Portal de Periódicos UDESC (Universidade do Estado de Santa Catarina)
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    VITRIFICAÇÃO DE OVÓCITOS BOVINOS COM A UTILIZAÇÃO DE MICROPIPETAS DE VIDRO OU PALHETAS ESTIRADAS

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    To evaluate the effect of different embryo containers in vitrification procedure, oocytes obtained from 2 to 8mm size follicles were randomly allocated in three groups and submitted to maturation in TCM 199 Earle salts medium with 10% of estrus mare serum (SEE), at 39C, with 5% CO2 atmosphere and 95% of relative humidity. After 22 hours of culture, two groups were submitted to a partial remove of cumulus cells by successive pipeting in a maintenance medium (TCM-Hepes + 10% fetal calf serum) and then exposed to an equilibrium solution with 50l of EG and 50l of DMSO in 400l of maintenance medium, for 30 seconds. After that, they were transferred to a vitrification solution composed by 300l of 0.8M sucrose solution in TCM-Hepes with 20% of fetal calf serum, added with 100l of EG and 100l of DMSO, and loaded in groups of five, in glass micropipetes (MV-T1) or pulled straws (OPS-T2) and vitrified. The warming was performed by direct immersion of MV or OPS in a 0.3M Sucrose solution in maintenance medium, at 37 - 38ºC, during five minutes. The oocytes were then transferred to a 0.15M sucrose solution (five minutes) and then to a maintenance medium. Then, the oocytes of both groups returned to the maturation medium for an additional two hours culture period. All groups were then submitted to the same fertilization and culture procedures. Fertilization was performed with 1 x 106 spermatozoa/ml, selected by swim- up procedure, and the incubation of oocytes / spermatozoa was performed in 400l of TALP-FERT medium with 30g/ml of heparin, during 18–22 hours. The culture was performed in SOFaaci. The cleavage rate of 55.5%, 54.6% and 78.6% was observed in the treatments MV, OPS and Control, respectively. The blastocyst rate was 10.0 and 7.9% for the MV and OPS treatments, respectively. There was not significant differences between treatments (p>0.05) and both were inferior (p<0.05) to the Control, 42.8%. These results demonstrated that the glass micropipetes could be used in the bovine oocyte vitrification, providing similar results than those obtained with the OPS.  Com o objetivo de avaliar diferentes formas de envase no processo de vitrificação, complexos cumulus oophorus (CCOs) obtidos de folículos entre 2 e 8mm foram divididos aleatoriamente em três grupos e submetidos a maturação em TCM 199 sais de Earle com 10% de soro de égua em estro (SEE), em estufa a 39oC, com atmosfera de 5% de CO2 e 95% de umidade relativa. Com 22 horas de cultivo os grupos a serem vitrificados foram submetidos a pipetagens sucessivas para o desnudamento parcial, em uma placa contendo meio de manutenção (TCM-Hepes com 10% de soro fetal bovino - SFB), sendo então expostos a uma solução de equilíbrio composta por 400l de meio de manutenção, adicionado de 50l de EG e 50l de DMSO, por 30 segundos. Em seguida foram transferidos para a solução de vitrificação composta por 300l de uma solução de sacarose 0,8M em TCM-Hepes com 20% SFB, acrescido de 100l de EG e 100l de DMSO, envasados em grupos de cinco, em micropipetas de vidro (MV T1) ou palhetas estiradas (OPS T2) e vitrificados. O reaquecimento foi realizado pela imersão direta das MV e OPS numa solução de Sacarose 0,3M em meio de manutenção, a 37 – 38ºC, onde os CCOs permaneceram por cinco minutos, quando foram transferidos para uma solução com 0,15M de sacarose por mais cinco minutos, antes de retornarem para o meio de manutenção. A seguir os ovócitos dos dois grupos retornaram ao meio de maturação por mais duas horas. A partir de então, todos os grupos foram submetidos aos mesmos procedimentos de fecundação e cultivo. Para a fecundação utilizou-se sêmen selecionado pelo processo de migração ascendente (swim-up), em meio TALP-SPERM, utilizando-se uma concentração final de 1 x 106 espermatozóides/ml. A incubação dos ovócitos com espermatozóides foi realizada por 18 – 22 horas, em 400l do meio TALP-FERT, adicionado de 30g/ml de heparina. O cultivo foi realizado em SOFaaci, sendo avaliadas as taxas de clivagem e blastocistos. Observou-se uma taxa de clivagem de 55,5, 54,6 e 78,6% para os tratamentos MV, OPS e Controle, respectivamente. A taxa de blastocistos foi 10,0 e 7,9% para os tratamentos MV e OPS, respectivamente, que não diferiram entre si (p>0,05) e foram inferiores (p<0,05) aos 42,8% do tratamento controle. Os resultados deste estudo demonstram que as micropipetas de vidro estiradas podem ser utilizadas na vitrificação de ovócitos bovinos, proporcionando resultados semelhantes aqueles obtidos com as palhetas estiradas. &nbsp

    PREVALÊNCIA DE MALASSEZIA SP . NO PAVILHÃO AURICULAR DE CÃES COM OTITE E ASSINTOMÁTICOS ATENDIDOS NO HOSPITAL DE CLÍNICA VETERINÁRIA EM LAGES/SC NO PERÍODO DE OUTUBRO À DEZEMBRO DE 2000.

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    The yeast Malassezia pachydermatis is very important in Veterinary Medicine, due to its presence in the ears and skin of dogs. The objective of this study was to determine the prevalence of Malassezia sp. in the external ear of dogs with otitis and asymptomatic dogs, and to establish a correlation among clinical otitis, direct microscopic examination and culture. It was collected the cerumen of the ears with swabs for direct microscopic examination and with the ginecological brush for culture in Sabouraud medium with olive oil at 25°C. It was observed a larger ocurrence of Malassezia sp. in ears with symptons of otitis and positive cultures which showed 26 from to 50 yeast cells in 5 microscopic fields in the direct examination.A levedura Malassezia pachydermatis é um organismo de suma importância em Medicina Veterinária, presente nas orelhas e na pele dos cães. O objetivo do presente estudo foi determinar a prevalência de Malassezia sp. no ouvido externo de cães com otite e cães sadios e estabelecer um grau de relação entre otite clínica, exame direto e cultivo. Foi coletado o cerúmen do conduto auditivo através de cotonete para exame direto em lâmina para coloração rápida e escovinha para cultivo da Malassezia sp. em ágar Sabouraud com óleo de oliva a 25oC. Existe maior prevalência de otite clínica com exame direto para Malassezia sp. na categoria B, onde ocorrem de 26 a 50 células de leveduras para cada 5 campos de leitura no exame direto

    EFEITO DA IDADE FISIOLÓGICA DE SEMENTES DE SOJA NOS RESULTADOS DO TESTE DE ENVELHECIMENTO ACELERADO.

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    With the objective to study the effect of the fisiologic age of soybean seeds in the results of the test of accelerated aging, it was lead en the laboratory of the Department of Fitotecnia of FCAVJ/ UNESP, an experiment with soybean seeds, CV. IAC 8 proceeding from harvests 1992/93, 93/94 and 94/95. Five periods has been used of stress (36, 48, 60, 72 and 84 hours). The analysed variables had been percentage of germination in the fifth day and the index of emergency speed. A complete randomized experimental design, with a factorial arrangement, was used. For the seeds of harvest 1992/93, that initially they presented germination of 68%, the aging after 48 hours was enough to reduce in 58% its germination. For harvests 93/94 and 94/95, with initial germination of 96 and 98,5%, respectively, the time of aging to reduce in 50% the germination was not detected, with up to 84 hours of estresse. The results indicate that the period of aging to be used in soybeans, must consider the initial quality of the seeds.Com o objetivo de estudar o efeito da idade fisiológica de sementes de soja nos resultados do teste de envelhecimento acelerado, foi conduzido no laboratório de sementes do Departamento de Fitotecnia da FCAVJ/UNESP, um experimento com sementes de soja da cultivar IAC 8 provenientes das safras 1992/93, 93/94 e 94/95. Foram utilizados cinco períodos de estresse (36, 48, 60, 72 e 84 horas). As variáveis analisadas foram primeira contagem da germinação, no quinto dia e o índice de velocidade de emergência. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado em um arranjo fatorial. Para as sementes da safra 1992/93, que inicialmente apresentavam germinação de 68%, o envelhecimento após 48 horas a 42º C, foi suficiente para reduzir para 58% a sua germinação. Para as safras 93/94 e 94/95, com germinação inicial de 96 e 98,5% respectivamente, o tempo de envelhecimento para reduzir em 50% a germinação não foi detectado, com até 84 horas de estresse. Os resultados indicam que o período de envelhecimento a ser usado em sementes de soja, deve considerar a qualidade inicial das sementes

    PREVALÊNCIA DE ANTICORPOS ANTI-Babesia EM BOVINOS NO PLANALTO NORTE DE SANTA CATARINA

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    With the aim to determine the prevalence of antibodies anti-Babesia bigemina and anti-Babesia bovis, samples were collected in sterile tubes from the jugular vein and sera examined from 388 bovines from dairy breeds of both sexes in 16 farms, in counties on the north plateau of Santa Catarina. The samples were grouped recording to age range as following: group 1, from three to six months; group 2, from six to twelve months; group 3, from twelve to eighteen months; group 4, from eighteen to twenty four months, and group 5, more than twenty four months. The sera obtained were examined by the Indirect Immunofluorescence Reaction (RIFI) for Babesia. Positive reactions were those which presented fluorescence at the serum dilution of 1:160. The results were tabulated and submitted to statistical analysis using Chi-Square test. From the 388 samples analyser 76,8% were positive for B. bovis and 84,5% were positive for B. bigemina.Com o objetivo de determinar a prevalência de anticorpos anti-Babesia bigemina e anti Babesia bovis foram coletadas amostras de sangue da veia jugular, em tubos de ensaio esterilizados, sem anticoagulante, de 388 bovinos com aptidão para a produção de leite, de ambos os sexos, em 16 propriedades dos municípios do Planalto Norte de Santa Catarina. As amostras foram agrupadas por faixa etária da seguinte forma: grupo 1, de três a seis meses; grupo 2, de seis a 12 meses; grupo 3, de 12 a 18 meses; grupo 4, de 18 a 24 meses e grupo 5, mais de 24 meses. Os soros obtidos foram submetidos a Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI), considerando-se reações positivas as que apresentaram fluorescência na diluição de 1:160. Os resultados foram tabulados e submetidos a análise estatística pela tabela de contingência – Quiquadrado. Das 388 amostras analisadas 76,8% foram positivas para B. bovis e 84,5% foram positivas para B. bigemina

    CARBENDAZIM, PROCLORAZ, PROPICONAZOL E TEBUCONAZOL PARA O CONTROLE DO OÍDIO DA SOJA

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    The prevalence of powdery mildew (Microsphaera diffusa) on soybean (Glycine max) is increasing in Brazil. This fact suggests that actions to control this disease have to be taken. One of these actions is the application of fungicides. Therefore, four field experiments, in a completely randomized block design with four (tests 1 and 2) or three (tests 3 and 4) replications, were performed to evaluated the effect of fungicides against the soybean powdery mildew. These experiments were conducted in Londrina, PR (1999/2000) where soybean is constantly and extensively cultivated. The cultivar EMBRAPA 48 was used and just one application of the products was made at the growth stage R4. The treatments of Test 1 (ai = active ingredient; cp = commercial product) were: - prochloraz [450g ai/L] + propiconazole [250g ai/L] (0.5L cp/ha + 0.25L cp/ha); tebuconazole-1 [250g/L] + prochloraz (0.3+0.5); prochloraz (0.5); tebuconazole-1 (0.2); tebuconazole-2 [200g/L] (0.75); tebuconazole-1 + propiconazole (0.3+0.25); tebuconazole-1 + carbendazin-1 (0.3+0.35); propiconazole + carbendazin-1 (0.2+0.35); and the control (water). The treatments of test 2 were: carbendazin-1 (0.5); propiconazole (0.5); propiconazole (0.3); tebuconazole-1 (0.4); tebuconazole-1 + carbendazin-1 (0.4+0.3); tebuconazole-2 (0.5); carbendazin-2 [500g/L] (0.5); prochloraz (0.75); and the control (water). The treatments of the test 3 were similar to those of the test 1, but with the mixture of tebuconazole-1 + carbendazin-1 (0.24+0.25) replacing the treatment with tebuconazole-1 (0.2). The treatments of test 4 were similar to those of test 2, but the treatments with tebuconazol-1 + carbendazim-1 and prochloraz (0,75) were replaced by treatments with tebuconazole-1 (0,6) and tebuconazole-2 (0,75). The best fungicides to control powdery mildew were: test 1 - tebuconazole-2 (0.75), prochloraz + propiconazole (0.5+0.25), propiconazole + carbendazin-1 (0.2+0.35), and tebuconazole-1 + propiconazole (0.3+0.25); test 2 - carbendazin-1 (0.5), carbendazin-2 (0.5), and tebuconazole-2 (0.5); test 3 - prochloraz + propiconazole (0.5+0.25), tebuconazole-1 + prochloraz (0.3+0.5), and tebuconazole-1 + propiconazole (0.3+0.25), and; test 4 - all treatments with fungicides were efficient.A ocorrência do oídio (Microsphaera diffusa) da soja (Glycine max) tem aumentado nas últimas safras. Esse fato sugere rapidez na tomada de ações para o controle da doença. O controle químico seria uma das medidas indicadas. Portanto, quatro experimentos conduzidos no campo (1999/2000) foram realizados na região de Londrina/PR com o objetivo de avaliar a eficiência de fungicidas para o controle do oídio na cultivar EMBRAPA 48. Os ensaios foram delineados em blocos ao acaso, sendo dois ensaios com quatro repetições e os demais com três repetições. Em cada teste foi feita uma aplicação dos produtos no estágio R4 da soja. Os tratamentos do ensaio 1 foram (ia = ingrediente ativo; pc = produto comercial): procloraz [450g ia/L] + propiconazol [250g ia/L] (0,5L pc/ha + 0,25L pc/ha); tebuconazol-1 [250g/L] + procloraz(0,3 +0,5); procloraz (0,5); tebuconazol-1 (0,2); tebuconazol-2 [200g/L] - (0,75); tebuconazol-1 + propiconazol (0,3+0,25); tebuconazol-1 + carbendazim-1 [500g/L] (0,3+0,35); propiconazol + carbendazim-1 (0,2+0,35); e testemunha (água). Os tratamentos do ensaio 2 foram: carbendazim-1 (0,5); propiconazol (0,5); propiconazol (0,3); tebuconazol-1 (0,4); tebuconazol-1 + carbendazim-1 (0,4+0,3); tebuconazol-2 (0,5); carbendazim-2 [500g/L] (0,5); procloraz (0,75); testemunha. O ensaio3 foi uma repetição modificada do ensaio1, porém retirou-se o tratamento com tebuconazol-1 (0,2) e adicionou-se o tratamento em mistura tebuconazol- 1 + carbendazim-1 (0,24+0,25). O ensaio 4 foi uma repetição aproximada do ensaio 2 com a ausência dos tratamentos tebuconazol-1 + carbendazim-1 e procloraz (0,75), mas com a adição dos tratamentos isolados com tebuconazol-1 (0,6) e tebuconazol-2 (0,75). Os tratamentos com fungicidas que mais se destacaram, reduzindo a severidade do oídio e favorecendo o aumento de produtividade da soja foram tebuconazol-2 (0,75), procloraz + propiconazol (0,5+0,25), propiconazol + carbendazin-1 (0,2+0,35) e tebuconazol-1 + propiconazol (0,3+0,25) no ensaio 1. No ensaio 2, os melhores tratamentos foram carbendazim-1 (0,5), carbendazim-2 (0,5) e tebuconazol-2 (0,5). No ensaio 3, as misturas de fungicidas mais eficientes foram procloraz + propiconazol (0,5+0,25), tebuconazol-1 + procloraz - (0,3+0,5) e tebuconazol-1 + propiconazol (0,3+0,25). No ensaio 4, todos os tratamentos com fungicidas foram eficientes

    CONGELAMENTO ULTRA – RÁPIDO DE EMBRIÕES BOVINOS

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    The aim of this study was to evaluate the ultra- rapid freezing of bovine embryos in vivo produced. Eight Bos taurus cows were submitted to embryo collection on day seven after multiple ovulation estrous induction. Only embryos at the late morulae and early blastocyst stage, and classified as grade one or two, according International Embryo Transfer Society (IETS), were used. After selected, twenty-seven embryos were exposed to a solution with 3.0M of glycerol and 0.25M of sucrose in Dulbecco’s medium (DPBSm), and individually loaded in 0.25ml straw. After 10 minutes, the straw was placed on a 1.5cm height styrofoam platform maintained floating in the liquid nitrogen. The straw was maintained in the cold vapor during one minute and then plunged in the liquid nitrogen. The warming was performed by five seconds air exposure, followed by the submersion in a 35C water-bath during 20 seconds. The intracellular cryoprotectant removal was performed by the use of an osmotic 0.25M sucrose gradient, during 10 minutes, followed by DPBSm to complete the rehidration. The embryos were then loaded in 0.25ml straws and inovulated in synchronous recipients, by transcervical method. Twenty-six of twenty-seven frozen embryos were transferred, resulting in five pregnant (19.2%) recipients, and born of five healthy and normal calves. We conclude that the ultra-rapid freezing method permits the cryopreservation of in vivo bovine embryos, however the pregnancy rates are still lower than that obtained with the conventional freezing method, indicating the need of new investigations to adequate the method for bovine embryos.Com o objetivo de avaliar o método ultra–rápido no congelamento de embriões bovinos produzidos in vivo, oito vacas Bos taurus foram submetidas a coleta de embriões, sete dias após o estro subseqüente ao tratamento superovulatório. Foram utilizados embriões no estágio de mórula compacta e blastocisto jovem, com qualidade um ou dois, de acordo com os critérios da Sociedade Internacional de Transferência de Embriões (IETS). Após selecionados, vinte e sete embriões foram expostos a uma solução com 3,0M de glicerol e 0,25M de sacarose em meio de Dulbeccos (DPBSm) e envasados individualmente em palhetas de 0,25ml. Após 10 minutos, as palhetas foram acondicionadas sobre uma plataforma de isopor com 1,5cm de altura, mantida flutuando sobre o nitrogênio, com exposição ao vapor gelado por um minuto, antes de serem mergulhadas no líquido. Para o descongelamento, as palhetas foram expostas ao ar por cinco segundos, seguido da imersão em banho-maria a 35oC, por 20 segundos. A remoção do glicerol intracelular foi efetuada com um gradiente osmótico de 0,25M de sacarose em DPBSm durante 10 minutos, passando a seguir para o DPBSm onde completaram a rehidratação. Dos vinte e sete embriões congelados, vinte e seis foram transferidos, resultando em cinco receptoras prenhes (19,2%) e no nascimento de cinco animais normais e saudáveis. Conclui-se que o método de congelamento ultra-rápido permite a criopreservação de embriões bovinos produzidos in vivo, entretanto com índices de prenhez inferiores aos obtidos com o método de congelamento convencional, indicando a necessidade de novas investigações para adequação do método para a espécie bovina

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