Theses.fr
Not a member yet
182636 research outputs found
Sort by
Characterization of Molecular Mechanisms of TXNDC5 and Its Role in Squalene Response Using Various Drug Delivery Systems in the AML12 Cell Line
No full textMaladie hépatique stéatosique associée à un dysfonctionnement métabolique (MASLD), anciennement connue sous le nom de stéatose hépatique non alcoolique (NAFLD) est induite par l'accumulation de graisse dans le foie. Le stress du réticulum endoplasmique (RE), le stress oxydatif et le dysfonctionnement mitochondrial sont des éléments nécessaires au développement de la MASLD. La protéine qui contient la thioredoxine de type 5 (TXNDC5) est un membre de la famille des thioredoxines et joue un rôle central en tant que chaperon du RE impliqué dans le maintien de l'homéostasie cellulaire dans des conditions de stress. L'objectif de cette étude était d'étudier les effets du TXNDC5 sur l'action du squalène, un antioxydant naturel présent dans l'huile d'olive vierge, délivré par divers systèmes d'administration de médicaments pour améliorer sa biodisponibilité. Le squalène a été encapsulé dans des nanoparticules de PLGA et de chitosane dans le but d'améliorer son absorption cellulaire dans les cellules AML12 (foie de souris alpha) et les cellules AML12 déficientes en TXNDC5 (KO) produites par la technologie CRISPR/Cas9. La caractérisation des nanoparticules par microscopie électronique, diffusion dynamique de la lumière, analyse du potentiel zêta et chromatographie liquide haute performance a confirmé l'encapsulation et l'inclusion efficaces du squalène à différentes concentrations. L'encapsulation du squalène dans des nanoparticules de chitosane a démontré une absorption cellulaire significativement améliorée par rapport aux vecteurs de médicaments PLGA et éthanol. Cela permet l'administration de doses plus élevées, qui améliorent la viabilité des hépatocytes et réduisent les niveaux de ROS, compensant efficacement les effets indésirables du déficit en TXNDC5 dans le contexte de la protection contre le stress des hépatocytes.Les tests de viabilité cellulaire ont montré que TXNDC5 joue un rôle important dans la modulation de la viabilité cellulaire dans des conditions de stress oxydatif et ER, comme en témoigne le fait que le squalène réduit efficacement les ROS dans les cellules AML12 tout en augmentant les ROS dans les cellules déficientes en TXNDC5. Il a été observé que le squalène améliore la viabilité cellulaire dans des conditions de stress ER en diminuant l'expression des marqueurs de stress ER, notamment ERN1 et EIF2AK3, et en induisant l'expression de protéines protectrices telles que GPx4. Pour déterminer la fonction de TXNDC5 dans les lignées cellulaires AML12 et KO, la tunicamycine, l'acide palmitique et la thapsigargine ont été utilisés comme facteurs de stress. Les résultats de l'expression protéique des marqueurs de stress ER les plus importants ont révélé que parmi eux, les protéines ERN1 et EIF2AK3 étaient régulées à la baisse et HSPA5 était régulée à la hausse. La tunicamycine a perturbé les niveaux de protéines de HSPA5, ERN1 et EIF2AK3 dans les cellules KO. L'acide palmitique a modifié les niveaux de protéines des capteurs de stress du RE, tels que ATF6, HSPA5 et EIF2AK3. TXNDC5 a interagi avec PRDX6 et HSPA9, des protéines impliquées dans la régulation redox de la peroxydation lipidique et du glutathion, et avec la perte de TXNDC5, ces voies ont des activités réduites, comme cela a été enregistré par la réduction de la peroxydation lipidique et du glutathion.En conclusion, ces résultats montrent que TXNDC5 est un modulateur de multiples voies de signalisation impliquées dans les stress oxydatifs et induits par le RE dans les hépatocytes, que le squalène, administré par l'intermédiaire de nanoparticules de PLGA et de chitosane, empêche l'action de ces stress et soutient son action protectrice par les implications thérapeutiques sous-jacentes de la modulation de TXNDC5 avec un système d'administration de médicaments ciblés pour protéger le foie.Metabolic dysfunction-associated steatotic liver disease (MASLD), previously known as non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) is induced by fat accumulation within the liver. Endoplasmic reticulum (ER) stress, oxidative stress, and mitochondrial dysfunction are necessary elements in the development of MASLD. Thioredoxin domain-containing 5 (TXNDC5) is a member of the thioredoxin family and plays a pivotal role as an ER chaperone involved in maintaining cellular homeostasis in stress conditions. Nevertheless, the precise molecular mechanisms through which TXNDC5 exerts its effects on hepatocytes under conditions of oxidative and ER stress remain incompletely understood. The objective of this study was to investigate the effects of TXNDC5 on squalene action, a natural antioxidant found in virgin olive oil, delivered through various drug delivery systems to enhance its bioavailability. Squalene was encapsulated in PLGA and chitosan nanoparticles with the aim of enhancing its cellular uptake in AML12 (alpha mouse liver) cells and TXNDC5-deficient AML12 cells (KO) produced by CRISPR/Cas9 technology. Characterization of the nanoparticles by electron microscopy, dynamic light scattering, zeta potential analysis, and high-performance liquid chromatography confirmed efficient encapsulation and inclusion of squalene at different concentrations. The encapsulation of squalene in chitosan nanoparticles demonstrated a significantly enhanced cellular uptake in comparison to the PLGA and ethanol drug carriers. This enables the administration of higher doses, which enhance hepatocyte viability and reduce ROS levels, effectively compensating for the adverse effects of TXNDC5 deficiency in the context of hepatocyte stress protection.Cell viability assays showed that TXNDC5 has an important role in modulating cell viability under conditions of oxidative and ER stress, as evidenced by the fact that squalene effectively reduced ROS in AML12 cells while increasing ROS in TXNDC5-deficient cells. Squalene was observed to enhance cell viability under conditions of ER stress by decreasing the expression of ER stress markers, including ERN1 and EIF2AK3, and by inducing the expression of protective proteins such as GPx4. To ascertain the function of TXNDC5 in AML12 and KO cell lines, tunicamycin, palmitic acid, and thapsigargin were utilized as stressors. The results from protein expression of the most prominent ER stress markers revealed that among them, the proteins ERN1 and EIF2AK3 were downregulated and HSPA5 was upregulated. Tunicamycin has disrupted the protein levels of HSPA5, ERN1, and EIF2AK3 in KO cells. Palmitic acid modified the protein levels of the ER stress sensors, such as ATF6, HSPA5, and EIF2AK3. TXNDC5 interacted with PRDX6 and HSPA9, proteins involved in the redox regulation of lipid peroxidation and glutathione, and with the loss of TXNDC5, these pathways do have reduced activities, as was recorded by reduced lipid and glutathione peroxidation. Thereby, loss of TXNDC5 impacted mitochondrial functions and specifically disrupted the mRNA levels coding genes that participate in an oxidative stress response and protein folding process.In conclusion, these findings show that TXNDC5 is a modulator of multiple signaling pathways involved in oxidative and ER-induced stresses in hepatocytes, which squalene, given through PLGA and chitosan nanoparticles, prevents the action of these stresses and supports its protective action by the underlying therapeutic implications for modulation of TXNDC5 with a drug-target delivery system to protect the liver
Molecular study of the epigenetic processes behind the activation and the maintenance of piRNA clusters
No full textLes éléments transposables (ET) sont des séquences génomiques ubiquitaires capables de se déplacer au sein du génome. Longtemps considérés comme de l'« ADN poubelle », ces séquences sont désormais reconnus comme des moteurs majeurs de l'évolution, de la plasticité et de la diversité génomiques. Représentant jusqu'à 50 % du génome humain et 15 % de celui de Drosophila melanogaster, les ETs ont façonné l'architecture génomique dans l'ensemble des branches du vivant. Toutefois, leur activité constitue une arme à double tranchant : s'ils peuvent favoriser l'apparition de nouvelles fonctions évolutives, ils sont aussi capables de compromettre l'intégrité génomique en induisant des mutations, des réarrangements chromosomiques et en contribuant potentiellement à l'apparition de tumeurs. Pour contrer cette menace, les organismes ont développé des mécanismes de défense génomique, notamment la voie des petits ARNs associés aux protéines de la famille PIWI (piRNAs) chez les animaux. Chez D. melanogaster, cette voie repose sur la production de petits ARNs non-codants dérivés de régions génomiques appelées piRNA clusters. Ces clusters sont eux-mêmes enrichis en fragments d'ETs, ce qui a conduit à l'hypothèse selon laquelle ils pourraient fonctionner comme des « pièges à loups » pour les éléments mobiles. Mon projet de thèse a consisté à essayer de décrypter les régulations transcriptionnelles et la dynamique évolutive des piRNA clusters et de leurs transcrits, afin de comprendre ce qu'il se passe, au niveau moléculaire, lorsqu'une séquence d'ADN ‘saute' dans l'un de ces loci et comment elle en vient à être transformée en séquence productrice de piRNAs.Transposable elements (TEs) are ubiquitous genomic sequences capable of mobilizing within the genome. Once perceived as "junk DNA", these sequences are now recognized as major drivers of genomic evolution, plasticity and diversity. Representing up to 50% of the human genome and 15% in Drosophila melanogaster, TEs have shaped the genomic architecture across all domains of life. However, their activity poses a dual threat: while they can foster evolutionary innovation, they also compromise genomic stability by inducing mutations, chromosomal rearrangements and potentially contributing to oncogenesis. To counteract this threat, organisms have evolved mechanisms of genomic defense, notably the PIWI-interacting RNAs (piRNAs) pathway in animals. In D. melanogaster, this pathway relies on the production of small non-coding RNAs derived from genomic regions called piRNA clusters. These clusters are themselves enriched in fragments of TEs, which led to the hypothesis that they could act as wolf-traps for mobile elements. During my PhD, I focused on deciphering the transcriptional nature, regulations and evolutionary dynamics of piRNA clusters, in order to understand what happens at the molecular level, when a DNA sequence ‘jumps' into one of these loci and how does it become a piRNAs producing one
Molecular insights into human chondroitin sulfate chain polymerization
No full textLe sulfate de chondroïtine (CS) est une chaîne polysaccharidique linéaire complexe,chargée négativement et attachée de manière covalente au résidu de sérine d'une protéine, formant ainsi un protéoglycane. Le CS est présent de manière omniprésente à la surface des cellules et dans la matrice extracellulaire de presque tous les eucaryotes supérieurs. Le squelette du CS est constitué d'unités disaccharidiques répétitives de N-acétyl-D-galactosamine (GalNAc) et d'acide D-glucuronique (GlcA), sulfatées à différentes positions. Sa diversité structurelle est la clé des vastes rôles physiologiques des CS, notamment la signalisation cellulaire, la cytokinèse, et la plasticité neuronale. Des défauts dans la biosynthèse des CS sont à l'origine de pathologies telles que l'arthrose, l'inflammation et divers cancers. Quatre enzymes du Golgi - CHSY1, CHSY3, CHPF et CHPF2 - catalysent l'allongement de la chaîne de CS. Sur la base d'études antérieures, nous avons émis l'hypothèse que ces enzymes forment des complexes hétérodimériques.Nous avons combiné des études structurales et fonctionnelles afin de fournir un aperçu mécanistique de l'élongation de la chaîne des CS par ces enzymes. Les quatre complexes hétérodimériques CHSY1-CHPF, CHSY1-CHPF2, CHSY3-CHPF, et CHSY3-CHPF2 ont été co-exprimés transitoirement en cellules HEK293-F. Aucune forme monomérique ou homo-dimérique n'a été observée. En accord avec les résultats de la co-expression, l'analyse in silico utilisant Alphafold2 (AF2) a produit les mêmes quatre complexes hétéro-dimériques avec le plus haut degré de confiance. Quatre complexes ont été exprimés de façon recombinante, purifiés et caractérisés sur le plan biophysique. L'analyse par électrophorèse des carbohydrates assistée par fluorescence a révélé que les quatre complexes allongent la chaîne de CS. Nous avons déterminé la structure Cryo-EM du complexe CHSY3-CHPF à une résolution de 3Å, qui a révélé un dimère étroitement intriqué par leurs domaines GT N- et C-terminaux respectifs et un enroulement central, formé par deux hélices α des deux protéines. Nous avons trouvé une densité pour un UDP lié dans le domaine GT N-terminal de CHSY3 - un analogue de substrat ajouté pendant la préparation de l'échantillon. La superposition de la structure Cryo-EM de CHSY3 avec le modèle AF2 de CHSY1 nous a permis d'identifier le motif DXD, essentiel, avec une résidu His proche, pour la liaison de l'UDP et la coordination des ions métalliques. Nous avons développé un test de complémentation in cellulo en utilisant des lignées cellulaires humaines CHSY1/CHSY3 CRISPR/Cas doublement inactivé (knock-out,KO). La transfection avec les complexes CHSY1-CHPF et CHSY3-CHPF de type sauvage a permis de restaurer les niveaux de CS des cellules KO CS, tandis que la transfection avec les mutants CHSY1 et CHSY3, associés à CHPF de type sauvage, n’a pas permis de restaurer les chaînes de CS à la surface cellulaire. Nous en concluons donc que seuls CHSY1 et CHSY3 catalysent le transfert de GlcA et GalNAc. En accord avec nos résultats in cellulo, les tests d’activité in vitro utilisant les complexes CHSY3mutant–CHPFWT ont également confirmé que CHSY3 est bi-fonctionnelle, ses domaines N- et C-terminaux catalysant respectivement les transferts de GlcA et de GalNAc. Fait intéressant, CHPF et CHPF2 ne possèdent aucune activité catalytique, mais sont essentiel à la formation des différents complexes de polymérase. Un mélange équimolaire des mutants GlcA-T et GalNAc-T a permis de restaurer l’activité de polymérisation. Ces résultats nous ont permis de proposer que l’élongation de la chaîne de CS se produit de manière discontinue, la chaîne polysaccharidique en croissance se détachant du complexe avant chaque nouveau cycle catalytique. Ce travail fournit la première explication mécanistique de la polymérisation des chaînes de CS et pourrait ouvrir la voie à de futures thérapies visant à moduler les niveaux de CS dans le traitement de maladies telles que le cancer.Chondroitin sulfate (CS) is a linear, negatively charged, complex polysaccharide chain, covalently attached to the serine residue of a core protein. Together they form a so-called chondroitin sulfate proteoglycan (CSPG). CS is ubiquitously found on the cell surface and within the extracellular matrix of nearly all higher eukaryotes. The CS backbone consists of repeating disaccharide units of N-acetyl-D-galactosamine (GalNAc) and D-glucuronic acid (GlcA), with sulfate groups added at various positions (Mikami & Kitagawa, 2013). The structural diversity is key to the broad physiological roles of CS, including cellular signaling, cytokinesis, morphogenesis, extracellular matrix remodeling, and neuronal plasticity (Djerbal et al., 2017). Defects in CS biosynthesis cause diseases, e.g., osteoarthritis, inflammation, and various cancers (Zhang & Chi, 2021). Four Golgi-localized enzymes - CHSY1, CHSY3, CHPF, and CHPF2 – catalyze CS chain elongation. These type-II transmembrane proteins harbor an N-terminal membrane anchoring helix, a flexible loop, and a large Golgi-luminal catalytic domain. Based on earlier studies (Izumikawa et al., 2007; 2008), we hypothesized that these enzymes form heterodimeric complexes. Their precise role in CS polymerization remains unknown.We combined structural and functional studies on these CS polymerizing enzymes to provide a mechanistic insight into CS chain elongation. Transient co-expression in HEK293-F cells showed four heterodimeric complexes – CHSY1-CHPF, CHSY1-CHPF2, CHSY3-CHPF, and CHSY3-CHPF2. Neither monomeric nor homodimeric forms were observed. Consistent with co-expression results, in silico analysis using Alphafold2 (AF2) (Jumper et al, 2021) produced the same four hetero-dimeric complexes with the highest confidence. Four complexes were recombinantly expressed, purified, and biophysically characterized. Fluorescent-assisted carbohydrate electrophoresis assay revealed that all four complexes elongate the CS chain. We determined the Cryo-EM structure of the CHSY3-CHPF complex at 3Å resolution, which showed a tightly packed CHSY3-CHPF complex with the respective N- and C-terminal glycosyltransferase (GT) domains and a central coiled-coil, formed by two α-helices from both proteins. We found density for a bound UDP in the N-terminal GT domain of CHSY3 - a substrate analog added during the Cryo-EM sample preparation. The superimposition of the Cryo-EM structure of CHSY3 with the AF2 model of CHSY1 enabled us to identify the essential DXD motif and a nearby His residue for UDP binding and metal ion coordination. We developed an in cellulo complementation assay using human CHSY1/CHSY3 CRISPR/Cas double knockout (KO) cell lines. Transfection with wild-type CHSY1-CHPF and CHSY3-CHPF complexes enabled KO cells to restore CS levels, while transfection of CHSY1 and CHSY3 mutants along with wild-type CHPF did not restore CS chains on the cell surface. Therefore, we conclude that only CHSY1 and CHSY3 catalyze GlcA and GalNAc transfer. Consistent with our in cellulo results, in vitro activity assays using CHSY3 mutant-CHPF WT complexes also confirmed that CHSY3 is bi-functional with its N- and C-terminal domains catalyzing GlcA and GalNAc transfer, respectively. Furthermore, we found that CS polymerization depends on metal ions, optimally Mn2+. Interestingly, CHPF has no catalytic activity; however, it is essential for complex formation. The equimolar mixture of GlcA-T and GalNAc-T mutants restored polymerization activity. These findings allowed us to propose that CS chain elongation occurs in a disruptive manner, where the growing polysaccharide chain detaches from the complex before going into the next catalytic cycle. This work provides the first insight into the molecular mechanism of CS chain polymerization. It may set the premise for future therapeutics manipulating CS levels to treat diseases like cancer
Arbitral jurisprudence and the Balance of the Foreign Investor-Host State Relationship
No full textLe droit des investissements internationaux s'est construit sous l'impulsion des tribunaux arbitraux qui, dans leur rôle d'interprétation du droit international coutumier et des traités d'investissement, ont contribué à enrichir le droit matériel des investissements. La multiplication des sentences rendues a constitué progressivement une véritable jurisprudence, visant à équilibrer la relation entre l'investisseur étranger et l'État hôte. Cependant, l'interprétation des traités par les tribunaux arbitraux s'est souvent faite dans un objectif de protection de l'investisseur face à la puissance publique de l'État, jusqu'à inverser parfois le rapport de force entre les deux opérateurs. De plus, l'absence de principe de précédent en arbitrage d'investissement a contribué à créer un flou notionnel, du fait des interprétations changeantes des dispositions des traités protégeant l'investisseur étranger. 2Cette étude vise donc à faire état du droit positif des investissements internationaux en déterminant un courant doctrinal commun aux sentences arbitrales. Une fois ce travail de compilation réalisé, l'objectif sera alors de déterminer l'état de l'équilibre des forces entre les deux opérateurs et proposer un rééquilibrage du droit des investissements. Ce rééquilibrage passe notamment par une redéfinition des critères jurisprudentiels imprécis ou changeants et une adaptation de la protection de l'investisseur étranger aux enjeux modernes du commerce international, tout en veillant à permettre à l'Etat hôte de conserver ses prérogatives de puissance publiqueInternational investment law has largely been shaped by arbitral tribunals, whose interpretative function with regard to customary international law and investment treaties has contributed significantly to the development of substantive investment law. The proliferation of arbitral awards has progressively given rise to a de facto jurisprudence, aimed at striking a balance between the interests of foreign investors and the sovereign rights of host States. However, treaty interpretation by arbitral tribunals has often been guided by a protective logic in favour of the investor, at times to the extent of inverting the power dynamic between the two actors. Furthermore, the absence of a binding precedent doctrine in investment arbitration has fostered conceptual uncertainty, resulting from fluctuating interpretations of the treaty provisions safeguarding foreign investors.This study seeks to provide an overview of the current state of positive international investment law by identifying a coherent doctrinal trend emerging from arbitral case law. Based on this synthesis, the aim is to evaluate the prevailing balance of power between the investor and the host State, and to propose avenues for rebalancing investment law. Such rebalancing entails, in particular, a clarification of vague or inconsistent jurisprudential standards and an adaptation of investor protection to contemporary challenges of international trade, while ensuring that host States retain their sovereign regulatory authority
Effets du déficit en NRP1 sur la production de rénine et la fibrose rénale médiée par les fibroblastes
No full textNRP1 est un corécepteur transmembranaire initialement découvert dans le système nerveux. Capable de réagir avec différents facteurs de croissance tels que les sémaphorines de classe 3, le VEGF et le TGFβ, NRP1 peut jouer un rôle dans de nombreux processus biologiques et pathologiques, notamment le développement neuronal, l'angiogenèse et la progression tumorale. Dans le rein, NRP1 peut s'exprimer dans de nombreux types de cellules. Cependant, son rôle dans la physiologie et la physiopathologie rénales reste incertain. Afin de comprendre le rôle de NRP1 dans le rein, nous avons constitué un groupe expérimental de souris Nrp1-KO, comparé la structure et la fonction rénales en conditions physiques et en conditions de déséquilibre de l'homéostasie sodique. De plus, nous avons comparé la gravité de la fibrose rénale avec celle d'un modèle murin de fibrose rénale et expliqué pourquoi cette différence est observée. Nous avons constaté qu'en conditions basales, la structure et la fonction rénales ne sont pas affectées par l'absence de Nrp1. En cas de déséquilibre de l'homéostasie sodique, la capacité d'adaptation est moindre et la rénine des cellules JG est moins détectée. En conditions fibrotiques, Nrp1-KO présente une fibrose rénale plus sévère, probablement due à l'influence de Nrp1 sur la réparation tissulaire des fibroblastes en phase aiguë de lésion. De plus, les souris Nrp1-KO présentent même une fibrose cardiaque plus sévère, ce qui signifie que la fonction protectrice de Nrp1 peut s'étendre à d'autres organesNRP1 is a transmembrane co-receptor that was first found in the neural system. It can react with different growth factors, such as class 3 Semaphorins, VEGF, and TGFβ. NRP1 can play a role in multiple biological and pathological processes, including neuronal development, angiogenesis, and tumor progression. In the kidney, Nrp1 can be expressed in many kinds of cells. But the role of Nrp1 in renal physiological and pathophysiological is remains unclear. To figure out what is the role of Nrp1 in the kidney, we constructed the Nrp1-KO mice as the experimental group, compared the renal structure and function under physical conditions and sodium homeostasis unbalanced conditions, in addition, we compared the severity of renal fibrosis with the renal fibrosis mouse model and what is the reason to make the difference. We found that under basal conditions, the renal structure and function are not influenced when lacking Nrp1. When facing the sodium homeostasis imbalance, the ability to adapt to the imbalance is worse, and the renin in JG cells is less detected. When under fibrotic conditions, Nrp1-KO has more severe renal fibrosis, the reason is probably that Nrp1 influences the tissue repair of fibroblasts when in the acute injury phase. What's more, Nrp1-KO mice even have more severe cardiac fibrosis, which means the protective function of Nrp1 can apply to other organs
Regulation of megakaryopoiesis and thrombopoiesis by the non-transmembrane tyrosine phosphatases Shp1 and Shp2
No full textLa production de mégacaryocytes (MK) et de plaquettes sanguines repose sur une régulation précise de la signalisation cellulaire. Des mutations clonales au sein des cellules souches hématopoïétiques (CSH) entraînent l’activation constitutive du récepteur Mpl de la thrombopoïètine (Tpo), favorisant l’apparition de néoplasmes myéloprolifératifs (NMP). Les protéines tyrosines phosphatases (PTP) sont reconnues comme étant des acteurs clés des voies de signalisation. Des études chez la souris utilisant le modèle Pf4-Cre ont révélés que deux PTP non transmembranaires, Shp1 et Shp2, sont essentielles au maintien d’une mégacaryopoïèse et d’une thrombopoïèse physiologique. Cette thèse vise à mieux comprendre le rôle de ce tandem protéique dans la maturation des MK et la production plaquettaire chez la souris et l’humain via des approches multidisciplinaires. Nos résultats mettent en évidence que Shp2 est un régulateur crucial de ces processus, notamment en modulant la signalisation Mpl, et représente ainsi une cible thérapeutique prometteuse contre les NMP.Megakaryocytes (MK) and platelet production relies on tightly regulated signaling mechanisms. Clonal mutations in hematopoietic stem cells (HSC) lead to constitutive activation of the Mpl thrombopoietin (Tpo) receptor, driving the development of myeloproliferative neoplasms (MPN). Protein tyrosine phosphatases (PTP) are recognized as key players in signaling pathways. Previous results in mice using the Pf4-Cre model revealed that two non-transmembrane PTP, Shp1 and Shp2, are essential for the physiological maintenance of megakaryopoiesis and thrombopoiesis. This thesis aimed to investigate the role of this protein tandem in MK maturation and platelet production in mice and humans via multidisciplinary approaches. Our results highlight Shp2 as a critical regulator of these processes, acting through Mpl signaling, and identify it as a promising therapeutic target for MPN
The prohibition to discriminate under the new African Constitutions
No full textLa question de la discrimination est au cœur des préoccupations des sociétés contemporaines. En Afrique, les nouvelles constitutions proclament leur attachement aux droits et libertés de la personne humaine. Ce faisant, elles prohibent toutes les formes de discrimination fondées sur la race, le sexe, la religion, les opinions politiques, l'âge ou la position sociale. Elles promeuvent aussi l'égalité entre l'homme et la femme et se fixent désormais comme objectif la protection des personnes vulnérables : personnes handicapées, personnes âgées, enfants. La thèse se veut pour objectif de dresser un inventaire des dispositions constitutionnelles portant interdiction de discriminer, de répertorier les différentes formes d'interdiction, de rechercher et d'analyser leurs motifs. La réalisation de cet objectif passe par une délimitation de notre champ d'étude. La thèse se focalisera ainsi sur les constitutions de l'Afrique de l'Ouest et plus précisément sur celles du Bénin, du Burkina-Faso, de la Côte d'Ivoire et du Sénégal. L'échantillon d'étude ainsi défini nous permettra de saisir les différences entre les constitutions en vigueur dans ces États tout en mettant en évidence leurs potentielles ressemblances. Notre réflexion se placera au confluent du droit constitutionnel, du droit des libertés fondamentales, du droit communautaire africain, du droit international des droits de l'homme… Les constitutions africaines rappellent dans leurs préambules leur attachement aux textes d'origine supra étatique qui interdisent la discrimination. Il s'agit, entre autres, de la convention sur l'élimination de toutes les formes de discrimination à l'égard de la femme, de la convention sur l'élimination de toutes les formes de discrimination raciale, de la déclaration universelle des droits de l'homme, de la convention relative aux droits des personnes handicapées et de celle relative aux droits de l'enfant. La pluralité des sources rend compte du caractère fondamental de la question et requiert que l'on s'interroge sur la réalisation par les États étudiés des objectifs que les conventions précitées leur ont assignés. Sur le plan jurisprudentiel, notre thèse sera l'occasion d'explorer et d'analyser les jurisprudences des Cour et Conseils constitutionnels des États cités ainsi que l'activité de la Cour africaine des droits de l'homme et des peuples qui a la mission essentielle d'exercer une sorte de contrôle de « compatibilité des dispositions constitutionnelles au droit de l'Union africaine ». Notre réflexion constituera ainsi une contribution originale au droit de la non-discrimination en Afrique en ce qu'elle porte sur un objet de recherche peu exploré qui pourtant confère au chercheur une belle opportunité d'exprimer sa position scientifique et de forger sa propre conviction. En définitive, ce sujet nous permettra de faire un état des lieux de l'adaptation des constitutions africaines aux évolutions sociales et sociétales récentes.The issue of discrimination is at the heart of the concerns of contemporary societies. In Africa, the new constitutions proclaim their attachment to the rights and freedoms of the human person. In doing so, they prohibit all forms of discrimination based on race, sex, religion, political opinion, age or social position. They also promote equality between men and women and now set the goal of protecting vulnerable people: people with disabilities, the elderly and children. The aim of the thesis is to draw up an inventory of the constitutional provisions prohibiting discrimination, to list the various forms of prohibition, to research and analyze their reasons. The achievement of this goal requires a delimitation of our field of study. The thesis will focus on the constitutions of West Africa and more precisely those of Benin, Burkina-Faso, Côte d'Ivoire and Senegal. The study sample thus defined will enable us to grasp the differences between the constitutions in force in these states while highlighting their potential similarities. Our thinking will be at the confluence of constitutional law, the law of fundamental freedoms, African community law, international human rights law ... The African constitutions recall in their preambles their attachment to texts of supra-state origin that forbid discrimination. These include the Convention on the Elimination of All Forms of Discrimination against Women, the Convention on the Elimination of All Forms of Racial Discrimination, the Universal Declaration of Human Rights human rights, the Convention on the Rights of Persons with Disabilities and the Convention on the Rights of the Child. The plurality of sources reflects the fundamental nature of the question and requires that we question the realization by the States studied of the objectives that the aforementioned conventions have assigned to them. On the case law, our thesis will be an opportunity to explore and analyze the case law of the Courts and Constitutional Councils of the States mentioned as well as the activity of the African Court of Human and Peoples' Rights which has the mission essential to exercise some sort of control over the ''compatibility of constitutional provisions with African Union law''. Our reflection will thus constitute an original contribution to the law of non-discrimination in Africa as it relates to a little-explored research object which nevertheless gives the researcher a great opportunity to express his scientific position and to forge his own conviction. Ultimately, this topic will allow us to make an inventory of the adaptation of African constitutions to recent social and societal developments
Détermination des produits de décomposition et des mécanismes réactionnels des mélanges gazeux à base d'Heptafluoro-isobutyronitrile, dioxyde de carbone et oxygène utilisés comme gaz d'isolation et de coupure dans les disjoncteurs haute tension
No full textL'objectif du projet g³ est d'étudier les sous-produits de décomposition générés sous contrainte d'arc électrique dans la chambre de coupure des disjoncteurs haute tension. Le mélange gazeux (C4F7N - CO2 - O2), appelé g³, est utilisé comme substitut au SF6, gaz à PRG élevé (24 900 selon le Protocole de Kyoto de 1999). Après chaque essai de coupure, des échantillons de gaz pollués sont collectés, puis analysés et quantifiés via TCD-GC-MS et FTIR. Les principaux sous-produits identifiés sont : CO, COF2, CF4, C2F6, C3F8, CF3CN, C2F5CN et (CN)2. La variation du facteur de réponse (Rf) met en évidence le vieillissement de la colonne GC et la nécessité d'un étalonnage périodique. Des calculs DFT ont été réalisés pour comprendre les mécanismes réactionnels du mélange g³ (C4F7N - CO2 - O2). Les interactions de C4F7N avec O2 et l'oxygène atomique, ainsi que les dissociations moléculaires, ont été étudiées. Parmi les réactions de dissociation,C4F7NO → C3F3NO + CF4 et C4F7NO → C2F5CN + CF2O sont thermodynamiquement favorables, avec des barrières énergétiques respectives de 91,7 et 90,8 kcal/mol. La seconde partie du projet porte sur l'hydrolyse de C4F7N, combinant expériences et chimie quantique. Trois cas d'étude ont été menés, faisant varier l'humidité et les tamis moléculaires (zéolite et dessiccants organiques). Les zéolites ont généré des cristaux aciculaires, tandis que les dessiccants organiques ont produit des cristaux en paillettes, avec un rendement supérieur. Dans les deux cas, une élimination rigoureuse de l'humidité s'est avérée essentielle. Les cristaux obtenus sont de type amide ou dimère, identifiables via la DSC. L'étalonnage en phase vapeur a été effectué par GC-MS et les calculs thermodynamiques ont permis d'estimer la pression partielle maximale de l'amide. L'hydrolyse implique l'attaque du fluoronitrile par l'eau, générant des produits solides tels que l'amide, le dimère, le trimère, puis le tétramère. Cette étude fournit une base solide pour comprendre les interactions du C4F7N avec l'eau et les sous-produits issus de l'arc électrique, soutenue par une base de données théorique DFT complète.This project investigates the decomposition byproducts formed under arc fault stress inhigh-voltage circuit breakers filled with g3 gas (C4F7N - CO2 - O2), a low-GWP alternative toSF6. It is identified in the Kyoto Protocol (1999), has a GWP of 24,900 and is a major greenhouse gas. During the study, polluted gas samples were collected post-breaking tests and analyzed using thermal conductivity detection, gas chromatography-mass spectrometry(TCD-GC-MS), and Fourier-transform infrared spectroscopy (FTIR). Major decomposition products identified include CO, COF2, CF4, C2F6, C3F8, CF3CN, C2F5CN, and (CN)2. Calibration of key compounds (CF4, C2F6, C3F8, COF2, and CF3CN) was conducted before and after GC-MS maintenance, with variations in response factors (Rf) indicating the need for periodic recalibration due to GC column aging.To further explore the chemical behavior of the g³ gas mixture, Density Functional Theory (DFT) calculations were used to simulate the reaction mechanisms of C4F7N with O2 andatomic O. Thirty-two reaction pathways, including eight recombination reactions, were proposed for the C₄F₇N + O system. Among the main dissociation reactions, C4F7NO →C3F3NO + CF4 and C4F7NO → C2F5CN + CF2O were identified as the most thermodynamically favorable, with energy barriers of 91.7 and 90.8 kcal/mol, respectively. In the second phase, hydrolysis behavior of C4F7N was studied through both experimental work and quantum chemical modeling. The formation of solid byproducts under varying humidityand desiccant conditions was analyzed. Zeolite desiccants led to needle-shaped crystals, while organic desiccants produced flakes with higher recovery. Differential scanning calorimetry(DSC) distinguished amide and dimer crystals by melting point. GC-MS was used to calibrate vapor-phase amides, and thermodynamic modeling estimated their partial pressures. The hydrolysis pathway of C4F7N involves progressive formation of amide, dimer, trimer, and tetramer products, underscoring the critical role of moisture control. Overall, this study provides a detailed understanding of g³ decomposition and hydrolysis, supported by comprehensive DFT insights
Modélisation de la synergie entre nanoparticules et promoteurs lors de processus catalytiques : cas de la synthèse de l'ammoniac
No full textL'ammoniac est un vecteur prometteur pour le stockage de l'hydrogène vert, mais sa synthèse actuelle via le procédé Haber-Bosch reste inadaptée. Une réaction alternative, catalysée par des nanoparticules de cobalt encapsulées dans de l'oxyde de baryum, suscite un fort intérêt. Cette thèse vise à explorer, par modélisation atomistique, l'interaction entre les nanoparticules de cobalt et des promoteurs potentiels (Ba, Ca), via le développement de potentiels issus de l'apprentissage automatique (MLP, Machine Learned Potentials) et de méthodes d'analyse robustes. Un potentiel SNAP (Spectral Neighbor Analysis Potential) très performant a été développé pour le cobalt pur, permettant de reproduire ses propriétés statiques et dynamiques, depuis la phase massive jusqu'à l'échelle nanométrique. Après de nombreuses tentatives infructueuses, un potentiel Co-Ba stable a finalement été obtenu à la fin de la thèse. En parallèle, une méthode avancée a été mise au point pour caractériser les environnements atomiques au sein de systèmes complexes, menant à des résultats quantitatifs concernant l'activation et la fusion de surface des nanoparticules de cobalt pur. Ces découvertes, ainsi que la méthodologie développée, ouvrent de nombreuses perspectives pour l'analyse dynamique des nanoparticules aux températures pertinentes pour la catalyse.Ammonia is a promising vector for green hydrogen storage, yet its current synthesis via the Haber-Bosch process remains unsuitable for sustainable applications. An alternative catalytic route involving cobalt nanoparticles encapsulated in barium oxide has attracted growing interest. This thesis investigates, through atomistic modeling, the interactions between cobalt nanoparticles and potential promoters (Ba, Ca), by developing machine learning potentials (MLPs) and robust analytical methodologies. A high-performance Spectral Neighbor Analysis Potential (SNAP) was developed for pure cobalt, accurately capturing its static and dynamic properties from the bulk phase to the nanoscale. After numerous unsuccessful attempts, a stable Co-Ba potential was finally obtained at the end of the thesis. In parallel, an advanced method was designed to characterize atomic environments in complex systems, leading to quantitative insights into surface activation and melting phenomena in pure cobalt nanoparticles. These findings, along with the developed methodology, open new avenues for the dynamic analysis of nanoparticles under catalytically relevant temperatures
Synthèse de nouvelles vues via des considérations 3D
No full textLa synthèse de nouvelles vues est un domaine relativement récent dans l'histoire de l'informatique, qui remonte approximativement aux années 1990. Mêlant infographie, reconstruction 3D et vision par ordinateur, la synthèse de nouvelles vues cherche à générer des images d'une scène depuis des angles de vue non observés au préalable. Si l'avènement des techniques d'apprentissage dites profondes a permis de réelles avancées sur ce sujet depuis 2010, le domaine conserve toujours ses anciens fondements, de la géométrie multi-vues à la reconstruction 3D. La synthèse de nouvelles vues est aujourd'hui au coeur de toutes les attentions, tant ses applications potentielles sont nombreuses, de la VR et la AR, en passant par le rendu 3D, et donc naturellement les jeux vidéo ou encore l'animation. Nous abordons dans cette thèse l'une des configurations les plus contraignantes en synthèse de nouvelles vues, en se restreignant à n'avoir en entrée qu'une seule et unique vue. La première partie de ce manuscrit s'intéresse à la manière dont l'information de pose de caméra peut être encodée et fournie comme un a priori à un réseau de neurones via des considérations issues de la géométrie épipolaire. En effet, cette information de pose relative, entre la vue d'entrée et celle à générer, est souvent encodée de manière sous-optimale. Nous montrons à travers nos travaux que cette pose peut être intégralement encodée dans une image, grâce aux droites épipolaires. Nous montrons ensuite comment l'avènement récent des NeRF a complètement redéfini la manière d'aborder la synthèse de nouvelles vues. Ce type d'architecture possède désormais des propriétés génératives intéressantes, qui permettent de synthétiser de nouvelles vues sans se limiter à une scène unique. Cependant, l'intégration de contraintes épipolaires dans ces réseaux reste encore assez peu explorée, et nous proposons donc un mécanisme d'attention simple, basé sur des attributs issus d'un second NeRF. Enfin, dans une dernière partie, nous élargissons et assouplissons notre contrainte initiale pour nous rapprocher davantage d'une application industrielle. En disposant de plusieurs vues, les modèles 3DGS permettent de reconstruire fidèlement l'apparence et la structure géométrique 3D d'une scène. Nous utilisons cette reconstruction 3D explicite pour synthétiser de nouvelles vues à des positions prédéterminées, éloignées des vues originellement observées lors de l'entraînement.In the history of computing, the Novel View Synthesis (NVS) is a relatively recent and evolving field that emerged in the 1990s. It aims to generate images of a scene from unobserved viewpoints thanks to computer graphics, 3D reconstruction and computer vision concepts. While recent breakthroughs in Deep Learning methods have enabled substantial advancements since the 2010s, the field continues to rely on its foundational basis, such as multi-view geometry and 3D reconstruction. Given its numerous potential applications NVS is now in the spotlight, with uses ranging from VR and AR to 3D rendering, video games, and animation. We chose to adress in this thesis one of the most challenging scenarios in NVS, where we rely solely on a single input image. The first part of this manuscript focuses on how camera pose information can be encoded and provided as an apriori to a neural network through epipolar geometry considerations. The camera pose, which captures the relative displacement between the source view and the target view to be generated, is often encoded suboptimally. Through our work, we demonstrate that camera pose can be fully encoded within an image using epipolar lines. In the second part, we highlight how NeRF has massively impacted the way NVS is adressed. Through recent advances in neural rendering, these architectures now possess interesting generative properties, allowing the synthesis of novel views without being limited to a single scene. However, the integration of epipolar constraints in these networks remains largely unexplored. We proposed a simple yet effective feature-based attention mechanism, leveraging on a secondary NeRF. Finally, we relax our initial single-view constraint to move closer to an industrial application. With multiple images, 3DGS models accurately reconstruct the apparence and 3D geometric structures of a scene. We use this explicit 3D reconstruction to synthesize novel views at predetermined positions. However, rendering these viewpoints remains challenging since they are far from the views originally observed during training