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Evaluación de la bioactividad de ciprofloxacino y vancomicina incorporados en cementos óseos poliacrílicos
Get PDFLa inclusión de antibióticos en el cemento óseo destinado a la fijación mecánica de las prótesis constituye un sistema de liberación local de antibiótico que permite minimizar la prevalencia y la gravedad de las reacciones adversas que pueden desencadenar los fármacos cuando éstos se administran por vía sistémica.El objetivo del trabajo es estudiar el mecanismo y cinética de liberación in vitro de ciprofloxacino y vancomicina incorporados en diferentes cementos óseos comerciales y evaluar la bioactividad mediante un ejercicio de simulación farmacocinética.Se prepararon mezclas de los cementos de estudio con ciprofloxacino clorhidrato y vancomicina (40:0,5:0,5). Los estudios de liberación se realizaron en agitación continua en solución salina de tampón fosfatos, pH=7,4, durante dos meses. Las cantidades liberadas acumuladas y las velocidades de elución se evaluaron mediante ANOVA. Con el fin estudiar la bioactividad, se realizó una simulación de Monte Carlo.La cantidad total liberada de ciprofloxacino en un periodo de 8 semanas fue de 0,29±0,06mg desde los cementos Palacos®, 0,44±0,06mg Lima® y 0,18±0,04mg Simplex®.La cantidad total de vancomicina liberada en 24 horas fue de 0,34±0,17mg desde el cemento Palacos®, 0,68±0,16mg Lima® y 0,17±0,02mg Simplex®. Transcurrido este tiempo la liberación cesó.El estudio de simulación, muestra que durante las primeras 72 horas, la cobertura antibiótica dependería tanto del cemento elegido, como de la sensibilidad del microorganismo y el día postquirúrgico. Teniendo en cuenta el drenaje externo, es de prever que tras estas primeras 72 horas, una vez retirado, la bioactividad aumente
Reactive oxygen species and vascular remodeling in cardiovascular diseases
Get PDFReactive oxygen species (ROS) are reactive derivatives of O2 metabolism produced by all types of vascular cells. ROS play an important role in both physiological and pathological situations by acting as intracellular signaling molecules which regulate vascular function and structure. Accordingly, oxidative stress is implicated among other processes in inflammation, hypertrophy, migration, growth/apoptosis and extracellular matrix protein turnover which are important processes involved in vascular remodeling in cardiovascular diseases. In the cardiovascular system, the major source of ROS is the NADPH oxidase family of enzymes composed by seven members where NOX-1 and NOX-4 are the main isoforms in vascular smooth muscle cells. This review highlights the importance of NOX-derived ROS in vascular biology and focuses on the potential role of oxidative stress in vascular remodeling
Superóxido Dismutasa: Un candidato terapéutico para el estrés oxidativo
Get PDFThe Superoxide Dismutase activity is present in every cell with aerobic metabolism, and is just absent in obligate anaerobes, due to the important role that it plays in antioxidant protection of many cellular components from oxygen reactive species (ROS). Its deficit is related with different pathologies, such as inflammation, diabetes, cancer, neurodegenerative disorders, among others. In the present review, some pathologies produced by the enzymatic deficit will be tackled, and also the main methods of protein engineering, applied to optimization and modification of the enzyme as a therapeutic product.La actividad Superóxido Dismutasa está presente en toda célula de metabolismo aerobio, y sólo ausente en microorganismos anaerobios obligados, pues cumple un importante rol en la protección antioxidante de numerosos componentes celulares, frente a las especies reactivas del oxígeno (ERO). Su afectación se relaciona con disímiles patologías, entre las cuales se encuentran, la inflamación, la diabetes, el cáncer, las enfermedades neurodegenerativas y otras. En la presente revisión serán abordadas algunas de las patologías producidas por déficit de la enzima, así como las principales técnicas de ingeniería de proteínas, aplicadas a la modificación y optimización de la misma como producto terapéutico
Efectos cardioprotectores de reducción de tamaño del infarto de miocardio y prevención del remodelado ventricular post-infarto del agonista del receptor de esfingosina-1-fosfato: estudio experimental en un modelo porcino de isquemia-reperfusión
Get PDFMyocardic
ischemia
induces
cell
death
due
to
necrosis
or
apoptosis.
Apoptosis
requires
energy
(obtained
from
oxygen
and
ATP).
Th
Although
proapoptotic
genes
are
activated
during
ischemia
the
apoptotic
programm
does
not
take
place
until
re‐perfusion
(when
oxygen
is
again
available
to
synthesize
ATP).
Sphingosine
‐1‐phosphate
is
a
phospholipid
with
known
antiapoptotic
properties.
Fingolimod
is
the
only
synthetic
agonist
known
of
spingosine‐1‐phosphate
receptor
(
S1P‐R)
aproved
for
use
in
patients
(
with
multiple
sclerosis).
Our
hypotheis
is
that
activation
of
S‐1‐P
R
with
Fingolimod
during
the
period
of
ischemia
of
acute
myocardic
infartion
decreases
apoptosis,
reduce
the
size
and
the
process
of
remodeling
of
left
ventricle
in
a
porcine
model
of
ischemia‐ reperfusion
(
I‐R).
Thus,
I‐R
was
induced
in
Yorkshire
pigs
by
oclusión
of
coronary
ateria
in
its
proximal
segment
during
60
min.
and
treated
or
not
with
Fingolimod.
Animals
were
evaluated
by
cardiac
magnetic
resonance
(RM),
ecocardiography
3D,
hemodynamic
tecniques,
histology
and
Western
blot
analysis.
Pigs
treated
with
Fingolimod
after
24
hr
showed
lower
apoptosis
of
the
myocardium
and
activation
of
antiapototic
proteins
Tan
control
group.
In
a
long
term
study
Fingolimod
reduced
the
size
of
infartion
and
improved
sustolic
function
of
left
ventricle.
In
addition
Fingolimod
decreased
cardiomyocites
hypertrophy
and
activation
of
molecular
parameters
as
Akt
and
ERK
1/2.
We
conclude
that
early
activation
of
S1P‐R
by
Fingolimod
reduces
the
size
of
infartion
improves
systolic
function
and
mitigates
adverse
cadiac
remodelling
.La isquemia miocárdica induce fenómenos de muerte celular por necrosis y apoptosis. La apoptosis es un proceso que requiere energía (dependiente de oxígeno y ATP), por lo que -aunque los genes proapoptóticos se activen durante la isquemia- el programa apoptótico no se lleva a cabo hasta la reperfusión (cuando el oxígeno está nuevamente disponible para sintetizar ATP). La esfingosina 1-fosfato es un fosfolípido presente en el cuerpo con propiedades antiapoptóticas ya demostradas. Fingolimod es el único agonista sintético del receptor de esfingosina 1-fosfato (S1P-R) que está aprobado para uso en pacientes (en concreto, para esclerosis múltiple). Nuestra hipótesis consiste en que la activación del receptor S1P-R mediante el tratamiento con Fingolimod durante el periodo isquémico del infarto agudo de miocardio disminuye la apoptosis, aumenta el miocardio preservado, reduce el tamaño de infarto y mitiga el remodelado del ventrículo izquierdo en un modelo porcino de isquemia-reperfusión (I-R)
Síntesis enzimática de fructooligosacáridos estimuladores de la microbiota colónica
Get PDFThe control of the intestinal flora is one of the targets of the functional foods and nutraceuticals. A symbiotic equilibrium can be achieved by the intake of live microorganisms (probiotics) or by the so-called prebiotics (non-digested oligosaccharides). Prebiotics are selectively fermented by the human microbiota allowing specific changes and conferring benefits upon host well-being and health. Among prebiotics fructooligosaccharides (FOS) constitute one of the most established groups. Levansucrases (EC 2.4.1.10) are a family of enzymes that catalyse the transfer of the fructosyl moiety from sucrose to different acceptors such as: (1) sucrose –yielding FOS that can be further fructosylated forming levan a polymer with food and biomedical applications -; (2) water resulting in sucrose hydrolysis. In this work a levansucrase from Zymomonas mobilis was characterized and the reaction products using sucrose as substrate were analysed by High-Performance Anion-Exchange Chromatography (HPAEC-PAD). The number of FOS synthesized by the soluble enzyme was significantly higher compared with previous reports. In order to optimize the biocatalytic process the enzyme was further immobilized by entrapment in calcium alginate gel and the resulting beads were dehydrated to obtain DALGEEs (Dry ALGinate Entrapped Enzymes). Different immobilization strategies were studied to minimize enzyme loss (lixiviation) throughout the pores. The effect of enzyme immobilization on levansucrase behaviour was also analysed.El control de la microflora intestinal es uno de los objetivos de los alimentos funcionales y nutracéuticos. El equilibrio simbiótico puede lograrse mediante la ingesta de microorganismos vivos (probióticos) o de los denominados prebióticos (oligosacáridos no digeribles). Los prebióticos son fermentados selectivamente por la microbiota generando cambios específicos en su composición que producen un beneficio en la salud del hospedador. Entre los prebióticos, los fructooligosacáridos (FOS) constituyen uno de los grupos más importantes. Las levansacarasas (EC 2.4.1.10) son una familia de enzimas que catalizan la transferencia de un grupo fructosilo desde una sacarosa a diferentes aceptores, entre ellos, otra molécula de sacarosa, dando lugar a FOS sobre los que puede transferir otro grupo fructosilo para llegar a formar levano, un polímero con aplicaciones en alimentación y biomedicina. Si el grupo fructosilo se transfiere sobre una molécula de agua, da lugar a la hidrólisis de la sacarosa. En este trabajo se caracterizó una levansacarasa de Z. mobilis y los productos de reacción con sacarosa como sustrato se analizaron por cromatografía de intercambio aniónico con detector amperométrico de pulsos (HPAEC-PAD). Con objeto de optimizar el proceso biocatalítico, la enzima se inmovilizó por atrapamiento en geles de alginato cálcico y las esferas resultantes se deshidrataron para formar DALGEEs (Dry ALGinate Entrapped Enzymes). Se probaron diferentes estrategias de inmovilización para minimizar la pérdida de la enzima por los poros. El efecto de la inmovilización en el comportamiento de la levansacarasa fue analizado.
Suelos del entorno del balneario
Get PDFSoil characteristics are decisive in groundwater quality. The impact of human activities, especially in areas subject to agricultural pressure, involves potential risks which may be critical to the viability of the water resource. This work gathers together the study of three representative soils located in the thermal environment of “Villa Olmedo”, Valladolid. All of them have developed from arkoses and found around 750 m elevation in a zone of flat topography. Morphological, physical, chemical and mineralogical properties of these soils were analyzed. They are poorly developed, coarse textured, with pH close to neutrality and antric features in the surface horizons. El conocimiento del suelo es imprescindible para comprender el riesgo de la posible afectación de las aguas subterráneas, especialmente en áreas sometidas a una fuerte presión de actividad agrícola. Se presenta el estudio de tres suelos localizados en los alrededores del Balneario “Villa de Olmedo”, provincia de Valladolid. Se han desarrollado a partir de arcosas, situados en topografía llana, con una altitud entorno a los 750 m y bajo clima Mediterráneo templado. Se analizaron las propiedades morfológicas, físicas, químicas y mineralógicas de los suelos. En general, son suelos poco evolucionados, con textura gruesa, pH próximos a la neutralidad y horizontes superficiales con características ántricas.