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Hybrid nanoparticles to co-delivery drugs with improved properties for topical ocular application
No full textTese de mestrado, Ciências Biofarmacêuticas, 2024, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia.Atualmente são diversas as doenças oculares conhecidas, e estima-se que mais de 1 mil milhão de pessoas em todo o mundo sofram de algum distúrbio visual, o que torna necessário o desenvolvimento de formulações nesta área. Apesar desta necessidade, a passagem dos fármacos pelas membranas oculares nem sempre é possível devido à anatomia e fisiologia do olho humano. Assim, é necessário a inclusão de promotores de permeação nas formulações oftálmicas, ou seja, com estes compostos será possível aumentar a permeabilidade do fármaco pelas membranas oculares. Neste trabalho de investigação foram desenvolvidas nanopartículas híbridas lípido-polímero e adicionados promotores de permeação como o Gelucire® 48/16 e HP-β-CD, também com propriedades mucoadesivas. Além disso, a adição de ácido hialurónico permite que as nanopartículas tenham maior mucoadesão.
As nanopartículas híbridas poliméricas foram otimizadas para poder abranger fármacos de natureza hidrofílica e lipofílica. Para esta inclusão foi utilizada a técnica de homogeneização a quente, sendo a levofloxacina (quinolona) e o ibuprofeno (anti-inflamatório não esteróide) incorporados na fase lipídica. Posteriormente foram verificadas as propriedades físico-químicas das nanopartículas, bem como suas propriedades mucoadesivas. Em estudos in vitro foi possível verificar a captação de nanopartículas pelas células ARPE-19 e verificar a viabilidade celular dos diferentes componentes das nanopartículas.
As formulações finais otimizadas tiveram tamanho médio de 264,9 ± 25,8 nm; um PDI de 0,312 ± 0,067 e um potencial zeta de -31,4 ± 2,5 mV. A adição de fármacos às nanopartículas não afetou significativamente estes parâmetros, sendo possível verificar que a eficiência de encapsulamento foi de quase 100% para o ibuprofeno, que também apresentou maior perfil de libertação. Testes in vitro demonstraram que as células ARPE-19 foram capazes de captar positivamente as nanopartículas e seus compostos não apresentaram citotoxicidade celular, sendo a viabilidade celular de quase 100%.Currently there are several known eye diseases, and it is estimated that more than 1 billion people worldwide suffer from a visual disorder, which makes it necessary to develop formulations in this field. Despite this need, the passage of drugs through the ocular membranes is not always possible due to the anatomy and physiology of the human eye. Thus, it is necessary to include permeation enhancers in ophthalmic formulations, that is, with these compounds it will be possible to increase the permeability of the drug in the ocular membranes. In this research work, lipid-polymer hybrid nanoparticles were developed and permeation enhancers such as Gelucire® 48/16 and HP-β-CD were added, with also mucoadhesive properties. Furthermore, the addition of hyaluronic acid allows the nanoparticles to have greater mucoadhesion.
Lipid-polymer hybrid nanoparticles were optimized to encompass drugs of a hydrophilic and lipophilic nature. For this inclusion, the hot high sheer homogenization technique was used, with levofloxacin and ibuprofen being incorporated into the lipid phase. The physical-chemical properties of the nanoparticles were subsequently verified as well as their mucoadhesive properties. In in vitro studies, it was possible to verify the uptake of nanoparticles by ARPE-19 cells and verify the cellular viability of the different components of the nanoparticles.
The final optimized formulations had a particle size of 264.9 ± 25.83nm; a PDI of 0.31 ± 0.067 and a zeta potential of -31.4 ± 2.5mV. The addition of drugs to the nanoparticles did not significantly affect these parameters, and it was possible to verify that the encapsulation efficiency was almost 100% for ibuprofen, which also presented a greater release profile. In vitro tests demonstrated that ARPE-19 cells were able to positively capture the nanoparticles and their compounds did not show cellular cytotoxicity, with cell viability being almost 100%.Edifício Almeida Ribeiro - Faculdade de Farmácia da Universidade de Lisboa
Estudo da atividade antimicrobiana de derivados de Azauronas e Sphaerococcenol A
No full textTese de mestrado, Microbiologia Aplicada, 2024, Universidade de Lisboa, Faculdade de CiênciasA tuberculose (TB) continua a ser uma das doenças provocadas por um único agente infecioso que mais
morbilidade e mortalidade causa a nível mundial. Porém, os tratamentos existentes são longos e nem
sempre eficazes, promovendo a emergência e incidência de estirpes resistentes, sendo cada vez mais
importante a descoberta e utilização de novas terapias para o combate desta patologia. Este trabalho tem,
então, como objetivo determinar se os derivados de azauronas e de sphaerococcenol A são possíveis
alternativas terapêuticas para a TB. Relativamente aos derivados de azauronas, estes foram
identificados, através de ensaios de microdiluição, como ativos apenas contra micobactérias
tuberculosas pertencentes ao complexo Mycobacterium tuberculosis (MTBC), sendo que essa atividade
contra Mycobacterium tuberculosis (Mtb) é bacteriostática. Para além disto, apesar destes fármacos
serem aparentemente tóxicos (índice de seletividade < 1), eles apresentam sinergia com macrófagos
diferenciados de células THP-1. Contudo, o mecanismo de ação destes derivados continua por
determinar, apesar de não parecer envolver bombas de efluxo inibidas por reserpina e clorpromazina. Já
os derivados de sphaerococcenol A não apresentam atividade contra Mtb, mas sim contra M. smegmatis
e contra uma variada gama de bactérias de Gram-positivo com diferentes graus de resistências a outros
antibióticos. Estas atividades são, contudo, diferentes, visto que para a micobactéria não-tuberculosa de
crescimento rápido a atividade é bactericida e que para as bactérias de Gram-positivo é bacteriostática,
promovendo para estas últimas um fenómeno de tolerância. Adicionalmente, determinou-se que a
eficácia destes fármacos depende da presença do grupo hidroxilo à frente do plano em vez de um grupo
carbonilo. Logo, apesar de só os derivados de azauronas serem promissores para o tratamento da TB, os
derivados de sphaerococcenol A são promissores para o combate a infeções provocadas por bactérias
de Gram-positivo, pelo que se está perante fármacos importantes para o combate a duas ameaças de
saúde pública.Tuberculosis (TB), caused by a single infectious agent, continues to be one of the diseases with more
morbidity and mortality worldwide. However, existing treatments are long and not always effective,
promoting the emergence and incidence of resistant strains, so it is extremely important to discover and
use new therapies to fight against this pathology. Hence, the objective of this study is to determine
whether azaaurone and sphaerococcenol A derivatives are possible therapeutic alternatives for TB.
Regarding azaaurone derivatives, they have been identified, through microdilution assays, as active only
against tuberculous mycobacteria belonging to the Mycobacterium tuberculosis complex (MTBC), and
they have a bacteriostatic activity against Mycobacterium tuberculosis (Mtb). Furthermore, although
these drugs are apparently toxic (selectivity index < 1), they have synergy with differentiated
macrophages of THP-1 cells. But the mechanism of action of these derivatives remains to be determined,
although it does not appear to involve efflux pumps inhibited by reserpine and chlorpromazine. On the
other hand, sphaerococcenol derivatives do not show activity against Mtb, but against M. smegmatis and
against a wide range of Gram-positive bacteria with different degrees of resistance to other antibiotics.
Nevertheless, these activities are different, since for the fast-growing nontuberculous Mycobacterium
the activity is bactericidal and for the Gram-positive bacteria it is bacteriostatic, which promotes a
tolerance phenomenon for these last bacteria. In addition, it has been determined that the efficacy of
these derivatives depends on the presence of the hydroxyl group ahead of the plane rather than a carbonyl
group. Therefore, although only azaaurone derivatives are promising drugs for the treatment of TB,
sphaerococcenol A derivatives are promising drugs for the therapy of infections caused by Grampositive bacteria, thus these two groups of derivatives are important to fight against two threats to global
health
Morphological, biochemical, ecological and taxonomic analysis of the reversible adhesion of sea urchins from the Atlantic and Indo-Pacific
No full textTese de mestrado, Ecologia Marinha, 2024, Universidade de Lisboa, Faculdade de CiênciasSea urchins tube feet produce adhesive and de-adhesive secretions, enabling strong but
reversible adhesion to the substrate. Due to its potential in biotechnology, research has been conducted
to study the protein and glycidic contents of the adhesive secretion, and identify the main components
responsible for its adhesion and polymerization. A recent study with four sea urchin species indicated a
high interspecific variability of glycans involved in adhesion, although high conservation was found
between taxonomically closer species.
To further confirm these results, six sea urchin species (Paracentrotus lividus,
Strongylocentrotus droebachiensis, Strongylocentrotus purpuratus, Echinometra mathaei and
Tripneustes gratilla and Holopneustes purpurascens) were tested for common key elements in their
adhesive secretions and whether these similarities are related to their geographical distribution, habitat
or taxonomy. The study aims at analysing: 1) external morphology of the tube feet through Scanning
Electron Microscopy; 2) internal morphology through a variety of staining techniques on histological
sections, and 3) presence of adhesive molecules through lectin histochemistry and lectin blotting, using
22 lectins.
Our results showed the presence of N-acetylglucosamine (GlcNAc) conjugated glycoproteins in
all species, while N-acetylgalactosamine (GalNAc) conjugated glycoproteins were found in all except
T. gratilla. Contrary to the above mentioned hypothesis, it was demonstrated that at least for the six
studied species: (1) the glycans present in adhesion related structures are mainly GlcNAc and GalNAc,
(2) taxonomically closer species do not necessarily have glycoproteins with similar molecular weights,
since species belonging to different families and orders presented protein bands with the same molecular
weight, (3) no connection to the species morphology, ecology and habitat could be established. Although
the two glycans have been detected in other sea urchin species and other marine attaching invertebrates,
there is still a need to expand the study and consistently use a wider battery of lectins, to consolidate
these results
Água para consumo humano – Desafios do contexto rural na região de Oio, Guiné-Bissau
No full textTese de Mestrado, Biologia Humana e Ambiente, 2024, Universidade de Lisboa, Faculdade de CiênciasA água é um direito humano. Ainda assim, não está à disposição de uma parte significativa da
população mundial. Em 2023, cerca de 2 mil milhões de pessoas não dispunham de água potável. Esta
problemática é particularmente grave em África e em países em desenvolvimento como a Guiné-Bissau.
O trabalho desenvolvido teve como objetivo principal avaliar a qualidade microbióloga e
físico-química da água para consumo em localidades da Região de Oio na Guiné-Bissau, bem como a
análise da sua disponibilidade.
O estudo foi realizado entre outubro de 2022 e setembro de 2023 em quatro localidades rurais: Cangha
N’Tchugal, Cajaque, Infaidi e Insanha. Durante o período foram colhidas e analisadas oito amostras de
água por localidade, quatro em cada estação.
Os resultados microbiológicos revelaram a presença de coliformes fecais na maioria das amostras, com
concentrações entre 2 e 39 UFC/100 mL. Das determinações físico-químicas realizadas destaca-se o pH
ácido das águas em todas as localidades, que variou entre 4,93 e 6,58, os fosfatos com concentrações
entre 0,23 mg/L e 0,77 mg/L e os valores elevados de ferro na estação seca entre 0,27 e 3,00 mg/L. A
análise dos parâmetros permitiu verificar um aumento da concentração de coliformes fecais da estação
seca para a estação das chuvas: Cangha N’Tchugal 0 para 4 UFC/100 mL, Cajaque 31 para 47 UFC/100
mL, Infaidi 8 para 33 UFC/100 mL e Insanha 2 para 15 UFC/100 mL, e uma diminuição das
concentrações de ferro: Cangha N’Tchugal 0,27 para 0,09 mg/L, Cajaque 0,48 para 0,10 mg/L e Insanha
0,07 para 0,05 mg/L.
Conclui-se assim, que a água nos quatro pontos analisados não é adequada para o consumo humano.
Perante este contexto, destaca-se a necessidade no futuro de uma monitorização regular dos pontos de
água utilizados para consumo e de um maior acesso ao recurso e ao saneamento básico.Water is a human right. Still, it is not available to a significant part of the world's population. In 2023
around 2 billion people did not have access to drinking water. This problem is particularly severe in
Africa and in developing countries such as Guinea-Bissau. The main objective of this study was to
evaluate the microbiological and physicochemical quality of drinking water in localities of the Oio
Region in Guinea-Bissau, as well as the analysis of its availability. The present study was conducted
between October 2022 and September 2023 in four rural locations: Cangha N'Tchugal, Cajaque, Infaidi,
and Insanha. During this period, eight water samples were collected and analyzed per location, four in
each season. Microbiological results revealed fecal coliforms in most samples, with concentrations
ranging from 2 to 39 CFU/100 mL. Among the physicochemical determinations carried out, the acidic
pH of the waters in all locations stands out, varying between 4.93 and 6.58, the phosphates with
concentrations between 0.23 and 0.77 mg/L and the iron values in the dry season between 0.27 and 3.00
mg/L. The analysis of the parameters showed an increase in the concentration of fecal coliforms from
the X to X season: Cangha N'Tchugal 0 to 4 CFU/100 mL, Cajaque 31 to 47 CFU/100 mL, Infaidi 8 to
33 CFU/100 mL and Insanha 2 to 15 CFU/100 mL, and a decrease in iron concentrations: Cangha
N'Tchugal 0.27 to 0.09 mg/L, Cajaque 0.48 to 0.10 mg/L, and Insanha 0.07 to 0.05 mg/L. Thus
concluding that the water analyzed at the four points is not suitable for human consumption. In view of
this context, the need for regular monitoring of water points used for consumption and greater access to
resources and basic sanitation in the future is highlighted
#FILMISNOTDEAD : uma análise comparativa das postagens de fotografias analógicas e digitais nas redes sociais
No full textMestrado Bolonha em MarketingVários autores têm procurado entender a crescente popularidade de objetos analógicos
num mundo pós-digital. A utilização de objetos analógicos está, não apenas relacionada com a
procura de um escape do mundo digital, mas também com sentimentos nostálgicos e genuínos,
oferecendo uma experiência física e de qualidade superior que não seria possível apenas no
contexto digital.
O presente trabalho pretende, assim, fazer uma análise comparativa das postagens de
fotografias analógicas e digitais nas redes sociais, procurando descobrir que diferenças existem
nas motivações e gratificações de postagem de fotografia analógica vs. digital nas redes sociais;
e que tenções poderão existir entre a dualidade do espaço físico de produção vs. espaço digital
de postagem, das fotografias analógicas.
Este estudo seguiu uma abordagem qualitativa, tendo sido realizadas 15 entrevistas em
profundidade.
Os resultados dizem-nos que existem variações significativas entre as motivações e
gratificações retiradas dos dois tipos de fotografia. A aparente ausência de pontos de tensão na
dualidade espaço físico vs. digital é discutida em detalhe.
Embora estudos anteriores tenham abordado as motivações para a partilha de imagens
digitais nas redes sociais, este trabalho preenche uma lacuna ao centrar-se nas motivações
específicas que impulsionam a partilha de fotografias analógicas.
As empresas e as marcas podem modificar as suas táticas de marketing para melhor se
envolverem com os clientes com base nos motivos e gratificações descobertos para a partilha
de imagens analógicas e digitais.Several authors have tried to understand the growing popularity of analog objects in a
post-digital world. The use of analog objects is not only related to the search for an escape from
the digital world, but also to nostalgic and genuine feelings, offering a physical and higher
quality experience that would not be possible only in the digital context.
This paper therefore aims to make a comparative analysis of analog and digital photo
posts on social networks, seeking to discover what differences exist in the motivations and
gratifications of posting analog vs. digital photography on social networks; and what tensions
might exist between the duality of the physical production space vs. the digital posting space
for analog photographs.
This study took a qualitative approach, and 15 in-depth interviews were conducted.
The results tell us that there are significant variations between the motivations and
gratifications derived from the two types of photography. The apparent absence of tension
points in the physical vs. digital space duality is discussed in detail.
While previous studies have addressed the motivations for sharing digital images on
social media, this work fills a gap by focusing on the specific motivations that drive the sharing
of analog photos.
Companies and brands can modify their marketing tactics to better engage with
customers based on the motives and gratifications discovered for sharing analog and digital
images.info:eu-repo/semantics/publishedVersio
O efeito do co-branding “Masstige” na intenção de compra e na geração de Word-of-Mouth pelo Consumidor
No full textMestrado Bolonha em MarketingA estratégia de aliança entre marcas, conhecida como co-branding, é amplamente empregue em diversos setores de atividade e tem sido objeto de extensa investigação no campo do marketing. Embora a literatura tenha demonstrado a importância da compatibilidade de atributos para o sucesso de uma colaboração, a união de marcas que possuem atributos aparentemente conflitantes, como "massa" e "prestígio” tem tido imenso sucesso.
O propósito desta investigação consistiu em analisar o impacto do co-branding "masstige" em comparação com o co-branding de "massa" nas intenções de compra e na propensão a gerar word-of-mouth positivo para o novo produto resultante da colaboração entre marcas.
Foi empregue o método experimental para testar as hipóteses de investigação, fazendo uso de um questionário online, para conduzir uma experiência com 587 participantes, considerando dois cenários distintos: co-branding "masstige" e co-branding de massa.
Os resultados deste estudo revelaram que o co-branding "masstige" não demonstrou um aumento significativo na intenção de compra nem na disposição para o word-of-mouth. Além disso, a percepção de "brand coolness" para o co-branding “masstige” não teve um efeito mediador observado sobre a intenção de compra e a disposição para o word-of-mouth. No entanto, a perceção de exclusividade mostrou uma influência positiva e mediadora na intenção de compra, bem como na disposição para o WOM. Por fim, a característica individual de need for uniqueness teve um efeito moderador positivo na intenção de compra, embora não tenha demonstrado um efeito moderador na disposição para o word-of-mouth.
O presente estudo possibilita novo conhecimento sobre a dinâmica de um co-branding masstige e a avaliação feita pelo consumidor, levando em consideração fatores que não foram analisados antes. Além disso, são oferecidas contribuições práticas para empresas que possuam interesse na estratégia masstige por meio de uma colaboração entre marcas.The strategy of alliance between brands, known as co-branding, is widely used in various sectors of activity and has been the subject of extensive research in the field of marketing. Although the literature has demonstrated the importance of compatibility of attributes for the success of a collaboration, the union of brands with apparently conflicting attributes, such as "mass" and "prestige" has been extremely successful.
The purpose of this research was to analyze the impact of "masstige" co-branding compared to "mass" co-branding on purchase intentions and the propensity to generate positive word-of-mouth for the new product resulting from the collaboration between brands.
The experimental method that was used to test the research hypotheses consisted in using an online questionnaire to conduct an experiment with 587 participants, considering two different scenarios: "masstige" co-branding and "mass" co-branding.
The results of this study revealed that "masstige" co-branding did not show a significant increase in purchase intention or word-of-mouth willingness. In addition, the perception of "brand coolness" for "masstige" cobranding had no observed mediating effect on purchase intention and word-of-mouth willingness. However, the perception of exclusivity showed a positive and mediating influence on purchase intention, as well as on willingness to WOM. Finally, the individual characteristic of need for uniqueness had a positive moderating effect on purchase intention, although it did not show a moderating effect on word-of-mouth willingness.
This study provides new knowledge about the dynamics of a masstige co-branding and consumer evaluation, considering factors that have not been analyzed before. In addition, it offers practical contributions for companies interested in the masstige strategy through collaboration between brands.info:eu-repo/semantics/publishedVersio
In, out and ihrough: literary and comparative perspectives on thresholds
No full textDe l’Antiquité classique à la contemporanéité, notre organisation de l’espace, du temps, du savoir, notre interprétation des relations que les êtres humains tissent entre eux et avec le monde environnant, notre représentation de la délicate articulation entre dimension terrestre et dimension surnaturelle de l’existence, finissent toutes, tôt ou tard et de manière plus ou moins explicite, par se confronter avec la notion de « seuil ». Mais qu’est-ce qu’un « seuil » ? La question est plus complexe qu’il n’y paraît.
En convoquant des spécialistes de différents domaines d’études littéraires et artistiques et en faisant dialoguer une grande variété d’approches et perspectives, ce volume n’entend pas forcer une réponse illusoirement univoque et catégorique, ce qui ne pourrait se faire qu’au prix de simplifications excessives et trompeuses, mais, bien au contraire, il vise à rendre compte de la richesse sémantique et symbolique, ainsi que des ambiguïtés foncières, de cette notion complexe et polymorphe qui défie toute pensée binaire.This work is financed by national funds through the FCT - Foundation for Science and Technology, I.P., within the scope of the projects UIDB/00509/2020 and UIDP/00509/2020info:eu-repo/semantics/publishedVersio
Genome-wide understanding of biofilm formation phenotypic variability in C. glabrata clinical isolates
No full textTese de mestrado, Microbiologia Aplicada , 2023, Universidade de Lisboa, Faculdade de CiênciasCandida glabrata is the second major pathogen in the Candida genus, representing over 20% of all
candidemia and candiduria nosocomial infections. Phylogenetically, it is the furthest member in the
genus, being more closely related to the environmental saprophyte Saccharomyces cerevisiae3
. It is
intrinsically less susceptible to azole drugs. Emergence of resistance to the other drugs available for
candidiasis treatment is being documented.
The threat of an increasing number in fungal infections worldwide is aggravated by the high rate of
antimicrobial resistance among clinically relevant pathogens, as well as by the emergence of novel ones,
some of which are intrinsically resistant to commonly used drugs. C. glabrata is a relatively recent
pathogen and of increasing concern. Its evolution towards a higher virulence is generally associated with
strong adhesion to host’s tissues and biofilm formation. To unveil key regulators of biofilm formation
in C. glabrata, in this work, a comparative genomics approach was paired with microevolution of
clinical isolates towards a stronger biofilm formation phenotype. Specialization towards biofilm mode
of growth was verified to occur rapidly, in association to genome shortening, adhesin remodelling and
polymorphism accumulation in effectors of different regulatory levels: from epigenetic to posttranslational. Seven genes with a putative role in biofilm formation were identified and their impact
experimentally validated: SET1, EST3, SRB2, CRZ1, LMS7, RPL22A and SWF1. Those genes may be
further explored in the future as targets for biofilm disruption and markers of biofilm evolution
“A formidável espada da igreja”. Christianity, clergy, and portuguese rule in eighteenth-century Angola
No full textHistoriography on West-Central Africa has over the last decades produced a significant amount of research on the role of Christianity within the region, showcasing a very pronounced interest in sixteenth- and seventeenth-century Kongo. Scholars have paid particular attention to the appropriation of Christian religious practices by West-Central Africans. Especially how West-Central African elites used and transformed Christianity to consolidate their power and maintain their independence has been studied extensively. Meanwhile, post-seventeenth-century developments in the areas south of Kongo – particularly, the Portuguese colony of Angola – have attracted far less scholarly interest.
The eighteenth century has frequently been described as a time of ‘decline’ or ‘crisis’ for ecclesiastical structures in Portuguese Angola. Rather than analyzing the nature of the ecclesiastical presence in the colony during this period, researchers have mostly limited themselves to referring to the lack of religious personnel and colonial officials’ complaints about a supposed ‘decay’ of the Catholic Church’s presence in the colony. Otherwise, there has been a general disinterest in the role of the Catholic Church and its representatives in eighteenth-century Angola. In striking contrast to studies on earlier periods, scholars often have treated clerics as historical actors of only marginal relevance in the context of Angola during the seventeen hundreds. By highlighting the social composition of the clergy, its relationship to the secular colonial administration, the disciplining function of the Catholic Church within the colony as well as the clergy’s economic endeavors, this study challenges existing conceptions about the role of the Catholic Church in pre-nineteenth-century West-Central Africa. This study argues that ecclesiastical structures were an important pillar of Portuguese colonial rule in Angola during the seventeen hundreds. The clergy in eighteenth-century Angola – directly and indirectly – supported and perpetuated Portuguese colonization in the social, political, religious, and economic realm.Grande parte da historiografia produzida nas últimas décadas sobre a África Centro-Ocidental mostrou um interesse muito pronunciado no papel do Cristianismo nessa região, especialmente em relação à história do reino do Kongo dos séculos XVI e XVII. Nesse contexto, investigadores prestaram particular atenção à apropriação de práticas religiosas cristãs pelas populações da África Centro-Ocidental. O modo como as elites da região utilizaram e transformaram o Cristianismo para consolidar o seu poder e manter sua independência foi também objeto de estudo. Entretanto, desenvolvimentos que aconteceram após o século XVII nos territórios a sul do Kongo – particularmente, na colónia portuguesa de Angola – têm despertado menor interesse entre os investigadores.
O século XVIII foi frequentemente descrito como uma época de ‘decadência’ ou de ‘crise’ para as estruturas eclesiásticas na colónia portuguesa de Angola. Ao invés de analisar as especificidades da presença eclesiástica nesse território português durante o século XVIII, a historiografia limitou-se a referir a falta de clérigos e as queixas de oficiais coloniais sobre o ‘declínio’ da Igreja Católica na colónia. Em geral, pode-se verificar um desinteresse quase completo por parte dos historiadores da África Centro-Ocidental sobre o papel da Igreja Católica e dos seus representantes na Angola setecentista. Ao contrário do que pode observar-se para períodos anteriores, os clérigos têm sido tratados como atores históricos com uma escassa relevância. Ao destacar a composição social do clero, a sua relação com a administração colonial secular, a função disciplinadora da Igreja Católica na colónia, como também as atividades económicas do clero, esta investigação desafia as concepções dominantes sobre o papel da Igreja Católica na África Centro-Ocidental antes do século XIX. Este estudo argumenta que as estruturas eclesiásticas foram um pilar de elevada importância do domínio colonial português em Angola, durante o século XVIII. O clero na Angola setecentista – direta e indiretamente – apoiou e perpetuou a colonização portuguesa nas suas dimensões social, política, religiosa e económica.
Este estudo está dividido em quatro secções. O primeiro capítulo aborda uma questão simples, mas ao mesmo tempo negligenciada e fundamental, nomeadamente, quem eram os clérigos regulares e seculares da Angola setecentista? Aqui se demonstra que a distinção demasiado generalizante estabelecida por muitos historiadores entre um clero secular ‘centro-africano’ e um clero regular ‘europeu’ deve ser revista. Membros de ambas as partes do clero tinham uma ampla variedade de origens sociais, trajetórias pessoais e convicções religiosas individuais. Este capítulo presta particular atenção à ação de clérigos seculares nascidos em Angola. Muito membros do clero secular em Angola – desde o cabido da sé de Luanda até aos párocos locais – faziam parte de redes familiares luso-africanas. Estas famílias estavam interessadas em assegurar posições eclesiásticas para os seus descendentes como fonte de distinção social, influência e expansão das suas redes comerciais. A nossa análise também desafia a noção de que a ‘crioulização’ ocorrida em Angola levou os clérigos seculares nascidos na África Centro-Ocidental a difundir universalmente uma variante uniforme de um cristianismo com caraterísticas centro-africanas. Fontes setecentistas não corroboram a ideia de que o clero secular em Angola praticava amplamente uma forma consistente de um ‘catolicismo centro-africano’.
O clero não constituía um grupo homogéneo, a pluralidade dos representantes da Igreja Católica em Angola e a multiplicidade dos seus interesses refletem-se também na relação das instituições eclesiásticas com a administração secular. Assim, o segundo capítulo centra-se na relação institucional entre o clero e a administração secular portuguesa. Argumenta-se que a relação entre clero e administração secular portuguesa foi marcada por um profundo entrelaçamento institucional e uma significativa interdependência que foram constantemente negociados, às vezes de uma maneira conflitual. Um dos melhores exemplos é a Junta das Missões de Angola. A fundação desta instituição tinha como objetivo estreitar a cooperação entre as duas esferas e promover uma administração mais eficiente do trabalho missionário. A Junta tornou-se muito importante para o financiamento da missionação e a discussão de assuntos relacionados com o proselitismo na região. No entanto, o seu funcionamento foi também marcado por conflitos entre os seus membros. Também fora da Junta das Missões, as autoridades seculares e eclesiásticas entravam frequentemente em conflito. Contudo, eclesiásticos – especialmente os capuchinhos italianos, apesar de não estarem sujeitos ao padroado – eram colaboradores essenciais da administração secular portuguesa durante todo século XVIII. Isso contribuiu para estender o alcance da administração secular no interior de Angola e também em outras partes da África centro-ocidental. Portanto, a relação entre a administração secular e o clero não foi, nem completamente marcada por confrontos insuperáveis nem por uma cooperação incondicional. Dada a profunda e complexa interligação institucional e mútua dependência existentes, a relação ente ambas as esferas foi objeto de constante negociação.
A importância da Igreja Católica para o domínio português na Angola setecentista baseava-se em grande parte na função disciplinadora exercida pelo clero. O capítulo 3 analisa a forma como as estruturas eclesiásticas em Angola aplicavam a supervisão e a coerção religiosas para disciplinar a população da colónia de acordo com uma visão particular do catolicismo. Esta secção argumenta que a supervisão e a coerção religiosas em Angola eram relativamente extensas e tiveram um impacto considerável sobre a população da colónia. Ademais, este capítulo demonstra que o disciplinamento não era um fenómeno restrito ao clero regular, mas sim, muitas vezes diretamente exercido ou apoiado por clérigos seculares nascidos em Angola. Neste contexto, a ação inquisitorial era um instrumento importante. No entanto, o sistema de justiça eclesiástico e medidas mais ‘suaves’ como, por exemplo, o sacramento da confissão, tinham semelhante, senão maior, importância para o disciplinamento da população da colónia. Todos os grupos populacionais das zonas centrais de Angola foram afetados por estas medidas disciplinadoras. No entanto, particularmente a justiça eclesiástica e os clérigos que a representavam tiveram um efeito particularmente disruptivo nas comunidades centro-africanas do interior de Angola. Este efeito foi catalisado pelo fato de as medidas disciplinadoras servirem frequentemente os interesses económicos dos clérigos locais, que utilizavam o sistema de justiça eclesiástica como um instrumento para extrair recursos da população sob a sua jurisdição.
A dimensão económica das estruturas eclesiásticas na Angola setecentista é analisada no quarto capítulo da tese. Este capítulo demonstra que os interesses económicos coletivos e individuais dos eclesiásticos assumiram um papel central na presença da Igreja Católica em Angola e que o clero, através dos seus vários negócios, participou ativamente na dimensão económica da colonização portuguesa. A apropriação de terras centro-africanas permitiu que o clero – em particular as ordens religiosas – se tornasse proprietário de extensas propriedades, gerando receitas para os eclesiásticos através da produção agrícola que era largamente sustentada por trabalho escravo. No entanto, o clero utilizava o trabalho forçado de pessoas escravizadas para mais do que apenas a agricultura. Os cativos trabalhavam, por exemplo, também como artesãos, carregadores ou intérpretes, tanto em Luanda como nas estações missionárias e igrejas no interior da colónia. A escravização de africanos constituiu a base económica e logística da presença do clero em Angola. Além disso, muitos clérigos estavam também envolvidos no comércio no interior da colónia, que envolvia não só a compra e venda de seres humanos, mas também de mercadorias de vários tipos. As diferentes camadas das sociedades centro-africanas não eram passivas neste processo. Os sobas procuravam estabelecer alianças com os clérigos, mas muitas vezes, também, resistiam aos interesses económicos dos eclesiásticos. Além disso, os escravizados – mas também os dependentes livres – contestavam a sua condição de várias formas, rebelando-se contra a sua exploração pelas autoridades eclesiásticas e seculares. As atividades económicas dos eclesiásticos afetaram, assim, profundamente, o papel da Igreja Católica na Angola do século XVIII
Novel targeted triazene derivatives against metastatic melanoma
No full textTese de mestrado, Química Medicinal e Biofarmacêutica, 2023, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia.O cancro é uma doença multifatorial que afeta os seres humanos em todo o mundo com taxas de incidência crescentes ao longo dos anos. O melanoma é um tipo de cancro de pele causado pelo crescimento descontrolado de melanócitos. Em condições saudáveis, os melanócitos produzem melanina, pigmento responsável pela cor da pele e proteção dos efeitos do sol. No entanto, a exposição elevada à radiação solar ultravioleta (UV), alguns fatores genéticos como os genes responsáveis pela cor da pele, cabelo, cor dos olhos e outros podem levar a um crescimento descontrolado dos melanócitos. Neste tipo de cancro, a tirosinase, uma proteína envolvida na produção de melanina, encontra-se sobreexpressa nas células de melanoma. Este facto torna esta enzima um alvo de interesse no desenvolvimento de novos fármacos para melanoma metastático.
Embora o melanoma seja um dos cancros de pele menos comuns, é muito mais agressivo do que os outros cancros de pele uma vez que pode metastizar facilmente para os gânglios linfáticos, pulmões, fígado, cérebro e ossos.
Atualmente, o melanoma metastático é tratado através de diferentes estratégias tais como terapia molecular direcionada, quimioterapia, e terapia combinada. No entanto, os efeitos secundários e o eventual desenvolvimento de resistência levaram à procura de novas estratégias, tais como os compostos híbridos.
A hibridação molecular é uma das estratégias mais recentes e promissoras no desenvolvimento de novos compostos anticancerígenos. Os compostos híbridos são formados através da combinação de duas ou mais moléculas ou farmacóforos numa única molécula. Este tipo de compostos permite melhorar a potência e diminuir os efeitos secundários quando comparados com os seus compostos originais, testados individualmente ou em terapia combinada.
Nesta dissertação procedeu-se à síntese e estudo das moléculas híbridas 57 e 62a-e. Estes compostos híbridos são formados pela união de duas moléculas de interesse: o 4-(2-hidroxietiltio)fenol que é um agente melanocitotóxico que atua como substrato da tirosinase e os monometiltriazenos, agentes alquilantes do DNA. Os triazenos são uma classe de compostos com interesse farmacológico sendo a dacarbazina e o temozolomide fármacos usados atualmente no tratamento de melanoma metastático e glioma.
A síntese dos híbridos foi realizada por acoplamento entre o 4-(2-hidroxietiltio)fenol e os carbamatos intermédios derivados de triazenos 59. Neste trabalho, o composto 4-(2-hidroxietiltio)fenol e os carbamatos de triazenos intermédios 59 foram sintetizados satisfatoriamente e caracterizados através de RMN. A partir do mesmo processo de síntese foram obtidos dois tipos de híbridos: O híbrido 57 resultou da ligação entre o carbamato intermediário 59 e o OH alquilico do 4-(2-hidroxietiltio)fenol, enquanto os híbridos 62a-e resultaram da ligação entre os carbamatos intermediários 59 e o fenol do 4-(2-hidroxietiltio)fenol. Todos os híbridos, excepto o 62e, foram obtidos com rendimentos superiores a 50%.
A estabilidade dos híbridos 57 e 62a,d foi estudada em solução tampão fosfato salina (PBS) e em plasma humano (80% v/v) a 37°C. A reação foi monitorizada por HPLC. Nas condições de estudo em PBS, o híbrido 57 mostrou maior estabilidade do que os híbridos 62a,d com tempo de semi-vida de 4,78 dias. Os compostos 62a,d tiveram tempos de semi-vida de 42 horas e 32 horas, respetivamente.
Em plasma humano, o híbrido 57 teve um t1/2 de 6,9 horas enquanto os híbridos 62a,d tiveram um t1/2 de 8,37 minutos e 18,78 minutos respectivamente. Estes resultados indicam que o híbrido 57 é muito menos suscetível à degradação por enzimas plasmáticas do que os híbridos 62a,d. Tendo então maior probabilidade de atingir os melanócitos sem sofrer degradação. Todos os compostos foram mais estáveis em PBS do que em plasma humano.
A capacidade dos híbridos 57 e 62a,d de atuarem como substrato de tirosinase também foi avaliada. Para este ensaio usou-se 100U/mL de tirosinase de cogumelo. Os resultados mostraram que o composto 57 é um excelente substrato para tirosinase apresentando um tempo de sem-vida de 1,53 minutos. A análise por HPLC permitiu observar o aparecimento de um pico correspondente à orto-quinona confirmada por espectrometria de massa. A orto-quinona é uma molécula produzida pela hidroxilação e posterior oxidação de monofenois na presença de tirosinase.
No caso dos híbridos 62a,d não se observou diminuição significativa da concentração dos mesmos quando estiveram em contato com a tirosinase e também não foi possível observar o aparecimento da orto-quinona, assim, os híbridos 62a,d mostraram não ser substratos da enzima e confirmaram a necessidade de ter disponível o hidroxilo do grupo fenol para interagir com a tirosinase.
As propriedades moleculares de todos os híbridos foram calculadas teoricamente. Os híbridos 57 e 62a-e mostraram estar de acordo com as regras de Lipinski com os respetivos pesos moleculares inferiores a 500g/mol, log P ≤5, menos de 5 átomos doadores de ligações de hidrogénio e menos de 10 átomos aceitadores de ligações hidrogénio. Além disso, todos tiveram um log P maior do que 2 pelo qual entende-se que os híbridos estudados têm carater hidrofóbico.
A atividade biológica dos híbridos 57 e 62a,d foi avaliada em duas linhas celulares de melanoma, uma de melanoma murino (B16F10) e outra de melanoma humano (A375) e numa linha de queratinócitos normais (HaCat). O ensaio foi realizado através do método MTT que quantifica a viabilidade celular. Os compostos 62a-c mostraram ser citotóxicos para a linha B16F10 com IC50 entre 61 e 74µM, sendo mais citotóxicos que o temozolamide (usado nos ensaios como controlo positivo). Estes resultados demostram que os compostos híbridos são promissores para o tratamento do melanoma metastático.Melanoma is a type of skin cancer caused by the uncontrolled growth of melanocytes. Although it is one of the less common skin cancers, it is much more aggressive than non-melanoma and can metastasize from nearby tissues to distant major organs. Currently, metastatic melanoma is treated through different strategies such as molecular targeted therapy, chemotherapy, and combined therapy. However, the side effects and the eventual resistance to drugs developed by tumor cells have prompted the search for new strategies, such as hybrid compounds. This type of drugs is formed of two or more molecules or pharmacophores that exhibit biological activity in one single molecule. They have been shown to improve potency and decrease side effects when compared to their parent compounds individually tested or in combination therapy.
In this work we have developed and studied hybrids formed by two pharmacophores with different modes of action: a monomethyltriazenes that act as DNA alkylating and 4-(2-hydroxyethylthio)phenol, that has melanocytotoxic properties and at same time is a tyrosinase substrate, an enzyme overexpressed in melanoma cells, that allows the targeting of these hybrids to melanoma cells.
Hybrid compounds 57 and 62a-d were synthesized with a yield greater than 50%. The stability of hybrids 57 and 62a,d was studied in phosphate buffered saline (PBS) and human plasma (80%). Hybrid 57 showed greater stability than hybrids 62a,d both in PBS and in human plasma, with a t1/2 of 4.78 days in PBS and 6.9 hours in human plasma.
The ability of the hybrids to act as a tyrosinase substrate was also evaluated, showing that compound 57 is an excellent substrate for tyrosinase (t1/2 =1.53 minutes) whereas hybrids 62a,d were not substrates of the enzyme.
Hybrid compounds were also evaluated regarding their biological activity. All hybrids are cytotoxic for a murine melanoma (B16F10) and a human melanoma (A375) cell lines. Hybrid compounds 62a-c displayed antiproliferative activity, with IC50 between 61μM and 74μM against B16F10 cell line. These compounds are more cytotoxic comparing with temozolomide (IC50 >75μM) in the same cell line.Fundação para a Ciência e Tecnologia (FCT) ; Portuguese Mass
Spectrometry Network (Rede Nacional de Espectrometria de Massa – RNEM