ReDivia - Repositorio Digital de l'Instit Valencià d'Investigacions Agràries
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Obtención de híbridos triploides de cítricos
La presencia de semillas en los frutos de mandarina es una característica indeseable ya que el mercado de consumo en fresco no acepta frutos con semillas. Los híbridos triploides de cítricos son de gran interés ya que no producen semillas ni inducen la formación de semillas en otros genotipos por polinización cruzada. Los híbridos triploides se pueden obtener mediante hibridación somática entre protoplastos haploides y diploides y mediante hibridación sexual entre parentales diploides y entre parentales diploides y tetraploides. El objetivo general de esta tesis doctoral es la obtención de parentales para la producción de híbridos triploides de cítricos, la caracterización de los diferentes tipos de hibridaciones sexuales que permiten obtener híbridos triploides y un mejor conocimiento de la biología reproductiva de los cítricos en relación con la obtención de híbridos triploides. Estos objetivos generales se concretan en los siguientes objetivos específicos: 1.Obtención de plantas haploides mediante la técnica de ginogénesis in situ inducida por polen irradiado y posterior rescate y cultivo de embriones in vitro. Se han obtenido genotipos haploides, dobles haploides y aneuploides de clementina `Clemenules´ y uno de los genotipos haploides ha sido elegido por el Consorcio Internacional de Genómica de Cítricos para la secuenciación del genoma completo de los cítricos. 2.Obtención de plantas tetraploides de diferentes genotipos apomícticos de mandarinos, naranjos dulces y pomelos que puedan ser utilizados como parentales masculinos en hibridaciones 2x X 4x para la obtención de híbridos triploides. Mediante citometría de flujo se han
identificado plantas tetraploides espontáneas en 15 genotipos de los 17 estudiados, con frecuencias que oscilaron entre el 9,7% en mandarino `Kinnow´ y el 0,5% en mandarino `Page´. Se demuestra que todos los genotipos tetraploides obtenidos proceden de la duplicación del número de cromosomas de células de la nucela. 3.Obtención de plantas tetraploides de genotipos no
apomícticos de mandarino que puedan ser utilizadas como parentales masculinos y femeninos en hibridaciones 2x X 4x y 4x X 2x. Para ello se realizó el microinjerto in vitro de ápices caulinares tratados con colchicina y orizalina. Se han obtenido plantas tetraploides a partir de la brotación directa del ápice microinjertado y a partir de la segregación de citoquimeras, obteniendo plantas tetraploides estables de las clementinas `Clemenules´, `Fina´, `Marisol´ y mandarino `Moncada´. 4.Obtención de
híbridos triploides mediante hibridaciones 2x X 2x, 2x X 4x y 4x X 2x. Se demuestra que los embriones triploides se encuentran en diferentes tipos de semillas en función del tipo de hibridación realizada y se propone una mejora en cada etapa del proceso de obtención de híbridos triploides. Se evaluaron las eficiencias de las diferentes estrategias en función de los genotipos parentales. Las hibridaciones 4x X 2x y 2x X 4x presentaron la mayor eficiencia en la obtención de híbridos triploides; sin embargo en aquellos genotipos capaces de producir frecuencias muy elevadas de gametos 2n, como mandarino `Fortune´, la estrategia 2x X 2x es muy eficiente. Los resultados obtenidos también demuestran la gran influencia que tiene el parental masculino en la obtención de híbridos triploides, lo que implica la selección de una estrategia u otra. Por fin, se discuten las implicaciones de los
diferentes tipos de hibridación a nivel de las segregaciones y de la diversidad genotípica teórica de las poblaciones triploides. 5.Determinación del origen genético de las plantas regeneradas a partir de semillas parcialmente desarrolladas originadas en las hibridaciones 2x X 4x utilizando genotipos no apomícticos como parentales femeninos. Se demuestra con marcadores microsatélites que el origen de este tipo de poliembrionía ocurre como consecuencia de una embriogénesis secundaria a partir
del embrión zigótico original. Así mismo, esta característica se confirma mediante la regeneración de plantas a partir del cultivo de nucelas in vitro de genotipos no apomícticos de cítricos. Se concluye que la formación de embriones adventicios a partir del embrión zigótico original es un fenómeno frecuente en los genotipos no apomícticos de cítricos y que el desarrollo de estos embriones está generalmente inhibido por el embrión principal. Se discuten las implicaciones que tiene este mecanismo en los programas de mejora genética y además se describe por primera vez la ocurrencia de este mecanismo en la biología reproductiva de los genotipos no apomícticos de cítricos. 6.Establecer un perfil molecular con marcadores microsatélites de 15 nuevos híbridos triploides de mandarino presentados por el Instituto Valenciano de Investigaciones Agrarias en el Registro de Variedades Protegidas de la Oficina Española de Variedades Vegetales. El análisis genético se realizó con un secuenciador automático mediante electroforesis capilar que permite calcular para marcadores heterocigóticos la dosis alélica de cada híbrido triploide lo que genera una diferenciación varietal mucho más potente
Contenido nutricional en cultivos hortícolas tratados con varias enmiendas orgánicas líquidas aplicadas al suelo con el riego
En un ensayo de campo iniciado en septiembre de 2002 en las parcelas experimentales
del Centro de la Fundación Ruralcaja, en Paiporta (Valencia), se estudió la respuesta de
diferentes cultivos hortícolas a siete productos comerciales a base de materias orgánicas
líquidas: Vit-Humic 26 (L1), Welgrohumus (L2), Naturvital-16 (L3), Disahumic-16 (L4),
Disaful (L5), Magic-Humic (L6) y Organ d’Or (L7), que se aplicaron al suelo en los cultivos
de coliflor, patata, sandía, hinojo, pimiento y col china mediante el sistema de riego, a
una dosis de 45 l/ha, fraccionada en tres veces a lo largo del ciclo de cultivo. Los resultados
correspondientes al contenido de nutrientes en los productos cosechados junto a la
discusión de los mismos se muestran en esta comunicación
Evaluación del injerto intermedio como solución a los problemas de afinidad del melón piel de sapo injertado
El injerto intermedio de Cucumis melo, entre melones de tipo español ‘Piel de Sapo’
y sobre calabaza (Cucurbita hibrida) podría ser una solución para mejorar la afinidad
entre estos y soslayar la incidencia de las enfermedades del suelo que afectan al melón.
Para ello se ha evaluado la productividad y calidad del fruto de melón en plantas del
cultivar de melón ‘Torpedo’ del tipo Piel de Sapo bien injertado directamente sobre
‘Strongtosa’ (Cucurbita hibrida) o utilizando los cultivares de melón ‘Sienne’, ‘Cyro’ y
‘Sirio’ como injerto intermedio. El injerto de ‘Piel de Sapo’ directamente sobre Cucurbita
híbrida, a diferencia de lo que ha ocurrido en otras ocasiones, no presentó problemas
aparentes de afinidad, no observándose “miriñaque” en la unión del injerto en ninguna
de las plantas ni se ha producido clorosis o muerte prematura en ningún caso, han
producido perfectamente y han aguantado hasta el final. A pesar de ello, el injerto
intermedio con el cultivar ‘Sienne’ ha mejorado ligeramente la producción, el número
de frutos, el aspecto de las parcelas y el porcentaje de plantas vivas al final del cultivo.
Este cultivar, injertado sobre ‘Strongtosa’ ha tenido mejor comportamiento que el resto
'Amiga' strawberry
‘Amiga’ is a short-day strawberry cultivar
developed by the Spanish public breeding
program. ‘Amiga’ has a very high fruit firmness,
high production, long fruit shape, and
good appearance. An agronomic and sensory
characterization of this new cultivar, in
comparison with the well-adapted cultivars
Camarosa, Carisma, Marina and Medina, was
undertaken during the 2000 and 2001 crop
seasons.
Most strawberries produced in Spain
are shipped fresh to destinations throughout
Europe. Growers therefore need cultivars
producing fruit that, in addition to attractiveness
and top-class sensory attributes, ensures
maintenance of quality after long-distance
shipment. During the crop season 2006, a
total of 58.3% of the total strawberry output
at Huelva (312,066 t) was shipped fresh to
market (Anonymous, 2006). The main destinations
were Germany, France, and the
United Kingdom.
As a result of the economic and social
significance of strawberry production in
Spain, which is currently the leading European
producer of fresh-market strawberries
(López-Aranda et al., 2003), a number of
public institutions, including the Instituto
Nacional de Investigaciones Agrarias (INIA),
the Instituto de Investigacio´n y Formacio´n
Agraria y Pesquera (IFAPA), and the Instituto
Valenciano de Investigaciones Agrarias
(IVIA), are carrying out a breeding program
to develop new strawberry cultivars well
adapted to growing conditions in Spanish
production areas, and particularly in Huelva.
‘Amiga’ is the latest cultivar released from
this program in cooperation with the private
partner, Viveros California, S.L. Previous
cultivars released include ‘Andana’ (Bartual
et al., 1997), ‘Carisma’ (Bartual et al., 2002),
‘Marina’ (López-Aranda et al., 2004),
‘Medina’ (López-Aranda et al., 2005a), and
‘Aguedilla’ (López-Aranda et al., 2005b).
The new short-day strawberry (Fragaria
· ananassa Duch.) cultivar Amiga is remarkable
for its very high firmness, high production
in annual production systems, long
fruit shape, and good appearance. Its harvest
season is early, which is extremely important
for economic production on the southwest
coast of Spain, and its firmness is essential for
long-distance shipment
Efficacy of five selected acaricides against Tetranychus urticae (Acari: Tetranychidae) and their side effects on relevant natural enemies occurring in citrus orchards
BACKGROUND: Three groups of natural enemies are fundamental in citrus IPM in Spain: coccinellid and phytoseiid predators and hymenopteran parasitoids. Tetranychus urticae Koch is an important pest affecting citrus, for which biological control has not yet been achieved; therefore, acaricides are commonly used to control it. The goal of this study was to measure the efficacy of different acaricides on this mite and their side effects on three natural enemies relevant for citrus (Cryptolaemus montrouzieri Mulsant, Neoseiulus californicus McGregor and Aphidius colemani Viereck). RESULTS: Some products proved highly effective against T. urticae and harmless to A. colemani (mineral oil, tebufenpyrad, clofentezine and fenazaquin). However, almost all products tested were slightly harmful for both the predators considered. Fenazaquin was even moderately harmful for N. californicus. CONCLUSION: Further studies, like that presented here, are necessary to gain a better understanding of integrating biological and chemical controls. When considering both efficacy and side effects on beneficial arthropods, the best options would seem to be mineral oil, tebufenpyrad and clofentezine. However, it is urgent to complete testing of the side effects of the acaricides used in citrus. This question is crucial if the fact that two recently introduced Tetranychidae are being controlled in citrus by chemical means exclusively is considered
Mejora de la tecnología de desastringencia, conservación y comercialización de caqui "Rojo Brillante" para consumo en fresco
La producción de caqui ‘Rojo Brillante’ ha aumentado de manera muy importante en los últimos años, debido principalmente a la introducción de métodos postcosecha para la eliminación de la astringencia basados en la aplicación de altas concentraciones de dióxido de carbono (CO2), que permiten obtener un fruto no astringente de textura firme. Sin embargo, a nivel comercial en determinados momentos de la campaña se han encontrado dificultades para una eliminación total de la astringencia; no siendo conocidas las causas de la falta de eficacia del tratamiento, se hace necesario el estudio y optimización del proceso de desastringencia para poder obtener un fruto de elevada calidad que satisfaga las expectativas del consumidor. Por otra parte, debido al corto periodo de tiempo en el que se concentra la producción de este cultivar, entre los meses de Octubre a Diciembre, es de gran interés la optimización de la tecnología de conservación existente, así como la introducción de nuevas tecnologías que permitan prolongar el periodo comercial del fruto. Actualmente una de las principales alteraciones durante la comercialización de esta variedad es la presencia de pardeamiento, llegando a suponer considerables pérdidas para el sector ya que no están claras las causas de dicha alteración ni las medidas de control a tomar. Los objetivos principales de esta tesis fueron: la caracterización de diferentes estados de madurez de caqui ‘Rojo Brillante’, la optimización del tratamiento de desastringencia, la evaluación de tratamientos precosecha y postcosecha para prolongar la conservación, y el estudio de los factores implicados en la aparición de pardeamiento durante la comercialización del fruto
Effect of gelatin addition to freezing extender on rabbit semen parameters and reproductive performance
An improvement in reproduction management has been associated to the wide use of artificial insemination in rabbits. The use of frozen semen in this species is greatly limited due to its low fertility rates. Moreover, in politocous species, prolificacy is a very important trait and it is particularly affected when semen is frozen. Since gelatine addition to fresh semen extenders improves and
prolongs motility and viability sperm parameters, its use in semen freezing could enhance sperm efficiency after thawing. The aim of this study was to assess the effects of gelatine addition to freezing extender using a commercially available extender (MIII) and a tris-based extender (TGC). Four experimental extenders were used: TGC extender with gelatine, the same without gelatine and MIII extender with and without gelatine. In order to evaluate seminal parameters, motility was assessed using the Computer Assisted Sperm Analysis, while viability rate was calculated using flow cytometry. To evaluate in vivo frozen-thawed semen, 273 females were inseminated. No significant difference was found among the four freezing extenders when motility, viability fertility or prolificacy were considered. Motility rates ranged between 22.4% and 35.1%, while viability varied between 22.5 and 30.9%. Fertility rates oscillated from 80.8% to 86.2% and the total born ranged from 7.9 to 8.5. While in vitro results were lower than those obtained in other studies, in vivo results were quite favourable. In conclusion, gelatine addition did not improve sperm motility and viability after thawing nor fertility and prolificacy after insemination with frozen-thawed semen, using MIII or TCG extender
Immune response to repeated rhFSH superovulation treatment in rabbit does
Some studies have demonstrated that, when superovulation is induced more than once in the same animal, the response to treatment may be reduced. This reduced response may be related to an increase of anti-gonadotrophin antibodies. The aim of this study was to evaluate the effect of repeated recombinant human (rh) FSH superovulation treatments on the ovulation rate and anti-FSH antibodies production. For this purpose, 34 females were treated i.m. with rhFSH (0.6 mg every 24 h, for 3 days) in order to induce superovulation four consecutive times. Control does were injected with the vehicle at the appropriate time. The interval between the first three treatments was one month; and three months between the third and fourth treatment during which the females were inseminated without superovulation treatment. Ovulation rate was checked by laparoscopy and blood samples were
collected after each treatment. An indirect ELISA was used to detect sera anti-FSH antibodies. The ovulation rate was significantly higher in does treated with rhFSH than in control group. The ovulation rate was significantly higher in does treated for the first time with rhFSH than in those treated two, three, or four times (8.7±1.42, 19.3±1.36, 13.5±1.26, 13.0±1.28, 14.3±1.31 for control and
superovulated females, respectively, P<0.05). On the other hand, results obtained after four consecutives rhFSH treatments indicate that there was a significant difference in immune response of does after the second treatment (P<0.05), none of the treated females presented immune response in the first or second treatment, on the contrary, in the third and forth treatment the 40 to 60% of females presented high antibody levels. The results of the present study clearly demonstrate that repeated rhFSH superovulation treatments in rabbit does induce a immune response and have a negative effect on ovulation rate. Although anti-FSH antibodies induce a decrease in superovulation response, the ovulation rate of females superovulated twice, three and four times was significantly higher than control females. The immune response developed has an important individual variability and may be related with the reproductive response decrease after repeated treatments. Nevertheless, since there were females in which ovulation rate diminished without an increase in sera antibodies, it is clear that reproduction failure after consecutive superovulation treatments can be caused by different reasons, which have to be studied in future
Physico-chemical and sensory quality of 'Clemenules' mandarins and survival of the Mediterranean fruit fly as affected by complementary cold and carbon dioxide
Cold-based quarantine treatments (exposure to 1.1-2.2 degrees C for 14-18 d) against the Mediterranean fruit fly Ceratitis capitata (Wiedemann) (Diptera: Tephritidae) must be currently applied to Spanish citrus exports to pest-free markets such as the United States. Alternative or complementary treatments are needed because fruit quality of some cold sensitive cultivars can be adversely affected by these quarantine protocols. In this work, physico-chemical (rind color, firmness, and physiological disorders, soluble solids concentration, titratable acidity, maturity index,juice yield, and ethanol and acetaldehyde content) and sensory (sweetness, acidity, sensory maturity index, off-flavors, and mandarin-like flavor) fruit quality of 'Clemenules' clementine, mandarins and survival of C. capitala were assessed on fruit subjected to integrated quarantine treatments consisting of exposure to 1.5 degrees C for 3, 6, 9, or 12 d followed by exposure for 20 h to a controlled atmosphere (CA) of 95% CO2 at 20 or 25 degrees C. Complete insect mortality with no negative effects on fruit quality after 7 d at 20 degrees C of shelf life was obtained on clementines first exposed to 1.5 degrees C for 3 d and second treated with CA at 25 degrees C. Therefore, this combination of treatments considerably reduced quarantine time and showed promise as a potential commercial quarantine treatment for Spanish mandarin exports. (c) 2007 Elsevier B.V
ACTA HORTICULTURAE
A nucleic acid sequence-based amplification method coupled with flow-through hybridisation (NASBA-FH) was developed for Plum pox virus (PPV) detection. The detection limit of the NASBA-FH was established at two copies of control transcripts, resulting 10 times higher than that obtained by Co-PCR and 1000 times higher than the sensitivity afforded by RT-PCR. In addition, samples from 253 stone-fruit trees were collected during winter and analysed. The samples were tested using methods recommended by the European and Mediterranean Plant Protection Organization to detect PPV (DASI-ELISA, RT-PCR and Co-PCR) and by NASBA-FH. PPV diagnosis by ELISA and NASBA-FH coincided in 90.5%, while ELISA and PCR-based methods coincided in the diagnosis of 91.3% of the trees and PCR-based methods with NASBA-FH agreed in 95.2%. Results support that NASBA-FH is a suitable molecular method for routine PPV detection in the winter period