Biotecnología Vegetal (E-Journal - Instituto de Biotecnología de las Plantas. Universidad Central Marta Abreu de Las Villas)
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Protocolo para la propagación in vitro de Colocasia esculenta cv. ‘INIVIT MC-2012’
The in vitro establishment of malanga (Xanthosoma and Colocasia) from plant material cultivated in the field has been one of the ways to initiate the in vitro propagation. For this purpose different types of explants and methods have been used. The objective of this work was to present a protocol for the in vitro propagation of C. esculenta cv. 'INIVIT MC-2012'. Procedures are included for in vitro establishment from axillary buds of primary rhizomes of field-grown plants and axillary buds from field propagated plants that were modified to decrease the impact of bacterial contamination. In addition, a procedure for the visual detection of bacterial contaminants and alternatives for the in vitro propagation of this cultivar is presented.Keywords: bacterial contamination, taro, meristemsEl establecimiento in vitro de malanga (Xanthosoma y Colocasia) a partir de material vegetal procedente de campo ha sido una de las vías para iniciar su propagación in vitro. Para ello se han empleado diferentes tipos de explantes y métodos. Este trabajo persiguió como objetivo presentar un protocolo para la propagación in vitro de C. esculenta cv. ‘INIVIT MC-2012’. Se incluyen procedimientos para el establecimiento in vitro a partir de yemas axilares de rizomas primarios de plantas cultivadas en campo y de yemas axilares de plantas propagadas en campo que se modificaron para disminuir el impacto de la contaminación bacteriana. Además, se presenta un procedimiento para la detección visual de contaminantes bacterianos y alternativas para la propagación in vitro de este cultivar.Palabras clave: contaminación bacteriana, malanga, meristemo
Caracterización histológica del enraizamiento in vitro de brotes de caña de azúcar en medio de cultivo líquido
In the sugarcane (Saccharum spp.) propagation in temporary immersion there are individual shoots or groups of shoots that require their in vitro rooting before being transferred to natural conditions. The objective of the present work was to characterize the in vitro rooting of sugarcane shoots in liquid culture medium by histological analysis. Sugarcane shoots cv. 'Ragnar' were rooted by two methods: static liquid culture medium (MCLE) and Temporal Immersion Bioreactor (BIT). As initial explants, individual shoots or groups of shoots were used together to form a ‘macolla’. The shoots were then acclimatized. To characterize rooting histologically, samples were taken for each culture form and explant type at 0, 3, 6 and 9 days of culture. It was demonstrated that in vitro rooting of shoots group directly in BIT is effective. This prevents further manipulation of the explants and satisfactory survival results (90%) are achieved in acclimatization. In addition, it was verified that root formation in stems, regardless of the method of cultivation used (MCLE or BIT), both in individual shoots and in groups of shoots, occurs from the continuous growth of perivascular parenchyma cells during first 3 days of culture. The most internal shoot of group of shoots also present a high rhizogenic potential, with root primordia characterized by a high root apex distinction and the presence of calyptra, influenced by the mechanical obstruction exerted by leaf pods of the shoot itself and adjacent shoots. Keywords: acclimatization, calyptra, histology, in vitro roots, temporary immersionEn la propagación de caña de azúcar (Saccharum spp.) en inmersión temporal se producen brotes individuales o grupos de brotes que requieren de su enraizamiento in vitro antes de ser transferidos a condiciones naturales. El presente trabajo tuvo como objetivo caracterizar el enraizamiento in vitro de brotes de caña de azúcar en medio de cultivo líquido mediante un análisis histológico. Los brotes de caña de azúcar cv. ‘Ragnar’ se enraizaron mediante dos métodos: medio de cultivo líquido estático (MCLE) y Biorreactor de Inmersión Temporal (BIT). Como explantes iniciales se emplearon brotes individuales o grupos de brotes unidos entre sí formando una ‘macolla’. Posteriormente los brotes se aclimatizaron. Para caracterizar histológicamente el enraizamiento se tomaron muestras por cada forma de cultivo y tipo de explante a los 0, 3, 6 y 9 días de cultivo. Se demostró que es efectivo el enraizamiento in vitro de grupo de brotes directamente en BIT. Con esto se evita manipulación adicional de los explantes y se alcanzan resultados satisfactorios de supervivencia (90%) en la aclimatización. Además, se comprobó que la formación de raíces en los tallos, independiente del método de cultivo utilizado (MCLE o BIT), tanto en los brotes individuales como en los grupos de brotes, ocurre a partir del crecimiento continuado de células del parénquima perivascular durante los primeros 3 días de cultivo. Los brotes más internos de los grupos de brotes también presentan un elevado potencial rizogénico, con primordios de raíces caracterizados por una alta distinción del ápice radical y la presencia de caliptra, influenciado por la obstrucción mecánica que ejercen las vainas de las hojas del brote en sí mismo y de los brotes adyacentes. Palabras clave: aclimatización, caliptra, histología, inmersión temporal, raíces in vitr
Respuesta de diferentes líneas y cultivares de arroz sometidos a bajas temperaturas en condiciones controladas
Rice (Oryza sativa L.) is the most important food crop in the world and primary source of food for more than a third of the population. The low temperatures are among the main abiotic stresses that affect the yield of this cereal. The objective of this work was to determinate the response of different lines and cultivars of rice in seedling state to low temperature stress under controlled conditions. 172 lines and cultivars were studied. It were subjected to 5 0C for 24 hours, when the plants were about three to four leaves. The evaluations were conducted by measured of chlorophyll fluorescence and visually. A wide range of response was obtained, which indicated a high allelic diversity for the low temperatures sensitivity in the studied germplasm. A group of 30 cultivars responded more favorably to the cold and the most prominent cultivars showed Fv/Fm values between 0.80 and 0.89. A significant relationship between visual evaluation and chlorophyll fluorescence was found. The correlation coefficient revealed a moderately strong relationship between both variables. Tolerant plant materials were more consistently identified. However, the dispersion between methods increased to more susceptible cultivars. Keywords: cold tolerance, chlorophyll fluorescence, Oryza sativa, visual evaluationEl arroz (Oryza sativa L.) es el cultivo alimentario más importante del mundo y fuente primaria de alimentos para más de un tercio de la población mundial. Las bajas temperaturas están entre los principales estreses abióticos que afectan los rendimientos de este cereal. Este trabajo tuvo como objetivo determinar la respuesta de diferentes líneas y cultivares de arroz en estado de plántula, al estrés por bajas temperaturas en condiciones controladas. Se estudiaron 172 líneas y cultivares que fueron sometidos a 5 0C durante 24 horas, cuando las plántulas tenían de tres a cuatro hojas. Las evaluaciones se realizaron mediante medición de la fluorescencia clorofílica y escala visual. Se obtuvo un amplio rango de respuestas, lo cual indicó una gran diversidad alélica para la sensibilidad a las bajas temperaturas en el germoplasma estudiado. Un grupo de 30 cultivares respondió de manera más favorable al frío y los más destacados resultaron tener valores Fv/Fm entre 0.80 y 0.89. Se encontró una relación significativa entre la evaluación visual y la fluorescencia clorofílica. El coeficiente de correlación reveló una relación moderadamente fuerte entre ambas variables. Los materiales vegetales tolerantes se identificaron de modo más consistente. En cambio, la dispersión entre métodos se incrementó hacia los de mayor susceptibilidad. Palabras clave: evaluación visual, fluorescencia clorofílica, Oryza sativa, tolerancia a frí
Respuesta de plantas micropropagadas de Opuntia stricta Haw. en aclimatización y campo
Forage palm (Opuntia stricta Haw.) is a great important crop for the semi-arid region of Brasil. It has been propagated through in vitro culture, by areole activation. This work aimed to determine the response of Opuntia stricta Haw. variety ‘Oreja de Elefante Mexicana’ micropropagated plants during its acclimatization and field planting. Plants were acclimatized in tubes and plastic bags with a mixture of soil and manure, and it were kept in greenhouse for 130 days. Later, the plants kept in tubes were divided into nine treatments, according to their size (between 6 to 14 cm), and transfer to the field. The use of tubes provided a higher survival, height, fresh and dry mass of the cladodes. There was no significant differences between the recipients used for root development. At the end of acclimatization it was observed that plants did not have a uniform development, presenting size variation. After the first 15 days in the field, the majority of the plants with primary shoots were larger than 10 cm. At 60 days the survival was 100%, and all plants presented shoots, even the smallest. However, is recommended that plants larger than 10 cm will be used, due to the better establishment to field conditions. The results demonstrate the feasibility in the use of micropropagated plants for the establishment of forage palm fields.Keywords: cladodes, forage palm, in vitro culture, semi-arid regionEl nopal forrajero (Opuntia stricta Haw.) es un cultivo de gran importancia para la región semiárida de Brasil que se ha propagado a través de cultivo in vitro mediante la activación de areolas. Este trabajo tuvo como objetivo determinar la respuesta de plantas micropropagadas de Opuntia stricta Haw. variedad ‘Oreja de Elefante Mexicana’ durante su aclimatización y plantación en campo. Las plantas fueron aclimatizadas en tubetes y bolsas plásticas con una mezcla de suelo y estiércol, y mantenidas en invernadero por 130 días. Posteriormente las plantas cultivadas en tubetes fueron divididas en nueve tratamientos, de acuerdo con su altura (entre 6 y 14 cm) y llevadas al campo. El uso de tubetes proporcionó mayor supervivencia, altura y masa fresca y seca de los cladodios. En cuanto al desarrollo radicular, no hubo diferencias significativas entre los envases utilizados. Al final de la aclimatización se observó que las plantas no tenían un desarrollo uniforme, con variaciones de altura. Después de los 15 primeros días en campo, la mayoría de las plantas con brotes primarios tenían altura superior a 10 cm. A los 60 días la supervivencia fue 100% y todas las plantas presentaban brotes, incluso las de menor altura, pero se recomienda que sean utilizadas plantas mayores de 10 cm, debido al mejor establecimiento a las condiciones de campo. Los resultados demostraron la viabilidad del uso de plantas micropropagadas para el establecimiento de campos de nopal forrajero. Palabras clave: cladodios, cultivo in vitro, nopal forrajero, región semiárid
Cancro bacteriano asociado a Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis en naranjilla en Ecuador
Bacterial canker of naranjilla or lulo (Solanum quitoense and Solanum pectinatum) is a new disease that could completely destroy naranjilla plants. The objectives of this study were to identify and characterize bacteria associated with canker wilt of naranjilla, and to determine the importance of wounds in the dissemination and transmission of bacterial canker.Symptoms of this disorder consist of dieback and leaves showing incurvature which was diagnostic to confirm bacterial wilt. Collapse of leaf panel on Nicotiana tabacum confirmed that the bacterium is phytopathogenic. This bacterium showed positive serological tests for Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis, positive Gram reaction, growth on NCP 88, (ELISA+ GRAM+ NCP 88 +) as well as re-isolation through Koch postulates in Solanum cheesmanii. Aerial wounds appear to be the most important means for dissemination. More research is needed about the molecular characterization of the bacterium, and potential for the bacterium to be transmitted to other solanaceous crops. Keywords: emerging infectious crop diseases, Solanum quitoense, Solanum pectinatum, Solanum cheesmanii, Solanum hirsutumLa marchitez bacteriana o cancro bacteriano de la naranjilla o lulo (Solanum quitoense y Solanum pectinatum) es una enfermedad con potencial para destruir completamente el cultivo. Los objetivos de este estudio fueron identificar y caracterizar la bacteria o bacterias asociadas al cancro bacteriano en naranjilla y determinar la importancia de las heridas en su transmisión y diseminación. Los síntomas de esta enfermedad consistieron en muerte descendente, y la curvatura de la nervadura principal que constituye un síntoma diagnóstico para la confirmación de marchitez bacteriana. El colapso del panel intervenal (propio de respuesta de hipersensibilidad) en Nicotiana tabacum permitió la confirmación de que la bacteria aislada era patogénica. Esta cepa bacteriana presentó serología positiva para Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis, reacción Gram positiva, crecimiento en medio de cultivo semi-selectivo NCP 88 (ELISA+ GRAM+ NCP 88 +), así como re-aislamiento a partir de tejido de Solanum cheesmanii previamente inoculado para cumplir con los postulados de Koch. Heridas aéreas desarrolladas durante la poda con equipo de poda no desinfectado parece ser la forma principal de diseminación. Estudios adicionales son necesarios dirigidos hacia la caracterización molecular de la bacteria, y el potencial de diseminación de la bacteria hacia otras solanáceas. Palabras clave: enfermedades infecciosas emergentes, Solanum quitoense, Solanum pectinatum, Solanum cheesmanii, Solanum hirsutu
Efecto de luz LED sobre semillas de Capsicum annuum L. var. serrano
Serrano pepper (Capsicum annuum L.) is a crop of economic, nutritional and medicinal importance; so it is necessary to increase its production and improve its characteristics. The objective of this research was to evaluate the stimulatory effect of light emitting diodes (LEDs) on serrano pepper seedlings. Germination percentage, stem length, leaf width, leaf length, number of leaves, total chlorophyll content and carotenoid content were analyzed. The seeds were exposed to white, blue and red LED light, using fluorescent light as a control and a photoperiod of 11/13 hours. Once germinated, the seedlings continued with exposure to light for 30 days. After the laboratory conditions, the seedlings were transferred to a greenhouse for 60 days. The results show that there were no significant differences between LED light treatments on seed germination. The variables stem length, leaf width and leaf length, were favored with red light. Blue and red LEDs highlighted by increasing the number of leaves. Seedlings treated with blue light showed the highest content of photosynthetic pigments (chlorophyll= 0.84 mg g-1, carotenoid= 0.12 mg g-1). In conclusion, the red LED light is effective for the growth of serrano pepper seedlings, while the production of photosynthetic pigments was favored by blue LED light. Keywords: peppers, light-emitting diodes, germination, growth, photosynthetic pigmentsEl chile serrano (Capsicum annuum L.), es un cultivo de importancia económica, alimenticia y medicinal; por lo que es necesario incrementar su producción y mejorar sus características. Esta investigación, tuvo como objetivo evaluar el efecto estimulatorio que ejercen los diodos emisores de luz (LEDs), sobre plántulas de chile serrano. Se analizó el porcentaje de germinación, longitud de tallo, ancho de hoja, longitud de hoja, número de hojas, contenido de clorofila total y de carotenoides. Las semillas se expusieron a luz LED blanca, azul y roja, utilizando luz fluorescente como control y fotoperiodo de 11/13 horas. Una vez germinadas, las plántulas continuaron con la exposición a la luz por 30 días en condiciones de laboratorio y posteriormente se mantuvieron en invernadero por 60 días. Los resultados mostraron que no hubo diferencias significativas entre los tratamientos de luz LED sobre la germinación de las semillas. Las variables longitud de tallo, ancho y longitud de hoja se favorecieron con luz roja, mientras que los LEDs azules y rojos destacaron por aumentar el número de hojas. Las plántulas tratadas con luz azul presentaron el mayor contenido de pigmentos fotosintéticos (Clorofila= 0.84 mg g-1, Carotenoides= 0.12 mg g-1). Se concluye que la luz LED roja es eficaz para el crecimiento de las plántulas de chile serrano, mientras que la producción de pigmentos fotosintéticos se favorece con la luz LED azul. Palabras clave: chiles, diodos emisores de luz, germinación, crecimiento, pigmentos fotosintético
Propagación in vitro de Caesalpinia spinosa (Mol.) O. Kuntz a partir de yemas axilares de árboles plus seleccionados
Guarango or tara [Caesalpinia spinosa (Mol.) O. Kuntz] is a tree native to the Andes, with great economic importance and for reforestation programs. The aim of this work was to in vitro propagate this specie from axillary buds of selected trees. During in vitro establishment, the effect of sodium hypochlorite (3.0%) with different times of disinfection (5.0, 10, 15 min), as well as the effect of 6-BAP on the in vitro response of buds were studied. For multiplication, different combination of 6-BAP with 0.1 mg l-1 ANA were tested. A free-growth regulator culture medium was used for rooting. The best results for in vitro establishment were achieved with a disinfection treatment with sodium hypochlorite 3.0% for 10 minutes and cultivation in a culture medium with 0.25 mg l-1 6-BAP, which 90% of buds in vitro established, with a length of 6.71 cm. The highest multiplication rate of shoot (2.88 per explant) was obtained with 1.0 mg l-1 6-BAP and 0.1 mg l-1 ANA, after 60 days of culture. The 55% of these shoots developed roots in a half-strength basal salts MS culture medium free of regulators of growth. Keywords: biodiversity, conservation, forest plant, guarango, tissue cultureEl guarango o tara [Caesalpinia spinosa (Mol.) O. Kuntz] es un árbol originario de los Andes, con gran importancia económica para los programas de reforestación. El objetivo de este trabajo fue propagar in vitro esta especie a partir de yemas axilares obtenidas de árboles plus seleccionados por sus características morfo-agronómicas superiores. En el establecimiento in vitro, se estudió el efecto del hipoclorito de sodio (3.0%) con diferentes tiempos de desinfección (5, 10, 15 min), así como el efecto del 6-BAP en la respuesta in vitro de las yemas. Para la multiplicación se combinaron diferentes concentraciones de 6-BAP con 0.1 mg l-1 de ANA. Los brotes fueron enraizados en un medio de cultivo de similar composición al de la fase de multiplicación pero sin reguladores del crecimiento. El tratamiento con 3.0% de hipoclorito de sodio por 10 minutos y un medio de cultivo con 0.25 mg l-1 de 6-BAP fue el mejor para el establecimiento in vitro, con el cual se alcanzaron un 90% de brotes establecidos in vitro, con una longitud de 6.71 cm. La mayor tasa de multiplicación de brotes (2.88 por explante) se obtuvo con 1.0 mg l-1 de 6-BAP y 0.1 mg l-1 de ANA después de 60 días de cultivo. El 55% de estos brotes enraizaron en un medio de cultivo con la mitad de las sales MS, sin reguladores del crecimiento. Palabras clave: biodiversidad, conservación, cultivo de tejidos, guarango, planta foresta
Efecto de la aplicación del H2O2 durante la interacción ‘Grande naine’-Mycosphaerella fijiensis
In Musa spp. considerable economical lost are cause by Mycosphaerella fijiensis infection around the world, that is why the study of the pathosystem constitute a priority. However, the main mechanisms activated in banana after infection are still unknown and are a limitation for a better understanding of this complex relationship. The objective of this study was to determine the effect of hydrogen peroxide (H2O2) application, on leaves of ‘Grande naine’ plants, on black leaf streak disease development (BLSD). For this purpose, the first three open leaves of banana plants were inoculated with the monoascosporic isolate of M. fijiensis CCIBP-Pf-83. At three days post-inoculation different H2O2 concentrations (10, 20, 30 and 40 mmol l-1) were sprayed to these plants as well as to non-inoculated ones. During the time course of the experiment for inoculated, sprayed plants and for control plants (infected with M. fijiensis) epidemiological variables as well as the area of necrotic lesions at 49 dpi were measured. The findings of this analysis showed that the early application of H2O2 have influence on the BLSD development. Keywords: banana, black leaf streak disease, hemibiotrophic, hydrogen peroxideEn Musa spp. la infección con Mycosphaerella fijiensis Morelet causa considerables pérdidas económicas alrededor del mundo, por lo cual el estudio del patosistema constituye una prioridad. Sin embargo, los principales mecanismos activados en bananos después de la infección aún se desconocen y son una limitante para el mejor entendimiento de esta compleja relación. El objetivo de este estudio fue determinar el efecto de la aplicación de peróxido de hidrógeno (H2O2), en hojas de plantas de ‘Grande naine’, en el desarrollo de la enfermedad del rayado negro de la hoja (BLSD). Para este propósito, las tres primeras hojas abiertas de las plantas de banano se inocularon con el aislado monoascospórico de M. fijiensis CCIBP-Pf-83. A los tres días posteriores a la inoculación diferentes concentraciones de H2O2 (10, 20, 30 y 40 mmol l-1)se asperjaron a estas plantas así como a las no-inoculadas. Durante el curso de tiempo del experimento en plantas inoculadas, asperjadas y para las plantas control (infectadas con M. fijiensis) se determinaron variables epifitiológicas así como el área de las lesiones necróticas a los 49 dpi. Los resultados mostraron que la aplicación temprana de H2O2 tiene influencia en el desarrollo de BLSD. Palabras clave: banano, enfermedad del rayado negro de la hoja, hemibiotrófico, peróxido de hidrógen
Efecto del sustrato en la aclimatización de plantas in vitro de Aloe vera L.
Aloe vera L. for its exceptional therapeutic properties has great economic importance. However, the main problem, especially in Cuba, lies in the scarce commercial plantations. The development of in vitro propagation protocols may contribute to this end. The present work was carried out with the objective of determining the effect of the substrate in the acclimatization of in vitro plants of Aloe vera. Substrates were formulated with different ratios of compost and zeolite (100: 0, 75:25, 50:50, 25:75, 0: 100). A 100% survival rate was achieved, 8.38 leaves per plant with a height of 9.02 cm and the highest number of roots per plant (7.69) in the substrate containing 100% compost. In vitro plants showed 100% survival in field conditions, similar to plants obtained by traditional methods. However, the number of shoots per in vitro plant cultivated in the field was five while the plants cultivated by traditional methods were 2.7 after 60 days of planted. In Cuba, the present research constitutes the first report about the effect of the substrate on the acclimatization of in vitro plants as the last stage of an in vitro propagation protocol and its response under field conditions. These results close the cycle of in vitro plant culture that corroborates the possibility of using them in the establishment of commercial plantations for use in the pharmaceutical and cosmetic industries. Keywords: compost, ex vitro conditions, in vitro plants, zeoliteAloe vera L. por sus propiedades terapéuticas excepcionales tiene gran importancia económica. Sin embargo, la principal problemática, especialmente en Cuba, radica en las escasas plantaciones comerciales. El desarrollo de protocolos de propagación in vitro puede contribuir a este fin. El presente trabajo se realizó con el objetivo de determinar el efecto del sustrato en la aclimatización de plantas in vitro de Aloe vera. Se formularon sustratos con diferentes proporciones de Compost y zeolita (100:0, 75:25, 50:50, 25:75, 0:100). Se logró un 100% de supervivencia, 8.38 hojas por planta con una altura de 9.02 cm y el mayor número de raíces por planta (7.69) en el sustrato que contenía el 100% de compost. Las plantas in vitro mostraron en condiciones de campo 100% de supervivencia, similar a las plantas obtenidas por métodos tradicionales. Sin embargo, el número de hijuelos por planta in vitro cultivada en campo fue de cinco mientras que las plantas cultivadas por métodos tradicionales fue de 2.7 a los 60 días de plantadas. En Cuba la presente investigación constituye el primer informe del efecto del sustrato en la aclimatización de plantas in vitro como última fase de un protocolo de propagación in vitro y su respuesta en condiciones de campo. Estos resultados cierran el ciclo de cultivo de plantas in vitro que corroboran la posibilidad de emplearlas en el establecimiento de plantaciones comerciales para el uso en las industrias farmacéuticas y de cosméticos. Palabras clave: condiciones ex vitro, compost, plantas in vitro, zeolit
Caracterización fitoquímica de la especie amenazada Fraxinus caroliniana Mill subsp. cubensis (Griseb.) Borhidi
Fraxinus caroliniana Mill subsp. cubensis (Griseb.) Borhidi is commonly known as buffalo, represents an endemic subspecies and categorized as critical danger of extinction in Cuba. This work aimed to characterize the phytochemical composition of plants of F. caroliniana in two localities of the Matanzas province. The presence of secondary metabolites in leaf extracts was qualitatively analyzed and reductive and total sugars were quantified. The results indicated the presence of flavonoids, terpenes, steroids, saponins, tannins and anthraquinones in leaves that could be considered for further systematic studies and application in agriculture. The plants from the Ciénaga de Zapata showed contents of reducing sugars and totals higher than those obtained in the plants of Martí. These results provide information for the identification of characters of possible taxonomic and conservation value in this species. Keywords: anthraquinons, extracts, swamp ash, steroids, tannins, terpensFraxinus caroliniana Mill subsp. cubensis (Griseb.) Borhidi es conocida comúnmente como búfano, representa una subespecie endémica y categorizada en Peligro Crítico de extinción en Cuba. Este trabajo tuvo como objetivo caracterizar la composición fitoquímica de plantas de F. caroliniana en dos localidades de la provincia de Matanzas. Se analizó cualitativamente la presencia de metabolitos secundarios en extractos foliares y se cuantificaron azúcares reductores y totales. Los resultados indicaron la presencia de flavonoides, terpenos, esteroides, saponinas, taninos y antraquinonas en hojas que pudieran ser consideradas para posteriores estudios sistemáticos y de aplicación en la agricultura. Las plantas provenientes de la Ciénaga de Zapata mostraron contenidos de azúcares reductores y totales superiores a los obtenidos en las plantas de la localidad de Martí. Estos resultados aportan información para la identificación de caracteres de posible valor taxonómico y conservacionista en esta especie. Palabras clave: antroquininas, búfano, esteroides, extracto, taninos, terpeno