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The advantages of using a combination of LDL and glutamine in comparison with TRIS egg yolk and Equex® STAMP extenders in the cryopreservation of canine semen
Bencharif, Djemil Amirat-Briand, Lamia Garand, Annabelle Anton, Marc Schmitt, Eric Desherces, Serge Delhomme, Guy Langlois, Marie-Laure Barriere, Paul Destrumelle, Sandrine Vera-Munoz, Oscar Tainturier, Daniel46ELSEVIER SCI LTD[Bencharif, Djemil; Amirat-Briand, Lamia; Garand, Annabelle; Destrumelle, Sandrine; Vera-Munoz, Oscar; Tainturier, Daniel] Oniris, Ecole Natl Vet Agroalimentaire & Alimentat, Lab Biotechnol & Pathol Reprod, F-44307 Nantes, France. [Anton, Marc] INRA, Equipe Interfaces & Syst Disperses, Biopolymeres Interact Assemblages UR1268, F-44316 Nantes 3, France. [Schmitt, Eric; Desherces, Serge; Delhomme, Guy] IMV Technol, F-61302 Aigle, France. [Langlois, Marie-Laure; Barriere, Paul] CHU Hotel Dieux, Dept Reprod Pathol Mother & Child, F-44093 Nantes 1, [email protected] audienc
Evaluation de la qualité de la semence après ajout d'un antioxydant, l'Oxyfree dans les milieux de conservation de semence bovine
Vingt éjaculats de quatre taureaux différents ont été congelés dans trois milieux différents : un milieu LDL, un milieu à base de jaune d œuf et un milieu à base de lécithines de soja. La mobilité de la semence, la viabilité et l intégrité acrosomale ont été mesurées. Aucune différence significative n a été mise en évidence pour la mobilité totale et la mobilité progressive. Des différences significatives sont observées pour les paramètres de vélocité (VAP, VSL, VCL). Après ajout d Oxyfree®, une augmentation significative de l ALH et une diminution significative de la BCF ont été observées. Aucune différence n a été observée concernant la viabilité des spermatozoïdes et l intégralité acrosomale.TOULOUSE-EN Vétérinaire (315552301) / SudocNANTES-Ecole Nat.Vétérinaire (441092302) / SudocSudocFranceF
Etude de la maladie de schmallenberg et comparaison avec les autres orthobunyavirus à syndrome arthrogrypose/hydranencéphalie
L auteur présente le virus Schmallenberg et le compare avec les autres Orthobunyavirus à syndrome arthrogrypose/hydranencéphalie retrouvés dans d autres régions du monde. Sont successivement présentés dans cette étude bibliographique : leurs épidémiologies, leurs étiologies, leurs pathogénies, les symptômes et lésions engendrés, leurs diagnostics, leurs traitements et leurs prophylaxies.TOULOUSE-EN Vétérinaire (315552301) / SudocNANTES-Ecole Nat.Vétérinaire (441092302) / SudocSudocFranceF
Méthode d'abord d'une mauvaise fréquentation du robot de traite chez la vache laitière
La traite robotisée est de plus en plus choisie par les éleveurs, apportant un certain confort mais surtout permettant de traire les vaches plus de deux fois par jour. La fréquentation du robot de traite correspond au nombre de traites par vache par jour elle doit être d au moins 2.5 traites par jour. Une fréquentation inférieure à 2,2 nécessite d en objectiver les causes car elle est responsable de la chute de production laitière, diminution de la durée de lactation, de mammite, etc.... L objectif de notre étude était d aider le vétérinaire praticien à résoudre le problème de sous fréquentation en élevage en identifiant les causes en se basant sur des fiches d aide à la visite. Ces fiches ont été réalisées à partir d une étude bibliographique puis ont été utilisées dans 5 élevages n atteignant pas leur objectif soit en terme de fréquentation, de quantité de lait ou de vaches à pousser vers le robot/j. Trois élevages sur les cinq testés ont atteint leurs objectifs, 1 élevage n a pas atteint ses objectifs et 1 élevage n a pas donné suite à l étude. La méthodologie employée serait applicable et efficace ; elle permettrait au vétérinaire de n oublier aucun facteur de risque. Cependant l application sur un plus grand nombre d élevages permettrait de confirmer les résultats préliminaires obtenus dans notre étude et de valider cette méthode.NANTES-Ecole Nat.Vétérinaire (441092302) / SudocTOULOUSE-EN Vétérinaire (315552301) / SudocSudocFranceF
La reproduction des ovins (sa maîtrise et sa mise en œuvre dans les élevages (DVD-rom))
Une synthèse scientifique et technique richement illustrée à propos de la reproduction du mouton est proposée sur DVD-rom. L anatomie et la physiologie de la reproduction ovine sont abordées dans une première partie. Puis, la conduite de la reproduction des ovins, depuis la préparation de la lutte jusqu aux soins postpartum, est décrite en essayant d être le plus pratique possible et proche de la réalité.NANTES-Ecole Nat.Vétérinaire (441092302) / SudocTOULOUSE-EN Vétérinaire (315552301) / SudocSudocFranceF
Effet de la variation de concentration en lipoprotéines à faible densité (LDL) sur la mobilité des spermatozoïdes bovins conservés dans les paillettes faiblement dosées
Une diminution de la mobilité des spermatozoïdes a été observée dans une étude récente parallèlement à la dilution de la semence dans le dilueur LDL 8% (MS) : plus le nombre de spermatozoïdes par paillette était faible, plus la mobilité après décongélation était réduite. L objectif de notre étude est de vérifier l hypothèse selon laquelle cette chute de mobilité était due au fait qu il fallait ajuster la teneur en LDL dans les dilueurs pour de plus faibles concentrations en spermatozoïdes. Vingt quatre éjaculats provenant de six taureaux ont été congelés-décongelés dans différents dilueurs LDL à 6, 8, 10 et 12% (MS) et conditionnés à 20 et 60.106 spz/mL. Nous avons pris comme témoin la semence congelée-décongelée dans le dilueur LDL à 8% (MS) et conditionnée à la concentration de 80.106 spz/mL. La mobilité de la semence décongelée a été évaluée par analyse assistée par ordinateur (Hamilton Thorn). Une diminution de la mobilité a été observée avec la dilution de la semence, résultat en concordance avec les études précédentes. Aucune différence significative de mobilités n a été mise en évidence pour les teneurs de 8, 10 et 12 % en LDL (p > 0,05). Cependant, la teneur en LDL de 6% a donné de mauvais résultats de mobilité quelle que soit la concentration en spermatozoïdes (p < 0,02). En conclusion, nos résultats ont montré que le dilueur LDL 8% classiquement utilisé pour les concentrations usuelles en spermatozoïdes pouvait également être utilisé pour de plus basses concentrations, l ajustement de la teneur en LDL n améliorant pas la mobilité. Il faudrait s orienter vers l hypothèse selon laquelle la diminution de la mobilité serait liée à dilution du plasma séminal et de ses composants, qui ne seraient plus assez concentrés pour apporter leur rôle protecteur.NANTES-Ecole Nat.Vétérinaire (441092302) / SudocTOULOUSE-EN Vétérinaire (315552301) / SudocSudocFranceF
Le guépard (aspects d'anatomie et de reproduction)
Après une présentation du guépard (Acinonyx jubatus) centrée sur son anatomie et sa reproduction, deux études sont présentées. Une première, basée sur des dissections de membres pelviens de guépards, montre que ce membre propulseur possède de nombreuses adaptations pour la vitesse. Une seconde met en place un protocole de reproduction dans un refuge animalier possédant 6 guépards adultes à Djibouti en Afrique. Aucune portée n a été obtenue mais ce travail pourra servir de base à d autres essais au sein même de ce refuge.NANTES-Ecole Nat.Vétérinaire (441092302) / SudocTOULOUSE-EN Vétérinaire (315552301) / SudocSudocFranceF
ProAKAP4 biomarqueur de qualité spermatique et de fertilité chez les grands animaux domestiques
La proAKAP4 est une protéine de structure strictement localisée au niveau du flagelle des spermatozoïdes de mammifères. L’objectif principal de cette thèse est d’évaluer la proAKAP4 comme biomarqueur de qualité spermatique chez le taureau, l’étalon et l’âne. Une série d’expérimentations ont été menées chez ces trois espèces, comprenant la comparaison de concentration de proAKAP4 avec des paramètres de mobilité dans différentes conditions, y compris en post décongélation, avec ou sans cryoprotecteur, et à travers des calculs et de mises en évidence de sous populations. De plus les résultats d’insémination chez le taureau ont été analysés rétrospectivement et mis en corrélation avec les valeurs de proAKAP4. Notre étude a permis de localiser et d’identifier pour la première fois la proAKAP4 chez l’âne, tandis que chez l’étalon les concentrations en proAKAP4 ont été comparées avant et après le processus de congélation/décongélation afin d’évaluer l’impact de la cryoconservation. Les résultats ont révélé des corrélations positives entre les concentrations de proAKAP4 et la motilité totale et progressive chez les ânes, les taureaux et les étalons ainsi qu’avec certains paramètres de vélocité. En revanche chez les étalons une corrélation négative a été observée avec la sous population de spermatozoïdes les plus lents. Cette expérience suggère un seuil de qualité de 37,77 ng/10M de spermatozoïdes dans le sperme post-congélation. De plus l’étude sur les effets de la congélation décongélation sur les concentrations de proAKAP4 dans le sperme équin a indiqué une réduction de 72,1%. Chez les taureaux, les concentrations de proAKAP4 étaient positivement corrélées avec la fertilité en prenant comme critère le taux de non-retour à 90j, avec un seuil de 39,55 ng/10M de spermatozoïdes. En conclusion, les résultats de cette thèse montrent que la proAKAP4 constitue un marqueur fiable de la motilité des spermatozoïdes et offre des perspectives en tant que biomarqueur potentiel de la fertilité chez les grands animaux domestiques.The ProAKAP4 protein is a strictly localized structural protein found in the flagellum of spermatozoa, identified as a marker for sperm mobility reserve. The main objective of this thesis was to characterize and evaluate this protein as a new biomarker for sperm quality in stallions, donkeys, and bulls. To achieve this, a series of experiments were conducted on these three species. The concentration of proAKAP4 in ejaculates was measured using a commercial ELISA kit and then compared to motility parameters under different conditions at T0, T1h, T3h, post-thaw with or without cryoprotectant, and through calculations of subpopulations, mitochondrial activity was also evaluated. In bulls, we aimed to correlate proAKAP4 concentrations with retrospective data from insemination results. Our study successfully localized proAKP4 for the first time in donkeys at the level of sperm flagellum. Additionally, we demonstrated a positive correlation between proAKAP4 concentration and total and progressive motility as well as certain velocity parameters in the species studied here. However, a negative correlation was observed in stallions with the slowest subpopulation of spermatozoa, suggesting a quality threshold of 37.77 ng/10M spermatozoa in post-thaw semen. Furthermore, an analysis of the effects of the freeze thaw cycle on proAKAP4 concentrations in equine semen indicated a reduction of 72.1%. In bulls, proAKAP4 concentrations were positively correlated with the non-return rate at 90 days, a fertility evaluation parameter used by artificial insemination centers. We were able to determine a threshold concentration of proAKAP4 below which bulls were considered less fertile (39.55 ng/10M spermatozoa). In conclusion, the findings of this thesis demonstrate that proAKAP4 could be used as a new biomarker for sperm quality correlated with motility in bulls, stallions, and donkeys, thus opening up possibilities for fertility predictio.La ProAKAP4 és una proteïna estructural estrictament localitzada al flagel dels espermatozoides identificada com a testimoni de la reserva de mobilitat espermàtica. L'objectiu principal d'aquesta tesi era caracteritzar i avaluar aquesta proteïna com a nou biomarcador de qualitat espermàtica en el semental, el ruc i el toro. Per aconseguir-ho, es van dur a terme una sèrie d'experiments en aquestes tres espècies. La concentració de proAKAP4 dels ejaculats es va mesurar amb un kit ELISA comercial i després es va comparar amb els paràmetres de motilitat en diferents condicions a T0, T1h, T3h, post descongelació amb o sense crioprotector, i mitjançant càlculs de subpoblacions, també es va avaluar l'activitat mitocondrial. En el cas del toro, vam voler relacionar les concentracions de proAKAP4 amb les dades retrospectives dels resultats d'insseminació. El nostre estudi ha permès localitzar la proAKP4 per primera vegada al ruc al nivell del flagel·lum dels espermatozoides. A més, hem demostrat, en les espècies estudiades aquí, una correlació positiva entre la concentració de proAKAP4 i la motilitat total i progressiva així com amb alguns paràmetres de velocitat. En canvi, s'ha observat una correlació negativa en el semental amb la subpoblació d'espermatozoides més lenta, en la mateixa experiència es suggereix un llindar de qualitat de 37,77 ng/10M d'espermatozoides en el sèmen en condicio després de descongelar. A més, un anàlisi sobre els efectes del cicle de congelació descongelació sobre les concentracions de proAKAP4 en el sèmen equí ha indicat una reducció del 72,1%. En el cas del toro, les concentracions de proAKAP4 estaven positivament correlacionades amb la taxa de no retorn a 90 dies, paràmetre d'avaluació de la fertilitat utilitzat pels centres d'inseminació artificial. Vam poder determinar un llindar de concentració de proAKAP4 per sota del qual els braus eren considerats menys fèrtils (39,55 ng/10M d'espermatozoides). En conclusió, els treballs d'aquesta tesi han pogut mostrar que la proAKAP4 podia ser utilitzada com a nou biomarcador de qualitat espermàtica correlacionat amb la motilitat en el toro, el semental i el ruc, obrint perspectives de predicció de la fertilitat
Etude de l'impact des écoulements vaginaux purulents sur les performances de reproduction chez la vache allaitante dans une clientèle vétérinaire française
Les liens entre santé utérine des vaches allaitantes et leurs performanes de reproduction ont été peu étudiées à ce jour, en particulier en France. Suite à l'étude de Claes et al. (202), une seconde étude des écoulements vaginaux entre le vêlage et la mise à la reproduction a été réalisée sur le terrain sur 209 vaches de race Blonde d'Aquitaine et Charolaise. La définition des écoulements vaginaux purulens retenue (score supérieur ou égal à 3) est issue des publications en élevage laitier et llaitant. La prévalence des écoulements vginaux purulents entre 21 et 44 jours post-partum est de 13.5% (11.5% de Blonde d'Aquitaine et 2% de Charolaise). Après avoir combiné nos données sur les performances de reproduction avec celles de Claes et al. (2021), il a été mis en évidence une diminution de la probabilité de gestation à 100 jours posst-partum chez les vaches multipares mises à la reproduction avant 60 jours post-partum. Bien que les modèles statistiques utilisés ne respectent pas les conditions de normaliténécessaires à une interprétation fiable, il semble exister un allongement de l'intervalle vêlage-fécondation chez cette même catégorie d'individus (+20.5 jours). A la lumière de ces deux études, un examen vaginal ciblé pourrait être réalisé à la mise à la reproduction sur les vaches dont l'anamnèse rapporte une césarienne, un prolapsus utérin ou une non-délivrance à la suite du vêlage, un veau de plus de 53 kg à la naissance ou un vêlage en fin de période (intervalle vêlage-mise au taureau inférieur à 60 jours). Ceci pourrait permettre d'envisager, chez ces individus, une réforme ou un traitement antibiotique et éventuellement hormonal
Cryoconservation de la semence bovine dans les liposomes : mise au point d'un nouveau dilueur
Les dilueurs à base de jaune d'œuf sont communément employés pour la congélation de la semence bovine. Cependant, étant donné la préoccupation mondiale accrue en matière de sécurité biologique, il existe depuis quelques années une demande croissante de mise sur le marché d'un dilueur de semence bovine exempt de produits d'origine animale. A ce jour, les alternatives trouvées sont l'utilisation de lécithines de soja et de liposomes dans les dilueurs à la place du jaune d'œuf. L'efficacité des lécithines de soja fait toujours débat. Au contraire, les quelques études réalisées sur les dilueurs à base de liposomes semblent s'accorder sur le fait que les liposomes puissent être une alternative de choix pour la dilution de la semence bovine. Nous avons souhaité dans cette étude mettre en évidence leur efficacité en les comparant à deux dilueurs témoins (BULLXcell® à base de 20% de jaune d'œuf et LDL 8%) et trouver la concentration optimale permettant d'obtenir les meilleurs paramètres de mobilité tout en conservant l'intégrité des membranes plasmiques et acrosomiques. Les liposomes ont été élaborés par l'entreprise IMV Technologies à partir des phospholipides d'intérêt du jaune d'œuf et testés à des concentrations comprises entre 0.5 et 2.5 g de phospholipides / 100mL. Dans cette étude, 7 taureaux appartenant à deux structures différentes (ONIRIS et CRITER) ont été récoltés au vagin artificiel afin de récolter entre 12 et 22 éjaculats par expérience. Une première expérience réalisée avec 6 taureaux et 22 éjaculats a montré que la température de conservation du dilueur avant utilisation impactait les résultats post-décongélation(Expérience n°1 et 2a). Une congélation à - 23°C du dilueur à base de liposomes engendre l'apparition d'un précipité qui entrave la visualisation correcte des spermatozoïdes à l'analyseur d'image. D'autre part, il augmente la viscosité du dilueur. De plus, la première formulation du dilueur liposome testé avait un pH trop acide (5.3) pour permettre aux spermatozoïdes d'avoir une activité optimale et une concentration en glutathion trop élevée toxique pour les spermatozoïdes. Ces deux éléments étaient d'ailleurs à l'origine de trajectoires très tortueuses et les paramètres de mobilité obtenus étaient inférieurs ou égaux aux dilueurs témoins (54 et 58 % (liposomes) vs 58 % (témoins) pour la mobilité totale ; 29 % (liposomes) vs 42 % (témoins) pour la mobilité progressive). L'intégrité des membranes était tout de même conservée (58-63 % (liposomes) vs 60-64 % (témoins) pour l'intégrité de la membrane plasmique ; 85-86 % (liposomes) vs 86-88 % (témoins) pour l'intégrité de la membrane acrosomique (Expérience n°2b). Une seconde formulation du dilueur (conservé à +4°C) a été mise au point en ajustant le pH (6.4 et 6.8) et la quantité en glutathion introduite. Dans cette autre expérience (Expérience n°3), 4 taureaux et 16 éjaculats ont été exploités. Les dilueurs à base de liposomes présentent un pourcentage de spermatozoïdes mobiles supérieur aux dilueurs témoins (57-60% (liposomes) vs 51-53 % (témoins) (p˂0.05). Les concentrations de 1.5 et 1.75 g de phospholipides / 100mL accordent les meilleurs résultats de mobilité (60%) (NS). Le pourcentage de spermatozoïdes progressifs est lui aussi supérieur aux témoins (NS) (38-41 % (liposomes) vs 38-39 % (témoins). Il semble donc que les liposomes à une concentration comprise entre 1.5 et 1.75 gde phopholipides / 100 mL soient plus efficace pour la cryoconservation de la semence bovine que les dilueurs à base de jaune d'œuf et de LDL
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