Biotecnología Vegetal (E-Journal - Instituto de Biotecnología de las Plantas. Universidad Central Marta Abreu de Las Villas)
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    Aclimatización ex vitro de Kalanchoe blossfeldiana Poelln.

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    Kalanchoe blossfeldiana Poelln. is an ornamental specie used as a plant for pots and garden. Although are found studies on its propagation by biotechnological methods, the conditions to guarantee high survival rates in the acclimatization stage of in vitro plants have not been described. The aim of this work was to evaluate the development of K. blossfeldianain vitro plants during the acclimatization stage. Rooted plants were used in a culture medium without growth regulators. For planting, two mixtures of substrate were used in proportion 80:20, earthworm humus:zeolite and earthworm humus: sand. During the acclimatization the percentage of survival was calculated at 7, 15 and 30 days, and the plants height was measured at 30 days. In the rooting stage an average of 9.8 roots and a 0.9 cm height per plant was obtained. The survival in the acclimatization was 97.5% for both substrates, and there were no significant differences for the variable height of the plant. According to the results, with the substrates used for the acclimatization of K. blossfeldiana in vitro plants, high percentages of survival can be obtained under the conditions studied in the present work.Keywords:Crassulaceae, earthworm humus, substrae, zeoliteKalanchoe blossfeldiana Poelln. es una especie ornamental usada como planta para macetas y jardín. Aunque se encuentran estudios sobre su propagación por métodos biotecnológicos, no han sido descritas las condicionespara garantizar altos porcentajes de supervivencia en la fase de aclimatización de las plantas in vitro. El objetivo del presente trabajo fue evaluar el desarrollo de plantas in vitro de K. blossfeldiana durante la fase de aclimatización. Se emplearon plantas enraizadas en un medio de cultivo sin reguladores de crecimiento. Para la plantación se usaron dos mezclas de sustrato en proporción 80:20, humus de lombriz:zeolita y humus de lombriz:arena. Durante la aclimatización se calculó el porcentaje de supervivencia a los 7, 15 y 30 días, y se midió la altura de las plantas a los 30 días. En el enraizamiento se obtuvo un promedio de 9.8 raíces y una altura de 0.9 cm por planta. La supervivencia en la aclimatización fue 97.5% para ambos sustratos, y no hubo diferencias significativas para la variable altura de la planta. De acuerdo con los resultados, con los sustratos empleados para la aclimatización de plantas in vitro de K. blossfeldiana,pueden ser obtenidos altos porcentajes de supervivencia bajo las condiciones estudiadas en el presente trabajo.Palabras clave:Crassulaceae, humus de lombriz, sustrato, zeolit

    Comparación de tres explantes para la regeneración vía organogénesis indirecta de Phaseolus vulgaris L.

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    The embryonic axis and green nodular calli were the most used explants for genetic transformation via Agrobacterium tumefaciens of common bean (Phaseolus vulgaris L). However, obtaining transgenic plants from these explants is inefficient. Therefore, the study of other target explants is required. The objective of this work was to compare the explants NC-1 and NC-2 explants with ½ NC-1 in the regeneration via indirect organogenesis of P. vulgaris cv. 'ICA Pijao' and 'BAT 93'. The number of explants that formed calli was evaluated and the percentage of calli formation per explant was determined. The length of shoots was measured, the number of shoots with root formation was quantified, as well as the average length of the rooted shoots. Similar values were obtained for the percentages of callus formation for each cultivar independently, as well as the percentage of calli that formed shoots and the average number of shoots per callus. The type of explant did not influence the growth of the regenerated shoots, the percentage of shoots with roots, as well as the average length of these rooted shoots. The ½ NC-1 explant can be used for plant regeneration via indirect organogenesis in P. vulgaris cv. 'ICA Pijao' and 'BAT 93'.Keywords:shoots, calli, common bean, rootsEl eje embrionario y los callos nodulares verdes han sido los explantes más utilizados para la transformación genética vía Agrobacterium tumefaciens de frijol común (Phaseolus vulgaris L.). Sin embargo, la obtención de plantas transgénicas a partir de estos explantes es ineficiente. Por ello, se requiere el estudio de otros explantes blanco. El objetivo de este trabajo fue comparar la respuesta en la regeneración de los explantes ½ NC-1, NC-1 y NC-2 en los cultivares 'ICA Pijao' y 'BAT 93'. Se cuantificó el número de explantes que formaron callos y se calculó el porcentaje de formación de callos por explante. Se le midió la longitud de los brotes, se cuantificó el número de brotes con formación de raíces, así como la longitud promedio de los brotes enraizados. Se obtuvieron valores similares entre los porcentajes de formación de callos para cada cultivar de forma independiente, así como en el porcentaje de callos que formaron brotes y el número promedio de brotes por callo. El tipo de explante empleado no influyó en el crecimiento de los brotes regenerados, en el porcentaje de brotes con raíces, así como en la longitud promedio de los brotes enraizados. El explante ½ NC-1 puede ser utilizado para la regeneración de plantas vía organogénesis indirecta en P. vulgaris cultivares 'ICA Pijao' y 'BAT 93'. Palabras clave: brotes, callos, frijol común, raíce

    Evaluación de la toxicidad del Vitrofural® en agar sobre lombriz de tierra

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    Vitrofural® is an additive used for the chemical sterilization of plant culture media in the in vitro propagation of plants. At the end of its use, it becomes a waste of the biotechnological process and is dumped into confined terrestrial environments. Nevertheless, the possible ecotoxicological impacts that could occur are unknown. The aim of this work was to determine the acute toxicity of earthworms (Eisenia foetida) by exposure to Vitrofural® residues on agar. The toxic potential of the waste was evaluated by single exposure to earthworms for 14 days. Worms were exposed by contact and ingestion at a concentration corresponding to the maximum possible to be obtained from lixiviate of the solid residue of Vitrofural® on agar, after 7 and 21 days of preparation. The number of dead animals and the loss of body mass were quantified, and the sublethal toxic signs were described. In the experimental groups there was no mortality, only slight morphological and physiological alterations were observed with a tendency to decrease in frequency in the group exposed to the lixiviates with 21 days of preparation. Similar response was observed in the evolution of body mass. The lixiviated of Vitrofural® in agarized medium induce slight sublethal effects in earthworms a function of the preparation time and demonstrate the absence of ecotoxicological risk due to exposure in this specie.Keywords: bioassay, chemical sterilization, Eisenia foetida, toxicityEl Vitrofural® es un aditivo utilizado para la esterilización química de los medios de cultivo en la propagación in vitro de plantas. Al término de su utilización se convierte en un desecho del proceso biotecnológico y es vertido a ambientes terrestres confinados. Sin embargo, se desconocen los posibles impactos ecotoxicológicos que pudiera producir. El objetivo de este trabajo fue determinar la toxicidad aguda sobre lombrices de tierra (Eisenia foetida) por exposición a los residuos del Vitrofural® en agar. Se evaluó el potencial tóxico de los residuos por exposición única a lombrices de tierra durante 14 días. Se expusieron lombrices por contacto e ingestión a una concentración que se corresponde con la máxima posible a obtener del lixiviado del residuo sólido del Vitrofural® en agar, después de 7 y 21 días de preparado. El número de animales muertos y la pérdida de masa corporal se cuantificaron y se describieron los signos tóxicos subletales. En los grupos experimentales no ocurrió mortalidad, solo se presentaron ligeras alteraciones morfológicas y fisiológicas no significativas con tendencia a disminuir en frecuencia en el grupo expuesto al lixiviado con 21 días de preparado. Similar respuesta fue observada en la evolución de la masa corporal. Los lixiviados del Vitrofural® en medio agarizado inducen ligeros efectos subletales en lombrices de tierra en función del tiempo de preparado y demuestran la ausencia de riesgo ecotoxicológico por exposición en dicha especie. Palabras clave: bioensayo, Eisenia foetida, esterilización química, toxicida

    Enzimas antioxidantes preservan la calidad del café en ambiente refrigerado

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    Post-harvest phases may cause biochemical and physiological changes with direct effects on coffee (Coffea sp.) grains quality during its storage. The aim of this study was to determine the relevance of antioxidant isoenzyme expression on the coffee grains quality undergoing different types of processing and storage conditions. Coffea arabica L. ripe fruits was harvested, part of them was dry processed and another part was wet processing. Immediately, the coffee was dried. After drying, some of the grains were hulled and the other part was maintained unhulled. After that, the grains were stored under refrigerate controlled conditions (10 degC and 50% relative humidity) or at 25 °C without relative humidity control for a period of 12 months. Enzymatic expression of catalase, esterase, peroxidase, and alcohol dehydrogenase enzymes was evaluated in the coffee grains in these storage conditions by electrophoretic analysis. The results were compared to the sensorial and physiological profiles of the samples. It was found that expression of enzymes of the antioxidative process is associated with changes in the quality of coffee grains. Natural coffee obtained by dry processing is more sensitive to biochemical changes than wet-processed coffee. A refrigerated environment has a beneficial effect for preserving the coffee grains showed by higher expression of catalase, peroxidase, and alcohol dehydrogenase enzymes after six months of storage in these conditions. The protection of the endosperm by the presence of the pericarp in natural coffee or the endocarp in fully-washed coffee is beneficial to maintenance of quality and is related to expression of antioxidant enzymes.Keywords: alcohol dehydrogenase, catalase, Coffea arabica L., esterase, peroxidaseLas etapas de la poscosecha pueden causar alteraciones bioquímicas y fisiológicas con efectos directos en la calidad de los granos de cafeto (Coffea spp.) durante su almacenamiento. El objetivo de este trabajo fue determinar la relevancia de la expresión de isoenzimas del proceso antioxidante, en la conservación de la calidad de los granos sometidos a diferentes tipos de procesamiento y condiciones de almacenamiento. Los frutos de Coffea arabica L. fueron cosechados en estado de maduración cereza y secados, luego de ser beneficiados por vía seca y por vía húmeda. Después del secado, parte de los granos fue trillada y otra parte conservada en coco o en pergamino. Luego, los granos fueron almacenados en condiciones controladas de aire refrigerado (10 °C y humedad relativa del 50%) o a 25 °C sin control de la humedad relativa, durante un periodo de 12 meses. La expresión enzimática de las enzimas catalasa, esterasa, peroxidasa y alcohol deshidrogenasa fue evaluada en los granos de café a lo largo del almacenamiento por medio de un análisis electroforético. Estos resultados fueron comparados con el perfil sensorial y fisiológico de las muestras. Se constató que la expresión de las enzimas del proceso antioxidante, está asociada con alteraciones en la calidad de los granos de café. El café natural obtenido por beneficio mediante secado, es más sensible a las alteraciones bioquímicas del beneficiado por vía húmeda. El efecto beneficioso de la refrigeración del aire de almacenamiento en la preservación de la calidad del café, es evidenciado por la mayor expresión de las enzimas estudiadas después de seis meses. La expresión de las enzimas del proceso antioxidante, está asociada al efecto protector del pericarpio y endocarpio.Palabras clave: alcohol deshidrogenasa,catalasa, Coffea arabica L., esterasa, peroxidas

    Efecto del manejo a brotes in vitro de Xanthosoma sagittifolium (L.) Schott y Colocasia esculenta (L.) Schott durante la fase de multiplicación

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    To solve the limited in vitro multiplication coefficients in taro (Xanthosoma and Colocasia) several strategies are used. This work was carried out with the aim of to determine the effect of the in vitro management of shoots of both species of taro that allows to increase the multiplication coefficient in order to develop a simple method of in vitro propagation of this crop. Four cultivars of Xanthosoma ('Mexico 1', 'Mexico 8', 'Yellow Special', 'Selection INIVIT') and the cultivar 'Cameroon 14' of C. esculenta were used in the multiplication phase. The treatments included variants of decapitation and cut of the shoots. After 25 days of culture, the number of shoots per explant was quantified and the fresh mass was determined. The best results were achieved with treatments 6 (Decapitated 75% of the shoot and cut in the apical bud) and 7 (Decapitated 75% of the shoot, longitudinal cut and bevel of the apical bud) in all cultivars. The multiplication coefficients in both treatments varied from 3.00 to 6.98 depending on the cultivar. It is possible to increase the multiplication coefficient using other forms of cutting of the explants different from the traditional ones used (Beheaded 50% of the shoot and bevel cut).Keywords: cocoyam, decapitated, in vitro handlings, in vitro shoot, multiplication, taroPara resolver los limitados coeficientes de multiplicación in vitro en malanga (Xanthosoma y Colocasia)se emplean varias estrategias. Este trabajo fue realizado con el objetivo de determinar el efecto del manejo a los brotes in vitro de ambas especies de malanga que permita incrementar el coeficiente de multiplicación con el fin de desarrollar un método sencillo de propagación in vitro de este cultivo. Se emplearon cuatro cultivares de Xanthosoma (‘México 1’, ‘México 8’, ‘Amarilla Especial’, ‘Selección INIVIT’) y el cultivar ‘Camerún 14’ de C. esculenta en la fase de multiplicación.Los tratamientos incluyeron variantes de decapitado y corte de los brotes. A los 25 días de cultivo se cuantificó el número de brotes por explante y se determinó la masa fresca. Los mejores resultados se alcanzaron con los tratamientos 6 (Decapitado 75% del brote y corte en la yema apical) y 7 (Decapitado 75% del brote, corte longitudinal y a bisel de la yema apical) en todos los cultivares. Los coeficientes de multiplicación en ambos tratamientos variaron desde 3.00 hasta 6.98 en dependencia del cultivar.Es posible aumentar el coeficiente de multiplicación utilizando otras formas de corte de los explantes diferentes a las tradicionales empleadas (Decapitado 50% del brote y corte a bisel).Palabras clave: brote in vitro, decapitado, malangas, manejo in vitro, multiplicació

    Caracterización morfológica y molecular de árboles de Umbu-cajá en la región nordeste del Brasil

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    The umbu-cajá (Spondias sp.) is a fruit specie native of the brazilian semiarid region with high potential for cultivation. The juicy pulp is used in the production of juices and nectars. The aim of this study was to characterize 18 individuals of umbu-cajá tree at three sites located in the Brazilian northeast municipalities of Mossoró/RN and Apodi/RN to identify individuals with superior attributes for fruit processing and/or in natura consumption The morphological, physical and physicochemical characterization of 20 fruits of each individuals were performed. Leaves of trees were used for molecular analyses with Inter Simple Sequence Repeats (ISSR) and Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) markers. It was possible to verify that there are phenotypic variability among the fruits of umbu-cajá trees.  The individuals of the same region were grouped in the same group. JZ5, JZ6 and MA6 individuals can be used for pulp processing, while JZ1, JZ2, JZ3 and JZ6 are adequate for in natura consumption. The molecular analyses showed polymorphism for the two molecular markers used. The ISSR marker generated the greatest polymorphism among the individuals. However, the RAPD marker made it possible to achieve a more consistent cluster, which is in agreement with the geographical distribution of these individuals. The use of morphological markers together with molecular markers constitutes an important tool for characterizing umbu-cajá individuals. Keywords: genetic resources, ISSR, RAPD, Spondias sp.Umbu-cajá (Spondias sp.) es una especie de fruto nativa de la región semiárida brasileña con alto potencial de cultivo. La pulpa jugosa se utiliza en la producción de jugos y néctares. El objetivo de este estudio fue caracterizar a 18 individuos de umbu-cajá en tres sitios ubicados en los municipios noreste de Mossoró / RN y Apodi / RN para identificar individuos con atributos superiores para procesamiento de frutas y / o consumo in natura. Se realizó la caracterización morfológica, física y fisicoquímica de 20 frutos de cada individuo. Las hojas de los árboles se utilizaron para los análisis moleculares mediante Secuencias Intergénicas Repetidas Simples (ISSR) y la Amplificación aleatoria de ADN polimórfico (RAPD). Se pudo verificar la existencia de variabilidad fenotípica entre los frutos de los árboles umbu-cajá. Los individuos de la misma región se agruparon en el mismo grupo. Los individuos JZ5, JZ6 y MA6 pueden usarse para el procesamiento de pulpa, mientras que JZ1, JZ2, JZ3 y JZ6 son adecuados para el consumo in natura. Los análisis moleculares mostraron polimorfismo para los dos marcadores moleculares utilizados. El ISSR generó el mayor polimorfismo entre los individuos. Sin embargo, el marcador RAPD permitió lograr un grupo más consistente, lo que está de acuerdo con la distribución geográfica de estos individuos. El uso de marcadores morfológicos junto con marcadores moleculares constituye una herramienta importante para caracterizar individuos umbu-cajá. Palabras clave: ISSR, RAPD, recursos genéticos, Spondias sp

    Caracterización morfológica en vivero de plantas de Coffea arabica L. cv. Caturra rojo J-884 obtenidas por embriogénesis somática

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    The culture of plant cells and tissues plays an important role in agricultural biotechnology, somatic embryogenesis as a method of plant regeneration has been achieved in a large number of families and species including the cultivation of coffee (Coffea spp.). The research was carried out with the objective of determining the morphology of coffee plants obtained by somatic embryogenesis during their ex vitro adaptation in the nursery. Plants obtained by somatic embryogenesis of the red Caturra J-884 cultivar were characterized and compared with plants obtained by zygotic embryogenesis from the same cultivar. The plants of both origins were adapted in a nursery in the area of the Guamuhaya massif for 180 days. The variables evaluated were the survival of the plants, height, leaf area, stem diameter and number of pairs of leaves. The plants obtained by somatic embryogenesis were more uniform in their height. Values between 14 -17.9 cm were found with a range of 3.9; while, plants derived from zygotic embryogenesis oscillated in height values between 9.5 - 28.5 cm with a range value of 19. The plants obtained by the two morphogenetic pathways presented similar morphological characteristics in terms of stem diameter and height. However, plants derived from somatic embryogenesis developed a greater number of pairs of new leaves and total leaf area.Keywords: coffee, conversion, survival, zygotic embryogenesisEl cultivo de células y tejidos vegetales desempeña un papel importante en la biotecnología agrícola, la embriogénesis somática como método de regeneración de plantas se ha logrado en un gran número de familias y especies incluyendo al cultivo de cafeto (Coffea spp.). La investigación se realizó con el objetivo de caracterizar la morfología de plantas de cafeto obtenidas por embriogénesis somática durante su adaptación ex vitro en vivero. Plantas obtenidas por embriogénesis somática del cultivar Caturra rojo J-884 fueron caracterizadas y comparadas con plantas obtenidas por embriogénesis cigótica del mismo cultivar. Las plantas de ambas procedencias fueron adaptadas en vivero en la zona de macizo de Guamuhaya durante 180 días. Las variables evaluadas fueron la supervivencia de las plantas, altura, área foliar, diámetro del tallo y número de pares de hojas. Las plantas obtenidas por embriogénesis somática fueron más uniformes en su altura, con valores entre 14 -17.9 cm con un rango de 3.9; mientras que, las plantas procedentes de embriogénesis cigótica oscilaron en valores entre 9.5 – 28.5 cm con valor de rango de 19. Las plantas obtenidas por las dos vías morfogenéticas presentaron característicasmorfológicas similares en cuanto al diámetro del tallo y altura. Sin embargo, las plantas procedentes por embriogénesis somática desarrollaron mayor número de pares de hojas nuevas y área foliar total. Palabras clave: cafeto, conversión, embriogénesis cigótica, supervivenci

    Obtención de microtubérculos y minitubérculos como semilla pre-básica en tres cultivares peruanos de papa

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    In potato (Solanum tuberosum L.) seed certification programs, the use of in vitro plants, microtubers and minitubers as pre-basic seed are of great importance, especially in countries such as Peru, where there is a need to eradicate the informal production of the seed to promote new plantations. The present work had as objective to obtain of microtubers and minitubers as pre-basic seed in three Peruvian potato cultivars. When comparing the effect of both factors (method and cultivar) in the number of seeds per plant it was possible to state that with the exception of the cultivar 'Capiro', no differences were found between both methods of seed production for the rest of the cultivars. This result is very important since it shows that it is possible to use both methods of pre-basic seed production for cultivars 'Canchan' and 'Papa3'. In the cultivar 'Capiro' a greater number of minitubers was achieved per plant, but its low fresh mass, which could prevent its use as a basic seed. Other studies are required to adjust the culture conditions to achieve better results in this cultivar. Keywords: certified seed, genotype, in vitro techniquesEn los programas de certificación de la semilla de papa (Solanum tuberosum L.), el empleo de plantas in vitro, microtubérculos y minitubérculos como semilla pre-básica tiene gran importancia. Especialmente, en países como Perú existe la necesidad de erradicar la producción informal de semilla para fomentar nuevas plantaciones. El presente trabajo tuvo como objetivo obtener microtubérculos y minitubérculos de tres cultivares de papa peruanos (‘Canchan’, ‘Capiro’ y ‘Papa3’). Al comparar el efecto de ambos factores (método de obtención y cultivar) en el número de semilla por planta se pudo constatar que con excepción del cultivar ‘Capiro’, no se encontraron diferencias entre ambos métodos de producción de semilla para el resto de los cultivares. Este resultado es de gran importancia ya que evidencia que es posible utilizar ambos métodos de semilla pre-básica para los cultivares ‘Canchan’ y ‘Papa3’. En el cultivar ‘Capiro’ a pesar de que se logró un mayor número de minitubérculos por planta su baja masa fresca pudiera impedir su uso como semilla básica. Se requieren otros estudios que permitan ajustar las condiciones de cultivo para lograr mejores resultados en este cultivar. Palabras clave: cultivo in vitro, genotipo, tubérculos, semilla certificad

    Mínima concentración de polietilenglicol 6000 para seleccionar in vitro plantas de Musa spp. tolerantes a estrés hídrico

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    Increasingly intense droughts are an abiotic factor which has affected bananas and plantains (Musa spp.) production, therefore it is necessary to obtain tolerant genotypes. Plants in vitro selection offers advantages over field selection as it saves time, resources and permit to work with larger plant volumes. Before to establish an in vitro selection protocol for drought, it is necessary first, to establish some conditions. The aim of this work was to determine the minimum polyethylene glycol 6000 concentration which morpho-physiological variables are affected in in vitro Musa spp. plants, 'Grande naine' (AAA) and 'Pelipita' (ABB) cultivars. In vitro plants were subjected to four polyethylene glycol 6000 concentrations (3, 5, 7 and 9%; w/v) in semisolid multiplication culture medium. Also it was taken into account a control treatment without polyethylene glycol 6000. As stress indicators, plant height, leaf area, fresh weight, dry weight and malondialdehyde content were evaluated. After 30 days of culture, all variables were significantly affected in 'Grande naine' cultivar from 3% polyethylene glycol 6000, whereas in 'Pelipita' cultivar the affections began to be significative from 5%. These results indicated that 'Pelipita' cultivar tolerated the stress better than 'Grande naine'. From this, using these two cultivars as reference standards, the minimum polyethylene glycol 6000 concentration to select in vitro Musa spp. plants, tolerant to water deficit, may be 3%. Keywords: drought, Grand naine, in vitro selection, PEG, PelipitaLas sequías cada vez más intensas son un factor abiótico que ha afectado la producción de plátanos y bananos (Musa spp.), por ello se hace necesaria la obtención de cultivares tolerantes. La selección in vitro de plantas ofrece ventajas sobre la selección en campo pues ahora tiempo, recursos y permite trabajar con mayores volúmenes de individuos. Para este tipo de selección es necesario establecer una serie de condiciones. El objetivo del presente trabajo fue determinar la mínima concentración de polietilenglicol 6000 a la cual se afectan variables morfo-fisiológicas en plantas in vitro de los cultivares de Musa spp. ‘Grande naine’ (AAA) y ‘Pelipita’ (ABB). Las plantas fueron sometidas a cuatro concentraciones de polietilenglicol 6000 (3, 5, 7 y 9%; m/v) en medio de cultivo semisólido de multiplicación, y un tratamiento control sin la presencia de esta sustancia. Como indicadores de estrés se evaluaron las variables altura de la planta, área foliar, masa fresca, masa seca y contenido de malondialdehído. A los 30 días de cultivo se afectaron significativamente para el cultivar ‘Grande naine’ todas las variables a partir de 3% de polietilenglicol 6000, mientras que para el cultivar ‘Pelipita’ las afectaciones comenzaron a ser significativas a partir del 5% de esta sustancia. Los resultados indicaron que el cultivar ‘Pelipita’ toleró mejor el estrés que el ‘Grande naine’, y que usando estos dos cultivares como patrones de referencia, la mínima concentración de polietilenglicol 6000 para seleccionar in vitro plantas de Musa spp. tolerantes al déficit hídrico, puede ser 3%. Palabras clave: Grande naine, PEG, Pelipita, selección in vitro, sequí

    Diferenciación de cultivares de Phaseolus vulgaris L. mediante respuesta del tejido foliar expuesto a estrés hídrico y salino

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    The identification of Phaseolus vulgaris L. cultivars capable to tolerate abiotic stress without affecting its yield is a purpose of the breeding programs of this legume. The objective of this work was to differentiate P. vulgaris cultivars by the foliar tissue response exposed to hydric and saline stress in vitro induced. Leaf discs of 'Cuba Cueto 25-9 Negro' cultivar were placed in Petri dishes on filter paper. On each plate 2 ml of 6, 8, 10, 12, 14, 16 and 18% (w / v) PEG 6000 or 50, 100, 150, 200, 250, and 300 mM NaCl solution were added to induce hydric or saline stress. Deionized water was used as the control. The plates were maintained for 48 h at 25 ± 2 ° C. A scale of degrees of affectation was elaborated according to the percentage of foliar area with necrosis. In ten cultivars of P. vulgaris the assay was applied and its response recorded by the elaborated scale. Leaf tissue at 48 h showed necrotic areas. The designed scale was structured with seven grades where grade 1 corresponded with unaffected tissue and seven with tissue with total necrosis. The predominance of grade 3, 4 and 5 was observed. The response of cultivars exposed to PEG 6000 and NaCl was influenced by the type of stressor and it was classified as high, intermediate or low. The test of P. vulgaris leaf discs subjected to in vitro induced hydric and saline stress allows differentiation of the response of cultivars to these conditions through an elaborated qualitative scale based on the percentage of area with necrosis. Keywords: necrotic areas, legume, genetic improvement, NaCl, PEG 6000La identificación de cultivares de Phaseolus vulgaris L. capaces de tolerar estrés abiótico sin que se afecte su rendimiento es un propósito de los programas de mejoramiento genético de esta leguminosa. El objetivo de este trabajo fue diferenciar cultivares de P. vulgaris mediante la respuesta de tejido foliar expuesto a estrés hídrico y salino inducido in vitro. Discos de hojas del cultivar ‘Cuba Cueto 25-9 Negro’ se colocaron en placas Petri sobre papel de filtro. En cada placa se añadieron 2 ml de solución de PEG 6000  al 6, 8, 10, 12, 14, 16 y 18% (m/v) o NaCl  a 50, 100, 150, 200, 250 y 300 mM para inducir estrés hídrico o salino. Como control se empleó agua desionizada. Las placas se mantuvieron durante 48 h a 25 ± 2 °C. Se elaboró una escala de grados de afectación según el porcentaje de área foliar con necrosis. En diez cultivares se aplicó el ensayo y se registró su respuesta mediante la escala elaborada.  El tejido foliar a las 48 h presentó áreas necróticas. La escala diseñada se estructuró con siete grados donde el grado 1 se correspondió con tejido no afectado y el siete con tejido con necrosis total. Se observó predominio de los grados 3, 4 y 5. La respuesta de los cultivares expuestos a PEG 6000 y NaCl estuvo influenciada por el tipo de agente estresante y se clasificó en alta, intermedia o baja. El ensayo de discos de hojas de P. vulgaris sometidos a estrés hídrico y salino inducidos in vitro permitió diferenciar la respuesta de cultivares a estas condiciones mediante una escala cualitativa elaborada basada en el porcentaje de área con necrosis. Palabras clave: áreas necróticas, leguminosa, mejoramiento genético, NaCl, PEG 600

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