KeiO Academic Resource Archive

ウワモリ, ヒロユキ

Uwamori, Hiroyuki

上森, 寛元

Onchippu soshiki kōgaku ni yoru seitai gai Neurovascular Unit moderu no kaihatsu

ヤマシタ, タツヤ

Yamashita, Tatsuya

山下, 達也

Gasu kahōwasuichū no gasu kihōkaku oyobi onkyō kyabitēshon ni kansuru jikken kenkyū

ヤブモト, マサノリ

Yabumoto, Masanori

薮本, 将典

慶應義塾大学法学部准教授

Associate professor of legal history, Faculty of Law, Keio University

Preface : Japan Brazil international symposium 2016

裏表紙 ; 英文目次

イワイ, マキ

Iwai, Maki

祝井, 麻希

論文審査の要旨及び担当者 
 
報 告 番 号 氏 名 甲 乙 第     号 
（ 論 文 審 査 の 要 旨 ） 
論文題名：Membrane protein CD9 is repositioned and released to enhance uterine function 
     （子宮内膜上皮の膜タンパク質CD9は再配置・細胞外分泌によって子宮機能を 
      制御する） 
 
 
 マウス子宮内膜上皮細胞と子宮内腔液中の膜タンパク質CD9の動態を解析した結果、性
周期に伴うCD9の子宮内膜上皮での局在変化と細胞外分泌が、子宮内膜上皮細胞の膜構造
とミトコンドリア数に影響を及ぼすことが明らかとなった。 
 審査では、まずトランスジェニックマウスについて問われ、卵特異的マウスZP3プロ
モーターを用い、CD9の細胞内領域N末端にEGFPを融合させたタンパク質を発現するト
ランスジェニックマウスを使用したと回答された。子宮内膜の免疫組織化学について、
CD9タンパク質が移動しているのか、共局在分子を含め細胞内移動のメカニズムについて
問われた。例えば、CD9 mRNAを高発現する線維芽細胞ではCD9タンパク質が検出され
ず、CD9タンパク質を高発現する胚性幹細胞ではCD9 mRNAが検出されないことから、
CD9タンパク質を発現している子宮内膜上皮細胞では、転写レベルの変化ではなく、タン
パク質レベルでCD9が移動していると推測されると回答された。また着床期の子宮内膜
は、基底膜側に存在するインテグリンv3を介して極性が変化することが知られてお
り、着床期にCD9は、基底膜側の共局在分子インテグリンとの結合が減弱し、頂端側に移
動すると推測されると回答された。発情期のCD9の基底膜側への局在と細胞外分泌は矛盾
するのではないかと問われた。細胞膜上に発現しているCD9に比べ、CD9の細胞外分泌は
僅かであり、結果基底膜側への局在は保持されていると回答された。また基底膜側に局
在するCD9に、細胞質のCD9も含まれるか問われた。細胞膜内、細胞質内で分画した上で
のCD9の検討は行っていないが、CD9はエンドソームに含まれるものの、その量は細胞膜
に比べて微量であり、ほとんどのCD9タンパク質は細胞膜に含まれると考えられると回答
された。透過型電子顕微鏡解析について、細胞外微粒子として分泌されている根拠、コ
ントロールについて問われた。透過型電子顕微鏡解析において、CD9は脂質二重膜構造を
有さない構造体として分泌されるとの結論に留まるが、脂質解析にて細胞外微粒子に特
異的なホスファチジルエタノールアミンが検出されており、細胞外微粒子としての分泌
を確認していると回答された。粘液の可能性を問われたが、脂質解析からは細胞膜、特
に内側に存在するリン脂質が多く含まれるため、線状を呈する分泌型粘液とは形態が異
なると回答された。また卵子の細胞外微粒子をポジティブコントロールとしており、CD9
欠損マウスの子宮内腔液の解析は今後の検討が必要と回答された。マウス胚性幹細胞や
月経血由来ヒトiPS細胞の培養以外の初代培養での検討有無が問われたが、予備実験のマ
ウス子宮内膜上皮細胞と間質細胞の共培養において、in vivoの再現が困難であったた
め、初代培養でのCD9検証を行わなかったと回答された。 
 以上、検討すべき課題を残すものの、性周期に応じたCD9タンパク質の再配置と細胞外
分泌が、子宮内膜上皮の膜構造とミトコンドリア代謝に影響を及ぼすことを明らかにし
た点において有意義な研究であると評価された。  
論文審査担当者   主 査 産婦人科学 田 中   守 
  産婦人科学 青 木 大 輔 病理学 坂 元 亨 宇 
   小児科学 長谷川 奉 延 
学力確認担当者： 審査委員長：青木 大輔 
 試問日：平成３１年 ２月１８日 
祝 井 麻 希 


Shikyū naimaku jōhi no maku tanpakushitsu CD9 wa saihaichi saibōgai bunpitsu ni yotte shikyū kinō o seigyosuru

キタ, モトコ

Kita, Motoko

喜田, 素子

 
要 約 
報 告 番 号 氏 名 甲 乙 第     号 
（ 内容 の要 旨 ） 
主 論 文 題 名 
 肥満は、心血管疾患につながるメタボリックシンドローム発症の原因として、その予
防・治療は重要である。肥満はエネルギー摂取と消費の正のバランスにより発症する
が、近年、エネルギー消費調節において、褐色脂肪細胞および白色脂肪細胞の褐色化
（Beige細胞）が、着目されている。フォークヘッド転写因子Foxo1は、脂肪組織におい
てエネルギー消費を抑制することが報告されている（Nakae J et al. Diabetes. 2008;57:563
-76)。私たちは、脂肪細胞におけるFoxo1の結合蛋白としてZinc-finger型転写因子Zfp238
を同定し、Zfp238がFoxo1の転写活性を抑制することを確認した。Zfp238は白色及び褐色
脂肪組織に発現を認め、白色脂肪細胞株3T3-L1細胞、褐色脂肪細胞株T37i細胞のいずれ
においても分化につれて発現が増加した。組織特異的Zfp238ノックアウトマウスと脂肪
組織特異的なAdiponectin Creマウスを用い、脂肪組織特異的Zfp238ノックアウトマウス
（Adipo-Zfp238KO）を作製した。Adipo-Zfp238KOは、普通食で20週齢より有意に体重が
増加し、耐糖能異常、インスリン抵抗性を認めた。さらに、酸素消費量、および、寒冷
刺激による直腸温低下が有意に増強し、エネルギー消費の低下が考えられた。Adipo-
Zfp238KOでは、寒冷刺激、および、3受容体刺激薬である、CL316243投与により、皮下
脂肪組織において、Ucp1遺伝子およびタンパク発現が有意に低下していた。Zfp238ノッ
クダウン3T3-L1細胞では、31度での低温培養及びForskolin刺激によるUcp1遺伝子発現誘
導は有意に抑制された。一方、Zfp238過剰発現3T3-L1細胞では、Forskolin刺激でUcp1遺
伝子発現は有意に上昇した。さらに、レトロウィルスベクターを用いて、Foxo1/Zfp238
ダブルノックダウン3T3-L1細胞を作製した。31度の低温培養及びForskolin刺激におい
て、Foxo1/Zfp238ダブルノックダウン3T3-L1細胞では、Ucp1発現が正常化していた。
ChIPアッセイにより、Zfp238過剰発現3T3-L1細胞において、Zfp238のUcp1遺伝子の
enhancer領域への結合を認め、Zfp238がUcp1遺伝子発現に直接関与している可能性が考
えられたが、Ucp1遺伝子のpromoter領域にはFoxo1結合配列が、いくつか散見されるが、
Zfp238結合配列は認められない。 
 以上のことから、Zfp238は、Foxo1との結合を介し、その活性を何らかのメカニズムで
抑制することにより、Ucp1発現調節を行ない、熱産生プログラムを制御すると考えられ
た。 
喜 田 素 子 
Zfp238 Regulates the Thermogenic Program in Cooperation with Foxo1 
（Zfp238はFoxo1を制御し熱産生プログラムを調節する） 


Zfp238 wa Foxo1 o seigyoshi netsu sansei puroguramu o chōsetsusuru

 
主 論 文 要 旨 
報 告 番 号 氏 名 甲 乙 第     号 
（ 内容 の要 旨 ） 
主 論 文 題 名 
 先行研究で、膜貫通型タンパク質CD9はあらゆる細胞で発現し、受精、特に配偶子融合
において、卵側因子として必須であることが報告されている。また、CD9はエクソソーム
よりさらに微細な細胞外微粒子の構成因子として働き、卵の細胞膜からCD9を含む細胞外
微粒子が放出され、精子頭部に作用することにより、精子と卵の融合を促進する。さら
にマウスの子宮内腔液を用いた検証実験から、子宮内膜上皮細胞からもCD9を含む細胞外
微粒子が放出され、出産後の子宮内膜再生に寄与することが報告されている。しかしな
がら、子宮内膜上皮細胞からCD9を含む細胞外微粒子が放出される詳細なメカニズムにつ
いては未だに解明されていない。そこで子宮内膜上皮細胞と子宮内腔液中のCD9の動態を
解析することにより、CD9を含む細胞外微粒子の分泌のメカニズムを解明することを目的
とした。 
 マウス子宮内膜上皮細胞の性周期に伴うCD9の局在変化を検討したところ、発情期と発
情間期では基底膜側にCD9が局在するのに対し、着床期では基底膜と対側の子宮内腔側に
局在しており、性周期に応じたCD9の再配置が起こることが明らかとなった。さらに着床
期のCD9の局在と胚の着床部位は一致していた。またマウス子宮内腔液中でのCD9の分泌
量を、性周期別にイムノブロット法により解析したところ、全性周期を通じCD9の分泌を
認めるものの、発情期のマウス子宮内腔液中で最も多くのCD9が検出された。また、子宮
内膜上皮細胞におけるCD9含有量を性周期別に検証したところ、発情期で最も低下してい
た。以上の結果から、発情期に子宮内膜上皮細胞からCD9は分泌され、全性周期を通じて
子宮内腔液中に含まれることで、子宮内膜上皮の機能維持に関わっていることが推測さ
れた。一方、マウス胚性幹細胞（ES細胞）や月経血由来ヒトiPS細胞の培養上清ではCD9
は検出感度以下であった。すなわち性周期に応じて子宮内膜上皮細胞から特異的にCD9が
分泌されることが明らかとなった。またゲルろ過クロマトグラフィーを用いた検証によ
り、ヒトの子宮内腔液中においてもCD9を含む細胞外微粒子が分泌されている可能性が強
く示唆された。さらに、マウス子宮内膜上皮の透過型電子顕微鏡解析より、CD9遺伝子欠
損型マウスから採取した子宮内膜上皮細胞では野生型と比較し、微絨毛が粗かつ短小化
しており、また、子宮内膜上皮細胞内のミトコンドリア数が優位に減少していることが
明らかとなった。 
 これらの解析結果から、子宮内膜上皮細胞の膜タンパク質CD9の再配置と細胞外分泌
が、子宮内膜上皮細胞の膜構造とミトコンドリア数に影響を及ぼし、さらに子宮内膜の
再生により内膜機能を制御することが明らかとなった。今後、ヒトでの子宮内膜の再生
と着床機構の解明に努めたい。これらの研究を通じて不妊症、特に着床不全の治療薬と
しての応用が可能であると考えている。  
祝 井 麻 希 
Membrane protein CD9 is repositioned and released to enhance uterine function 
（子宮内膜上皮の膜タンパク質CD9は再配置・細胞外分泌によって子宮機能を制御する）  


ヤマモト, ノブコ

Yamamoto, Nobuko

山本, 修子

Chūon\u27iki shōgaigata kan\u27on nanchō kanja ni okeru TECTA idenshi hen\u27i no hindo

オウジ, トミト

Ōji, Tomito

王子, 富登

論文審査の要旨及び担当者 
 
報 告 番 号 氏 名 甲 乙 第     号 
（ 論 文 審 査 の 要 旨 ） 
論文題名：Modified Lengthening Temporalis Myoplasty Involving an Extended Lazy-S 
     Incision to Avoid Facial Scar Formation 
     （顔面に瘢痕を残さない延長耳下腺S状切開による島状側頭筋移行術） 
 
 
 島状側頭筋移行術は顔面神経麻痺に対する動的再建（笑いの再建）であるが、島状側
頭筋移行術原法で用いる鼻唇溝切開は顔面に目立つ瘢痕を残す。本研究では、鼻唇溝切
開の代わりに延長S状耳下腺切開を用いた島状側頭筋移行術変法に関して、固定屍体を用
いた解剖検索及び臨床使用例での検討を行った。その結果、変法の操作面と整容面にお
ける優位性が示唆された。 
 審査ではまず、本研究の学問的な意義を問われた。これに対して、延長耳下腺切開を
用いた島状側頭筋移行術変法については初の臨床報告であり、顔面神経麻痺の動的再建
術の進歩として意義があると回答された。 
 次に、島状側頭筋移行術原法の鼻唇溝切開の利点と瘢痕についての質問がなされた。
鼻唇溝切開の利点は側頭筋腱の皮下への縫合が容易であることだが、術後に作成された
鼻唇溝が不整となり瘢痕と一致しないこともあるので、大きな利点とは言えない。瘢痕
の定量的評価は困難だが、他文献での西洋人の鼻唇溝切開の瘢痕はあまり目立たない印
象であるのに対して、東洋人は皮膚の性状の差異からか瘢痕が目立つ傾向があると回答
された。 
 続いて、術式の侵襲について、具体的には延長耳下腺切開の侵襲性と下顎骨筋突起を
離断する必要性に関しての質問がなされた。鼻唇溝切開より延長耳下腺切開の方が剥離
範囲が広いが、双方で血腫などの合併症の頻度に差はなく、手術時間も有意差がなかっ
たことから、双方の侵襲度に大きな差はないと考えられる。また、筋突起の離断は侵襲
が高いと考えられがちであるが、術後の咬合運動には影響を及ぼさず、筋突起を離断す
ることで側頭筋腱と筋突起の骨膜を確実に連続させて腱骨膜弁とすることができ、十分
な強度と長さの側頭筋腱を縫合できる利点があると回答された。 
 再建結果及びその定量化に関しての質問がなされた。臨床例の再建結果はTerzis 
grading systemのgrade3〜5であったが、grade4と5の差は年齢やリハビリテーションのコ
ンプライアンスと関係し、grade3と4の差は術中の技術的な要素が関係していると考えて
いる。今回、再建結果として手術時間と口角滑走距離を採用したが、表情の対称性や瘢
痕を含めた整容面での結果の定量化は今後の課題と考えていると回答された。 
 最後に術後のリハビリテーションに関しての質問がなされた。術後3-4週後からミラー
フィードバックトレーニングを行う。鏡を見ながら咬む動きで口角を動かすことから始
め、徐々に半開口の状態でも口角を動かせるように訓練するリハビリテーション計画で
ある。これによって咬む動作なしでの不随意的笑いが表現可能となる例が多いと回答さ
れた。 
 以上、本研究は検討すべき課題を残しているものの、延長S状耳下腺切開による島状側
頭筋移行術変法は顔面に瘢痕を残さずに原法と同等の再建結果を得ることができ、特に
小児や女性、耳下腺切開の既往がある症例で有用性が高いことを示した点で有意義な研
究であると評価された。  
論文審査担当者   主 査 形成外科学 貴 志 和 生 
 耳鼻咽喉科学 小 川   郁 脳神経外科学  田 一 成 
    解剖学 久保田 義 顕 
学力確認担当者：岡野 栄之 審査委員長：小川  郁 
 試問日：2019年 3月25日 
王 子 富 登 


Ganmen ni hankon o nokosanai enchō jikasen Sjō sekkai ni yoru shimajō sokutōkin ikōjutsu

シイノ, ショウ

Shiino, Shō

椎野, 翔

 
主 論 文 要 旨 
報 告 番 号 氏 名 甲 乙 第     号 
（ 内容 の要 旨 ） 
主 論 文 題 名 
 腋窩センチネルリンパ節生検（Sentinel lymph node biopsy: SLNB）は、乳癌の腋窩リ
ンパ節転移を評価するための標準的手法である。同手法は、腋窩リンパ節郭清（Axillary 
lymph node dissection: ALND）と比較して低侵襲な手技であるが、上肢機能障害やリン
パ浮腫が報告されており、妊娠中の女性医師への放射線被曝が懸念される。一方、
microRNA（miRNA）は血清中で安定であることが報告されており、乳癌を検出する体液
診断としての臨床応用が期待されている。そこで、乳癌症例の血清中miRNAを用いて腋
窩リンパ節（Axillary lymph node: ALN）転移予測のモデル式を構築し、その有用性を検
討した。2008年～2014年で原発乳癌に対して初回治療としてSLNBまたはALNDを施行
し、包括的同意が得られている症例を対象とした。臨床病理組織学的情報は、診療録お
よび病理データベースより調査した。958例の血清サンプル（乳癌921例、乳腺良性腫瘍
37例）に対して、マイクロアレイ解析で網羅的にmiRNA発現量を解析した。乳癌症例
を、ランダムにトレーニング群とテスト群に分類した。トレーニング群に対して、ロジ
スティックLASSO回帰分析によってALN転移陰性予測モデル式の構築を行い、テスト群
でその有用性を検証した。全症例中、ALN転移陰性は630例であり、ALN転移陽性は291
例だった。血清miRNA2種（miR-629-3p, miR-4710）と臨床病理組織学的因子3種（浸潤
径、脈管侵襲、超音波による腋窩リンパ節転移診断）を組み合わせたモデル式が最も判
別良好であり、テスト群のAUC（an area under the receiver operating characteristic 
curve）は0.86（0.82-0.90)、感 度 0.88（0.84–0.92)、特 異 度0.69（0.61–0.76)、精 度 
0.818だった。臨床病理組織学的因子3種では、テスト群のAUCは0.81（0.76-0.86)、感度 
0.77（0.72–0.82)、特異度0.75（0.68–0.82）だった。血清miRNA2種では、テスト群の
AUCは0.75（0.70-0.80)、感度 0.74（0.69–0.79)、特異度0.66（0.58–0.74）だった。miR-
629-3p発現量に関して、ALN転移陰性例は、ALN転移陽性例より低値であり、乳腺良性
腫瘍例はさらに低値であった。miR-4710に関して、ALN転移陰性例は、ALN転移陽性例
より高値であり、乳腺良性腫瘍例はさらに高値であった。 
 以上より、術前の血清miRNAは、乳癌の腋窩リンパ節転移予測に有用であり、SLNBよ
り低侵襲な診断法として臨床応用できる可能性がある。  
 
椎 野  翔 
Serum miRNA-based Prediction of Axillary Lymph Node Metastasis in Breast Cancer 
（血清マイクロRNAを用いた乳癌の腋窩リンパ節転移予測） 


Kessei maikuroRNA o mochiita nyūgan no ekika rinpasetsu ten\u27i yosoku

Keio University

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Onchippu soshiki kōgaku ni yoru seitai gai Neurovascular Unit moderu no kaihatsu

Gasu kahōwasuichū no gasu kihōkaku oyobi onkyō kyabitēshon ni kansuru jikken kenkyū

Preface : Japan Brazil international symposium 2016

裏表紙 ; 英文目次

Shikyū naimaku jōhi no maku tanpakushitsu CD9 wa saihaichi saibōgai bunpitsu ni yotte shikyū kinō o seigyosuru

Zfp238 wa Foxo1 o seigyoshi netsu sansei puroguramu o chōsetsusuru

Shikyū naimaku jōhi no maku tanpakushitsu CD9 wa saihaichi saibōgai bunpitsu ni yotte shikyū kinō o seigyosuru

Chūon\u27iki shōgaigata kan\u27on nanchō kanja ni okeru TECTA idenshi hen\u27i no hindo

Ganmen ni hankon o nokosanai enchō jikasen Sjō sekkai ni yoru shimajō sokutōkin ikōjutsu

Kessei maikuroRNA o mochiita nyūgan no ekika rinpasetsu ten\u27i yosoku

65,328

71,603