Qazvin University of Medical Sciences
Qazvin University of Medical Sciences RepositoryNot a member yet
10283 research outputs found
Sort by
Isolation, Characterization and in vitro Evaluation of Specific Bacteriophages Targeting Extensive Drug Resistance Strains of Pseudomonas aeruginosa Isolated from Septic Burn Wounds
Full text linkBackground: Antibiotic resistant bacteria and various infections caused by them especially
extensive drug resistance (XDR) strains and worrying statistics of mortality due to these
strains and also the lack of a clear vision for development and production of new effective
antibiotics have made the necessity of using alternative therapies more apparent.
Materials and Methods: In this study, specific phages affecting the Pseudomonas aeruginosa
XDR strain were extracted from hospital wastewater and their laboratory characteristics
along with lysis effect on 40 XDR strains of P. aeruginosa were investigated.
Results: The results indicated that three isolated phages (PaB1, PaBa2 and PaBa3) belonged
to the Myoviridae and Pododoviridae families and were specific to Pseudomonas aeruginosa strains.
More than 98% of phages absorbed their host in less than 10 minutes (Adsorption time <10
min) and completed their lytic cycle after 40 minutes (latent time = 40 min). Burst size of
PaBa1, PaBa2 and PaBa3 was 240, 250 and 220 pfu/cell, respectively. PaBa1 lysed 62.5% of the
XDR strains with the highest efficiency. The three Phage cocktail was effective against 67.5%
of the studied strains.
Conclusion: The results of this study indicate the significant potential of these phages for
therapeutic use and prophylaxis of infections caused by this bacterium.
Keywords: Bacteriophage; Pseudomonas aeruginosa; Drug resistance; Antibiotic resistanc
Cone beam computed tomography, an overlooked modality in validated image ordering guidelines for odontogenic infections
No full text
ارزیابی اثر باکتریوفاژ اختصاصی در بهبود روند درمان زخمهای عفونی شده با کلبسیلا پنومونیه در مدل موشی
Full text linkچکیده فارسی
عنوان پایاننامه: ارزیابی اثر باکتریوفاژ اختصاصی در بهبود روند درمان زخمهای عفونی شده با کلبسیلا پنومونیه در مدل موشی
استاد راهنما: دکتر فرهاد نیکخواهی- گروه میکروبشناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی قزوین
[email protected]
سابقه و هدف: عفونت زخم سالانه در سراسر جهان، افراد زیادی را تحت تاثیر قرار میدهد. عفونت زخم با عوامل باکتریایی متعدد میتواند تهدید کننده حیات بیمار باشد. باکتریهای مختلفی میتوانند عامل عفونت زخم باشند. از جمله این باکتریها می توان به استافیلوکوکوس اورئوس، سودوموناس آئروژینوزا و اشریشیا کلای اشاره کرد. اما گزارشات سالهای اخیر نشان دهنده افزایش شیوع کلبسیلا پنومونیه در موارد عفونت زخم میباشند. دارا بودن عوامل ویرولانس مختلف، از جمله کپسول، فیمبریه و سیدروفورهای جذب آهن و همچنین توانایی تولید بیوفیلم، این باکتری را به چالش جدی در بالین، تبدیل کرده است. از طرفی مقاومتهای آنتیبیوتیکی گسترده که در مورد این باکتری گزارش شده است، خطری بزرگ برای سیستم بهداشت جهانی می باشد و می تواند به سرعت، درمان آنتیبیوتیکی علیه کلبسیلا پنومونیه را محدود کند. بنابراین، محققان روشهای جدیدتری را برای کنترل عوامل عفونی مقاوم به دارو پیشنهاد میکنند. یکی از این عوامل، باکتریوفاژها هستند. باکتریوفاژها یا فاژها، ویروسهایی هستند که به باکتریها حمله می کنند و آنها را از بین میبرند. فاژها برای باکتریها اختصاصی هستند و نمیتوانند آسیبی به فلور نرمال بدن و حتی سلولهای یوکاریوت برسانند. این مطالعه با هدف جداسازی باکتریوفاژ موثر بر علیه کلبسیلا پنومونیه ویرولانت و مقاوم به چند دارو و بررسی اثر آن در محیط in vivo طراحی شد.
روش بررسی: نمونههای کلبسیلا پنومونیه از زخمهای عفونی جداسازی شد و پس از تعیین هویت فنوتیپی و ژنوتیپی، ویژگیهای آنها مورد بررسی قرار گرفت. حساسیت آنتیبیوتیکی سویهها (به روش دیسک دیفیوژن) و همچنین توانایی تولید بیوفیلم آنها (به روش میکروپلیت) ارزیابی شد. سپس ژنهای ویرولانس سویهها (به روش PCR) شناسایی شدند. ارتباط حضور ژنهای ویرولانس و توانایی تولید بیوفیلم، و همچنین ارتباط تولید بیوفیلم و میزان مقاومت آنتیبیوتیکی بررسی شد. نهایتا یک سویه مقاوم به چند دارو و ویرولانت و دارای توانایی تولید بیوفیلم قوی انتخاب شد و در ادامه مطالعه برای جداسازی فاژ، استفاده شد.
نمونههای فاضلاب به عنوان منابع فاژ، تهیه شدند. جداسازی فاژ با استفاده از روشهای استاندارد ذکر شده، انجام شد. پس از تعیین میزبان فاژ (به روش spot test) و تعیین مورفولوژی آن (با استفاده از میکروسکوپ TEM)، تیتر فاژ تعیین شد و در نهایت اثر درمانی فاژ در مقایسه با آنتیبیوتیک جنتامیسین، در مدل حیوانی مورد ارزیابی قرار گرفت.
یافتهها: براساس نتایج تعیین هویت فنوتیپی و ژنوتیپی، تعداد 74 سویه کلبسیلا پنومونیه جداسازی شد. نتایج تعیین حساسیت آنتیبیوتیکی نشان دادند که تعداد 57 سویه، سویه مقاوم به چند دارو بودند. همچنین نشان داده شد که همه سویههای جداسازی شده، توانایی تولید بیوفیلم را داشتند و 53 سویه، تولید کننده قوی بیوفیلم بودند. شایعترین ژنها در میان ایزولهها ژنهای entB ، fimH ، mrkD و mrkA بودند. بین حضور ژنهای fimH، mrkD، mrkA و wcaG و توانایی تولید بیوفیلم ارتباط معناداری وجود داشت (0.05 P<). همچنین، مقاومت به سفازولین، سفوروکسیم، سفوتاکسیم، سفتازیدیم، سفوکسیتین، سفپیم، تری متوپریم-سولفامتوکسازول و آمیکاسین در بین سویههای تولید کننده بیوفیلم، به طور معناداری، بالاتر بود (0.05 P<).
باکتریوفاژ مورد استفاده در مطالعه، از نمونه فاضلاب بیمارستانی جداسازی شد. نتایج تعیین میزبان باکتریوفاژ نشان داد که این فاژ کاملا اختصاصی برای کلبسیلا پنومونیه مورد مطالعه بود و هیچگونه اثر لیتیکی بر روی سویههای استاندارد موجود در آزمایشگاه، نداشت. براساس مورفولوژی فاژ در عکسهای میکروسکوپ الکترونی TEM (سر Icosahedral و دم طویل) احتمالا این فاژ از خانواده سیفوویریده می باشد. در مدل حیوانی این فاژ به خوبی عفونت زخم با کلبسیلا پنومونیه را درمان کرد و اثر درمانی آن قابل مقایسه با جنتامیسین بود.
نتیجهگیری: با توجه به شیوع روز افزون مقاومتهای آنتیبیوتیکی در بین سویههای کلبسیلا پنومونیه، و با توجه به ویژگیهای مناسب و اثرگذاری باکتریوفاژ جداسازی شده در این مطالعه برای مقاصد فاژتراپی، مطالعات بیشتر بر روی این عوامل پیشنهاد میشود تا بتوان در آینده، از فاژتراپی به طور گسترده در درمان عفونتهای مرتبط با باکتریهای مقاوم به چند دارو، استفاده کرد.
واژگان کلیدی: کلبسیلا پنومونیه، عفونت زخم، باکتریوفاژ، فاکتورهای ویرولانس، بیوفیلم، مقاومت آنتیبیوتیک
