University of Trás-os-Montes and Alto Douro

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    11655 research outputs found

    Cadmium toxicity and role of plant growth promoting Bacteria in Phytoremediation

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    2214-39B3-9E57 | Paulo Favasinfo:eu-repo/semantics/publishedVersio

    Inverse Cellular Lattices

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    The deformation mechanisms of classic lattice topologies (e.g., Cubic, Diamond, Octet, and Double Pyramid lattices) and their specific density-dependent mechanical properties have already been thoroughly explored by the scientific community. This study details a novel approach to designing lattices by generating the topologies that correspond to the voids of these classic lattice designs. This is achieved by using a Boolean operation performed to create a solid topology from the original voided fraction. The resultant topologies are proposed to be named Inverse lattices. Static structural numerical analysis shows that this process may generate significant changes in the lattice deformation mechanism and stiffness. For this effect, elastic properties such as the Specific modulus and Apparent Poisson’s ratio were determined as a function of Specific density. Specifically, for Octet and Double Pyramid inverse lattice topologies, results show a reduction in stiffness by promoting a change to a bending deformation mechanism. However, the inverse Diamond inverse lattice topologies present a higher stiffness (i.e., specific modulus) relative to the original classic design. This new lattice model may be a promising design for future lattice applications

    Sumário da Lição: Métodos moleculares na análise microbiológica de produtos alimentares

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    De acordo com a alínea c) do nº 2 do artigo 8º, do Decreto-Lei n.º 239/2007 de 19 de junho, apresenta-se, neste documento, o sumário da lição a que se refere a alínea c) do artigo 5º do referido diploma legal, para efeitos de prestação de provas de Agregação em Ciências Químicas e Biológicas, ramo de Ciências Biológicas, na Universidade de Trás-os-Montes e Alto Douro

    O uso da rinoscopia como método diagnóstico e terapêutico no cão: estudo retrospetivo de 74 casos clínicos

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    A rinoscopia permite o acesso direto, visual e físico, à cavidade nasal e nasofaringe, possibilitando a realização de um exame completo, com recolha de amostras de biopsia com o fim de diagnóstico e a realização da maioria dos procedimentos terapêuticos. Este estudo pretendeu avaliar o uso da rinoscopia como método diagnóstico e terapêutico no cão. Todos os animais da amostra foram submetidos ao procedimento de rinoscopia. Foi realizado um estudo retrospetivo através da análise detalhada das fichas clínicas dos cães submetidos a rinoscopia, num hospital de referência em Lisboa. Na análise foram incluídos 74 animais, dos quais 33 apresentaram corpos estranhos (44,60%), 18 rinite idiopática (24,32%), 16 neoplasia nasal (21,62%), 2 rinite fúngica por Aspergillus spp. (2,70%), 1 rinite bacteriana por Klebsiella spp. (1,35%), e em cerca de 4 cães (5,41%) não foram observadas alterações durante o exame de rinoscopia. Na amostra em estudo, a maioria eram cães machos e de raça definida 55,56% (30/54). Em relação à distribuição etária, a média de idades foi de 6,23 anos, onde predominaram os animais com idade mais jovem (≤ 2 anos) 27,03% (20/74). As raças predominantes foram o Labrador Retriever 7,41% (4/54) e o Yorkshire Terrier 7,41% (4/54). Em geral, os cães de raça definida foram de porte médio 42,59% (23/54). O espirro foi o sinal clínico mais reportado 70,27% (52/74). Os animais dos quais se retiraram corpos estranhos foram, na sua maioria fêmeas 51,52% (17/33), e predominavam os cães de raça definida 81,82% (27/33). Os animais de raça definida apresentavam maioritariamente porte médio 44,44% (12/27). As raças que mais se distinguiram foram o Jack Russel Terrier 9,09% (3/27) e Beagle 9,09% (3/27). A média de idades foi de 4,96 anos com as idades mais jovens em maioria (≤ 2 anos) 36,36% (12/33). O espirro foi o sinal clínico mais frequentemente reportado 81,82% (27/33). Verificou-se que as praganas foram o corpo estranho mais retirado 81,82% (27/33) da narina esquerda 51,52% (17/33), durante o exame de rinoscopia. No que respeita à rinite idiopática, os animais diagnosticados eram, na sua maioria, machos 61,11% (11/18) e predominavam os cães de raça definida 55,56% (10/18). Os animais de raça definida apresentavam maioritariamente porte médio 50% (5/10). A raça que mais se distinguiu foi o Bull Terrier. A média de idades foi de 6,13 anos com as idades mais jovens em maioria (≤ 2 anos) 33,33% (6/18). O espirro foi, mais uma vez, o sinal clínico mais frequentemente reportado 55,56% (10/18). A maioria das rinites mista foi composta por diferentes células inflamatórias 77,78% (14/18). Relativamente aos animais diagnosticados com neoplasia, 81,25% (13/16) foram machos, predominando os cães de raça definida 81,25% (13/16). Os animais de raça definida apresentavam porte médio 38,46% (5/13) e grande 38,46% (5/13). As raças mesaticefálicas e dolicocefálicas predominavam. A média de idades foi de 10,14 anos com as idades mais avançadas em maioria (≥ 12 anos) 31,25% (5/16). O espirro foi o sinal clínico mais frequentemente reportado 62,50% (10/16). As neoplasias eram todas malignas e predominavam as do tipo epitelial 75% (12/16), onde o carcinoma indiferenciado 31,25% (5/12) foi o que mais se distinguiu. As massas surgiram mais frequentemente da cavidade nasal esquerda 31,25% (5/16). Os animais que foram diagnosticados com rinite fúngica por Aspergillus spp. eram machos e o Bull Terrier foi a única raça definida presente. A média de idades foi de 5,04 anos. A epistaxis unilateral foi o sinal clínico mais reportado. No que concerne à rinite bacteriana por Klebsiella spp., o animal que foi diagnosticado era fêmea, de raça Teckel, com cerca de 3 meses de idade. Os espirros e a rinorreia bilateral foram os sinais clínicos mais reportados. Os animais submetidos a rinoscopia onde não foram observadas quaisquer alterações apresentavam sinais clínicos como espirros, engasgo, estertor e tosse. A utilização do procedimento de rinoscopia permite um acesso menos invasivo do que a cirurgia à cavidade nasal e nasofaringe, sendo uma mais valia para a Medicina Veterinária. É um método terapêutico que possibilita a extração de corpos estranhos e um método de diagnóstico, uma vez que permite recolher amostras de biopsia para análise histopatológica e, em alguns casos, também realizar cultura bacteriana e fúngica.Rhinoscopy allows direct visual and physical access to the nasal cavity and nasopharynx, enabling a complete examination to be carried out, biopsy samples to be taken for diagnostic purposes and most therapeutic procedures to be carried out. This study aimed to evaluate the use of rhinoscopy as a diagnostic and therapeutic method in dogs. All the animals in the sample underwent the rhinoscopy procedure. A retrospective study was carried out through a detailed analysis of the clinical records of the dogs that underwent the rhinoscopy procedure at a reference hospital in Lisbon. The analysis included 74 animals, of which 33 had foreign bodies (44,60%), 18 idiopathic rhinitis (24,32%), 16 nasal neoplasms (21,62%), 2 fungal rhinitis caused by Aspergillus spp. (2,70%), 1 bacterial rhinitis caused by Klebsiella spp. (1,35%), and in around 4 dogs (5,41%) no alterations were observed during the rhinoscopy examination. In the study sample, the majority were male and of defined breed 55,56% (30/54). In terms of age distribution, the average age was 6,23 years, with a predominance of younger animals (≤ 2 years) 27,03% (20/74). The predominant breeds were the Labrador Retriever 7,41% (4/54) and the Yorkshire Terrier 7,41% (4/54). In general, the defined breed dogs were medium-sized 42,59% (23/54). Sneezing was the most frequently reported clinical sign 70,27% (52/74). The animals from which foreign bodies were removed were mostly female, 51,52% (17/33), and were predominantly defined breed dogs, 81,82% (27/33). The defined breed animals were mostly medium-sized, 44,44% (12/27). The breeds that stood out the most were the Jack Russell Terrier 9,09% (3/27) and the Beagle 9.09% (3/27). The average age was 4,96 years, with the youngest ages in the majority (≤ 2 years) 36,36% (12/33). Sneezing was the most frequently reported clinical sign 81,82% (27/33). We found that grass awns was the foreign body most frequently removed 81,82% (27/33) from the left nostril 51,52% (17/33) during rhinoscopy. With regard to idiopathic rhinitis, the majority of the animals diagnosed were male, 61,11% (11/18), and the majority were defined breed dogs, 55,56% (10/18). The defined breed animals were mostly medium-sized, 50% (5/10). The breed that stood out the most was the Bull Terrier. The average age was 6,13 years, with the youngest being the majority (≤ 2 years) 33,33% (6/18). Sneezing was once again the most frequently reported clinical sign 55.56% (10/18 . Most mixed rhinitis is composed of different inflammatory cells 77,78% (14/18). With regard to the animals diagnosed with neoplasia, 81,25% (13/16) were male, with a predominance of defined breed dogs 81,25% (13/16). The defined breed animals were medium-sized 38,46% (5/13) and large 38,46% (5/13). The mesaticephalic and dolichocephalic breeds predominated. The average age was 10,14 years, with the majority being older (≥ 12 years), 31,25% (5/16). Sneezing was the most frequently reported clinical sign, 62,50% (10/16). The neoplasms were all malignant and predominantly of the epithelial type, 75% (12/16) of which undifferentiated carcinoma was the most distinctive, 31,25% (5/12). The masses appeared most frequently in the left nasal cavity, 31,25% (5/16). The animals diagnosed with fungal rhinitis caused by Aspergillus spp. were male and the Bull Terrier was the only defined breed present. The average age was 5,04 years. Unilateral epistaxis was the most commonly reported clinical sign. With regard to bacterial rhinitis caused by Klebsiella spp., the animal diagnosed was a female Teckel, around 3 months old. Sneezing and bilateral rhinorrhea were the most commonly reported clinical signs. The animals submitted to rhinoscopy where no alterations were observed had clinical signs such as sneezing, choking, wheezing and coughing. The use of the rhinoscopy procedure allows less invasive access than surgery to the nasal cavity and nasopharynx, and is an asset to veterinary medicine. It’s a therapeutic method that enables the extraction of foreign bodies and a diagnostic method, as it allows biopsy samples to be taken for histopathological analysis and, in some cases, bacterial and fungal cultures

    Semiologia Médica II: Relatório, programa, conteúdos e métodos de ensino

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    Relatório sobre a Unidade Curricular Semiologia Médica II apresentado como parte das Provas de Agregaçã

    Utilização das TI no feedback aluno-professor: perceções e prática em turmas do Ensino Profissional: Relatório da Prática de Ensino Supervisionada

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    A prática de ensino supervisionada constitui uma unidade curricular do mestrado em ensino de informática, na qual foram lecionados conteúdos e realizadas atividades sugeridas pelo professor cooperante numa turma do ensino profissional. Nesta prática, foi realizada a avaliação formativa dos processos de aprendizagem dos alunos, com particular destaque para o feedback alunoprofessor proporcionado através de TI (Tecnologias de Informação), uma vez que constitui uma condição para a melhoria contínua das aprendizagens dos alunos. Assim, este relatório de prática de ensino supervisionada pretende descrever e analisar a referida prática, através da confrontação com a revisão de literatura e de investigações sobre a temática do feedback. Inclui, ainda, um estudo exploratório, com a elaboração, a validação e a administração de um questionário a alunos do ensino profissional para verificar as suas perceções sobre o contributo do feedback aluno-professor na melhoria das suas aprendizagens. Daí que o objetivo principal do estudo seja compreender as perceções de alunos do ensino profissional sobre o contributo do feedback aluno-professor na melhoria das suas aprendizagens.The practice of supervised teaching is a curricular unit of the master's degree in computer science education in which contents will be taught and activities suggested by the cooperating teacher will be carried out in a vocational teaching class. In this practice, the formative evaluation of the students' learning processes will be carried out, with particular emphasis on the student-teacher feedback provided through IT (Information Technologies), since it constitutes a condition for the continuous improvement of students' learning. Thus, the supervised teaching practice report will describe and analyze said practice, through confrontation with the literature review and investigations on the subject of feedback. It will also include an exploratory study, with the elaboration, validation and administration of a questionnaire to vocational education students to verify their perceptions on the contribution of student-teacher feedback in improving their learning. Hence, the main objective of the study is to understand the perceptions of vocational education students about the contribution of student-teacher feedback in improving their learning

    Otimização da exploração de redes de distribuição com integracao de centrais elétricas virtuais

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    Aolongo dos ultimos anos tem-se veri cado um aumento na procura e consumo de energia eletrica. Para responder a esta necessidade crescente de consumo e distribuicao de energia este setor tem evoludo para novos paradigmas seja na gestao de redes seja a nvel do consumo da energia tendo por base uma utilizacao mais e ciente dos recursos. Nas ultimas decadas a diminuicao do consumo de combustveis fosseis tem-se assumido como um dos principais objetivos visto que estes apresentam um impacto negativo no meio ambiente pois tem como consequencia imediata a libertacao de gases com efeito de estufa. Neste contexto veri ca-se uma tendencia, cada vez mais acentuada, para que a producao de eletricidade tenha por base fontes de energia renovaveis tendo como objetivo diminuir assim a dependencia de combustveis fosseis. A dispersao de producao de energia atraves de fontes de energia renovaveis em diferentes pontos das redes de distribuicao propicia o aparecimento de novas formas de gestao e exploracao das redes. Esta evolucao na forma de gerir e explorar as redes de energia baseia-se em tecnologias que concretizam a possibilidade de armazenar a producao excedentaria, de forma otimizada visando a obtencao de ganhos de e ciencia para produtores e consumidores. E neste contexto que surgiram as Centrais Eletricas Virtuais que consistem na agregacao de pequenos produtores e fontes de potencia, numa rede virtual de geracao de energia. Este conceito inovador visa dotar a rede de uma maior exibilidade, aumentando assim a qualidade de producao e a distribuicao de energia eletrica. Esta dissertacao tem por base a criacao de um sistema otimizado que envolve a integracao de fontes de energia renovaveis e de sistemas de armazenamento baseados em bancos de baterias, numa smart grid, com objetivo de desenvolver cenarios mais vantajosos para consumidores e entidades agregadoras. Neste processo de otimizacao e necessaria uma ponderacao de custos e benefcios de cada sistema. Para tal, e fundamental ter presente os custos da energia no mercado bem como o conhecimento dos diagramas de carga das redes em estudo por forma a podermos otimizar os sistemas de ligacao entre produtores e consumidores de energias renovaveis. Vai ser possvel observar o comportamento da rede com a integracao de fontes de energia renovaveis e de sistemas de armazenamento, em que serao considerados os custos iniciais dos sistemas de armazenamento. Relativamente ao investimento em sistemas de armazenamento se houvesse uma superior producao de energias renovaveis, por forma a diluir o investimento inicial a sua viabilidade seria superior. Contudo, para o caso de estudo e vantajoso desde que em numero reduzido.Over the past few years, there has been an increase in demand and consumption of electricity. To refute the growing need for energy consumption and distribution, this sector has evolved towards new paradigms, in network management and energy consumption, based on more e cient use of resources. In the past decades, reducing the expending of fossil fuels has been assumed as one of the main goals since they have a negative impact on the environment, with the immediate consequence of releasing greenhouse gases. In that regard, there is a tendency, increasingly accentuated, to produce electricity based on renewable energy sources (RES) with the purpose of reducing the dependence on fossil fuels. The dissemination of energy production through RES in di erent places in the distribution network promotes the appearance of new forms of management and exploration of the networks. This evolution with the purpose of managing and exporting energy networks is based on technologies that emerge the possibility of storing surplus production in an optimized way, aiming to acquire e ciency gains for producers and consumers. In this context emerged Virtual Power Plants (VPP), which consist of the aggregation of small producers and power sources in a virtual energy generation network. The innovation of this concept aims to supply the network with substantial exibility, thus increasing the quality of production and distribution of electricity. This dissertation is based on the creation of an optimization and integration system for RES and storage systems based on battery banks, in an intelligent network, with the objective of developing more advantageous scenarios for consumers and aggregating entities. In the optimization process, its necessary to consider the costs and bene ts of each system. For this purpose, it is crucial to bear in mind the energy costs in the market as well as knowledge of the load diagrams of the networks under study so it can optimize the connection systems between producers and consumers of renewable energy. It will be possible to observe the behavior of the network with the integration of renewable energy sources and storage systems, in which the initial costs of the storage systems will be considered. The inclusion of storage systems if a superior durability production of renewable energy, in order to dilute or invest its initial viability would be superior. For the case study it is small, as long as it is in small numbers

    In vivo reversion of progeria phenotypes by cyclic induction of the FOXM1 transcription factor

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    The transcription factor Forkhead box M1 (FOXM1) is a key regulator of the cell cycle, playing an essential role in proliferation and maintenance of genomic stability. The expression of FOXM1 is mostly detected in progenitor cells and proliferative tissues and is gradually repressed over the years due to the process of cellular aging. Studies indicate that FOXM1 repression results in the loss of proliferative capacity and in the appearance of hallmarks of aging, such as cellular senescence. Restoring FOXM1 levels in human dermal fibroblasts retrieved from octogenarian healthy donors and patients with the Hutchinson-Gilford progeria syndrome (HGPS) delays the accumulation of proinflammatory senescent cells, rescuing cellular aging phenotypes. Recently, it was also demonstrated that in vivo induction of the FOXM1 transgene (FOXM1tg) in animal models of natural and progeroid aging delays the senescence-associated histopathological features, extending the lifespan by 25%. Although the induction of FOXM1tg starting in 4-month-old mice (nearly pre-symptomatic) efficiently delayed the establishment of progeroid phenotypes, it remains unknown whether FOXM1tg induction starting in older mice (already symptomatic) is able to reverse phenotypes. In this project, an HGPS mouse model was crossed with an inducible FOXM1tg mouse model to test different cyclic induction schemes starting at 4-, 8- and 12-weekold animals when progeroid phenotypes are mild, moderate, and severe, respectively. Major histopathological features related to HGPS were analyzed, confirming not only the delayed onset of progeroid phenotypes but also a partial reversal once already settled. In addition, to histological analysis, senescence markers were analyzed confirming the effect of FOXM1tg induction in decreasing senescence. Therefore, this confirms FOXM1 senostatic role, revealing its ability to restore organismal fitness and making FOXM1 a promising target for the treatment of progeroid syndromes and for the development of rejuvenation strategies.O fator de transcrição Forkhead box M1 (FOXM1) é um dos principais reguladores do ciclo celular, desempenhando um papel essencial na proliferação e manutenção da estabilidade genómica. A expressão de FOXM1 é detetada maioritariamente em células progenitoras e em tecidos proliferativos, sendo gradualmente reprimida ao longo dos anos, devido ao processo de envelhecimento celular. Diversos estudos indicam que a repressão de FOXM1 resulta na perda da capacidade proliferativa e no aparecimento de marcadores evidentes do processo de envelhecimento, como a senescência celular. Desta forma, foi comprovado que o restabelecimento dos seus níveis, em fibroblastos dérmicos de dadores octogenários saudáveis e de pacientes com síndrome progeróide de Hutchinson-Gilford (HGPS), retarda a acumulação de células senescentes próinflamatórias, resgatando fenótipos associados ao envelhecimento celular. Recentemente, foi também demonstrado que a indução do transgene FOXM1 (FOXM1tg) em modelos animais de envelhecimento natural e progeróide mitiga as características histopatológicas associadas à acumulação de senescência celular, resultando num aumento de longevidade em cerca de 25%. Embora a indução de FOXM1tg iniciada em animais com 4 semanas tenha sido eficaz em retardar o aparecimento de fenótipos associados ao envelhecimento, desconhece-se a sua capacidade de reverter fenótipos do envelhecimento quando iniciada em animais mais velhos. Neste projeto, foram testados esquemas de indução do transgene FOXM1 no modelo animal de HGPS iniciados em murganhos com 4, 8 e 12 semanas de idade quando os fenótipos progeróides são ligeiros, moderados e severos, respetivamente. Após a indução de FOXM1tg, foram analisadas as principais características histopatológicas, tendo sido confirmado não só o atraso na manifestação dos fenótipos de envelhecimento prematuro, mas também uma reversão parcial das características observadas. Adicionalmente, foi analisada a expressão de genes de senescência na aorta cuja repressão pela indução de FOXM1tg atesta a eficácia dos distintos esquemas testados na reversão de histopatologia da aorta na síndrome progeróide. Desta forma, o papel senostático de FOXM1 é confirmado, tornando-se um alvo promissor para o tratamento de síndromes progeróides e para o desenvolvimento de estratégias de rejuvenescimento

    Institutionalization of common land property in Portugal: tragic trends between

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    The current debate of ecosystem services has focused more on monetary valuation methods and payments for environmental services (PES) then on the classic economic analysis (i.e. assumptions regarding: sustainability, justice and efficiency). This paper examines, taking into consideration ecosystem services, income distribution from different land uses to stakeholders. We study the Portuguese common land ecosystem, which is characterized as having a wide range of ecosystem services. Allowing that all the benefits can be translated into economic value, we estimated the total economic value (TEV) associated with these territories on 5 different land use situations: forest, shrubland, water bodies, mountain agriculture and other uses, and analyzed the current institutional arrangements around these territories. We found that the distribution of the benefits of different land uses is relatively inequality. The results showed that the contemporary institutional arrangements of wealth distribution ensure a relatively fair distribution insider of system; however this institutional arrangement is unable to ensure equitable distribution of wealth by external stakeholders. We can conclude that different types of land use provide a very asymmetric distribution of income by different groups of humans: land owners; citizens of a country, and residents of Earth.B61A-9AB1-5540 | luis gomes lopesinfo:eu-repo/semantics/publishedVersio

    Extended-spectrum β-lactamases and carbapenemases in Enterobacteriaceae of pets, wild animals, and humans. Are we facing a public health problem?

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    Background: Antibiotic resistance is considered a significant public health concern, caused by the use, overuse, and misuse of these drugs in clinic prescription and veterinary medicine. Specifically, Klebsiella pneumoniae is considered one of the major pathogenic bacteria associated with nosocomial infections. Commensal bacteria of the gastrointestinal tract, such as Escherichia coli, are a reservoir of resistance genes that can be transferred to other commensal or pathogenic bacteria. The Extended-Spectrum β-lactamase (ESBL)-producing E. coli and K. pneumoniae are considered one of the great concerns regarding the public health issue. This work aimed to understand the genetic mechanisms associated with ESBL-producing and carbapenem-resistant K. pneumoniae and E. coli isolates from pets, wildlife, and/or hospitalized patients. Materials and Methods: A total of 502 faecal samples were obtained from 361 dogs (127 healthy dogs and 234 sick dogs) and 141 cats (43 healthy cats and 98 sick cats). All samples were collected between April-August 2017 using standardized procedures and one sample/animal. The samples from sick animals were obtained from hospitalized pets in seven hospitals/clinic centers located in different cities of Portuguese territory; faecal samples from healthy animals were recovered by their owners. These samples were processed in MacConkey agar supplemented with 2µg/mL cefotaxime (CTX) or 0.8µg/mL meropenem (MRP) for cefotaxime-resistant (CTXR ) or carbapenem-resistant (CPR ) E. coli or K. pneumoniae isolates in pets, respectively. Moreover, faecal samples were collected from 22 healthy free-ranging (wild) vulture chicks from Lanzarote and Fuerteventura (Canary Islands) during July 2019; they were seeded in MacConkey agar supplemented with cefotaxime (2 μg/ml). A total of 58 fecal samples were also recovered from apparently healthy camels used in touristic activities from Gran Canaria (n=32) and Fuerteventura (n=26) Islands during the same period. On the other hand, 84 cefotaxime/ceftazidime-resistant K. pneumoniae and E. coli isolates were obtained from different clinical samples (blood, urine, bronchial secretion, pus, among others) in a Northern Portuguese hospital (Centro Hospitalar de Trás os Montes e Alto Douro, CHTMAD). The MALDI-TOF-MS method was used for E. coli and K. pneumoniae identification, and antimicrobial susceptibility was performed by disk diffusion test, according to CLSI (2019) guidelines. Detection of β-lactamases and other antibiotic resistance genes, phylogenetic grouping, and molecular typing MLST (for selected isolates) were performed by specific PCR and sequencing. Results: K. pneumoniae isolates were recovered from MacConkey agar supplemented with MRP in 16 of the 361 tested dogs (4.4%, 13 from sick dogs and 3 from house healthy dogs) and one isolate/sample was characterized. Three of these isolates showed diminished susceptibility/resistance to carbapenems but carbapenemase genes were not detected; 15 of these 16 isolates were ESBL-producers (93.8%) and they carried the genes encoding CTX-M15 and/or SHV-28, associated in some cases with the high-risk clones ST307 and ST15. Fortyseven ESBL-producing E. coli isolates were detected among the 51 CTXR isolates (92.2%), recovered from 32 sick and 15 healthy dogs (frequencies of 13.7% and 11.8%, respectively). Different variants of blaCTX-M genes were detected among 45 of 47 ESBL-producers: blaCTX-M15 (n=26), blaCTX-M-1 (n=10), blaCTX-M-32 (n=3), blaCTX-M-55 (n=3), blaCTX-M-14 (n=2) and blaCTXM-variant (n=1). Although at a lower rate, the CMY-2 β-lactamase was also found among one ESBL-positive isolate (co-produced CTX-M-15) and 2 additional CTXR ESBL-negative canine E. coli isolates. Ten different sequences types were identified among dog isolates (ST/phylogenetic-group/β-lactamase): ST131/B2/CTX-M-15, ST617/A/CTX-M-55, ST3078/B1/CTX-M-32, ST542/A/CTX-M-14, ST57/D/CTX-M-1, ST12/B2/CTX-M-15, ST6448/B1/CTX-M-15+CMY-2, ST5766/A/CTX-M-32, ST115/D/CMY-2 and a newST/D/CMY-2. On the other hand, qAmpC (CMY-2) (n=3, 2.1%)- and ESBL (n=11, 7.8%)-producing E. coli isolates were obtained from healthy and sick cats. However, K. pneumoniae was not recovered among the cats’ samples. E. coli isolates carried the following ESBL genes: blaCTXM-1 (n = 3), blaCTX-M-15 (n = 3), blaCTX-M-55 (n = 2), blaCTX-M-27 (n = 2) and blaCTX-M-9 (n = 1). Six different sequence types were identified among cat ESBL-producers (sequence type/associated ESBLs): ST847/CTX-M-9, CTX-M-27, CTX-M-1; ST10/CTX-M-15, CTX-M-27; ST6448/CTX-M-15, CTX-M-55; ST429/CTXM-15; ST101/CTX-M-1 and ST40/CTX-M-1. Three of the CTXR isolates were CMY-2-producers (two of them were ESBL-positive and one ESBL-negative), typed as ST429 and ST6448, and obtained in healthy or sick cats. The phylogenetic groups A/B1/D/clade 1 were detected among ESBL- and qAmpC-producing isolates of cat origin. Regarding the 22 CTXR K. pneumoniae isolates obtained from blood cultures, ESBL activity was detected in 54% of the isolates, and it was associated with CTX-M-15 and/or a SHV-type (blaSHV-27 or blaSHV-106 variants). Fourteen K. pneumoniae isolates showed imipenem resistance and 11 of them carried the KPC2/3 (carbapenemase gene). Four different genetic lineages were found among K. pneumoniae of blood origin: ST348, ST11, ST147, and ST15. ESBL activity was detected in all 62 E. coli and K. pneumoniae clinical isolates from different origins, other than blood. Considering the 24 ESBL-producing K. pneumoniae isolates, 18 of them carried a blaCTX-M gene (blaCTX-M-15 or blaCTX-M-55) and 14 carried an ESBL of SHVtype (blaSHV-12 or blaSHV-27). Ten K. pneumoniae isolates carried the blaKPC2/3 gene (always associated with ESBL genes) and showed imipenem-resistance. The K. pneumoniae genomic population structure was dominated by three international lineages: ST15, ST147, and ST280. Furthermore, the 38 ESBL-positive E. coli isolates obtained from different clinical origins carried in the majority of cases the blaCTX-M-15 gene (84%), ascribed to B2 phylogenetic group (84%), mostly associated with ST131 lineage and, at a lower rate, to ST410/A. Camels from the Canary Islands can be a source of ESBL-producer bacteria (3.8%), containing the widespread blaCTX-M-15 gene and belong to the lineages ST3018 (phylogroup A) and ST69 (phylogroup B1). Similarly, ESBL-producing E. coli isolates were detected in 22.7% of the wild vultures tested, carrying blaCTX-M genes (blaCTX-M-15 and blaCTX-M-55). These vulture isolates were ascribed to the following genetic lineages (ST/phylogenetic group/ESBL): ST515/B1/CTX-M-15, ST1290/A/CTX-M-15, ST38/D/CTX-M-15, ST457/D/CTX-M-55, and ST6448/B1/CTX-M-55. Conclusions: To our knowledge, this is the first study involving a complete approach to β-lactamases-producing Enterobacteriaceae among sick and healthy pets from Portugal, as well as Portuguese clinical isolates and wild animals from the Canary Islands. These isolates are associated with different international clones in which CTX-M-15 is the most frequent βlactamase in all studied ecosystems, also highlighting the KPC2/3 gene in Portuguese clinical isolates. These findings might represent a public health problem due to the proximity of pets (dogs and cats) with humans from a One Health perspective.Introdução: A resistência aos antibióticos é considerada uma problemática de saúde pública, provocada pelo uso excessivo ou incorreto deste tipo de medicamentos em medicina humana e veterinária. As bactérias comensais do trato gastrointestinal, como Escherichia coli, são um reservatório de genes de resistência a antibióticos que podem ser transferidos para outras bactérias, quer comensais quer patogénicas, sendo Klebsiella pneumoniae considerada uma das principais bactérias patogénicas associadas às infeções nosocomiais. Escherichia coli e K. pneumoniae produtoras de β-lactamases de espectro estendido (ESBL) são consideradas uma das maiores preocupações em saúde pública. Este trabalho tem como objetivo compreender os mecanismos genéticos associados aos isolados de K. pneumoniae e E. coli produtores de ESBL e carbapenemos em animais de estimação, animais selvagens e humanos hospitalizados. Materiais e Métodos: Um total de 502 amostras fecais foram obtidas de 361 cães (127 cães saudáveis e 234 cães doentes) e 141 gatos (43 gatos saudáveis e 98 gatos doentes). Todas as amostras foram recolhidas entre abril e agosto de 2017, obtendo-se uma amostra / animal. As amostras de animais doentes foram obtidas a partir de animais de estimação hospitalizados em sete hospitais/centros clínicos localizados em diferentes cidades do território português; as amostras fecais de animais saudáveis foram recolhidas pelos seus donos. Estas amostras foram processadas em agar MacConkey suplementado com 2µg / mL de cefotaxima (CTX) ou 0,8µg / mL de meropenemo (MRP) para isolados de E. coli resistentes a cefotaxima (CTXR ) e isolados de K. pneumoniae resistentes a carbapenemos (CPR ) em animais de estimação, respetivamente. Além disso, foram recolhidas amostras fecais de 22 crias de abutres saudáveis em Lanzarote e Fuerteventura (Ilhas Canárias) durante o mês de julho de 2019; estas amostras foram semeadas em agar MacConkey suplementado com cefotaxima (2 μg / ml). Um total de 58 amostras fecais foram obtidas de camelos aparentemente saudáveis usados em atividades turísticas nas ilhas de Gran Canaria (n = 32) e Fuerteventura (n = 26) durante o mesmo período. Por outro lado, 84 isolados de K. pneumoniae e E. coli resistentes a cefotaxima / ceftazidima foram obtidos de diferentes amostras clínicas humanas (sangue, urina, secreção brônquica, pus, entre outros) num hospital localizado no Norte de Portugal (Centro Hospitalar de Trás os Montes e Alto Douro, CHTMAD, Vila Real). O método MALDI-TOF-MS foi utilizado para a identificação de E. coli e K. pneumoniae, e o teste de sensibilidade antimicrobiana foi realizado por disco-difusão, de acordo com as indicações do CLSI (2019). A deteção de β-lactamases e outros genes de resistência a antibióticos, grupos filogenéticos e estudo molecular MLST (para isolados selecionados) foram realizados por PCR / sequenciação específicos. Resultados: Os isolados de K. pneumoniae foram obtidos a partir do agar MacConkey suplementado com MRP em 16 dos 361 cães analisados (4,4%, 13 de cães doentes e 3 de cães saudáveis) e um isolado/amostra foi caracterizado posteriormente. Três desses isolados mostraram reduzida suscetibilidade/ resistência a carbapenemos, apesar de não terem sido detetados genes de carbapenemases; 15 desses 16 isolados eram produtores de ESBL (93,8%) e possuíam os genes codificadores CTX-M-15 e / ou SHV-28, associados em alguns casos aos clones de alto risco ST307 e ST15. Quarenta e sete isolados de E. coli produtoras de ESBL foram detetados entre os 51 isolados de CTXR (92,2%), obtidos de 32 cães doentes e 15 cães saudáveis (frequências de 13,7% e 11,8%, respetivamente). Foram ainda detetadas diferentes variantes do gene blaCTX-M entre os 45/47 produtores de ESBL: blaCTX-M-15 (n = 26), blaCTX-M-1 (n = 10), blaCTX-M-32 (n = 3), blaCTX-M-55 (n = 3), blaCTX-M-14 (n = 2) e blaCTX-M-variante (n = 1). Embora menos frequente, a β-lactamase CMY-2 também foi encontrada num isolado ESBLpositivo (associado ao gene CTX-M-15) e em 2 isolados adicionais de E. coli de origem canina (CTXR ESBL-negativo). Foram identificados dez tipos de sequências diferentes nos isolados de cães (ST / grupo filogenético / β-lactamase): ST131 / B2 / CTX-M-15, ST617 / A / CTX-M55, ST3078 / B1 / CTX-M-32 , ST542 / A / CTX-M-14, ST57 / D / CTX-M-1, ST12 / B2 / CTX-M-15, ST6448 / B1 / CTX-M-15 + CMY-2, ST5766 / A / CTX -M-32, ST115 / D / CMY2 e um novo-ST / D / CMY-2. Por outro lado, os isolados de E. coli produtoras de qAmpC (CMY-2) (n = 3, 2,1%) e ESBL (n = 11, 7,8%) foram obtidos de gatos saudáveis e doentes. No entanto, K. pneumoniae não estava presente nas amostras analisadas de gatos. Os isolados de E. coli possuíam os seguintes genes ESBL: blaCTX-M-1 (n = 3), blaCTX-M-15 (n = 3), blaCTX-M-55 (n = 2), blaCTX-M-27 (n = 2) e blaCTX-M-9 (n = 1). Além disso, foram identificados seis tipos de sequências diferentes nos produtores de ESBL em gatos (tipo de sequência / ESBL associado): ST847 / CTX-M-9, CTXM-27, CTX-M-1; ST10 / CTX-M-15, CTX-M-27; ST6448 / CTX-M-15, CTX-M-55; ST429 / CTXM-15; ST101 / CTX-M-1 e ST40 / CTX-M-1. Três dos isolados de CTXR eram produtores de CMY-2 (dois deles eram ESBL-positivos e um ESBL-negativo), tipificados como ST429 e ST6448, e obtidos em gatos saudáveis ou doentes. Os grupos filogenéticos A / B1 / D / clade 1 foram detetados entre isolados produtores de ESBL e qAmpC de origem felina. Em relação aos 22 isolados de K. pneumoniae CTXR obtidos a partir de hemoculturas, a atividade de ESBL foi detetada em 54% dos isolados e estava associada à presença dos genes CTX-M-15 e / ou tipo SHV (blaSHV-27 ou blaSHV-106 variantes). Catorze isolados de K. pneumoniae apresentaram resistência ao imipenemo e 11 deles possuíam o gene KPC2/3. Um total de quatro linhagens genéticas diferentes foram encontradas nos isolados de K. pneumoniae de origem sanguínea: ST348, ST11, ST147 e ST15. A atividade de ESBL foi detectada em todos os 62 isolados clínicos de E. coli e K. pneumoniae de diferentes origens, exceto em sangue. Considerando os 24 isolados de K. pneumoniae produtores de ESBL, 18 deles possuíam o gene blaCTX-M (blaCTX-M-15 ou blaCTX-M55) e 14 eram positivos para um tipo de SHV (blaSHV-12 ou blaSHV-27). Dez isolados de K. pneumoniae possuíam o gene blaKPC2/3 (sempre associado a genes ESBL) e apresentavam resistência ao imipenemo. A população genómica de K. pneumoniae foi dominada por três linhagens internacionais: ST15, ST147 e ST280. Além disso, os 38 isolados de E. coli produtores de ESBL obtidos de diferentes origens clínicas eram positivos para o gene blaCTXM-15 (84%), atribuído ao grupo filogenético B2 (84%), principalmente associado à linhagem ST131 e, em menor prevalência, a ST410 / A. Os camelos das Ilhas Canárias podem ser considerados reservatórios de bactérias produtoras de ESBL (3,8%), contendo o gene blaCTX-M-15 amplamente disseminado e associado às linhagens ST3018 (filogrupo A) e ST69 (filogrupo B1). Da mesma forma, os isolados de E. coli produtores de ESBL foram detetados em 22,7% dos abutres selvagens testados, sendo portadores do gene blaCTX-M (blaCTX-M-15 e blaCTX-M-55). Estes isolados de abutres foram classificados com as seguintes linhagens genéticas (ST / grupo filogenético / ESBL): ST515 / B1 / CTX-M-15, ST1290 / A / CTX-M-15, ST38 / D / CTX-M-15, ST457 / D / CTX-M-55 e ST6448 / B1 / CTX-M-55. Conclusões: Este é o primeiro estudo que envolve uma abordagem completa de Enterobacteriaceae produtoras de β-lactamases em animais domésticos saudáveis e doentes de Portugal, bem como em isolados clínicos humanos portugueses, e também em animais selvagens das Ilhas Canárias. Estes isolados estão associados a diferentes clones internacionais nos quais CTX-M-15 é a β-lactamase mais frequente em todos os ecossistemas estudados, destacando-se também o gene KPC2/3 em isolados clínicos humanos portugueses. Estes resultados promissores podem representar um problema de saúde pública devido à proximidade de animais de estimação (cães e gatos) com humanos do ponto de vista da One Health (uma só Saúde)

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