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Dysbiose intestinale induite par la clothianidine et probiotiques pour contrer l'interaction synergétique clothianidine-microbiote chez l'Abeille mellifère (Apis mellifera)
No full textLes pollinisateurs sont importants pour la biodiversité, en plus de fournir des services écosystémiques essentiels à plusieurs cultures agricoles et autres espèces végétales à l'échelle mondiale. Les pollinisateurs sauvages et domestiques (dont Apis mellifera) ont subi d'importantes pertes récentes en raison de l'utilisation de pesticides. Il est urgent de trouver des alternatives aux effets néfastes de la clothianidine (une molécule de la famille des Néonicotinoïdes) sur la santé des abeilles, car elle persiste dans l'environnement et agit sur la santé des abeilles et leur microbiote intestinal. L'objectif principal de cette thèse était double : (1) de mettre en évidence un outil de biosurveillance des colonies d'abeilles basé sur des biomarqueurs microbiens qui sont sensibles à des concentrations sous-létales de la clothianidine, un composé de la famille des néonicotinoïdes et (2) de mettre en place une formulation d'un supplément probiotique composé de symbiotes clés endogènes de l'Abeille qui aiderait à la restauration des propriétés métaboliques et protectrices de la flore intestinale de l'Abeille en réponse à une exposition à la clothianidine. Les connaissances acquises dans le cadre de cette recherche sur l'influence d'un gradient de concentrations de clothianidine sur (1) les interactions d'activité entre les membres cœur et non cœur du microbiote intestinal d'Apis mellifera, (2) y compris les souches opportunistes potentielles, (3) ainsi qu'un lien possible entre le pesticide clothianidine et une perturbation de l'axe microbiote-immunité sont sans précédent. Nos résultats montrent que le degré de dysbiose du microbiote intestinal dépend à la fois (1) de l'intensité de l'exposition de l'Abeille domestique aux xénobiotiques ainsi que (2) de la section de son intestin. Nous avons également mis en évidence l'importance des réseaux d'interaction d'activité au sein du microbiote pour mesurer l'impact de l'exposition aux pesticides sur la dynamique d'une communauté bactérienne de microbiome. Grâce aux réseaux d'interactions et à leur caractérisation (paramètres topologiques), cette thèse a mis en évidence le rôle crucial des taxas de faible activité fonctionnelle en leur suggérant un statut d'espèces clés de voute du microbiote intestinal de l'Abeille, et ce dans des sections intestinales bien spécifiques. Nos résultats exposent également un point de vue unique de l'implication des micro-organismes endogènes de l'Abeille mellifère dans (1) la réduction de l'impact nocif de la clothianidine sur la santé des colonies et (2) dans la restauration d'un microbiote intestinal stable. L'utilisation de microorganismes probiotiques dans la supplémentation alimentaire de l'Abeille domestique est une stratégie viable de gestion des ruches pour réduire l'impact négatif des xénobiotiques sous-létaux sur les colonies.Pollinators are one of the most important components of global biodiversity that provide essential ecosystem services to cultivated crops and wild plant species worldwide. Wild and domesticated pollinators (including Apis mellifera) have experienced important recent losses. Globally, pesticides are increasing the mortality rate among honeybees (Apis mellifera). Is is now well-established that immune responses and insect behaviour are both influenced by the gut flora. There is a pressing need to find ways to alleviate the impact of pesticides, such as to clothianidin (Neonicotinoid molecule), that have detrimental effects on honeybee health and persists in the environment. The primary objective of this thesis was to highlight (1) a biomonitoring tool for bee colonies based on microbial biomarkers that are sensitive to sub-lethal levels of neonicotinoid family compounds and (2) a formulation of a probiotic supplement composed of key bee symbionts that would aid in the restoration of the bee's intestinal flora's metabolic and protective properties following neonicotinoid exposure. This novel research provided unprecedented information gained on the influence of clothianidin gradients on (1) the activity interactions between core and non-core members of the intestinal microbiota of Apis mellifera, (2) including potential opportunistic strains, and (3) the possible link between clothianidin pesticide and disturbance of the microbiota–immunity axis. Our findings imply how the degree of dysbiosis in the gut microbiota is dependent on both the intensity of xenobiotic exposure and the honeybee gut microbial section. Also, we highlighted the importance of activity interaction networks that appear to be a useful method for measuring the impact of pesticide exposure on a microbiome bacterial community dynamic. Interaction networks and their characterization (topological parameters) highlighted the crucial role of taxa of low functional activity by suggesting their status as keystone species of the honeybee intestinal microbiota, and this in specific intestinal sections. Our findings give a unique viewpoint on the involvement of honeybee endogenous microorganisms in (1) reducing the harmful impact of clothianidin on the health of honeybee colonies and (2) in restoring a stable honeybee gut microbiota. Using probiotic microorganisms in honeybee diets is a viable hive management strategy for reducing the negative impact of sublethal clothianidin concentrations and surely other environmental xenobiotics on honeybee colonies
Ant colony optimization for path planning in search and rescue operations
No full textIn search and rescue operations, an efficient search path, colloquially understood as a path maximizing the probability of finding survivors, is more than a path planning problem. Maximizing the objective adequately, i.e., quickly enough and with sufficient realism, can have substantial positive impact in terms of human lives saved. In this paper, we address the problem of efficiently optimizing search paths in the context of the NP-hard optimal search path problem with visibility, based on search theory. To that end, we evaluate and develop ant colony optimization algorithm variants where the goal is to maximize the probability of finding a moving search object with Markovian motion, given a finite time horizon and finite resources (scans) to allocate to visible regions. Our empirical results, based on evaluating 96 variants of the metaheuristic with standard components tailored to the problem and using realistic size search environments, provide valuable insights regarding the best algorithm configurations. Furthermore, our best variants compare favorably, especially on the larger and more realistic instances, with a standard greedy heuristic and a state-of-the-art mixed-integer linear program solver. With this research, we add to the empirical body of evidence on an ant colony optimization algorithms configuration and applications, and pave the way to the implementation of search path optimization in operational decision support systems for search and rescue
Indicateurs d'engagement de la personne et ses proches dans un contexte interprofessionnel : réalisation d'une validation DELPHI
No full textContexte : L'importance de l'engagement de l'usager et de ses proches dans le continuum de soins fait l'objet d'un consensus local et international depuis longtemps. Cela permet de fournir des services plus appropriés et plus rentables en plus d'améliorer les résultats de santé, la qualité de vie et la satisfaction des usagers. Toutefois, les efforts pour promouvoir un meilleur engagement des usagers se limitent trop souvent à des arguments rhétoriques sans actions concrètes pour clarifier les attentes à l'égard de ses rôles et responsabilités au sein de l'équipe interprofessionnelle. Afin d'enseigner plus efficacement ces notions, une liste d'indicateurs de l'engagement des usagers en contexte interprofessionnel a été développé par Milot et al. (2019). Bien que montrant un grand potentiel, ces indicateurs n'ont jamais été validés par des usagers et leurs proches. Objectif : Le but de cette étude est de décrire précisément, à l'aide d'une liste d'indicateurs validés, ce que signifie le partenariat avec l'usager et ses proches dans un contexte interprofessionnel afin de favoriser leur engagement dans les soins et services reçus. Les objectifs spécifiques sont de 1) valider, à partir de l'expertise des usagers et leurs proches, une liste d'indicateurs qui témoignent de l'engagement de ceux-ci au sein d'une équipe interprofessionnelle; et 2) explorer si ces indicateurs touchent à l'ensemble des formes d'engagement des usagers et leurs proches dans les soins et services les concernant. Méthodologie : Pour réaliser cette étude nous avons utilisé un devis mixte avec une méthodologie de validation utilisant la méthode DELPHI. Cette méthode permet de mettre en évidence des convergences d'opinions et de dégager certains consensus sur des sujets précis, souvent avec un caractère prospectif important, grâce à la consultation d'experts à travers un ensemble de questionnaires sur plusieurs rondes de consultation. Cette validation a été réalisée auprès de 31 usagers et proches qui ont rempli des questionnaires en ligne pour mesurer, à l'aide d'échelle LIKERT à 6 niveaux, la clarté et la pertinence de chaque indicateur. Résultats et conclusion : Les 13 indicateurs de la liste ont tous atteint le seuil de consensus (80%) fixé par l'équipe de recherche dès la première ronde. Une deuxième ronde a permis de recueillir les commentaires spécifiques des usagers-experts sur les indicateurs pour lesquels un désaccord avait été émis. En plus de confirmer l'inclusion obtenue dès la première ronde, cette deuxième ronde a révélé que les attentes des usagers et proches en matière d'engagement sont cohérentes avec les comportements facilitants et les obstacles aussi contenus dans la liste d'indicateurs, ainsi que les écrits scientifiques. En conclusion, cette liste d'indicateurs peut être utilisée avec confiance dans les milieux cliniques ou comme matériel pédagogique dans les formations continues ou les cours universitaires afin d'encourager un réel partenariat avec l'usager dans un contexte interprofessionnel.Background: There is a long-standing local and international consensus on the importance of engaging health services users and their circle of support in the continuum of care. It leads to more appropriate and cost-effective services and improved health outcomes, quality of life and satisfaction for users. However, efforts to promote greater user engagement are too often limited to rhetorical arguments with no concrete actions to clarify expectations about their roles and responsibilities within the interprofessional team. In order to more effectively teach these concepts, Milot et al. (2019) have developed a list of indicators of user engagement in a context of interprofessional care. Despite their significant potential, these indicators have never been validated by users and members of their circle of support. Objective: The aim of this study is to describe precisely, using a list of validated indicators, the meaning of partnering with users and their circle of support in an interprofessional context with a view to promoting their involvement in the care and services they receive. The specific objectives are 1) to validate, based on the expertise of users and their loved ones, a list of indicators that reflect their engagement within an interprofessional team; and 2) to explore if these indicators illustrates all the components of the involvement of users and their friends and family in the care and services that concern them. Methodology: For the purpose of this study, we used a mixed design with a DELPHI validation method. This method, often used as a forecasting tool, makes it possible to highlight convergences of opinion and to obtain consensus on specific subjects among experts through a process of several rounds of consultation by means of a set of questionnaires. This validation was carried out with 31 users and members of their circle of support who completed online questionnaires to measure the clarity and relevance of each indicator on a 6-point LIKERT scale. Results and conclusion: All 13 indicators on the list met the consensus threshold (80%) set by the research team in the first round. A second round was conducted to gather specific feedback from user experts on the indicators in relation to which there were disagreements. In addition to confirming the inclusion obtained in the first round, this second round revealed that the expectations of users and their circle of support as regards involvement are consistent with the facilitating behaviours and obstacles identified in the list of indicators and in the scientific literature. In conclusion, this list of indicators can be used with confidence both in clinical settings and in continuing education and university program curricula to foster meaningful partnership with users in the context of interprofessional care
Multiplication des regards : une recherche plastique du plaisir par anticipation
No full textMa production artistique et ce mémoire se concentrent sur la manipulation de contextes de la vie de tous les jours par l'entremise de thèmes récurrents dans ma pratique, tels l'humour, la monstruosité et le grotesque. Ce mémoire fait état des divers éléments symboliques qui constituent mon esthétique en analysant mon processus créatif ainsi que les objectifs et les questionnements inhérents à ma pratique. Ce texte met également en évidence la répétition en tant que méthode, l'anticipation des réactions du public comme moteur de création ainsi que les dynamiques positives et négatives qui influencent mon travail.My artistic production and this thesis are focused on the manipulation of everyday life contexts through recurring themes in my practice, such as humor, monstrosity, and the grotesque. This thesis reports on the various symbolic elements that constitute my aesthetic, analyzing my creative process as well as the objectives and questions inherent in my practice. This text also highlights repetition as a method, the anticipation of audience reactions as a creative engine, as well as the positive and negative dynamics that influence my work
Seismic vulnerability of aluminium and steel lattice domes
No full textLes dômes en treillis sont utilisés dans la construction de stades et d'aéroports pour accueillir un grand nombre de personnes. Ces structures entrent dans la catégorie d'importance sismique élevée car elles servent d'abris en cas d'événement sismique. Il existe des informations basées sur la recherche concernant la performance sismique des dômes ; cependant, l'application pratique de ces informations pour la conception reste un défi de taille. Essentiellement, il n'y a pas de directives établies pour la conception sismique des dômes. L'utilisation d'alliages d'aluminium peut présenter une solution efficace pour les dômes exposés à des environnements agressifs tels que les installations de stockage de produits chimiques, les dômes couvrant de grands espaces tels que les stades, et pour les dômes où des formes extrudées spécialisées peuvent faciliter les connexions efficaces entre les éléments structurels. La préférence pour ce matériau s'explique par sa durabilité, son faible rapport résistance/poids et son extrudabilité. Cependant, les alliages d'aluminium sont également connus pour être plus susceptibles à la rupture par fatigue oligocyclique. La fatigue oligocyclique peut conduire à la rupture d'un élément structurel sous l'effet de cycles de déformation induits par un tremblement de terre. La vulnérabilité des dômes en aluminium aux mouvements du sol dus aux tremblements de terre peut être affectée par la résistance à la fatigue oligocyclique du matériau. Cette étude de recherche évalue la performance sismique et la vulnérabilité sismique d'un dôme en treillis en alliage d'aluminium, en comparaison avec un dôme en treillis en acier. La vulnérabilité sismique des dômes en aluminium et en acier sous la même charge de gravité est comparée en développant des fonctions de fragilité basées sur des analyses dynamiques incrémentales. Pour les analyses dynamiques incrémentales, une suite de onze mouvements de sol non échelonnés avec une accélération maximale du sol allant de 0,2 g à 0,82 g, a été considérée. Il a été observé que les caractéristiques modales des deux dômes étaient similaires. Il n'y avait pas de déformation plastique dans les deux dômes soumis à la suite sélectionnée de mouvements de sol non échelonnés. Cependant, il y avait des déformations plastiques dans les deux dômes soumis à la suite de mouvements du sol mis à l'échelle à des intensités sismiques plus élevées. Les dômes en aluminium ont subi un déplacement deux fois plus important que le dôme en acier pour toutes les intensités sismiques considérées. Les résultats ont montré que la rupture par fatigue est attendue dans les dômes en aluminium qui sont soumis à des tremblements de terre sévères, avec une accélération spectrale supérieure à 1,5 g. Il a également été observé que le dôme en aluminium démontré une bonne résistance sismique pour les intensités de mouvement du sol représentatives du spectre de conception de l'Ouest du Canada, en particulier Vancouver, BC.Lattice domes are used to construct stadiums and airports that accommodate many people. These structures fit into the high seismic importance category because they serve as shelters during seismic events. Information based on research regarding the seismic performance of domes exists; however, the practical application of this information for design remains a daunting challenge. Essentially, there are no established guidelines for the seismic design of domes. The use of aluminium alloys may present an effective solution for domes exposed to aggressive environments such as chemical storage facilities, domes covering large spaces such as stadiums, and for domes where specialized extruded shapes may facilitate efficient connections between structural elements. The preference for this material is due to its durability, low strength-to-weight ratio and extrudability. However, aluminium alloys are also known to be more susceptible to failure under low-cycle fatigue. Low cycle fatigue may lead to the rupture of a structural member under earthquake-induced strain cycles. The vulnerability of aluminium domes under earthquake ground motions may be affected by the low cycle fatigue resistance of the material. This research study assesses the seismic performance and seismic vulnerability of an aluminium lattice dome compared to a steel lattice dome. The seismic vulnerability of aluminium and steel domes under the same gravity load are compared by developing fragility functions based on incremental dynamic analyses. For the incremental dynamic analyses, a suite of eleven unscaled ground motions with peak ground acceleration ranging from 0.2 g and 0.82 g was considered. It was observed that the modal characteristics of both domes were similar. There was no plastic deformation in both domes subjected to the selected suite of unscaled ground motions. However, there were plastic deformations in both domes subjected to the suite of ground motions scaled to higher seismic intensities. The aluminium domes experienced twice as much displacement as the steel dome for all seismic intensities considered. The results also showed that fatigue failure is expected in aluminium domes subjected to severe earthquakes, with a spectral acceleration greater than 1.5 g. It was also observed that the aluminium dome showed a good seismic resistance for ground motion intensities representative of the design spectrum of western Canada, particularly Vancouver, BC
Effets de la fibrine riche en plaquettes sur les différents paramètres péri-implantaires lors la mise en place d'un implant dentaire : revue systématique
No full textL'implantologie dentaire est en constante évolution et l'objectif de ces innovations est d'assurer le succès de la thérapie implantaire. Des protocoles utilisant la fibrine riche en plaquettes (PRF) ont d'ailleurs trouvé des indications dans ce domaine. Le but de cette revue systématique est d'évaluer les effets du PRF sur la guérison osseuse et gingivale péri-implantaire. La question de recherche, basée sur la méthode PICOS, a été définie comme suit : "Chez les sujets nécessitant le remplacement d'une dent manquante par un implant dentaire, est-ce que l'utilisation du PRF démontre un bénéfice significatif comparativement à la pose d'un implant dentaire sans utilisation conjointe de PRF sur les résultats cliniques, basé sur des études humaines cliniques contrôlées? ". Les paramètres évalués incluaient la stabilité implantaire, les changements gingivaux dimensionnels, le remodelage osseux crestal et le taux de survie implantaire. Une recherche sur les bases de données MEDLINE (PubMed), Embase et Cochrane Library a été effectuée suivant une stratégie de recherche déterminée. Cinq études ont été retenues. Les résultats démontrent que l'ajout de PRF n'a généralement pas d'impact sur la stabilité implantaire. En ce qui concerne la profondeur au sondage, aucune différence significative n'a été obtenue entre les groupes. Parmi les trois études ayant mesuré la variation du niveau osseux crestal péri-implantaire, deux études rapportent que l'utilisation du PRF a réduit le remodelage osseux crestal alors qu'une étude n'a observé aucun effet positif. Le taux de survie implantaire était de 100% à l'exception d'une étude dans laquelle deux implants ont été perdus dans le groupe expérimental. La présente revue met en lumière l'effet modeste du PRF sur la guérison péri-implantaire. Il faudrait cependant prendre en considération le risque de biais élevé, la grande hétérogénéité des études et le nombre limité d'études fiables sur le sujet. Davantage d'études de bonne qualité sont nécessaires.Dental implantology is in continuous evolution, and the objectives of these innovations are to ensure treatment success. Protocols using platelet-rich fibrin (PRF) have found indications in this field. The main goal of this systematic review is to assess the effects of PRF on peri-implant osseous and gingival healing. Based on the PICOS method, the research question has been defined as follows: " On subjects who need to replace a tooth with a dental implant, does PRF have a significant clinical benefit compared to dental implant placement without using PRF, based on human-controlled trials? " Assessed parameters included implant stability, dimensional gingival changes, crestal bone remodeling, and implant survival rate. A systematic literature search comprised three databases: MEDLINE (Pubmed), Embase, and Cochrane Library. Following a determined search strategy, five studies have been included. The results demonstrated that adding PRF generally has no positive effects on implant stability. No significant difference has been measured between groups when it comes to probing depth. Among the three studies that have evaluated peri-implant crestal bone height, PRF reduced crestal bone remodeling in two studies, whereas one study reported no positive effect. The implant survival rate was 100%, except for one study in which two implants were lost in the experimental group. This review highlights the modest positive effect of PRF on peri-implant healing. However, it is important to consider the high risk of bias, the high heterogeneity of the included studies, and the limited number of reliable studies. More research is necessary
Agir collectif et pratiques de résistance : démocratiser l’action publique.
No full textLa dimension démocratique de l’action publique est fragile et sujette à diverses contraintes qui la mettent en péril. La déshumanisation des pratiques et « l’autoritarisme » de l’organisation des services et du travail devenue trop centralisée sous l’effet de réformes souvent associées aux préceptes de la Nouvelle Gestion publique et aux approches de type Lean sont particulièrement pointés du doigt. Avec ces réformes, ce sont les modèles organisationnels de l’entreprise qui s’exportent vers les institutions publiques, ce qui met en danger les logiques et les pratiques de démocratisation et de solidarité. Cette réalité vécue dans les divers réseaux d’action publique peut générer des sentiments d’impuissance et de cynisme voire de la souffrance
Performances des pratiques de gestion optimales des eaux pluviales : cas du stationnement Roland-Beaudin
No full textCette étude de cas réalisée au complexe sportif de Ste-Foy avait pour objectif principal d'évaluer les performances hydrauliques et épuratoires des pratiques de gestion optimales (PGOs), en l'occurrence des systèmes de bio-rétention, dans un climat nordique comme au Québec. À partir de cet objectif général, plusieurs objectifs spécifiques ont été ressortis. Sur le plan qualitatif, il s'agissait d'effectuer la caractérisation du ruissellement urbain, la mesure de l'impact d'une fosse de décantation et enfin l'étude de l'homogénéité des polluants sur un stationnement. Les concentrations en polluants obtenues sont de façon générale, 22 à 317 mg /L pour les matières en suspension (MeS), < 0,3 à 2,6 mg/L pour l'azote total (NT), < 0,03 à 1,74 mg/L pour le phosphore total (PT) et 36 à 419 mg/L pour la demande chimique en oxygène (DCO). Ces différentes concentrations ont été obtenues à l'entrée ayant la plus grande aire tributaire. En effet, les concentrations en polluants ne sont pas homogènes sur tout le stationnement et dépendent des facteurs tels que le trafic et l'aire de drainage. Par ailleurs, la fosse de décantation n'a pas eu d'impact sur la concentration en MeS. L'efficacité épuratoire de la bio-rétention n'a pu être démontrée en raison des conditions du site.The main objective of this case study at the Ste-Foy sports complex was to evaluate the hydraulic and purification performance of best management practices, in this case bio-retention systems in a northern climate such as Quebec. From this general objective, several specific objectives have emerged. Qualitatively, the objective was to characterize urban runoff, measuring the impact of a settling pit and finally studying the homogeneity of pollutants on a parking lot. The pollutant concentrations obtained are from 22 to 317 mg /L for suspended matter (SS), < 0.3 to 2.6 mg /L for total nitrogen (TN), < 0.03 to 1.74 mg /L for total phosphorus (TP) and 36 to 419 mg /L for chemical oxygen demand(COD). These different concentrations were obtained at the entrance with the largest tributary area. Indeed, pollutant concentrations are not homogeneous throughout the parking lot and depend on factors such as traffic and drainage area. In addition, the settling pit had no impact on the SS concentration. The performance of the bio-retention could not be demonstrated due to site conditions
Caractérisation des mécanismes moléculaires impliqués dans la régulation des neutrophiles par le récepteur inhibiteur CLEC12A
No full textL'arthrite est une des principales causes d'invalidité et d'utilisation des soins de santé au Canada. Environ 16 % des Canadiens âgés de 15 ans et plus souffrent d'arthrite et l'incidence devrait atteindre 20 % de la population d'ici 2031. Les médicaments utilisés pour traiter l'arthrite ciblent les médiateurs pro-inflammatoires. Malheureusement, tous les patients ne répondent pas bien à ces médicaments et beaucoup souffrent d'effets secondaires indésirables. L'inflammation étant régulée par un équilibre délicat entre les voies d'inhibition et d'activation des cellules immunitaires, une stratégie thérapeutique alternative consiste à cibler les molécules et les voies de signalisation anti-inflammatoires. Les récepteurs inhibiteurs sont ainsi devenus un sujet d'étude important étant donné leur potentiel thérapeutique. Toutefois, leur fonctionnement et leur rôle dans les maladies inflammatoires demeurent peu connus, nécessitant ainsi leur étude. C'est dans ce but scientifique que cette thèse s'est déroulée. Mes travaux se sont basés sur l'identification du récepteur inhibiteur CLEC12A appartenant à la famille des lectines, dont notre laboratoire a montré qu'il était impliqué dans la pathogenèse de la goutte. Le récepteur CLEC12A est un récepteur inhibiteur exprimé chez les cellules d'origine myéloïde, dont les ligands naturels et la voie de signalisation restent à identifier. Toutefois, CLEC12A possède un motif ITIM ("Immunoreceptor Tyrosine-based Inhibitory Motif") caractéristique des récepteurs inhibiteurs. Les motifs ITIM recrutent des phosphatases qui, à leur tour, inhibent les voies de signalisation activatrices des cellules immunitaires et permettent ainsi de moduler leurs fonctions. Cette capacité de modulation négative de l'activation des cellules myéloïdes du récepteur CLEC12A a été observée dans plusieurs études faisant de lui un candidat pertinent à étudier. CLEC12A apparaît notamment comme un facteur commun dans le syndrome de Behçet's, l'arthrite rhumatoïde et la goutte qui sont caractérisés par des épisodes inflammatoires aigus impliquant le neutrophile. Les études montrent que la diminution ou l'altération du récepteur CLEC12A est associée avec une inflammation exacerbée dans ces pathologies. De plus, en absence de CLEC12A, le neutrophile arbore une réponse accrue à des stimuli pro-inflammatoires. De ce fait, le laboratoire a étudié le rôle du récepteur CLEC12A dans la pathologie de la goutte dont l'agent étiologique connu, les cristaux d'urate monosodique (UMS) provoquent une inflammation exacerbée caractérisée par la suractivation des neutrophiles. Les cristaux d'UMS diminuent l'expression de CLEC12A à la surface des neutrophiles ce qui aboutit à une réponse inflammatoire accrue. De plus, nous savons que l'une des molécules (la colchicine) utilisées pour traiter les patients souffrant de la goutte prévient la diminution de l'expression de CLEC12A à la surface des neutrophiles par les cristaux d'UMS. Or, chez le neutrophile, notre laboratoire a démontré qu'en réponse aux cristaux d'UMS CLEC12A régule négativement l'influx de calcium intracellulaire, la phosphorylation des protéines intracellulaires ainsi que la production d'IL-8. Ceci a mené à notre hypothèse que CLEC12A modulerait la réponse des neutrophiles en ciblant les différentes voies de signalisation intracellulaires activées par les cristaux d'UMS. Ainsi, notre premier objectif était de mieux identifier les voies de signalisation modulées par CLEC12A chez le neutrophile en réponse aux cristaux d'UMS. Cependant, le manque de connaissance sur la signalisation du récepteur CLEC12A limitait notre approche afin de comprendre son rôle et les mécanismes altérant son expression dans la pathogenèse de la goutte. Ainsi, notre deuxième objectif était de caractériser les mécanismes moléculaires impliqués dans la signalisation de CLEC12A. Dans la pathologie de la goutte, nos travaux ont identifié l'axe de signalisation p38-MAPK-PI3K Akt dans la production de l'IL-8 par les neutrophiles en réponse aux cristaux d'UMS. Nous avons démontré la rapide phosphorylation du récepteur CLEC12A par une kinase Src dans les domaines membranaires résistants aux détergents (DRM) enrichies en flotilline-1 en réponse aux cristaux d'UMS, ce qui révèle qu'avant d'être dégradé par les cristaux, le récepteur module l'activation des neutrophiles par l'axe de signalisation p38-MAPK-PI3K-Akt. Afin de pouvoir comprendre les mécanismes dérégulant l'expression de CLEC12A dans la goutte, nos travaux ont identifié des mécanismes de signalisation du récepteur qui étaient encore méconnus. Nos résultats rapportent les premières évidences des mécanismes de signalisation du récepteur CLEC12A. Nous démontrons le rôle des cystéines 118 et 130 de la tige extracellulaire de CLEC12A dans son oligomérisation, expression, et signalisation selon un mécanisme de modification post-traductionnel des cystéines
Implication de la kinase Aurora B en hypertension artérielle pulmoraire
No full textL'hypertension artérielle pulmonaire (HTAP) est une maladie vasculaire qui se caractérise par un remodelage des artères pulmonaires distales (APD). Cela conduit à une élévation de la pression sanguine ainsi qu'une résistance au niveau des artères pulmonaires entraînant une insuffisance cardiaque droite et la mort du patient. Aujourd'hui, il est reconnu que les cellules musculaires lisses des artères pulmonaires (CMLAP) sont des acteurs clés dans les changements histopathologiques de l'HTAP. Comme dans les cellules cancéreuses, les CMLAP présentent un phénotype pro-prolifératif et anti-apoptotique, soutenu par un important changement métabolique connu sous le nom d'effet Warburg. Les Aurora kinases sont une famille de sérine/thréonine kinase composée d'Aurora A (AURKA), Aurora B (AURKB) et Aurora C (AURKC). Toutes sont fortement impliquées dans la prolifération cellulaire, l'apoptose et le métabolisme en contrôlant l'activation du cycle cellulaire. Des recherches antérieures ont montré qu'AURKB est surexprimée dans divers cancers humains et que son inhibition réprime la progression tumorale à la fois in vivo et in vitro, suggérant qu'elle pourrait être une nouvelle cible thérapeutique dans l'HTAP. Nous avons donc émis l'hypothèse que AURKB est régulée à la hausse en HTAP et contribue à la prolifération et à la survie des CMLAP, dont l'inhibition pourrait inverser le phénotype de l'HTAP et le remodelage des artères pulmonaires (AP). Par une approche multidisciplinaire, nous avons tout d'abord démontré dans cette étude qu'AURKB est surexprimée en HTAP dans les CMLAP isolées de patients atteints par la maladie ainsi que dans les modèles animaux mimant la pathologie; monocrotaline (MCT) et sugen-hypoxie (Sg-Hx). Il a également été démontré que la surexpression d'AURKB était dépendante de FOXM1 dans ces mêmes cellules comparées aux contrôles. In vitro, l'inhibition pharmacologie de AURKB via l'utilisation du Barasertib (AZD1152-HQPA) a montré une diminution significative de la prolifération (incorporation d'EdU, marquage Ki67) et de la survie cellulaire des CMLAP-HTAP (test Annexin V). Parallèlement, des protéines impliquées dans la survie et la prolifération cellulaire (Survivin, PLK1) voient leur expression diminuée à la suite de l'inhibition de AURKB. À l'inverse, des protéines impliquées dans l'arrêt du cycle cellulaire et l'apoptose (P21, P27, P53) voient leur expression augmentée suite au traitement des cellules avec le Barasertib. Tel que suspecté, l'inhibition d'AURKB dans les CMLAP-HTAP est associée à une diminution dose-dépendante de l'expression de la forme phosphorylée de l'histone H3 (pH3). En collaboration avec le Docteur David Marsolais et son étudiant Olivier Courtemanche, il nous a été possible de réaliser de la cytométrie en flux. Cette analyse a permis d'observer que le Barasertib engendre un arrêt du cycle cellulaire, les cellules étant bloquées en phase G2/M. Nous avons également pu constater que le Barasertib provoque de la polyploïdie, un effet secondaire déjà observé en cancérologie. Enfin, un premier test in vivo a été réalisé sur des rats mâles ayant une HTAP induite par la MCT afin de déterminer si l'inhibition pharmacologique de AURKB améliore ou non les paramètres hémodynamiques et le remodelage des AP. Après deux semaines de traitement et afin de s'assurer de l'efficacité de celui-ci l'expression de pH3 a été évaluée par immunobuvardage de type western. Ainsi, après sacrifice et extraction des protéines présentent au niveau des poumons des rongeurs, nous avons pu observer que l'inhibition de AURKB via le Barasertib avait bel et bien fonctionné, l'expression de pH3 étant diminuée chez le groupe de rats traités comparativement aux véhicules. Finalement, ce premier protocole à petite échelle nous a permis de constater une amélioration de certains paramètres hémodynamiques chez les rats ayant reçu la thérapie, les résultats ayant été obtenus par échocardiographie. L'utilisation du Barasertib in vivo est donc très prometteuse, mais des protocoles à plus grandes échelles doivent être réalisés afin de confirmer le potentiel thérapeutique de l'inhibition de AURKB en HTAP.Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a vascular disease characterized by remodeling of the distal pulmonary arteries (DPA). This leads to increased blood pressure and resistance in the pulmonary arteries resulting in right heart failure and death. Today, it is recognized that pulmonary artery smooth muscle cells (PASMC) are key players in the histopathological changes of PAH. As in cancer cells, PASMCs exhibit a pro-proliferative and anti-apoptotic phenotype, supported by an important metabolic change known as the Warburg effect. Aurora kinases are a family of serine/threonine kinase composed of Aurora A (AURKA), Aurora B (AURKB) and Aurora C (AURKC). All are strongly involved in cell proliferation, apoptosis, and metabolism by controlling cell cycle activation. Previous research has shown that AURKB is overexpressed in various human cancers and its inhibition repressed tumor progression both in vivo and in vitro, suggesting that it may be a novel therapeutic target in PAH. We therefore hypothesized that AURKB is upregulated in PAH and contributes to the proliferation and survival of PASMCs-HTAP. The inhibition of AURKB would then reverse PAH phenotype and pulmonary artery (PA) remodeling. Using a multidisciplinary approach, we first demonstrated that AURKB is increased in PASMCs isolated from patients with PAH as well as in animal models mimicking the pathology; monocrotaline (MCT) and sugen-hypoxia (Sg-Hx). AURKB overexpression was also shown to be FOXM1 dependent in these cells compared to controls. In vitro, pharmacological inhibition of AURKB via the use of Barasertib (AZD1152-HQPA) showed a significant decrease in PAH-PASMCs proliferation (EdU incorporation, Ki67 labeling) and survival (Annexin V assay). At the same time, proteins involved in cell survival and proliferation (Survin, PLK1) were decreased following AURKB inhibition. On the other hand, proteins involved in cell cycle arrest and apoptosis (P21, P27, P53) were increased following treatment of cells with Barasertib. As suspected, AURKB inhibition in PAH-PASMCs is associated with a dose-dependent decrease in the expression of the phosphorylated form of H3 (pH3). In collaboration with Dr. David Marsolais and his student Olivier Courtemanche, it was possible to perform flow cytometry. This analysis allowed us to observe that Barasertib causes the cell cycle arrest, the cells being blocked in G2/M phase. We were also able to confirm that Barasertib causes polyploidy, a side effect already observed in cancerology. Finally, a first in vivo test was performed on male MCT rats to determine whether pharmacological inhibition of AURKB improves hemodynamic parameters and PA remodeling. After 2 weeks of treatment and to ensure its efficacy, the expression of pH3 was evaluated by western blot (WB). Thus, after sacrifice and extraction of proteins present in the lungs of rodents, we were able to observe that the inhibition of AURKB via Barasertib had indeed worked, the expression of pH3 being decreased in the treated rats compared to vehicles. Finally, this first small-scale protocol allowed us to observe an improvement in all hemodynamic parameters in rats that received the therapy, the results having been obtained by echocardiography. The use of Barasertib in vivo is therefore very promising, but larger-scale protocols must be performed to confirm the therapeutic potential of AURKB inhibition in PAH