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岐阜薬科大学博士（薬科学）2024年度doctoral thesi

福井 美奈

Japanese

医薬品・化粧品原料のせん断試験による力学的特性評価に関する研究

徳村 和也

 
 
博 士 論 文 要 旨 
 
グリオーマ進展を制御する新規因子の 
探索に関する研究 
 
徳村 和也 
 
グリオーマは Grade Iから IVに分類され、Grade Iおよび IIは低悪性度、Grade IIIお
よび IVは高悪性度とされている。膠芽腫（Glioblastoma; GBM）は Grade IVのグリオ
ーマであり、最も悪性度が高く、侵襲性の強い中枢神経系腫瘍である。GBM の予後
は、Isocitrate dehydrogenase（IDH）変異と相関があり、IDH変異型 GBM は IDH野生
型より生存期間が長く、化学療法薬テモゾロミドに反応しやすいことが知られてい
る。GBM は mesenchymal、classical、proneural、neural の 4つの分子サブタイプに分類
される。治療法として外科手術、放射線療法、化学療法、分子標的治療の多剤併用療
法が進歩しているものの、依然として予後は不良である。特にグリオーマ幹細胞
（Glioma stem cell; GSC）は、自己複製能、腫瘍増殖能、治療抵抗性に関与し、腫瘍
再発の一因とされており、GSC 標的治療が有望視されている。 
タンパク質のグリコシル化は主に N 結合型、O 結合型、C 結合型があり、細胞の輸
送、シグナル伝達、増殖、生存などを制御する翻訳後修飾である。グリオーマにおけ
るグリコシル化と、GSC や GBM の悪性度との関連性についての研究は進んでいるも
のの、未解明な点が多い。また、ビタミン代謝もグリオーマの病態に関与する可能性
があるが、既存の研究は直接的な in vitro 実験での効果や食事摂取に焦点を当てたも
のが多く、病態生理との関係は十分に解明されていない。本研究では、バイオインフ
ォマティクス解析を中心に行い、グリオーマの進展を制御する新規因子の探索を行っ
た。 
single-cell RNA-sequencing 解析により、GSC の遺伝子発現を解析した結果、GSC に
おいて N 結合グリコシル化の亢進が認められ、特に N 結合グリコシル化関連因子
Asparagine-linked glycosylation（ALG）酵素ファミリーの発現上昇が確認された。ALG
酵素ファミリーの発現上昇はグリオーマ細胞株 GL261 を用いた解析によっても確認
することができた。また、bulk RNA-sequencing 解析により、GBM 組織の遺伝子発現
を解析したところ、腫瘍組織で N結合グリコシル化の亢進が認められ、進行度・悪性
度の高い GBM 患者では特に顕著な亢進が観察された。さらに、ALG酵素ファミリー
の発現量は GBM の悪性度と生存転帰に関連していることが示された。 
一方、ビタミン代謝経路も GBM の悪性度や生存転帰と関連していた。特に脂溶性ビ
タミン（A、D、E、K）の代謝亢進が認められ、Vitamin K epoxide reductase complex subunit 
1（VKORC1）の発現量が複数の GBM コホートで共通して悪性度や予後不良と関連し
ていた。最後に、GL261 の Vkorc1 をノックダウンし、アポトーシスアッセイ、MTT
および創傷治癒アッセイによって細胞特性を評価した結果、GL261のアポトーシスに
は変化が認められなかった一方、増殖および遊走能はそれぞれ低下した。 
本研究により、グリオーマ幹細胞の N 結合グリコシル化および脂溶性ビタミン代謝
経路が GBM の悪性進展化に関連している可能性が示唆された。特に、ALG 酵素ファ
ミリーと VKORC1 の発現上昇は GBM の悪性度の指標となる可能性がある。これらの
因子を標的とした新規 GBM 治療薬の開発が期待される。 
 
 
論文審査結果の要旨 
 
氏名（本籍） 徳村 和也 （ 石川県 ） 
学位の種類 博士（薬科学） 
学位記番号 甲 第５５号 
学位授与年月日 令和７年３月１０日 
学位授与の条件 学位規則第４条第１項該当者 
学位論文の題名 グリオーマ進展を制御する新規因子の探索に関する研究 
論文審査委員 
（主査） 中西 剛 
（副査） 嶋澤 雅光 
（副査） 吉野 雄太 
 
膠芽腫（GBM）は、原発性脳腫瘍の中で最も悪性度が高く、予後不良の疾患である。
悪性度が高い一因として、グリオーマ幹細胞（GSC）の関与が指摘されている。本論
文では、single cell RNA-seq解析を用いて、GSCにおけるN結合型グリコシル化の
亢進および糖転移酵素 ALGファミリーの発現上昇を確認した。また、bulk RNA-seq
解析により、N結合型グリコシル化の亢進およびALGファミリーの発現上昇は、GBM
の悪性度および生存転帰と関連していることを確認した。一方、ビタミン代謝経路も
GBM の悪性度および生存転帰に関与していることが示された。特に脂溶性ビタミン
の代謝が亢進しており、ビタミン Kサイクル関連酵素 VKORC1の発現量が悪性度の
上昇および予後不良と関連していた。さらに VKORC1ノックダウンにより、GBM細
胞の増殖能および遊走能の低下が確認された。 
以上の結果は、N 結合型グリコシル化および脂溶性ビタミン代謝経路が、GBM の
悪性進展に関与している可能性を示す。加えて、ALGファミリーや VKORC1が GBM
に対する新規治療標的となることが示唆される。本論文は、GBM の根本治療法開発
における新たな分子標的を見い出した点において、博士（薬科学）論文として価値の
あるものとして認める。 


グリオーマ進展を制御する新規因子の探索に関する研究

岐阜薬科大学博士（薬学）2024年度doctoral thesi

前澤 美佳

 
 
 
 
 
博 士 論 文 要 旨 
 
注射薬の血管外漏出に関する 
リアルワールドエビデンスの創出に向けた研究 
 
前澤 美佳 
 
 
 注射薬の血管外漏出は、薬剤が血管外に漏出することで多様な皮膚傷害を惹起する。
血管外漏出による皮膚傷害の重症化は患者の Quality of Life を低下させるため、患
者のベッドサイドで輸液管理を行う看護師にとって、血管外漏出の予防・早期発見は
重要な課題である。本研究では、本邦の自発報告システム Japanese Adverse Drug 
Event Report database (JADER) および病院の電子カルテデータの 2種類のリアルワ
ールドデータを活用し、血管外漏出およびそれに伴う皮膚傷害のプロファイルやリス
ク因子に関する新たなリアルワールドエビデンスの創出を目的とした。 
 
1. 注射薬の血管外漏出による皮膚傷害の特徴と転帰 
JADER を活用し、血管外漏出との関連が疑われる薬剤に関するシグナルを検出する
とともに、薬剤毎に血管外漏出性皮膚傷害の特徴と転帰を明らかにした。先行研究に
おいてほとんど報告されていないイバンドロン酸ナトリウム水和物およびニカルジ
ピン塩酸塩と血管外漏出との新たな関連性が示唆された。また、トラベクテジン、塩
化カルシウム、およびガベキサートメシル酸塩等の薬剤において、血管外漏出による
壊死や潰瘍等の重篤な皮膚傷害の発現に注意を払う必要性が示唆された。 
 
2. 注射薬の血管外漏出による重篤な皮膚傷害のリスクとなり得る薬剤と患者プロ
ファイルの評価 
JADER を活用し、薬剤および患者背景に着目して、血管外漏出による皮膚傷害の重
症化に関連し得る独立した因子およびそれらの組み合わせを明らかにした。独立性の
検定の結果、年齢 (小児または高齢者)、末梢静脈栄養輸液製剤の使用、精神疾患の
既往等の 9つの因子について、血管外漏出による壊死や潰瘍等の重篤な皮膚傷害との
関連性が示唆された。また、アソシエーション・ルール・マイニングにより、小児の
川崎病治療に対する免疫グロブリン製剤の使用、高齢者の播種性血管内凝固症候群治
療に対するガベキサートメシル酸塩の使用等の複数の血管外漏出のリスク因子の組
み合わせは、壊死や潰瘍等の重篤な皮膚傷害の発現に関連している可能性が示唆され
た。 
 
3. 注射薬の血管外漏出が発生した症例の特徴 
病院の電子カルテデータを活用し、血管外漏出が発生した症例の特徴を、患者背景、
薬剤、輸液手順の 3つの観点から記述的に分析した。患者関連要因では、高齢、低栄
養状態、および血液凝固異常は、血管外漏出が報告された症例の特徴であった。薬剤
関連要因では、末梢静脈栄養輸液が漏出の原因薬剤として最も多く報告されていた。
また、輸液手順関連要因では、輸液ポンプの使用は血管外漏出発生症例の特徴であっ
た。 
 
 患者のベッドサイドで輸液管理を行う看護師が患者の血管外漏出のリスクを適切
にアセスメントし、患者教育や観察を強化することは、血管外漏出の予防・早期発見、
ひいては輸液管理を受ける患者の Quality of Life の維持・向上につながる。リアル
ワールドデータを活用した本研究の知見は、血管外漏出の発現プロファイルに関する
重要なリアルワールドエビデンスを提供し、血管外漏出リスクアセスメントの確立に
向けた基礎資料となり得る。 
 
論文審査結果の要旨 
 
氏名（本籍） 前澤 美佳 （ 長野県 ） 
学位の種類 博士（薬学） 
学位記番号 甲 第２０３号 
学位授与年月日 令和７年３月１０日 
学位授与の条件 学位規則第４条第１項該当者 
学位論文の題名 注射薬の血管外漏出に関するリアルワールドエビデンスの創出に
向けた研究 
論文審査委員 
（主査） 井口 和弘 
（副査） 位田 雅俊 
（副査） 原  宏和 
 
 注射薬の血管外漏出は、重篤な皮膚傷害に繋がる場合も多く、その予防や早期発見、
ケアの質の標準化は臨床上重要な課題である。一方、重篤な血管外漏出に関する前向
き試験の実施は時間を要するため、その知見の集積は限定的である。本研究は、血管
外漏出性皮膚傷害のプロファイルやリスクとなり得る因子の包括的な評価を行ったも
のである。自発報告システムからは、血管外漏出関連有害事象との関連が疑われる新
たな薬剤を見出すとともに、重篤な血管外漏出が起きることが十分に認識されていな
かった非抗がん剤を明確とし、薬剤ごとに血管外漏出性皮膚傷害の特徴と転帰を示し
た。また、血管外漏出性皮膚傷害の重症化に関連し得る患者背景因子を見出し、アソ
シエーション・ルール・マイニングにより、各因子と皮膚傷害の関連性を示す相関ル
ールを明らかとした。さらに、電子カルテデータからは、血管外漏出が発生した症例
の特徴を記述的に分析し、自発報告システムには情報の無い輸液手順や注射部位の特
徴を見出すことで、更なる調査のための仮説を生成した。以上、本研究は、注射薬の
血管外漏出の発現プロファイルに関する重要な知見を与えるものであり、今後の血管
外漏出リスクアセスメントの確立の礎となることが期待できる。よって、本論文を博
士（薬学）論文として価値あるものと認める。 


注射薬の血管外漏出に関するリアルワールドエビデンスの創出に向けた研究

知念 尚希

博 士 論 文 要 旨 
 
筋芽細胞における細胞内ストレス応答と 
それらを標的とした細胞保護に関する研究 
 
知念 尚希 
 
 超高齢化社会である現在の日本では、平均寿命に対する健康寿命との差が男女とも
に約 10 年前後存在しており、大きな問題となっている。身体活動及び運動量の違い
により健康寿命は左右されることが示唆されている。サルコペニアは、主に加齢によ
る筋肉量と身体能力の進行性低下と定義され、転倒や骨折を誘発し、身体障害や死亡
率の増加をもたらし、高齢者の虚弱の一因となる。サルコペニアの発症や進展にはホ
ルモンバランスや酸化ストレス、栄養状態など様々な要因が関与していると考えられ
ているが、それらの筋細胞への影響については不明な点が残されている。 
 本研究では、タバコ煙の外的要因や、酸化ストレスや小胞体ストレスといったサル
コペニアへの関与が疑われている細胞内ストレスが、筋形成において増殖や筋管形成
で重要な筋芽細胞にもたらす影響について検討し、それらを標的とした細胞保護作用
について検討した。 
1.過酸化水素（H2O2）誘導筋芽細胞死に対するエタノール抽出ブラジル産グリーンプ
ロポリスとその成分による保護効果に関する検討 
 マウス筋芽細胞C2C12において、エタノール抽出ブラジル産グリーンプロポリス
（EEBP）及びその成分の一つであるカフェ酸が、H2O2曝露後に観察される細胞生存率
の低下を改善し、活性酸素種の産生亢進を抑制することを明らかにした。また、EEBP
及びカフェ酸の処理によりHO-1のタンパク質発現量が増加することから、EEBPによる
酸化ストレスからの細胞保護にHO-1の発現亢進の関与が示唆された。 
2.タバコ煙抽出物による細胞骨格障害に対するクロセチンの保護効果に関する検討 
喫煙はサルコペニアの危険因子の一つとして知られているが、タバコ煙の抽出物や
その成分のアクロレインによる筋芽細胞への影響について検討した。タバコ煙抽出物
及びアクロレインは、筋芽細胞のアクチン骨格の異常を引き起こし、筋管形成を阻害
した。タバコ煙抽出物またはアクロレインを処置した筋芽細胞において、ROCK2や
LIMK1のタンパク質発現量は低下し、コフィリンのリン酸化を抑制した。これらの影
響は抗酸化剤であるNAC及びカロテノイドの一種であるクロセチンにより回復した。
以上より、タバコ煙抽出物及びアクロレインはROCK2/LIMK1/コフィリン経路を抑制す
ることにより筋形成を阻害し、それに対するクロセチンの有効性が示唆された。 
3.ツニカマイシン誘発筋芽細胞障害に対するNAMPT活性化薬の保護効果に関する検討 
C2C12に対するツニカマイシン処置により、NAD+合成における律速酵素NAMPTとマイ
トファジー関連タンパク質のPINK1のタンパク質発現量が減少した。これらのタンパ
ク質量への影響に先立ち、ミトコンドリア分裂関連タンパク質Drp1のリン酸化の減少
が認められた。NAMPT活性化薬P7C3-A20はC2C12においてミトコンドリア膜電位を増加
させた。P7C3-A20はツニカマイシン処理したC2C12細胞における細胞死の増加と細胞
生存率の低下を改善した。以上より、NAMPT活性化薬P7C3-A20は、ツニカマイシン誘
発細胞障害から筋芽細胞を保護する作用を有することが明らかとなった。 
 以上、本研究では筋芽細胞における各種ストレスに対し、抗酸化物質あるいはNAMPT
活性剤が保護的に作用することが明らかとなった。食品由来の抗酸化物質の摂取によ
る細胞内抗酸化能の上昇や、細胞内NAD+合成量の増加は、骨格筋を日々のストレスか
ら保護し、加齢に伴う筋肉の機能低下を予防し、健康寿命の延伸に寄与すると考えら
れる。 
 
【略語】 
Drp1  : Dynamin-related protein 1 
EEBP  : Ethanol-extracted Brazilian green propolis 
HO-1  : Heme oxygenase-1 
LIMK1  : LIM domain kinase 1 
NAC  : N-acetylcysteine 
NAMPT  : Nicotinamide phosphoribosyltransferase 
PINK1  : PTEN-induced putative kinase 1 
ROCK2  : Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 2 
 
論文審査結果の要旨 
 
氏名（本籍） 知念 尚希 （ 長野県 ） 
学位の種類 博士（薬学） 
学位記番号 甲 第２０４号 
学位授与年月日 令和７年３月１０日 
学位授与の条件 学位規則第４条第１項該当者 
学位論文の題名 
筋芽細胞における細胞内ストレス応答とそれらを標的とした細胞
保護に関する研究 
論文審査委員 
（主査） 松永 俊之 
（副査） 原  宏和 
（副査） 井口 和弘 
 
本論文は、タバコ煙の外的要因、酸化ストレス及び小胞体ストレスなどの細胞内ス
トレスが、筋芽細胞にもたらす影響とそれらを標的とした細胞保護作用について検討
したものである。まず、過酸化水素による筋芽細胞障害に対するエタノール抽出ブラ
ジル産グリーンプロポリス (EEBP) 及びその成分であるカフェ酸の保護効果を検討
した。その結果、EEBP 及びカフェ酸はヘムオキシゲナーゼ 1 を誘導し、細胞内活性
酸素種の産生亢進及び細胞生存率の低下を抑制した。次に、タバコ煙抽出物 (CSE) 及
びその成分のアクロレインによる筋芽細胞への影響について検討した。CSE及びアク
ロレインは、筋芽細胞のアクチン骨格形成分子の発現を低下させ、アクチン骨格異常
を誘導し、筋管形成を阻害した。これらは N-アセチルシステイン及びクロセチンによ
り回復した。最後に、小胞体ストレス下における NAD+合成律速酵素ニコチンアミド
ホスホリボシルトランスフェラーゼ (NAMPT) の活性化剤 P7C3-A20 の保護効果を検
討した。ツニカマイシンによる小胞体ストレス誘導により筋芽細胞のミトコンドリア
機能は低下し、P7C3-A20 は細胞死を抑制した。以上より、本研究は筋芽細胞におけ
る各種ストレスに対し、抗酸化物質あるいは NAMPT活性化剤が保護的に作用するこ
とを明らかにしたことから、博士 (薬学) の論文として価値あるものと認める。 


筋芽細胞における細胞内ストレス応答とそれらを標的とした細胞保護に関する研究

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