEIs in tobacco and Arabidopsis plants. Here, we report that, in tobacco plants constitutively expressing a PMEI from Actinidia chinensis (AcPMEI), systemic movement of Tobacco mosaic virus (TMV) is limited and viral symptoms are reduced. A delayed movement of Turnip vein clearing virus (TVCV) and a reduced susceptibility to the virus were also observed in Arabidopsis plants overexpressing AtPMEI-2. Our results provide evidence that PMEIs are able to limit tobamovirus movement and reduce plant susceptibility to the virus
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