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Gestaltung und Untersuchung funktioneller Kappen in Kombination mit polymerbasierten Ketten zur Einstellung von Friktionskräften innovativer Bracketsysteme
Get PDFInfluence of the autonomic nervous system on cardiac arrhythmogenesis
Get PDFThe autonomic nervous system (ANS) modulates our cardiorespiratory system providing physiological adaptation in times of rest, stress, or exercise. Imbalances in sympathetic and parasympathetic activities are tightly connected to the development of cardiovascular diseases. To non-invasively assess this fine-tuning between sympathetic and parasympathetic influences on cardiac function, various ECG-based biomarkers have been developed over the past decades.
However, little is known how these ECG-based biomarkers behave under certain physiological and environmental changes. Thus, with these research projects we aimed at further investigating the influence of environmental, physiological, and pathological conditions on autonomic nervous function and the ECG-based biomarker PRD. Additionally, we intended to develop a porcine model of IHF with a proarrhythmic phenotype allowing to reliably investigate arrhythmia-related remodeling processes especially on autonomic level
Diagnostik und Komorbiditäten des primären Hyperaldosteronismus
Get PDFZiel dieser Habilitationsarbeit war es, metabolische Auswirkungen des Aldosteronexzesses, insbesondere hinsichtlich des Glukosemetabolismus und des Calcium-Phosphat-Stoffwechsels, zu untersuchen. Außerdem sollten diagnostische Scores untersucht sowie die Prävalenz in der Primärversorgung charakterisiert werden
Heterogeneity analysis of low-risk HPV infection and high-risk HPV infection, HPV-positive and HPV-negative cancers
Get PDFZahlreiche Studien belegen, dass humane Papillomaviren (HPV) Krebs verursachen können. Allerdings haben nur wenige Studien die Heterogenität von HPV-infizierten oder nicht-infizierten (HPV-pos. und HPV-neg.) Krebserkrankungen untersucht. Zu-dem werden HPV-Infektionen mit niedrigem Risiko in der Regel mit gutartigen Läsio-nen in Verbindung gebracht, wobei sich nur wenige Studien mit der Heterogenität von HPV-Infektionen mit niedrigem und hohem Risiko befasst haben. Mit der Ent-wicklung von Next-Generation-Sequenzierung ist es möglich, Genome auf Einzelzel-lebene zu amplifizieren und zu sequenzieren, so dass die Heterogenität der Zellen mithilfe der Einzelzellsequenzierungstechnologie beobachtet werden kann. Auf die-ser Grundlage werden zukünftig eine genauere Diagnose und Behandlung von HPV-Patienten möglich sein.
In dieser Studie wurde versucht, dieses Problem zu lösen, indem die Einzelzellse-quenzierung mit der bulk-RNA-Sequenzierung kombiniert wurde, wobei die Einzel-zellsequenzierungsdaten Veränderungen auf zellulärer Ebene lieferten und die bulk-RNA-Sequenzierungsdaten große Stichprobengrößen mit passenden klinischen In-formationen enthielten. Die beiden wurden kombiniert, um mit Hilfe mehrerer Me-thoden wie Seurat für Zellcluster, CIBERSORT für Variationen der Immuninfiltration, WGCNA für charakteristische assoziierte Gencluster usw. zu analysieren.
Zunächst wurde die Hypothese aufgestellt, dass es eine Heterogenität zwischen HPV-pos. und HPV-neg.-Karzinomen gibt, und zwar von der Transkriptionsebene bis hin zur Immuninfiltration. Durch die Untersuchung von Gebärmutterhalskrebs, die mit Hochrisiko-HPV-Infektionen assoziiert ist, wurde bestätigt, dass CD8+ T-Zellen und B-Zellen herunterreguliert wurden, während T-Reg-Zellen, CD4+ T-Zellen und Epithelzellen in der HPV-pos.-Zervixkrebsgruppe hochreguliert waren. Die Analyse gutartiger Läsionen, die mit einer Niedrigrisiko-HPV-Infektion assoziiert sind, ergab Folgendes: Eine Niedrigrisiko-HPV-Infektion weist ähnliche genetische Veränderun-gen auf wie eine Hochrisiko-HPV-Infektion. Genetische Veränderungen, die durch eine Niedrigrisiko-HPV-Infektion verursacht werden, können auch die Prognose von Krebspatienten beeinflussen. Die Analyse von AIN3 und ASCC, CIN3 und CESC, präkanzerösen Läsionen und Tumoren, die in engem Zusammenhang mit Hochrisiko-HPV-Infektionen stehen, bestätigte auch, dass die Auswirkungen von Niedrigrisiko-HPV-Infektionen und Hochrisiko-HPV-Infektionen Ähnlichkeiten und Unterschiede aufweisen. Die Veränderungen in den Immunzellen waren bei den verschiedenen HPV-Infektionen teilweise gleich, während der Rest der Veränderungen in den Im-munzellen durch die Krankheit selbst verursacht werden kann. Die Induktion von oxidativem Stress ist bei den verschiedenen HPV-Infektionen gleich, was zu oxidati-vem Stress führt, der DNA-Schäden verursacht und das optimale Umfeld für eine maligne Transformation schafft. Schließlich wurde diese Erkenntnis durch in-vitro-Experimente bestätigt, bei denen sowohl normale als auch Krebszelllinien, die mit HPV transfiziert wurden, eine erhöhte Proliferation und eine hohe Expression von mit oxidativem Stress verbundenen Genen aufwiesen, und die hoch exprimierten Gene waren in der Lage, die Empfindlichkeit von mit oxidativem Stress assoziierten Inhibitoren zu erhöhen.
Die Bedeutung dieser Studie liegt in der Erklärung der Heterogenität zwischen HPV-pos. und HPV-neg.-Karzinomen und in der Entdeckung, dass die Gemeinsamkeit zwi-schen Niedrigrisiko-HPV-Infektionen und Hochrisiko-HPV-Infektionen im oxidativen Stress liegt. Dies könnte eine wichtige Entdeckung für eine künftige Präzisionsmedi-zin sein, damit Patienten mit HPV-assoziierten Krebserkrankungen präzise gezielte Behandlungen erhalten können.Numerous studies have established the causal relationship between Human Papil-lomavirus (HPV) and cancer development. Nevertheless, there exists a paucity of research efforts dedicated to investigating the heterogeneity observed in HPV-associated cancers, differentiating between HPV-positive (HPV-pos.) and HPV-negative (HPV-neg.) cases. Furthermore, while low-risk HPV infections have tradi-tionally been linked to benign lesions, investigations exploring the intricacies within both low-risk and high-risk HPV infections have been limited in scope. The advent of next-generation sequencing technologies, particularly single-cell sequencing, has revolutionized the field by facilitating genome amplification and sequencing at the single-cell level. This cutting-edge technology offers the unique capability to eluci-date cellular heterogeneity, presenting a promising avenue for enhancing the preci-sion of diagnostic and therapeutic approaches for HPV-infected patients, capitalizing on this newfound understanding of variability within the disease.
This study aimed to address this issue by integrating single-cell sequencing with bulk-RNA sequencing and DNA methylation sequencing. Single-cell sequencing data illuminated cellular-level alterations, while bulk-RNA sequencing and DNA methyla-tion sequencing data encompassed larger sample sizes with accompanying clinical information. The analytical toolbox included methods such as Seurat for cell cluster-ing, CIBERSORT for assessing immune infiltration variations, and WGCNA for identi-fying clusters of genes with characteristic associations.
Initially, we hypothesized that heterogeneity exists between HPV-pos. and HPV-neg. cancers, spanning from the transcriptional level to immune infiltration. In the con-text of the most well-established high-risk HPV infection-associated cancer, cervical cancer, CD8+ T cells and B cells were observed to be down-regulated, whereas T-reg cells, CD4+ T cells, and epithelial cells were up-regulated in the HPV-pos. cervical can-cer group. Subsequent analysis of benign lesions associated with low-risk HPV infec-tion revealed shared genetic alterations with high-risk HPV infection, and these ge-netic alterations impacted the prognosis of cancer patients. Furthermore, the exam-ination of AIN3 and ASCC, CIN3 and CESC, precancerous lesions, and tumors firmly linked to high-risk HPV infection reaffirmed that while low-risk HPV infection and high-risk HPV infection share similarities, differences also exist. Changes in immune cells were partially consistent across different HPV infections, while other immune cell alterations may be attributed to the disease itself. It was observed that oxida-tive stress, common to various HPV infections, induced DNA damage, creating an environment conducive to malignant transformation. This finding was further cor-roborated by in vitro experiments, where both normal and cancer cell lines trans-fected with HPV exhibited increased proliferation and upregulated expression of oxidative stress-related genes. These highly expressed genes increased sensitivity to oxidative stress-associated inhibitors.
The significance of this study lies in elucidating the heterogeneity between HPV-pos. and HPV-neg. cancers and identifying oxidative stress as a common factor in low-risk and high-risk HPV infections. Additionally, the altered sensitivity to genetic inhibi-tors resulting from HPV-induced genetic changes offers novel prospects for the treatment of HPV-pos. cancers, potentially paving the way for precision medicine approaches tailored to patients with HPV-associated cancers
Single molecule MATAC-seq reveals key determinants for DNA replication efficiency
Get PDFThe stochastic nature of origin activation results in significant variability in the way genome replication is carried out from cell to cell. The reason for the diversity in efficiency and timing of individual origins has remained an unresolved issue for a long time. Cell-to-cell variability has been demonstrated to play a crucial role in cellular plasticity and cancer in mammalian cells. Although population-based methods have provided valuable insight into biological processes, it is necessary to use single molecule techniques to uncover events that are hidden by the population average. Many biological processes, such as DNA replication, transcription, and gene expression, are closely linked to the local chromatin structure. In yeast, although DNA replication origins have conserved DNA sequences, they display remarkable differences in timing and efficiency. Some origins initiate replication earlier during S-phase or more frequently than others, resulting in a high degree of heterogeneity among the cells in a population, with no two cells having the exact same replication profile.
Our hypothesis is that the local nucleosomal structure may affect the DNA replication profile of individual origins. To explore this relationship, we have developed Methylation Accessibility of Targeted Chromatin domain Sequencing (MATAC-Seq) to determine single-molecule chromatin accessibility maps of specific genomic locations after targeted purification in their native chromatin context. Our analysis of selected early-efficient (EE) and late-inefficient (LI) replication origins in Saccharomyces cerevisiae using MATAC-Seq revealed significant cell-to-cell heterogeneity in their chromatin states. Disrupting the INO80 or ISW2 chromatin remodeling complexes led to changes at individual nucleosomal positions that correspond to changes in replication efficiency. Our results show that a chromatin state with a narrow size of accessible origin DNA in combination with well-positioned surrounding nucleosomes and an open +2 linker region was a strong predictor for efficient origin activation.
MATAC-Seq provides a single-molecule assay for chromatin accessibility that reveals the large spectrum of alternative chromatin states that coexist at a given locus, which was previously masked in population-based experiments. This provides a mechanistic basis for origin activation heterogeneity that occurs during DNA replication in eukaryotic cells. As a result, our single-molecule assay for chromatin accessibility will be ideal for defining single-molecule heterogeneity across many biological processes, such as transcription, replication, or DNA repair in vitro and ex vivo.Die stochastische Natur der Aktivierung von Replikationsursprüngen führt zu einer signifikanten Variabilität in der Art und Weise, wie die DNA Replikation von Zelle zu Zelle durchgeführt wird. Der Grund für die Diversität in Effizienz und Zeitpunkt der individuellen Aktivierung von Ursprüngen blieb lange ein ungelöstes Problem. Es wurde gezeigt, dass die Zell-zu-Zell-Variabilität eine entscheidende Rolle bei der zellulären Plastizität und Krebs in Säugetierzellen spielt. Obwohl populationsbasierte Methoden wertvolle Einblicke in biologische Prozesse geliefert haben, ist es notwendig, Einzelmolekültechniken zu verwenden, um Ereignisse aufzudecken, die durch das Durchschnittsverhalten aller Moleküle verborgen sind. Viele biologische Prozesse wie DNA-Replikation, Transkription und Genexpression sind eng mit der lokalen Chromatinstruktur verbunden. Obwohl die DNA-Replikationsursprünge in Hefe konservierte DNA-Sequenzen aufweisen, zeigen sie bemerkenswerte Unterschiede im Zeitpunkt und Effizienz der Replikation. Einige Ursprünge initiieren die Replikation früher während der S-Phase oder häufiger als andere, was zu einem hohen Grad an Heterogenität zwischen den Zellen in einer Population führt, wobei keine zwei Zellen das exakt gleiche Replikationsprofil aufweisen.
Unsere Hypothese ist, dass die lokale nukleosomale Struktur das DNA-Replikationsprofil beeinflussen kann. Um diese Beziehung zu untersuchen, haben wir Methylation Accessibility of Targeted Chromatin Domain Sequencing (MATAC-Seq) entwickelt, um Einzelmolekül-Chromatin-Zugänglichkeitskarten spezifischer genomischer Orte nach gezielter Reinigung in ihrem nativen Chromatin-Kontext zu bestimmen. Unsere Analyse ausgewählter früh-effizient (EE) und spät-ineffizient (LI) feuernde Replikationsursprünge in Saccharomyces cerevisiae mit MATAC-Seq ergab eine signifikante Zell-zu-Zell-Heterogenität in ihren Chromatinzuständen. Die genetische Deletion der INO80- oder ISW2-Chromatin-Remodeling Komplexe führte zu Veränderungen an einzelnen nukleosomalen Positionen, die mit Veränderungen der Replikationseffizienz korrespondierten. Unsere Ergebnisse zeigten, dass ein Chromatinzustand mit einem engen Fenster an zugänglicher Replikationsursprungs-DNA in Kombination mit gut positionierten umgebenden Nukleosomen und einer offenen +2-Linkerregion ein starker Prädiktor für eine effiziente Ursprungsaktivierung war.
MATAC-Seq bietet einen Einzelmolekül-Assay für die Zugänglichkeit von Chromatin, der das große Spektrum alternativer Chromatinzustände aufzeigt, die an einem bestimmten genomischen Lokus koexistieren, der zuvor in populationsbasierten Experimenten maskiert war. Dies liefert eine mechanistische Grundlage für die Heterogenität der Ursprungsaktivierung, die während der DNA-Replikation in eukaryotischen Zellen auftritt. Infolgedessen ist unser Einzelmolekül-Assay
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für Chromatin-Zugänglichkeit ideal für die Definition der Einzelmolekül-Heterogenität über viele biologische Prozesse hinweg, wie z. B. Transkription, Replikation oder DNA-Reparatur in vitro und ex vivo
Usability and performance studies of an Augmented Reality Laparoscopic System for Minimal Invasive Surgery
Get PDFData analysis for genomics, transcriptomics and proteomics
Get PDFGenomics, transcriptomics, and proteomics are fundamental blocks that shaped modern biology. High throughput and large-scale techniques, such as next-generation sequencing (NGS) and mass spectrometry (MS), have been widely used in the life sciences. Due to the complexity of these data, the analysis needs to be done by sophisticated bioinfor-matic methods. During my doctorate research, I developed new computational methods and applied new strategies to advance the research in genomics, transcriptomics, and proteomics.
NGS has brought tremendous and numerous changes to genomic research by providing higher sensitivity, sequencing depth, and throughput compared with traditional sequenc-ing methods, such as Sanger sequencing, qPCR, and microarrays. Benefiting from the advantages of NGS technology, RNA-seq has been widely used for the qualitative and quantitative analysis of genome wide changes in gene expression. Chromatin immuno-precipitation sequencing (ChIP-seq) as another popular application of NGS provides an efficient way to analyze the interaction between proteins and DNA. During my doctoral studies, I used these techniques to uncover the mechanisms behind the hybrid incompat-ibility between Drosophila melanogaster and D.simulans.
The loss of HMR in D.melanogaster leads to mitotic defects, increased transcription of transposable elements, and deregulated heterochromatic genes. Through the genome-wide analysis of HMR’s localization by ChIP-seq, I found that genomic insulator sites bound by HMR can be grouped into two clusters. One set is composed of gypsy insula-tors, whereas the other is bordered by HP1a-bound areas of active genes. In Hmr mu-tant flies, the transcription of genes belonging to the latter group is severely disrupted in larval tissue and ovaries. These findings showed a novel connection between HMR and insulator proteins, indicating a possible role for genome organization in species devel-opment.
Beyond the study of particular genes, and RNA transcripts, I also dedicated my work towards improving proteomic research by accurately predicting fragmentation patterns of peptides in tandem mass spectrometry (MS) with deep-learning.
MS is an important and powerful technology for proteomic research. In recent years, with the development of both theoretical and industrial technology and methods, the research scope of proteome has improved at an unprecedented speed. SWATH-MS is a mass spectrometric technique that combines the advantages of targeted data analysis and combines it with the speed of time-of-flight (ToF) mass spectrometers to improve peptide quantitation and identification in a data-independent acquisition (DIA) mode. SWATH-MS can analyze proteomes on a much larger scale than traditional methods such as data-dependent acquisition (DDA), parallel reaction monitoring (PRM), or se-lected reaction monitoring (SRM) due to its increased reproducibility and accuracy. Moreover, SWATH-MS shows a significant increase in the detection rates of peptides and proteins along with higher accurate quantifications.
However, mass spectra data generated by SWATH-MS showed a higher complexity compared to the traditional DDA mass spectrometry method. Therefore, more accurate data analysis strategies were required to address this complexity. At the beginning of my doctorate, SWATH-MS relied entirely on fragment libraries generated by DDA ex-periments, which greatly limited the number of detectible and identifiable peptides. Hence, the extension of the search space is crucial to improve both identification and quantitation on a proteome-wide scale, especially for SWATH-MS analysis.
With the development of new computational approaches to complex problems, more and more biological questions were addressed successfully. In this work, we applied such advanced methods to build a prediction framework that is composed of several tools: dpMS for mass spectra prediction, dpRT for retention time prediction, and dpMC for missed tryptic cleavages prediction, along with other new strategies to improve the ef-fective search space for SWATH-MS in high quality. With the in-silico library, we can identify proteins and peptides that exceed the experimental library limitation. We demonstrated the reproducibility and efficiency of dpSWATH across different organ-isms from D. melanogaster and H. sapiens on a Q-TOF instrument. With different ex-perimental conditions, dpSWATH can build highly reliable theoretical libraries for SWATH-MS analysis. Consequently, the new searching space has improved both sensi-tivity and specificity for SWATH-MS analysis at a higher level.
Within this thesis I summarize three publications I (co)authored: one of which is on the analysis of next generation sequencing, and the other two are on the work of pre-dictions for mass spectrometry, which are listed above.Genomik, Transkriptomik und Proteomik sind grundlegende Bausteine, die die moderne Biologie geprägt haben. Hochdurchsatz- und groß angelegte Techniken wie die Hoch-Durchsatz Sequenzierung (NGS) und die Massenspektrometrie (MS) werden in den Biowissenschaften in großem Umfang eingesetzt. Aufgrund der Komplexität dieser Daten muss die Analyse mit ausgefeilten bioinformatischen Methoden durchgeführt werden. Während meiner Doktorarbeit habe ich neue Methoden entwickelt und neue Strategien angewandt, um die Forschung in den Bereichen Genomik, Transkriptomik und Proteomik voranzutreiben.
NGS hat die Genomforschung in vielerlei Hinsicht verändert, da es im Vergleich zu herkömmlichen Sequenzierungsmethoden wie Sanger-Sequenzierung, qPCR und Microarrays eine höhere Empfindlichkeit, Sequenzierungstiefe und einen höheren Durchsatz bietet. RNA-seq profitiert von den Vorteilen der NGS-Technologie und wurde in großem Umfang für die qualitative und quantitative Analyse genomweiter Veränderungen der Genexpression eingesetzt. Die Chromatin-Immunpräzipitations-Sequenzierung (ChIP-seq), eine weitere Anwendung von NGS, bietet eine effiziente Möglichkeit zur Analyse der Interaktion zwischen Proteinen und DNA. Während meines Promotionsstudiums habe ich diese Techniken eingesetzt, um die Mechanismen hinter der Hybridinkompatibilität zwischen Drosophila melanogaster und Drosophila simulans aufzudecken.
Der Verlust von HMR in D. melanogaster führt zu mitotischen Defekten, erhöhter Transkription von transposablen Elementen und deregulierten heterochromatischen Genen. Durch die genomweite Analyse der HMR-Lokalisierung mittels ChIP-seq habe ich herausgefunden, dass genomische Isolatorstellen, die von HMR gebunden werden, in zwei Gruppen unterteilt werden können. Die eine Gruppe besteht aus Gypsy-Insulatoren, während die andere von HP1a-gebundenen Bereichen aktiver Gene begrenzt wird. Bei Hmr-mutierten Fliegen ist die Transkription von Genen, die zur letzteren Gruppe gehören, im Larvengewebe und in den Eierstöcken stark gestört. Diese Ergebnisse zeigen eine neuartige Verbindung zwischen HMR und Isolatorproteinen, was auf eine mögliche Rolle der Genomorganisation bei der Entwicklung von Arten hinweist.
Neben der Untersuchung bestimmter Gene und RNA-Transkripte widmete ich meine Arbeit auch der Verbesserung der Proteomforschung durch die genaue Vorhersage von Fragmentierungsmustern von Peptiden in der Tandem-Massenspektrometrie (MS) mit Hilfe von Deep-learning.
Die MS ist eine wichtige und leistungsfähige Technologie in der Proteomforschung. In den letzten Jahren hat sich der Umfang der Proteomforschung durch die Entwicklung sowohl theoretischer als auch experimenteller Technologien und Methoden dramatisch verbessert. SWATH-MS ist eine massenspektrometrische Methode, die die Vorteile der gezielten Untersuchung von individuellen Analyten mit der Geschwindigkeit von Flugzeit-Massenspektrometern kombiniert, um die Quantifizierung und Identifizierung von Peptiden in einer datenunabhängigen Messung (DIA) zu verbessern. SWATH-MS kann Proteome in einem viel größeren Umfang analysieren als herkömmliche Methoden wie die datenabhängige Messung (DDA), die parallele Messung von Fragmentübergängen (PRM) oder die Messung ausgewählter Fragmente (SRM), da es eine höhere Reproduzierbarkeit und Genauigkeit bietet. Darüber hinaus zeigt SWATH-MS eine signifikante Steigerung der Detektionsraten von Peptiden und Proteinen zusammen mit einer höheren Quantifizierungsgenauigkeit.
Die mit SWATH-MS erzeugten Massenspektren sind jedoch komplexer als bei der herkömmlichen DDA-Massenspektrometrie. Daher sind genauere Datenanalysestrategien erforderlich, um diese Komplexität zu bewältigen. Zu Beginn meiner Promotion stützte sich SWATH-MS ausschließlich auf Fragmentbibliotheken, die aus DDA-Experimenten stammten, was die Zahl der nachweisbaren und identifizierbaren Peptide stark einschränkte. Durch die von mir entwickelte Methode konnte ich den Suchraum deutlich erweitern, um sowohl die Identifizierung als auch die Quantifizierung auf proteomweiter Ebene zu verbessern.
Mit der Entwicklung neuer computergestützter Ansätze für komplexe Probleme konnten immer mehr biologische Fragen erfolgreich beantwortet werden. Die von mir entwickelte bioinformatische Methode besteht aus mehreren Komponenten: dpMS für die Vorhersage von Fragmentspektren, dpRT für die Vorhersage von Retentionszeiten und dpMC für die Vorhersage tryptischer Spaltungen, um den effektiven Suchraums für SWATH-MS zu erweitern. Mit der so (in-silico) generierten Bibliothek von Fragmentspektren konnte ich deutlich mehr Proteine und Peptide identifizieren. Ich konnte die Reproduzierbarkeit und Effizienz von dpSWATH durch Messung von Proteomen aus verschiedenen Organismen auf einem Q-TOF-Instrument nachgeweisen. Unter verschiedenen Versuchsbedingungen kann dpSWATH sehr zuverlässige theoretische Bibliotheken für die SWATH-MS-Analyse erstellen und damit die Sensitivität als auch die Spezifität der SWATH-MS-Analyse verbessern.
In dieser Arbeit fasse ich drei Publikationen zusammen, die ich (mit-)verfasst habe: eine davon befasst sich mit der Analyse von Next Generation Sequencing, die beiden anderen mit der Arbeit an Vorhersagen für die Massenspektrometrie, die oben aufgeführt sind
Evaluation der Ausbildung in der Internistischen Notaufnahme, Campus Innenstadt im Rahmen des Praktischen Jahres (PJ)
Get PDFSchwerpunkt dieser Dissertation war die Evaluation der notfallmedizinischen Ausbildung der PJ-Studierenden in der internistischen Notaufnahme, Campus Innenstadt der Ludwig-Maximilians-Universität (LMU) München anhand wichtiger klinischer Fertigkeiten wie der Triage. Für die prospektive monozentrische Längsschnittstudie wurden 41 Fragebögen ausgewertet. Es wurden Arbeitsmaterialien wie eine Pocket Card mit der modifizierten Darstellung zum dort eingesetzten ESI-Triage-Systems entwickelt. Ziel der Dissertation war einerseits die studentische Ausbildung in der internistischen Notaufnahme zu strukturieren, andererseits Probleme dieser zu identifizieren, um nachhaltige Verbesserungen implementieren zu können. Dabei zeigte sich unter anderem ein signifikant größerer subjektiver Lernfortschritt in einer der Schlüsselqualifiquationen, der Triage, in Abhängigkeit einer längeren Einsatzdauer von zwei Wochen. Die Implementierung einer mindestens dreiwöchigen notfallmedizinischen Einsatzdauer im PJ-Curriculum der LMU München wäre anzustreben. Um die Triagefähigkeiten zukünftig zu vertiefen, wurde ein fallbasiertes Online-Seminar entwickelt, das das modifizierte ESI-Triage-System der Pocket Card nutzt