ReDivia - Repositorio Digital de l'Instit Valencià d'Investigacions Agràries
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    In vitro evaluation of sperm quality

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    This paper highlights selected laboratory analyses that are currently used to evaluate sperm, and describes why results from these assays do not consistently correlate with sperm fertility. Reasons for the disconnect between the two are due in part to the definition and reliability of the fertility data collected, to the complexity of the spermatozoon itself, to imprecision of some measurements, and. to uncontrollable factors not associated to either the laboratory analysis or the sperm sample. Each sperm must possess a number of different attributes to fertilize an oocyte, and individual laboratory assays measure only one or a few of these attributes. Current and past data, correlating laboratory assay data with sperm fertility are presented in an effort to determine which types of assays are important to conduct and when to conduct them. Even though laboratory assay results do not allow accurate evaluation of the fertilizing potential of a semen sample, these assays are important to enable culling of poor quality samples

    Comportamiento de diferentes portainjertos, en cultivo de sandía sin pepitas de calibre mini

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    Durante dos campañas 2006 y 2007, se estudiaron diferentes portainjertos: cv. Shintoza (Cucurbita maxima x C. moschata), Lagenaria, cv. Robusta (Citrullus lanatus), frente a plantas de sandía (Citrullus lanatus) testigo sin injertar, utilizando cultivares (cvs) de sandía sin pepitas de calibre mini cv. Precious petite en la campaña 2006 y el cv. Mielhart en 2007, como método para evitar enfermedades vasculares, el virus del cribado y de conocer el comportamiento productivo y de calidad de los frutos. En 2006 el mejor rendimiento comercial, mayor peso medio de los frutos y mayor porcentaje de frutos con calibre entre 3 y 4 kg se obtuvo con el portainjerto cv. Shintoza. Este portainjerto, junto con el cv. Robusta fueron los que mayor vigor confirieron a la variedad. En 2007 el mayor rendimiento también se obtuvo con el portainjerto cv. Shintoza, junto con el cv. Robusta. Aunque el mayor peso medio correspondió al portainjerto cv. Shintoza utilizando el cv. Mielhart, no se apreciaron diferencias estadísticamente significativas (e.s.). El mayor vigor de las plantas se obtuvo con el portainjerto cv. Robusta, seguido del cv. Shintoza

    Evaluación agronómica y productiva de diferentes soluciones nutritivas, en cultivo sin suelo, berenjena en ciclo de primavera y otoño

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    Las experiencias se desarrollaron en un túnel grande con cubierta de polietileno térmico, bajo sistema de cultivo sin suelo, utilizando fibra de coco como sustrato. Se comparó la respuesta de la berenjena (Solanum melongena) a 3 soluciones nutritivas con niveles crecientes de nitratos, fosfatos, amonio, potasio, calcio y magnesio. La dosis media se utilizó para formular una 4ª solución nutritiva, a la que se le añadió una enmienda orgánica húmica líquida. Para el estudio se utilizó berenjena del tipo intermedio cv. Cristal, en dos ciclos de cultivo distintos: primavera y otoño. Aunque en otoño se produjo una helada, acaecida en el mes de noviembre, los resultados productivos siguieron la pauta de los obtenidos en el ciclo de primavera. La menor producción precoz y final se obtuvo con la concentración de iones más baja. En el ciclo de primavera y otoño la dosis baja dio lugar a frutos de un menor calibre, aunque en este último ciclo no se detectaron diferencias significativas a nivel estadístico. El crecimiento de la planta también fue menor en ambos ciclos, para la concentración menor. No hubo diferencias en rendimiento, peso medio, ni desarrollo de la planta, entre la dosis más enriquecida y la intermedia, para ninguno de los ciclos estudiados. No se apreciaron diferencias entre la dosis intermedia y la adición de enmienda orgánica líquida, en producción, desarrollo de la planta ni en peso medio de los frutos en ninguno de los ciclos estudiados, y únicamente se apreció una mayor susceptibilidad a la helada, en la parcela a la que se le adicionó la enmienda orgánica líquida. Se midió el consumo de solución nutritiva, siendo el menor en ambos ciclos el correspondiente a la dosis D3, aunque la mayor eficiencia de riego se obtuvo en el ciclo de primavera con la dosis D1

    Nuevas variedades de cítricos

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    Actualmente las variedades que se cultivan con cierta importancia comercial, es de alrededor de 35, con una producción que se aproxima a los 6 millones de tm, generando un empleo cifrado entre los 250.000 y 300.000 personas, y un valor de producción de unos 1.500 millones de euros. Sin embargo, es frecuente la utilización de nuevas variedades, a pesar de la excelente estructura varietal que tenemos, con vistas a mejorar distintos aspectos del cultivo y comercialización tales como ampliación del periodo de producción mediante la utilización de variedades más precocesy tardías, aumento de la producción, mejora de la calidad. etc. La mayor parte de variedades de cítricos que actualmente se cultivan, proceden de mutaciones espontáneas de yema, que mejoran a la variedades originarias aportando características, como adelanto o retraso de la madurez de sus frutos, aumento de su tamaño, incremento de la productividad, regularización de producción, mayor contenido en azúcares y ácidos, mayor contenido en zumo, etc. El equipo de variedades del Instituto Valenciano de Investigaciones Agrarias, continua con el estudio de nuevas variedades, procurando obtener una información lo más completa posible, seleccionando aquellas que presentan un interés comercial pensando en el consumidor, cada vez más exigente en calidades (sin semillas, buen color, de fácil pelado, alto porcentaje de zumo, equilibrio entre azúcares y ácidos y buen calibre)

    Plantas de vivero certificadas. Su repercusión en la citricultura española

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    En unas condiciones dadas de clima, agua suelo y unas técnicas de cultivo adecuadas, el éxito de una explotación en su aspecto agronómico requiere utilizar un material vegetal de calidad, con un elevado potencial productivo y que, en ningún caso, sea el factor limitante del resto de medios de producción. La disponibilidad de plantas de calidad se ha convertido en una exigencia de primera magnitud en cualquier citricultura que pretenda ser competitiva. Por otro lado la facilidad de los intercambios internacionales propicia la dispersión de plagas y enfermedades peligrosas para la citricultura, lo que obliga a la adopción de medidas de cuarentena. Un material vegetal de calidad, en el que se incluyen las plantas de vivero, es aquel que permite la mejor realización de los objetivos de los agricultores que lo utilizan. La calidad del material vegetal debe ser considerada desde un punto de vista global (Felipe 1999) y debe ser definida teniendo en cuenta aspectos genéticos, sanitarios, morfológico - viverísticos, agronómicos e incluso otros de carácter comercial. La calidad genética o autenticidad varietal, consiste en que el material vegetal llegue al agricultor con las mismas condiciones genéticas que sirvieron para realizar, en su momento, el proceso de selección o mejora genética y que se utilizaron para describir la variedad (cultivar) e inscribirlo en el Registro Oficial de Variedades Comerciales. Para ello el proceso de producción debe iniciarse a partir de un material genéticamente comprobado (material inicial) y, durante el proceso, se deben adoptar las medidas de control y técnicas para evitar o, al menos, minimizar el riesgo de su modificación, tales como inspecciones visuales, análisis, correcto etiquetado y registro, etc. Este parámetro de calidad no es identificable a simple vista en los plantones que adquiere el agricultor

    Characterization of hemizygous deletions in Citrus using array-Comparative Genomic Hybridization and microsynteny comparisons with the poplar genome

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    Background: Many fruit-tree species, including relevant Citrus spp varieties exhibit a reproductive biology that impairs breeding and strongly constrains genetic improvements. In citrus, juvenility increases the generation time while sexual sterility, inbreeding depression and self-incompatibility prevent the production of homozygous cultivars. Genomic technology may provide citrus researchers with a new set of tools to address these various restrictions. In this work, we report a valuable genomics-based protocol for the structural analysis of deletion mutations on an heterozygous background. Results: Two independent fast neutron mutants of self-incompatible clementine (Citrus clementina Hort. Ex Tan. cv. Clemenules) were the subject of the study. Both mutants, named 39B3 and 39E7, were expected to carry DNA deletions in hemizygous dosage. Array-based Comparative Genomic Hybridization (array-CGH) using a Citrus cDNA microarray allowed the identification of underrepresented genes in these two mutants. Subsequent comparison of citrus deleted genes with annotated plant genomes, especially poplar, made possible to predict the presence of a large deletion in 39B3 of about 700 kb and at least two deletions of approximately 100 and 500 kb in 39E7. The deletion in 39B3 was further characterized by PCR on available Citrus BACs, which helped us to build a partial physical map of the deletion. Among the deleted genes, ClpC-like gene coding for a putative subunit of a multifunctional chloroplastic protease involved in the regulation of chlorophyll b synthesis was directly related to the mutated phenotype since the mutant showed a reduced chlorophyll a/b ratio in green tissues. Conclusion: In this work, we report the use of array-CGH for the successful identification of genes included in a hemizygous deletion induced by fast neutron irradiation on Citrus clementina. The study of gene content and order into the 39B3 deletion also led to the unexpected conclusion that microsynteny and local gene colinearity in this species were higher with Populus trichocarpa than with the phylogenetically closer Arabidopsis thaliana. This work corroborates the potential of Citrus genomic resources to assist mutagenesis-based approaches for functional genetics, structural studies and comparative genomics, and hence to facilitate citrus variety improvement

    Composting olive mill pomace and other residues from rural southeastern Spain

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    The costly disposal of the semisolid residual pomace generated in the two phase extraction used in modern olive mills is causing serious problems to the small oil producers of rural southeastern Spain. Composting may be a viable alternative since complementary residues are usually available in these areas to prepare an adequate starting mixture. In this work, four different combinations of residues (pomace + rabbit manure, pomace + sheep manure, pomace + rabbit manure + rice straw, pomace + rabbit manure + almond shells) were composted in 3 toil piles aerated by turnings, using technology available to any small community of oil producers. During the four long processes (9-10 months), a steady decrease of organic matter and increases in the concentrations of nutrient and humic substances were observed, together with large increases in pH and salinity which may reduce the agronomic value Of the final products

    Genetic variation of papaya ringspot virus in Venezuela

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    The genetic variation of papaya ringspot virus (PRSV) in Venezuela was estimated by single strand conformation and nucleotide sequence analyses of two genomic regions of twenty-six isolates. These analyses showed that mutation, virus movement, selection, mixed infections and recombination contributed to shape the genetic variation observed. Phylogenetic analysis indicated that Venezuelan isolates were within a clade composed of isolates from the Americas and Australia. The genetic diversity of these isolates was sufficiently large that it must be taken into account when designing control strategies such as transgenic resistance and cross-protection

    Gene expression analysis in citrus reveals the role of gibberellins on photosynthesis and stress

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    The effect of gibberellins (GA) on internode transcriptome was investigated in transgenic Carrizo citrange (Citrus sinensis x Poncirus trifoliata) plants overexpressing endogenous CcGA20ox1 (encoding a GA biosynthetic gene), and in non-transformed explants treated with GA(3), using a citrus cDNA microarray. Substantial modulation of gene expression was found in sense CcGA20ox plants. Extensive up-regulation of genes involved in photosynthesis and carbon utilization, and down-regulation of those involved in protein synthesis and ribosome biogenesis were shown for the first time in plants with higher GA content. Importantly, increase of net photosynthesis in attached leaves was also demonstrated. Expression of other genes belonging to functional groups not reported previously to be regulated by GA (mainly abiotic and biotic stresses, and cuticle biosynthesis), and genes involved in cell division and cell wall architecture were also differentially expressed. Culture of citrus explants for 24 h in GA(3) solution produced much lower changes in the transcriptome compared with CcGA20ox plants (1.6% versus 16%, respectively, of total genes in the microarray), suggesting that most of the changes observed in CcGA20ox plants were a consequence of a long-standing GA effect. Interestingly, genes related to abiotic and biotic stresses were similarly modulated in transgenics and GA(3)-treated explants

    Integrated approach for detection of nonculturable cells of Ralstonia solanacearum in asymptomatic Pelargonium spp. cuttings

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    Ralstonia solanocearum (biovar 2. race 3) is a Soil and water-borne pathogen that Causes serious diseases in several solanaceous hosts. It can also infect geranium plants, posing an important threat to their culture when latently infected cuttings are imported from countries where the pathogen is endemic. R. solanacearum can be present in very low numbers in asymptomatic geranium cuttings, and/or in a particular stressed physiological state that escapes direct isolation on the solid media usually employed. Consequently, an integrated protocol has been developed to analyze asymptomatic geranium cuttings routinely. The first screening tests include isolation and co-operational-polymerase chain reaction (Co-PCR), based on the simultaneous and co-operational action of three primers from 16S rRNA of R. solanacearum. This method was selected as the most sensitive one, able to detect only 1 cell/ml including, non-culturable cells. When isolation is negative but Co-PCR is positive, the bioassay in tomato plants is proposed, since stressed bacterial cells or those present in low numbers that do not grow on solid media can be recovered from inoculated tomato plants and retain pathogenicity. This methodology has been demonstrated to be useful and has allowed LIS to assess the relevance of the physiological status of bacterial cells and its implications in detection. It also reveals the risk of introducing R. solanacearum through asymptomatic geranium material when relying only on bacterial isolation

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