Sapienza University of Rome

Pubblicazioni Aperte Digitali Interateneo Sapienza
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    Functional characterization of genes that control structure and dynamics of centrosomes in Drosophila

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    The general aim of my PhD thesis work was the characterization of Drosophila male meiosis, a widely used model system for genetic and molecular dissection of cell division. I first asked why the meiotic spindle of Drosophila males is much larger then the female meiotic spindle or the mitotic spindles of various cell types. I hypothesized that such large size reflects the availability of a large amount of tubulin stored in spermatocytes to be used postmeiotically for sperm tail assembly. To test this hypothesis, I examined male meiosis in 6 Drosophila species with dramatically different sperm flagella, ranging in length from 0.3 mm in D. persimilis to 58.3 mm in D. bifurca. I found that males of different species exhibit striking variations in meiotic spindle size, which positively correlate with sperm length, with D. bifurca showing a 30-fold larger spindle than D. persimilis. This suggests that primary spermatocytes of Drosophila species manufacture and store amounts of tubulin that are proportional to the length of the sperm tail and use these tubulin pools for spindle assembly. My findings also highlight an unsuspected plasticity of the meiotic spindle and suggest that the fidelity of chromosome segregation is largely independent of spindle size (Lattao et al. 2012, in press). I also performed a screen aimed at the identification of new D. melanogaster genes controlling centrosome structure and/or behavior. To facilitate this screen I developed two novel Tubby-marked balancer chromosomes that allow unambiguous recognition of mutant larvae from their heterozygous non-mutant siblings (Lattao et al., 2011). My screen led to the isolation of two mutants with abnormal numbers of centrosomes: molti asters (most) and fragile centrioles (fract). I characterized the meiotic phenotypes of these mutants and cloned the genes they specify. most encodes 749 aa transcription factor of the TFIID superfamily, with homology with the TBP-related factors. Mutations in most cause an arrest in the first meiotic prometaphase/metaphase and often exhibit multiple centrosomes in the aberrant meiotic figures. Thus, most belongs to a class of genes collectively known as meiotic arrest genes. These genes identify two independent pathways required for meiotic progression and spermatid differentiation. Gene expression analyses allowed definition of the most function, suggesting that it regulates the translation of twine (cdc25) mRNA, without affecting the spermatid differentiation pathway. My results also suggest that the centrosome phenotype of most mutants is likely to be an indirect consequence of meiotic arrest. Cytological analysis showed that premeiotic spermatocytes of fract mutants display 2 centrioles at each cell pole. However, meiotic ana-telophase I figures of the same mutants often exhibit two regular centrioles at one cell pole but only one at the opposite pole, suggesting that fract is required for centriole stability during the meiotic division. fract encodes a 322 aa testis-specific protein that contains WD repeats. The EMS-induced fract1 mutant allele I characterized carries a stop codon that truncates the Fract protein into a 298 aa polypeptide. A polyclonal antibody raised against Fract decorates the distal end of male meiotic centrioles. This specific staining pattern is lost in fract mutants, where the antibody decorates the entire centriole, suggesting that the C-terminal region of Fract is crucial for its correct localization. Collectively, these results strongly suggest that fract does not play an essential role in centriole duplication or assembly but it is instead required for the maintenance of centriole integrity during male meiosis, a function never described in other organisms

    La pubblicazione delle intercettazioni telefoniche

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    STORIA E CULTURA RELIGIOSA NELLA SPAGNA DEL SIGLO DE ORO

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    Tesi di Dottorato: STORIA E CULTURA RELIGIOSA NELLA SPAGNA DEL SIGLO DE ORO: L'AUTO SACRAMENTAL COME STRUMENTO DI (CONTRO) RIFORMA CATTOLICA – dott.ssa Maria Pilar Nogues Bruno La ricerca di tesi intende delineare alcuni risultati di studio sull'auto sacramental come genere letterario e di mobilitazione teologica - per il rafforzamento dell’ortodossia cattolica e contro l'eresia - che ha caratterizzato una fase importante della storia e della cultura della Spagna moderna, tra XVI e XVII secolo. Il neo-cattolicesimo tridentino, "controriformistico" e "riformatore" insieme, trova infatti nella Spagna degli Austria (marcata fortemente dalla passione religiosa del re Filippo II) un esempio straordinario per inquadrare quali strumenti le élite misero in campo per mobilitare il popolo alla riscoperta della fede "contro" l'eresia. Proprio nel genere degli autos si cimentarono infatti grandi autori del tempo, che entro i limiti del genere diedero un'impronta particolare alle proprie opere del genere. Tra questi Lope de Vega, di grande notorietà e influenza a quel tempo, ne è uno degli esempio più autorevoli. Il Cinquecento è il secolo che alimenta con il suo pensiero e la sua azione alcuni eventi che stanno alla base del mondo moderno. Esso introduce, con il Rinascimento,un nuovo modo di sentire, di pensare e quindi di agire, dà all’uomo fiducia nelle sue forze, cambia il modo in cui questi percepisce il mondo terreno e dunque anche il rapporto con l’aldilà. Sul piano politico, con la formazione dello Stato moderno, assoluto, laico e territoriale, lacerà le pastoie sociali e politiche del Medioevo, svuotando di significato le strutture politiche caratteristiche di quel mondo, l’Impero e il Papato, libera forze sociali nuove dalla dipendenza ecclesiastica e spinge alle guerre di predominio. D’altra parte con la Riforma protestante si risponde a un diffuso bisogno di fede cristiana che la Chiesa di Roma, con il suo formalismo rituale e il suo rigore gerarchico non sa e non può più soddisfare, è altrettanto vero che il successo del movimento sia dovuto all’interesse di molti gruppi politici e sociali interessati a togliere alla Chiesa i numerosi privilegi di cui essa gode e a incamerarne una parte delle ricchezze. L’incontro tra nuova politica rinascimentale e riforma religiosa, è però - al di là della sopravalutazione che ne fa la tradizionale storiografia liberale - soltanto congiunturale. La Riforma è stata vista da alcuni studiosi come l’aspetto religioso della grande rivoluzione dell’individualismo rinascimentale, che sostituì la coscienza del singolo all’autorità e alla giurisdizione della Chiesa romana, non si può negare che per molti altri aspetti il luteranesimo sia conservatore A questo vasto movimento segue la reazione cattolica. Come nel caso della Riforma protestante, anche la riforma cattolica, o Controriforma, è stata oggetto di un vasto dibattito storiografico, che ha le sue origini fin dal XVII secolo, quando vedono la luce le opere sul Concilio di Trento. Storici protestanti e liberali hanno addebitato alla Controriforma la definitiva frattura religiosa dell’Europa e la responsabilità di avere irrigidito la Chiesa, congelando la fede nel formalismo, di aver distrutto la libertà di coscienza, di aver trasformato l’Ecclesia in un organismo temporale e giuridico. Secondo autorevoli opinioni, i risultati della restaurazione cattolica sono dubbi. Nei Paesi non cattolici essa non riuscì a “fermare la propagazione di nuove idee filosofiche e scientifiche; e nei popoli rimasti fedeli a Roma compromise quel fervore religioso che in essi era nato spontaneamente”; d’altra parte essa fu determinata in gran parte dalla volontà dei popoli cattolici di mantenere in vita le forme della religiosità popolare” . Secondo gli studi più accreditati , l’auto sacramental nasce come elemento della riforma cattolica con il fine di accrescere e rafforzare la vita religiosa; con questo obiettivo gli autos presentarono un’inclinazione catechistica diretta al popolo: fu così che in Spagna riemersero forme quasi “medievali” che facevano in modo che il popolo potesse comprendere i misteri fondamentali della religione. Questo genere poetico-teatrale, sviluppatosi anteriormente al movimento di riforma protestante, non nasce dunque come strumento di lotta contro l’eresia ma trova sicuramente un forte impulso nella reazione allo spirito eretico . La discussione a proposito della relazione tra i conflitti religiosi dell’epoca con gli autos è arrivata a conclusioni differenti. Alcuni spiegano la ragione dell’essere degli autos riferendosi alle formule esposte nel Concilio di Trento che definiscono la festa del Corpus come manifestazioni del concetto cattolico dell’eucarestia opposta alle opinioni eretiche . In tal modo la festa del Corpus presenterebbe in generale una piega “controriformista” e per questo il contenuto concettuale eucaristico degli autos si porrebbe in opposizione al protestantesimo. Al tempo stesso si ammette il fatto che queste opere, nella loro origine, non avessero alla base questa concezione controriformista, ma in seguito questa emerge con una valenza grosso modo esplicita. La venerazione dell’eucarestia è parte tanto della stessa riforma della Chiesa, del suo proposito rinnovatore, come della lotta contro le idee eretiche e il loro sviluppo: la riforma cattolica infatti “punta alla sostanza della Chiesa e del cristianesimo” . In tal modo la festa del Corpus presenterebbe in generale una piega “controriformista” e per questo il contenuto concettuale eucaristico degli autos si posizionerebbe in opposizione al protestantesimo. Al tempo stesso si ammette il fatto che queste opere, nella loro origine, non avessero alla base questa concezione controriformista, ma in seguito questa emerge con una valenza grosso modo esplicita. La venerazione dell’eucarestia è parte tanto della stessa riforma della Chiesa, del suo proposito rinnovatore, come della lotta contro le idee eretiche e il loro sviluppo. In Spagna la celebrazione del Corpus Christi proliferò dall’epoca di Carlo V e non ebbe la stessa riuscita negli altri paesi europei. Si concretizzò in generi poetico-teatrali popolari, come l’auto sacramental, attraverso la penna dei più grandi autori e letterati dell’epoca. L’esempio del genere e lo studio di caso dell’autore (Lope de Vega) permettono di identificare e analizzare elementi e fattori di grande interesse per la conoscenza della fede popolare e del pubblico della Spagna dell’epoca (fine XVI- inizio XVII secolo)

    Profili problematici dell'esercizio decentrato della funzione amministrativa comunitaria

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    The thesis discusses problematic aspects of coordinated administration in the enforcement of the EU Competition Rule

    CORTICAL EEG RHYTHMS IN SUBJECTS WITH NEURODEVELOPMENTAL DISORDES

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    DEVELOPMENT OF AN INNOVATIVE PROCESS FOR THE SELECTIVE RECOVERY OF METALS FROM SPENT REFINERY CATALYSTS

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    In the present work was studied and developed the treatment of spent refinery catalysts to recovery valuable metals contained in them. It was hypothesized that, using the sulfide precipitation could be possible obtain a selective precipitation of molybdenum, nickel, vanadium and aluminium after the early solubilisation of them by leaching or bioleaching processes. The refinery catalysts are used extensively in the hydro-treating processes for the production of clean fuels from fractions distilled from crude oil. The hydro-treating processes include the elimination of nitrogen compounds, sulphur and metals from charged of the catalytic cracking. The metals present in the charged cause the poisoning of the catalysts reducing their activity; the catalysts deactivated are classified as solid wastes by the United States Environmental Protection Agency (USEPA). Environmental regulations and interesting amounts of strategic metals guide towards the development of new feasible and sustainable process not only to treat this waste but also to recover valuable metals such as V, Al, Ni and Mo. The work was divided in two phases: the first phase consisted in the solubilization of spent refinery catalysts by bioleaching processes with sulphur-oxidising bacteria or leaching process by sulphuric acid. Once solubilised the spent catalysts, the metal-containing wastewater was treated by adding of sulfide source and sodium hydroxide to precipitate and recovering the four metals at different pH values (second phase). The sulfide sources used were Na2S chemical compound and H2S gas produced by sulfate-reducing bacteria in a lactate feed anaerobic baffled reactor. Tests were conducted to determine whether could be possible obtain the selective precipitation of all metals presents at different pH values as sulfide (molybdenum and nickel) and as hydroxide (aluminum and vanadium); the molybdenum precipitation occurred at low pH value 0.5, nickel at pH value 3.5 aluminum at pH value 4 and vanadium at pH value 6. The pH values were settled by preliminary solubility tests and preliminary chemical speciation studies conducted with Medusa software. The selective precipitation tests were done using two synthetic base metals solution called leach liquor and bioleach liquor (solution 1 and solution 2 respectively) simulating the typical metals concentration of liquor after an operation of leaching and bioleaching processes respectively. About the experiments conducted using as sulfide source Na2S, the percentages of precipitation were higher than 60% for all metals investigated (Al= 65 %; Mo= 87 %; Ni= 52 %; V= 64 %;) in the synthetic bioleaching solution (solution 2) and in the synthetic leaching solution (Al= 55 %; Mo= 75 %; Ni= 54 %; V= 67 %;) (solution1). The indices of purity of precipitates were calculated considering the total weight of metal target precipitated (for example the molybdenum at pH 0.5) on the total weight of precipitates (Mo, Ni, V, Al) at pH 0.5; in both cases of bioleaching synthetic solution and leaching synthetic solution the purity indices of molybdenum were 0.86 and 0.70 at pH= 0.5 for leaching and bioleaching synthetic solutions respectively; while about the nickel the purity indices were 0.76 and 0.92 at pH=3 for leaching and bioleaching synthetic solutions. Regarding the experiments conducted using as sulfide source the H2S gas produced by anaerobic baffled reactor containing sulfate-reducing bacteria the average sulfate reduction rate in the ABR was 130 mg L-1 d-1 and the average dissolved sulfide concentration 190 mg L-1 mg L-1. The precipitations of Mo at target pH of 0.5 was 36-72% and V precipitation was 64-70% at pH 6 depending of the initial concentrations of them. Percent Ni precipitation was up to 40 % at target pH of 3.5. The purity indices of Mo and V precipitates were 0.97 and 0.90 at pH 0.5 and pH 6, respectively. Were also conducted the technical and economic analysis processes by Super Pro simulating chemical process software on four processes (C-C: leaching solution-Na2S; C-B: leaching solution- H2S; B-C: bioleaching solution- Na2S; B-B: bioleaching solution-H2S) were determinate the payback time of the processes (PBT= time of return of capital invested), the production of liquid waste, the percentages of base metals recovered and the total recovery of matter. The results obtained shown that the process C-C was the best among the all factors investigated (PBT, production of liquid waste, percentages of base metals recovered and total recovery of matter). The PBT of C-C process was less than 2 years, the recovery of base metals were all higher than 80%, the total recovery of matter was around the 90% and the production of liquid waste was around 3 tons/ tons of catalysts treated

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