ARCA (Fiocruz - Fundação Oswaldo Cruz)

Oswaldo Cruz Foundation

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    Estudo da interação entre Trypanosoma caninum e células macrofágicas: aspectos morfológicos, biológicos e ultraestruturais

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    Trypanosoma caninum é um tripanosomatídeo até então isolado apenas da cultura de pele íntegra de cães. No cultivo axênico apresenta as formas evolutivas: epimastigota aflagelar e flagelar, tripomastigota e esferomastigota. Inúmeros aspectos sobre T. caninum ainda precisam ser investigados, dentre eles em relação ao potencial infectivo das formas evolutivas. Nesse contexto, o objetivo deste estudo foi avaliar aspectos morfológicos, biológicos e utraestruturais da interação de T. caninum com células macrofágicas in vitro. Inicialmente, foi realizada curva de crescimento, análise e quantificação das formas evolutivas de T. caninum em meio axênico e em cocultivo com a linhagem celular DH82. Em seguida, foi realizada análise ultraestrutural das formas de T. caninum cultivadas em meio axênico e cocultivo com linhagem celular DH82. Com intenção de conhecer o potencial infectivo da forma epimastigota aflagelar foi realizado estudo de interação T. caninum com a linhagem de macrófago canino DH82 e macrófago peritoneal (M\0278) de camundongos BALB/c, em duas condições: em meio DMEM F12 suplementado com SFB e a outra com meio suplementado com BSA. Toda cinética ocorreu em 7 tempos: 15, 30 e 45 minutos e 2, 6 ,24 e 48 horas. A análise da interação foi realizada por microscopia óptica de campo claro (MCC), microscopia eletrônica de varredura (MEV) e de transmissão (MET). Para análise quantitativa e estatística foram contabilizados total de células infectadas, com parasitos aderidos e parasitos interiorizados por células infectadas. A curva de crescimento de T. caninum em meio axênico e em cocultivo apresentaram o mesmo perfil, porém no meio axênico foi observada no pico da fase exponencial quase quatro vezes mais parasitos que no cocultivo. Diferente do cultivo axênico, no qual foi observada apenas as formas epimastigotas, durante o cocultivo com a linhagem celular DH82 foi observada diferenciação para forma tripomastigota e esferomastigota. A análise ultraestrutural demonstrou que T. caninum possui estruturas descritas para as espécies de tripanosomatídeos, com destaque para inúmeros corpúsculos lipídicos ao longo do corpo. Em relação a interação T. caninum-macrófagos foram obtidos resultados inéditos: T. caninum é capaz de infectar células, a forma epimastigota aflagelar é infectiva para macrófagos e foi verificada a existência de formas amastigotas de T. caninum. Já no tempo de 15 minutos, a forma epimastigota aflagelar de T. caninum adere e entra nas células, rapidamente, modifica-se para a forma amastigota dentro do vacúolo parasitóforo. Dentro deste vacúolo ocorre divisão de amastigotas. Algumas amastigotas são digeridas pelas células e outras viáveis são liberadas, como observado por MET nos tempos de 45 minutos em interação com M\0278 e no tempo de 6 horas na interação com a linhagem DH82. No meio extracelular, em algumas amastigotas ocorre mudança para epimastigota aflagelar e outras interagem com a célula para reinfecção. Foi observada diferença significativa em relação a infecção entre as duas células e em relação a células nas quais ocorriam adesão e infecção simultaneamente na condição com SFB. Esta dissertação apresenta resultados inéditos sobre o conhecimento dos eventos ocorridos durante a interação T. caninum-células que são úteis no entendimento sobre aspectos biológicos e da relação parasito-hospedeiro.Trypanosoma caninum is a trypanosomatid hitherto isolated only from the culture of intact dog skin. In axenic cultivation it presents the evolutionary forms: aflagellar and flagellar epimastigote, trypomastigote and spheromastigote. Several aspects about T. caninum still need to be investigated, among them in relation to the infectious potential of evolutionary forms. In this context, the objective of this study was to evaluate morphological, biological and ultrastructural aspects of the interaction of T. caninum with macrophage cells in vitro. Initially, a growth curve, analysis and quantification of the evolutionary forms of T. caninum were performed in axenic medium and in co-cultivation with the cell line DH82. Then, an ultrastructural analysis of the forms of T. caninum cultivated in axenic and co-cultured media with cell line DH82 was performed. With the intention of knowing the infectious potential of the aflagellar epimastigote form, a T. caninum interaction study was performed with the canine macrophage DH82 and peritoneal macrophage (M\0278) strain of BALB / c mice, under two conditions: in DMEM F12 medium supplemented with FBS and the other with medium supplemented with BSA. All kinetics occurred in 7 times: 15, 30 and 45 minutes and 2, 6, 24 and 48 hours. The interaction analysis was carried out by light field optical microscopy, scanning electron microscopy (SEM) and transmission (TEM). For quantitative and statistical analysis, total infected cells were counted, with adherent parasites and parasites internalized by infected cells. The growth curve of T. caninum in axenic and co-cultured environments showed the same profile, but in the axenic environment, at the peak of the exponential phase, almost four times more parasites were observed than in co-cultivation. Unlike axenic culture, in which only epimastigote forms were observed, during co-cultivation with the DH82 cell line, differentiation into trypomastigote and spheromastigote forms was observed. The ultrastructural analysis showed that T. caninum has structures described for the trypanosomatid species, with emphasis on numerous lipid corpuscles throughout the body. Regarding the T. caninum-macrophage interaction, unprecedented results were obtained: T. caninum is capable of infecting cells, the aflagellar epimastigote form is infectious for macrophages and the existence of amastigote forms of T. caninum was verified. Within 15 minutes, the aflagellar epimastigote form of T. caninum adheres and enters the cells, quickly changes to the amastigote form within the parasitophore vacuole. Within this vacuole there is a division of amastigotes. Some amastigotes are digested by cells and others viable are released, as observed by TEM in 45 minutes in interaction with M\0278 and in 6 hours in interaction with the DH82 strain. In the extracellular environment, in some amastigotes there is a change to aflagellar epimastigote and others interact with the cell for reinfection. A significant difference was observed in relation to infection between the two cells and in relation to cells in which adhesion and infection occurred simultaneously in the condition with FBS. This dissertation presents unprecedented results on the knowledge of the events that occurred during T. caninumcell interaction that are useful in understanding biological aspects and the parasite-host relationship

    Cerebrospinal fluid PCR: A new approach for the diagnosis of CNS sporotrichosis

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    Cases of meningoencephalitis have increased in the zoonotic hyperendemia of sporotrichosis in the state of Rio de Janeiro, Brazil. The gold standard for the diagnosis of sporotrichosis is the isolation of Sporothrix spp. from clinical specimens, not always possible from the cerebrospinal fluid (CSF) of these patients, since fungus recovery in this specimen is difficult in most cases. This limitation led us to pursue a new approach on central nervous system (CNS) sporotrichosis diagnosis based on existing molecular methodologies for the detection of Sporothrix spp. in skin samples. Kano and colleagues (2003) designed species-specific primers for polymerase chain reaction (PCR) based on Sporothrix schenckii sensu lato chitin synthase 1 (CHS1) gene sequence and applied it in skin biopsy paraffin block. Hu and colleagues (2003) used a nested PCR in human clinical samples and samples from infected mice, with the 18S rRNA gene sequence as target. The assay was successfully used to detect S. schenckii DNA from strains from different areas of the world. However, Mendoza and colleagues compared the previously described nested PCR with conventional diagnostic methods, and the molecular methodology presented lower efficacy. Liu and colleagues, using the primer pair S2-R2 targeting the CHS1 gene in the PCR of biopsy tissue, verified positive results in 25 out of 30 cases (83.3%). The nested PCR targeting the partial sequence of the 18S rRNA gene was the best choice in terms of sensitivity due to a low fungal burden in CSF

    Situação epidemiológica e controle da esquistossomose em Pernambuco: estudo descritivo, 2010-2016

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    Article derived from the final course assignment entitled ‘Characterization of the epidemiological situation of schistosomiasis in the State of Pernambuco, 2010-2016’, submitted by Maria Isabelle Barbosa da Silva Brito to the Public Health Multiprofessional Residency Postgraduate Program, Aggeu Magalhães Institute, Oswaldo Cruz Institute Foundation/Pernambuco, on April 30th 2019.Objective: to describe schistosomiasis control actions and its epidemiological situation in Pernambuco, Brazil, 2010-2016. Methods: this was a descriptive study using data from the Schistosomiasis Surveillance and Control Program Information System for 116 municipalities, including indicators related to control actions (population surveyed, tests performed, treatment coverage) and epidemiological actions (positivity, parasite load, other helminthiases). Results: Health Regions II, III, IV, V and XII, which are traditionally endemic, registered higher average percentages for control actions (population surveyed [6.5%, 6.0%, 2.0%, 12.0%, and 13.0%], tests performed [75.0%, 75.5%, 74.0%, 74.0%, and 68.5%], and treatment coverage [71.0%, 82.5%, 82.0%, 91.0%, and 73.0%], respectively), and higher average percentages for epidemiological variables (positivity [3.5%, 8.0%, 1.0%, 2.0%, and 6.5%], high parasite load [0.1%, 0.7%, 0.02%, 0.03%, and 0.5%], and other helminthiases [4.0%, 11.0%, 4.0%, 6.0%, and 8.0%], respectively). Conclusion: control actions need to be expanded in traditionally endemic regions

    Rede de informações sobre a exposição ao SARS-CoV-2 em trabalhadores no Brasil: informe 2

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    A Rede de Informação sobre a Exposição ao Agente SARS-Cov-2 no Trabalho lança o informe que contém explicações para contribuir com a produção e a disseminação de informações a respeito do enfrentamento da pandemia de Covid-19 em trabalhadores e trabalhadoras. O grupo é formado por profissionais do Centro de Estudos do Trabalhador e Saúde e Ecologia Humana (Cesteh), Diesat, Fiocruz Brasília, Universidade Federal da Paraíba e diversos profissionais da área de saúde do trabalhador

    Morphological Characterization of the Antennal Sensilla of the Afrotropical Sand Fly, Phlebotomus duboscqi (Diptera: Psychodidae).

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    We investigated by scanning electron microscopy the morphology, distribution, and abundance of antennal sensilla of females Phlebotomus duboscqi sand fly, an important vector of zoonotic cutaneous leishmaniasis at Afrotropical region. Thirteen well-differentiated sensilla were identified, among six types of cuticular sensilla. The probable function of these sensillary types is discussed in relation to their external structure and distribution. Five sensillary types were classified as olfactory sensilla, as they have specific morphological characters of sensilla with this function. Number and distribution of sensilla significantly differed between antennal segments. The results of the present work, besides corroborating in the expansion of the morphological and ultrastructural knowledge of P. duboscqi, can foment future electrophysiological studies for the development of volatile semiochemicals, to be used as attractants in traps for monitoring and selective vector control of this sand fly

    Utilização da Espectroscopia no Infravermelho Próximo (NIRS) na detecção de arbovírus e bactéria Wolbachia pipientis Hertig,(1936) em mosquitos Aedes (Stegomyia) aegypti (Linnaeus,1762)

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    A disseminação global acelerada de arbovírus como o dengue (DENV), Zika (ZIKV) e o chikungunya (CHIKV) destaca a necessidade de ações proativas na vigilância de mosquitos potencialmente infectados. No entanto, um grande desafio durante surtos de arbovírus tem sido a falta de soluções rápidas como testes diagnósticos para detecção imediata de patógenos em mosquitos. Mostramos pela primeira vez que a espectroscopia no infravermelho próximo (NIRS) é uma ferramenta rápida e econômica que pode ser usada para detectar ZIKV de forma não invasiva em cabeças e tórax de mosquitos Aedes aegypti intactos com acurácias de 94,2 a 99,3% em relação a reação em cadeia da polimerase de transcrição reversa quantitativa (RT-qPCR). Seu baixo custo decorre da inexistência de materiais de consumo para o diagnóstico, mas envolve a coleta de um espectro na faixa do infravermelho após lançar um feixe de luz sob o inseto. Estimamos que o NIRS é 18 vezes mais rápido e 110 vezes mais barato do que RT-qPCR quando analisamos um primeiro estudo com mosquitos frescos. Avaliamos a precisão, sensibilidade e especificidade da NIRS na estimativa do tempo pós-morte, infecção por ZIKV, CHIKV e Wolbachia em fêmeas de Ae. aegypti aprisionadas por um período de 7 dias em armadilha BG sentinela, em ambiente de laboratório. Independentemente do tipo de infecção, o tempo pós-morte dos mosquitos foi previsto com precisão em quatro categorias (fresco, com 1 dia, 2-4 dias e 5-7 dias). Precisões gerais de 93,2, 97 e 90,3% foram observadas quando NIRS foi usado para detectar ZIKV, CHIKV e Wolbachia em fêmeas de Ae. aegypti a até 7 dias pós morte. A NIRS poderá ser expandida para melhorar os sistemas de vigilância de arbovírus identificando pontos de acesso de arbovírus para orientar a priorização espacial do controle de vetores.The accelerated global spread of arboviruses such as dengue (DENV), Zika (ZIKV) and chikungunya (CHIKV) highlights the need for proactive actions in the surveillance of potentially infected mosquitoes. However, a major challenge during arbovirus outbreaks has been a lack of quick solutions like diagnostic tests for detecting pathogens in mosquitoes. We have shown for the first time that near-infrared spectroscopy (NIRS) is a fast and economical tool that can be used to non-invasively detect ZIKV in the heads and thorax of intact Aedes aegypti mosquitoes with accuracy from 94.2 to 99.3% regarding the quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (RT-qPCR). Its low cost stems from the lack of consumables for the diagnosis, but it involves the collection of a spectrum in the infrared range after launching a beam of light under the insect. We estimate that NIRS is 18 times faster and 110 times cheaper than RT-qPCR when we analyzed a first study with mosquito frescoes. We evaluated the accuracy, sensitivity and specificity of the NIRS in the estimation of the postmortem time, infection by ZIKV, CHIKV and Wolbachia in second of Ae. aegypti trapped for a period of 7 days in a BG sentinel trap, in a laboratory environment. Regardless of the type of infection, the mosquitoes' postmortem time was accurately predicted in four categories (fresh, 1 day, 2-4 days and 5-7 days). General precision of 93.2, 97 and 90.3% was observed when NIRS was used to detect ZIKV, CHIKV and Wolbachia in second of Ae. aegypti dead up to 7 days after death. NIRS can be expanded to improve arbovirus surveillance systems by identifying arbovirus access points to guide spatial prioritization of vector control

    A importância dos Repositórios Institucionais em períodos de pandemia: a inserção da produção científica sobre a COVID-19 no Arca – RI da Fiocruz

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    Trabalho apresentado na sessão virtual de Pecha Kucha IV da 11ª ConfOA no dia 07/10/2020.Este vídeo destaca o papel dos Repositórios Institucionais, que tem como função reunir em um único sistema toda a produção científica de uma Instituição. Dentro de um contexto epidemiológico, onde o surgimento de uma pandemia demanda que o conhecimento científico esteja disponível e acessível o mais rápido possível, torna-se fundamental a inserção dos documentos relativos às doenças causadas por estes agentes no repositório, em particular aqueles referentes às doenças causadoras de pandemias cujo conhecimento precisa ser disseminado a toda a população, além da valorização e preservação da memória institucional. Ratifica-se ainda a necessidade do fortalecimento dos Repositórios Institucionais como Fonte de Informação das Instituições de Ensino e Pesquisa no Brasil e no Mundo, destacando o seu valioso trabalho de gestão do conhecimento científico, principalmente em momentos de crise

    Educação profissional dos manipuladores de alimentos: um estudo de caso técnico da área de gastronomia do município do Rio de Janeiro

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    Observamos no Brasil uma crescente oferta de cursos de gastronomia, de vários níveis de formação, público e privado, concursos de chefs de gastronomia, profissionais e amadores, além de programas televisivos, em canais abertos e a cabo, que popularizam e “glamourizam” essa profissão. Ministrar aula para essa categoria profissional possibilitou-me um conhecimento empírico acerca dos desafios relacionados às práticas de trabalho do manipulador de alimentos e aos riscos à saúde do consumidor no que se refere ao desenvolvimento de processos de saúde/doença. A ideia de desenvolver esse estudo como tema de uma pesquisa no nível de mestrado teve inicio numa das aulas de legislação sanitária e manipulação de alimentos que eu ministrava no Curso Técnico em Cozinha no ano de 2012. Sendo assim, o objetivo central desse estudo consistiu na investigação das mediações que orientam a abordagem pedagógica e a assimilação dos conteúdos de boas práticas no curso técnico em cozinha do Centro Vocacional Tecnológico da Cidade de Deus/ Faetec do município do Rio de Janeiro. Trata-se de um estudo de caso de abordagem qualitativa, de natureza aplicada, com objetivo exploratório e desenvolvido a partir da perspectiva teórica e metodológica do materialismo histórico dialético. Buscamos apresentar elementos da realidade material da formação profissional dos manipuladores de alimentos da área da gastronomia e as transformações históricas a partir da dialética. Para isso, trouxemos a história que fundamentou as categorias do referencial teórico do estudo (capítulo 1), o estado da arte das modalidades de formação de manipuladores de alimentos na área da gastronomia e a relação dessa formação com a saúde pública (capítulo 2), o estudo empírico da formação profissional técnica em cozinha (capítulo 3) e a discussão da realidade material da formação profissional (capítulo 4). Em vista dos resultados obtidos nesse estudo as mediações que orientam a abordagem pedagógica e a assimilação dos conteúdos de boas práticas estão pautados em muitos aspectos e, igualmente, podem fragilizar as técnicas que objetivam a qualidade higiênico-sanitária dos alimentos e da formação da consciência sanitária do manipulador de alimentos, dentre eles estão: a divisão da carga horária entre os componentes curriculares no curso de formação, o modelo das competências na formação, baixa participação dos professores em cursos de atualizações sobre as boas práticas, a falta de clareza da relação entre a prática dos manipuladores de alimentos com a saúde pública e as influências dos programas televisivos de chef na formação do manipulador de alimentos.In Brazil we observed a growing offer of gastronomy courses, of various levels of training, public and private, competitions of gastronomy chefs, professionals and amateurs, as well as television programs, in open and cable channels, which popularize and "glamorize" this profession. Teaching for this professional category has enabled me to have an empirical knowledge about the challenges related to the work practices of the food handler and the risks to consumer health with regard to the development of health/disease processes. The idea of developing this study as the subject of a research at the master's level began in one of the classes of sanitary legislation and food handling that I taught in the Technical Course in Kitchen in 2012. Thus, the central objective of this study was to investigate the mediations that guide the pedagogical approach and the assimilation of the contents of good practices in the technical course in kitcheng of the Technological Vocational Center of the City of God / Faetec of the municipality of Rio de Janeiro. This is a case study of a qualitative approach, of an applied nature, with exploratory objective and developed from the theoretical and methodological perspective of dialectical historical materialism. We seek to present elements of the material reality of the professional training of food handlers in the area of gastronomy and the historical transformations from dialectics. To this end, we brought the story that founded the categories of the theoretical framework of the study (chapter 1), the state of the art of the modalities of formation of food handlers in the area of gastronomy and the relationship of this formation with public health (chapter 2), the empirical study of technical professional training in cooking (chapter 3) and the discussion of the material reality of professional training (chapter 4). In view of the results obtained in this study, the mediations that guide the pedagogical approach and the assimilation of the contents of good practices are based on many aspects that can also weaken the techniques that aim at the hygienic-sanitary quality of food and the formation of the health consciousness of the food handler, among them are: the division of the workload between the curricular components in the training course, the model of skills in training, low participation of teachers in courses of updates on good practices, the lack of clarity of the relationship between the practice of food handlers with public health and the influences of television programs of chef in the training of the food handler

    Fake news ponen en riesgo la vida: la controversia de la campaña de vacunación contra la fiebre amarilla en Brasil

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    Adriana Teixeira da Pontifícia Universidade Católica de São Paulo teve seu artigo submetido e aprovado na edição da RECIIS - Dossiê Fake News e Saúde v. 14 n.1 (2020)Rogério da Costa Santos da Pontifícia Universidade Católica de São Paulo teve seu artigo submetido e aprovado na edição da RECIIS - Dossiê Fake News e Saúde v. 14 n.1 (2020)Este artigo faz a leitura das notícias falsas que circulam conteúdo sobre saúde pública em redes digitais e aplicativos de troca de mensagens. Para enumerar os argumentos utilizados pelos divulgadores de fake news na disputa pela enunciação da verdade, no campo do discurso, os autores escolheram a campanha de vacinação contra a febre amarela, lançada em um surto da doença no Brasil, no final de 2016. Selecionamos os textos de posts e áudios que se multiplicaram no WhatsApp, especificamente no ano de 2018, para a análise ancorada nas teses sobre produção de verdade e poder de Michel Foucault e de Nikolas Rose. Iniciamos, assim, uma reflexão sobre a ação das fake news em defesa da vida e que, ao mesmo tempo, colocam a vida em risco. A Organização Mundial da Saúde já aponta as fake news como uma das responsáveis pela baixa nos níveis internacionais de imunização.This article analyses the fake news that spread contents of public health using digital networks and crossplatform messaging applications. To list the arguments used by those people whom spread fake news to dispute the utterance of the truth, in the discourse field, the authors have chosen the yellow fever vaccination campaign, launched in the outbreak of the disease in Brazil, in late 2016. We selected the texts of posts and audios that multiplied via WhatsApp, specifically in 2018, for analysis based on the theses on the production of truth and power by Michel Foucault and Nikolas Rose. Thus, we started a reflection on the action of fake news in defense of life while themselves put many lives at risk. The World Health Organization already points out fake news as one of the factors responsible for the drop in international levels of immunization.Este artículo hace un análisis de las fake news que difunden contenido sobre salud pública por medio de redes digitales y aplicaciones de mensajería. Para enumerar los argumentos utilizados por las personas que hacen la divulgación de las fake news en la disputa por la expresión de la verdad, en el campo del discurso, los autores eligieron la campaña de vacunación contra la fiebre amarilla, lanzada en el brote de la enfermedad en Brasil, a fines de 2016. Seleccionamos los textos de publicaciones y audios que se multiplicaron en el WhatsApp, especialmente en 2018, para el análisis basado en las tesis sobre la producción de verdad y poder de Michel Foucault y de Nikolas Rose. Comenzamos así a reflexionar sobre la acción de las fake news en defensa de la vida y que al mismo tiempo la ponen en riesgo. La Organización Mundial de la Salud ya señala las fake news como uno de los factores responsables de la bajada de los niveles internacionales de inmunización

    Expression of NLRP3 inflammasome in leprosy indicates immune evasion of Mycobacterium leprae

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    BACKGROUND: Leprosy is an infectious-contagious disease caused by Mycobacterium leprae that remain endemic in 105 countries. This neglected disease has a wide range of clinical and histopathological manifestations that are related to the host inflammatory and immune responses. More recently, the inflammasome has assumed a relevant role in the inflammatory response against microbiological agents. However, the involvement of inflammasome in leprosy remains poorly understood. OBJECTIVES: The aim is to associate biomarkers of inflammasome with the different immunopathological forms of leprosy. METHODS: We performed an observational, cross-sectional, and comparative study of the immunophenotypic expression of inflammasome-associated proteins in immunopathological forms of leprosy of 99 skin lesion samples by immunohistochemistry. The intensity and percentage of NLRP3, Caspase-1, Caspases-4/5, interleukin-1β and interleukin-18 immunoreactivities in the inflammatory infiltrate of skin biopsies were evaluated. FINDINGS: Strong expression of NLRP3 and inflammatory Caspases-4/5 were observed in lepromatous leprosy (lepromatous pole). In addition, were observed low expression of caspase-1, interleukin-1β, and interleukin-18 in tuberculoid and lepromatous leprosy. The interpolar or borderline form showed immunophenotype predominantly similar to the lepromatous pole. MAIN CONCLUSIONS: Our results demonstrate that the NLRP3 inflammasome is inactive in leprosy, suggestin

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