Tsurumi University & Tsurumi College: Institutional Repository / 鶴見大学・短期大学部機関リポジトリ
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Multiple regulation of skeletal formation
Get PDF研究成果の概要（和文）：以下の３つの研究を行った。１）Annexina5による骨筋結合部形成機構の解明：頭蓋骨と長管骨の靭帯・腱結合部は軟骨組織、骨組織が層状に重なる組織enthesisを形作る。Anxa5機能欠損マウスではenthesisの増大が認められた。２）Osterix(Osx)の転写活性化に関与する制御因子の解明：Sirt７が骨芽細胞分化に必須の転写因子Osxの活性化に関与することが判明した。この活性化はOsterix分子の化学修飾を介して行われていた。３）破骨細胞の骨吸収を担当する多核細胞である。破骨細胞の前駆細胞にアデノウイルスでタンパク質を強制発現すると、前駆細胞の融合が阻害することが判明した。研究成果の概要（英文）：1)Annexin A5 (Anxa5) plays a critical role in the regulation of bone ridge outgrowth at enthesis. The sizes of bone ridges at the entheses of the long bones were increased in Anxa5 null mice. 8 weeks after hindlimb unloading, Anxa5 null mice showed a decrease in bone overgrowth to similar extents to wild-type mice, suggesting that Anxa5 regulates biological responses to mechanical forces. 2) Osterix (Osx) is a transcription factor that is necessary for osteoblast differentiation. Sirt7 null mice developed osteopenia characterized by decreased bone formation. Interaction of SIRT7 with OSX thorough C-terminal region results in activation of OSX activity. 3) Adenovirus-mediated gene transduction to osteoclast precursors inhibited osteoclast formation in vitro. Adenoviruses without a protein coding cDNA did not affect osteoclast formation, suggesting that modification protein production in osteoclast precursors has a negative impact on osteoclast formation.・2018(平成30)年度 科学研究費補助金 基盤研究(C) 研究成果報告書・研究期間 (年度)：2015-04-01 – 2019-03-31・研究分野：分子生物学・研究成果の学術的意義や社会的意義 : 脊椎動物の骨形成過程には内軟骨性骨形成と内膜性骨形成の２つの異なる過程がある。両過程において骨芽細胞が骨基質の産生と石灰化と骨基質を溶解する破骨細胞の分化を制御する。骨芽細胞と破骨細胞の機能的平衡状態が破綻すると、骨粗鬆症、骨硬化症あるいは癌細胞の骨転移などの骨格病変を引き起こす。加えて、骨組織は靭帯と腱組織により筋肉組織と結合することにより機能的な動きを獲得して生理的な役割を果たす。本研究では骨芽細胞分化とenthesisの発達、並びに破骨細胞分化の制御機構に焦点を当てており、新たな知見を得た。この応用を目指すことによって、骨格と筋組織の調和のとれた成長とその障害が解明されると期待できる。研究課題/領域番号 : 15K11027research repor
Regeneration of dentin/pulp complex with bFGF and simvastatin
Get PDF研究成果の概要（和文）：褥瘡・皮膚潰瘍の治療薬であり、幹細胞を増殖させる線維芽細胞増殖因子（bFGF）と高コレステロール血症治療薬で知られ、骨や歯の一部である象牙質を作ることが知られているシンバスタチンとを使用して歯髄の再生を試みる方法を開発する目的で研究を開始した。bFGFにより歯髄の細胞が増殖し、シンバスタチンにより象牙質様の構造物を生成することがわかった。またそれら二つの薬を徐放するゼラチンハイドロゲルの作製にも成功している。研究成果の概要（英文）：The objective of this study is to develop the method for the regeneration of dentin/pulp complex with basic fibroblast growth factor (bFGF)and simvastatin. Basic FGF possess broad mitogenic and cell survival activities. Simvastatin is the drug to treat dyslipidemia and to prevent atherosclerosis-related complications. We demonstrated that human dental pulp stem cells (hDPSCs), cultured with the medium containing bFGF, showed high proliferation ability, and that simvastatin induced the differentiation of hDPSCs into odontoblast-like cells. Here we showed that a biodegradable hydrogel of gelatin could achieve the sustained release of bFGF and water-insoluble simvastatin.・2018(平成30)年度 科学研究費補助金 基盤研究(C) 研究成果報告書・研究期間 (年度)：2016-04-01 – 2019-03-31・研究分野：象牙質／歯髄複合体の再生・研究成果の学術的意義や社会的意義 : 今までの歯髄再生の研究の中心は歯髄内の幹細胞を使用して行うことがほとんどであった。しかしながら、その臨床応用には多くの問題点がある。例えば、幹細胞単離において抗体の使用を必要とするが、この手技が煩雑である上感染のリスクがある点、ならびに細胞自体のがん化の可能性がある点などである。これらの点を考えると本研究は細胞を使用せずに既に臨床応用されている薬のみで再生を試みる方法であるため、現実的で社会的に有意義であると考えられる。研究課題/領域番号 : 16K11569research repor
Development of biocompatible implant using protein immobilization method
Get PDF研究成果の概要（和文）：SEM観察でGM-CSFは粗造で不規則な表面形態を生じ, MTTアッセイでは48時間後に細胞生存率に有意差が認められた. TNF-α分泌はGM-CSFなしで48時間後に24時間後と比較して有意に減少し, GM-CSFは24, 48時間後にTNF-αの分泌を有意に増加した. IL-4分泌は, 24時間, 48時間でGM-CSF刺激の有無に関わらず有意に異なった. GM-CSF刺激の24, 48時間後にIL-4分泌が有意に増加した.これらの結果は, Ti上で培養したマクロファージについてGM-CSFによって刺激すると抗炎症性および炎症性サイトカインの分泌を促進する可能性があることを示唆している.研究成果の概要（英文）：We investigated the secretion of tumor necrosis factor-α (TNF-α) and interleukin-4 (IL-4) from mouse macrophages(RAW264.7) activated by GM-CSF. RAW264.7 cells were cultured on titanium (Ti) discs. Secretion of TNF-α and IL-4 was evaluated using ELISA at 24h and 48h. Cell morphologies were observed using SEM, and cell viability was accessed by an MTT assay. GM-CSF caused rough and irregular surface morphology on the macrophages and resulted in a significant difference in cell viability after 48h. TNF-α secretion significantly decreased after 48h without GM-CSF compared with that at 24h. GM-CSF significantly increased the secretion of TNF-α after 24h and 48h. IL-4 secretion was significantly different with or without GM-CSF stimulation at 24h and 48h. There was a significant increase in IL-4 secretion 24h and 48h after GM-CSF stimulation. These results suggest that macrophage stimulated GM-CSF may promote secretion of anti-inflammatory and pro-inflammatory cytokines on Ti.・2018(平成30)年度 科学研究費補助金 若手研究(B) 研究成果報告書・研究期間 (年度)：2016-04-01 – 2019-03-31・研究分野：生体材料学・研究成果の学術的意義や社会的意義 : インプラント埋入後の創傷治癒は, 生活反応期, 創内浄化期, 組織修復期, 組織再構築期の４つのステージに分けられる. 各ステージにおいて働く細胞があり, 各細胞を活性化するサイトカインが存在する. 今回の研究では, 初期の治癒反応に関係するマクロファージとGM-CSFに狙いを絞って評価した. その結果, マクロファージをGM-CSFで刺激することにより創傷性サイトカインおよび炎症性サイトカインが促進された.今後これらのサイトカインを組み合わせてチタン表面へ固定化し各ステージで働く細胞活性を促進することにより創傷治癒を短縮できる可能性があると考えられる.研究課題/領域番号 : 16K20546research repor
Migration Abilitty of Mesenchymal stem cells in Periodontal Ligament
Get PDF研究成果の概要（和文）：歯根膜線維芽細胞に特異的に発現しているCXCL12の歯根膜組織における間葉系幹細胞の遊走能を明らかにすることを目的に、GFP陽性マウス間葉系幹細胞の尾静脈投与による遊走能の評価を行った。また、本研究に使用した間葉系幹細胞については、血管内移植前に表面抗原マーカーの発現、細胞付着性、多分化能の検討を行った。商業的に利用できるマウス間葉系幹細胞を入手し、推奨される試薬・培地類を使用し維持培養を行い６～９継代目のマウス間葉系幹細胞を本研究で使用した。マウス尾静脈投与により恒常時での循環性間葉系幹細胞の遊走を認めた。研究成果の概要（英文）：The expression level of CXCL12 in the periodontal ligament fibroblasts(HPDL) was much higher than that in Dermal Fibroblasts in vitro and in vivo. HPDLF drew significantly high number of mesenchymal stem cells in the migration assay. In addition, the migrated MSCs expressed some genes that are characteristics of osteoblast.・2018(平成30)年度 科学研究費補助金 若手研究(B) 研究成果報告書・研究期間 (年度)：2016-04-01 – 2019-03-31・研究分野：分子生物学・研究成果の学術的意義や社会的意義 : 歯根膜の線維芽細胞に高発現する遺伝子CXCl12の歯根膜における機能について解明することであり、さらには歯を移動した際の歯根膜の修復におけるCXCl12の関与を明らかにすることで、従来移動困難とされる骨性癒着歯などの矯正学的歯の移動などに有用な知見が得られると考えられる。研究課題/領域番号 : 16K20661research repor
Verification of the safety of intravenous sedation to patients with dementia and depression, and development of novel stress mitigation method
Get PDF研究成果の概要（和文）：Handling stressによって，ストレッサーを認識・認知するネットワーク、不安や恐怖などの情動発現に関係するネットワークでのモノアミン神経活動が亢進した．ミダゾラムとNBI127914の局所投与は，ストレス状況下のこれらの神経活動の亢進を抑制するのに対し、デクスメデトミジンは，ストレス状況下のこれらの神経系の活動の亢進を抑制しなかった．研究成果の概要（英文）：Handing stress enhanced monoaminergic activity in networks that recognize and recognize stressors, and networks related to emotional expression such as anxiety and fear. Local infusion of midazolam and NBI127914 inhibited the enhanced of these neural activity under stress conditions, whereas dexmedetomidine did not inhibit the enhanced.・2018(平成30)年度 科学研究費補助金 若手研究(B) 研究成果報告書・研究期間 (年度)：2017-04-01 – 2019-03-31・研究分野：歯科麻酔学・研究成果の学術的意義や社会的意義 : 歯科治療はストレスを引き起こすストレッサーとなることが少なくない.歯科麻酔臨床では, ストレス軽減に静脈内鎮静法が有効である．しかしながら高次脳機能に障害・変調をきたしているとされているこれらの患者に，同じく静脈内麻酔薬を用いた静脈内鎮静法の応用が適切なのか否か，その基本的な検討はほとんど行われていない。本研究では、高次脳機能の面から静脈内鎮静法のこれらの精神疾患への応用の安全性の検討し、さらに静脈内鎮静法に替わる安全性の高い新たな歯科治療ストレス軽減法の可能性についても検討していく。研究課題/領域番号 : 17K17298research repor
A Study on the Fairy Tale “Yamanobori" by Rieko Nakagawa -the Structure and the Acceptance of Children-
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The effect of sonic toothbrushes in assisted tooth brushing on plaque removal - Comparison of dry-cell type sonic tooth brushes and charge-type sonic tooth brushes -
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Search for molecular signatures that discriminate between tendon and ligament tissue
Get PDF研究成果の概要（和文）：腱と靱帯は形態学的には極めて類似しているが、力学的な機能は異なっており、分子的な相違も想定されるが、不明な点が多い。本研究では腱組織と靱帯組織を分離し、in vivoとin vitroでそれぞれの遺伝子発現の比較をすることで、差として得られるものをmolecular signatureの候補とすることを目指した。それらの候補は腱組織において力学的な刺激に対する転写活性の変化が見られるか、さらに成長因子TGFb２に対する応答性があるか、という点から候補分子の機能の推定を行った。これらにより、力学的な刺激ならびに成長因子に対する応答性の異なる、複数の候補分子が同定された。研究成果の概要（英文）：Our aging population will increase the prevalence of musculoskeletal diseases, so the importance of tendon and ligament tissue that support muscles and skeletons is recognized. Tendon and ligament tissues are morphologically similar, but their functional properties seem to be different. This study aimed to search for molecular signatures that can discriminate molecular differences between the two issues. By dissecting mouse tendon and ligament tissues, we compared whole transcripts of two tissue by RNA sequencing. We also compared the transcripts which were expressed in the primary cells isolated from those tissues. We found groups of transcripts differentially expressed between two tissue. The expressions of some transcripts changed after mechanical loading, and treatment with TGFb2 resulted in changes of those transcripts in tenocytes. Thus those newly identified genes could be functional in tendon and/or ligament tissues.・2018(平成30)年度 科学研究費補助金 挑戦的萌芽研究 研究成果報告書・研究期間 (年度)：2015-04-01 – 2019-03-31・研究分野：骨格系組織の発生分化・研究成果の学術的意義や社会的意義 : 腱組織は骨と筋肉を連結する組織であり、筋肉からの収縮－伸張サイクルの影響を受け長さが変化する。一方靱帯組織は関節を形成する骨と骨を連結し運動を制御する制動器官としての働きをもつ。ともに線維性結合組織を主たる成分とし、力学的負荷に対応する構造を持つが、それらを区別できる分子（群）があるか否かについては不明である。本研究で行った転写産物の解析から、いくつかの分子（群）が、異なる発現量を示すこと、それらが力学的負荷に対応する変化を示すことが解った。これらの知見は腱・靱帯に関わる疾患への基礎的基盤に繋がると考えられる。研究課題/領域番号 : 15K15679research repor
Death and Life Studies after the Great East Japan Earthquake of March 11, 2011
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