Biotecnología Vegetal (E-Journal - Instituto de Biotecnología de las Plantas. Universidad Central Marta Abreu de Las Villas)
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    Caracterización de la respuesta in vitro de callos de Phaseolus vulgaris cultivar ʹBAT-93ʹ a estrés hídrico inducido con PEG-6000

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    Water stress is one of the major abiotic factors that limits the growth and productivity of many cultures including Phaseolus. In this research the in vitro callus response of cultivar ʹBAT-93ʹ, in multiplication culture media with 6% of polyethylenglycol-6000 (PEG-6000) as water stress inductor was characterize. First, the callus response at 21 days of culture under water stress conditions was assessed. At the same time, the effect of subculture number on callus response with the use of two treatments was also determined. In the treatment I, the callus were subculture at 7 and 14 days of culture and then evaluated at 14 and 21 days respectively. In the treatment II, the callus were subcultivated at 14 days and subsequently assessed one week later. In each test, the degree of callus affectation as well as the frequency of its appearance was evaluated. The experimental design included 35 explants for both control as well as for every stress induction analysis. The callus growing in PEG-6000 free culture medium was considered as control. In this research, the water stress induction with 6% of PEG-6000 affected the in vitro response of ʹBAT-93ʹ callus. In the treatment II the use of only one in vitro callus subculture, reduced the affectation of them under stressing conditions respect to the use of two subcultures. The results constituted a step in advance in genetic focus on water stress tolerance in Phaseolus.El estrés hídrico es uno de los principales factores abióticos que limita el crecimiento y productividad de muchos cultivos incluyendo Phaseolus. En esta investigación se caracterizó la respuesta in vitro de callos del cultivar ʹBAT-93ʹ, en medio de cultivo de multiplicación con 6% de polietilenglicol-6000 (PEG-6000) como inductor de estrés hídrico. Primero, se evaluó la respuesta de los callos a los 21 días de cultivo bajo condiciones de estrés hídrico. Al mismo tiempo, se determinó el efecto del número de subcultivos en la respuesta de los callos con el uso de dos tratamientos. En el tratamiento I, los callos fueron subcultivados a los 7 y 14 días de cultivo y posteriormente evaluados a los 14 y 21 días respectivamente. En el tratamiento II, los callos se subcultivaron a los 14 días y posteriormente evaluados una semana después. En cada ensayo se evaluó el grado de afectación de los callos así como la frecuencia de su aparición. El diseño experimental incluyó 35 explantes tanto para el control así como para cada análisis de inducción de estrés. El crecimiento de los callos en medio de cultivo libre de PEG-6000 se consideró como control. En esta investigación la inducción de estrés hídrico con 6% de PEG-6000 afectó la respuesta in vitro de los callos de ʹBAT-93ʹ. En el tratamiento II la utilización de un solo subcultivo in vitro de los callos, redujo su afectación bajo condiciones estresantes respecto al uso de dos subcultivos. Los resultados constituyeron un paso de avance en los estudios de mejoramiento genético, enfocados hacia la tolerancia a estrés hídrico en Phaseolus

    Establecimiento in vitro de la especie ornamental Aglaonema spp.

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    There is commercial interest in plants of the genus Aglaonema as ornamentals given their morphophysiological characteristics. However, the demand is not met through the main propagation methods used. Therefore, it is necessary to develop in vitro propagation protocols. The objective of this study was to establish Aglaonema spp. in vitro through direct organogenesis. Three exposure times (15, 20, and 25 min) of the nodal segments to sodium hypochlorite (3.0%) were evaluated. In addition, the effect of two concentrations of 6- BAP in the in vitro establishment culture medium was determined. The disinfection protocol reduced visible microbial contamination depending on the exposure time to sodium hypochlorite. The best results were obtained with 20 and 25 min, with no significant differences between them. After 15 days of culture, the survival rate coincided with the percentage of contamination. In treatments with the two concentrations of 6- BAP tested, bud sprouting and in vitro shoot growth were observed in 100% of live explants, with vigorous growth, an intense green color, and the presence of expanded leaves after 35 days of cultivation. The results indicated that in vitro shoot establishment of Aglaonema spp. from axillary buds of adult plants is possible using 6- BAP in the culture medium. This is the first report of in vitro establishment of this species in Cuba.Existe un interés comercial sobre plantas del género Aglaonema como ornamental dadas sus características morfofisiológicas. Sin embargo, por las vías principales de propagación usadas no se suple la demanda. Por ello, se hace necesario desarrollar protocolos de propagación in vitro. El objetivo del presente trabajo fue establecer in vitro Aglaonema spp., a través de organogénesis directa. Se evaluaron tres tiempos de exposición (15, 20 y 25 min) de los segmentos nodales al hipoclorito de sodio (3.0%). Además, se determinó el efecto de dos concentraciones de 6-BAP en el medio de cultivo de establecimiento in vitro. El protocolo de desinfección redujo la contaminación microbiana visible dependiendo del tiempo de exposición al hipoclorito de sodio. Los mejores resultados se obtuvieron con 20 y 25 min, sin diferencias significativas entre ellos. A los 15 días de cultivo el porcentaje de supervivencia coincidió con el porcentaje de contaminación. En los tratamientos con las dos concentraciones de 6-BAP  ensayadas se observó la brotación de yemas y el crecimiento del brote in vitro en el 100% de los explantes vivos con un crecimiento vigoroso, color verde intenso y presencia de hojas expandidas a los 35 días de cultivo. Los resultados indicaron que es posible el establecimiento in vitro de brotes de Aglaonema spp. a partir de yemas axilares de plantas adultas y el empleo de 6-BAP en el medio de cultivo. Este es el primer informe de establecimiento in vitro de esta especie en Cuba

    Formación y desarrollo de brotes in vitro de Anthurium magnificum Linden a partir de yemas adventicias

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    Within the Araceae family, Anthurium magnificum Linden is an ornamental planthighly appreciated for its exotic foliage. It is mainly used as a potted plant,although in recent years its use as cut foliage has increased. In this species,conventional propagation methods have certain limitations, which do not allowthe growing demand for this plant to be met. In the scientific literature there isno protocol for propagating this species through in vitro culture. This work aimedto determine the effect of two culture media on the formation and developmentof in vitro shoots of Anthurium magnificum from adventitious buds. The MSculture medium and the MS culture medium enriched with 1.0 mg l-1 of gibberellicacid were used. The results showed that the highest number of shoots wasobtained in the MS culture medium without the presence of gibberellic acid. Alsoin this culture medium the greatest length of the shoots and the highest averagenumber of leaves per shoot were achieved. This study is the first scientific report on the in vitro shoots formation and development from adventitious buds in thisspecies.Dentro de la familia Araceae, Anthurium magnificum Linden es una planta ornamental muy apreciada por su exótico follaje. Se emplea principalmente como planta de maceta, aunque en los últimos años se ha incrementado su uso como follaje de corte. En esta especie, los métodos de propagación convencionales presentan ciertas limitantes por lo que no permiten satisfacer la creciente demanda de esta planta. En la literatura científica no existe un protocolo de propagación de esta especie mediante su cultivo in vitro. Este trabajo tuvo como  determinar el efecto de dos medios de cultivo en la formación y desarrollo de brotes in vitro de Anthurium magnificum a partir de yemas adventicias. Se empleó el medio de cultivo MS y el medio de cultivo MS enriquecido con 1.0 mg l-1 de ácido giberélico. Los resultados mostraron que en el medio de cultivo MS sin la presencia de ácido giberélico fue donde mayor número de brotes se obtuvo. También en este medio de cultivo se logró la mayor longitud de los brotes y el mayor número promedio de hojas por brote. Este estudio es el primer informe científico sobre la formación y desarrollo de brotes in vitroa partir de yemas adventicias en esta especie

    Caracterización morfológica de dos especies de trips en plantas de frijol común tratadas con el bioproducto CBQ-AgroG®

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    Magalurothrips usitatus BAGNAL constituye una de las especies dentro de la familia Thripidae que másafectaciones económicas importantes produce en plantaciones de frijol común (Phaseolus vulgaris L.). Sin embargo, diferenciar su presencia de otras especies de trips comunes en el cultivo resulta engorroso para los productores y hacer un diagnóstico presuntivo en el campo. El presente trabajo se realizó con el objetivo de caracterizar morfológicamente las especies Megalurothips usitatus BAGNALy Frankliniella insulares Franklin en un área de frijol común donde se empleó como único producto para la nutrición de las plantas el bioproducto CBQ-AgroG®. Se utilizó semilla registrada del cultivar comercial ‘CUL-156’. Los insectos se recolectaron en plantas con sintomatología de daños. La identificación se realizó mediante la metodología orientada por el Procedimiento Normativo Operacional del Centro Nacional de Sanidad Vegetal. Para la caracterización morfológica se emplearon las claves taxonómicas establecidas para el orden Thysanoptera. Se describieron las características morfológicas de cada especie y se establecieron las principales diferencias.Se comprobó la presencia de M. usitatus y F. insulares. Ambas se encontraban asociadas en las plantas muestreadas. Fue posible diferenciarlas de forma sencilla mediante características morfológicas para su rápido diagnóstico. Los resultados pueden contribuir al diagnóstico temprano por productores especialistas y técnicos

    Utilización del Pectimorf® en el desarrollo de plantas in vitro procedentes de embriones somáticos cv. de banano ‘FHIA 01’ (Musa AAAB)

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    Pectimorf® is has been has been used as partial or total substitute of the plant growth regulators in the in vitro propagation of different crops.  Nevertheless, its effect has not been evaluated in the somatic embryogenesis in bananas to large scale. Therefore, the investigation about the effect of the Pectimorf® in the development of in vitro plants of somatic embryos in germination phase of banana cultivar 'FHIA 01' (AAAB) to commercial scale in the Biofábrica Granma was carried out. The treatments consisted on the use of the alone Pectimorf® (5, 10 and 15 mg l-1) and combined with the plant growth regulators (2 mg l-1 AIA + 0.05 mg l-1 6-BAP). At 30 days after culture it was taken randomly 60 in vitro plants (from 200 somatic embryos per treatment with three replicate) in which were determined the following variables: rooting and survival percentage,bud, leaves and root numbers, pseudostem height and thickness (cm), root greater size length (cm), air and root part mass dry (g). Bigger vegetative development of the plants was obtained with the use of the alone Pectimorf® (to reason of 10 and 15 mg l-1) and combined with the plant growth regulators (AIA and 6-BAP) in the somatic embryogenesis of banana cultivar 'FHIA 01' (AAAB). These results can constitute an important alternative in the optimization from the propagation process to Cuban commercial large scale lab.Pectimorf® se ha empleado como sustituto parcial o total de los reguladores del crecimiento usados en la propagación in vitro de diferentes cultivos.  No obstante, su efecto no se ha evaluado en la embriogénesis somática de bananos a escala comercial. Por ello, esta investigación tuvo como objetivo determinar el efecto del Pectimorf® en el desarrollo de plantas in vitro procedentes de embriones somáticos de banano cv. ‘FHIA 01’ (Musa AAAB) en la Biofábrica de Granma. Los tratamientos consistieron en el uso del Pectimorf® solo (5, 10 y 15 mg l-1) y combinado con los reguladores del crecimiento (2 mg l-1 AIA + 0.05 mg l-1 6-BAP) del medio de cultivo.  A los 30 días, se tomaron aleatoriamente 60 plantas in vitro (de un total de 200 embriones somáticos germinados por tratamiento con tres réplicas), a los cuales se les determinaron las siguientes variables: porcentaje de supervivencia y enraizamiento, número de brotes, hojas y raíces, altura y grosor del pseudotallo, longitud de la raíz más larga, masa seca parte aérea y de las raíces. Se obtuvo mayor desarrollo vegetativo de las plantas con la utilización del Pectimorf® solo (a razón de 10 y 15 mg l-1) y combinado con los reguladores del crecimiento (AIA y 6-BAP). Estos resultados pueden constituir una alternativa en la optimización del proceso de propagación a escala comercial en la Biofábricas cubanas

    Aislamiento, cultivo y fusión de protoplastos en el género Vasconcellea

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    Species of the genus Vasconcellea, often called highland papayas, are wild relatives of the common papaya (Carica papaya L.) widely distributed in tropical America. Its uses are various, including: raw material in the tropical fruit industry as a source of papain or its use in genetic improvement programs. The present work was carried out with the objective of carrying out a review of scientific literature on the isolation, purification and fusion of protoplasts in the genus Vasconcellea and their uses in genetic improvement. In addition, the main sources of protoplasts of the genus Vasconcellea, the factors that influence the isolation process, the culture conditions and the fusion of the protoplasts are described. Finally, the advances achieved to date in intergeneric hybridization with Carica papaya to generate greater resistance and productivity are summarized.Las especies del género Vasconcellea, frecuentemente denominadas papayas de las tierras altas, son parientes silvestres de la papaya común (Carica papaya L.) ampliamente distribuida en la América tropical. Sus usos son varios entre los que se incluyen: materia prima en la industria de las frutas tropicales como fuente de papaína o su empleo en programas de mejoramiento genético. El presente trabajo se realizó con el objetivo de realizar una revisión de literatura científica sobre el aislamiento, purificación y fusión de protoplastos en el género Vasconcellea y sus usos en el mejoramiento genético. Además, se describen las principales fuentes de protoplastos del género Vasconcellea, los factores que influyen en el proceso de aislamiento, las condiciones de cultivo y la fusión de los protoplastos. Finalmente, se resumen los adelantos alcanzados hasta la fecha en la hibridación intergenérica con Carica papaya para generar mayor resistencia y productividad

    Efecto de Trichoderma sp. sobre la morfología, incidencia de plagas y rendimiento agrícola en Phaseolus vulgaris L. cv. ‘CUFIG-110’

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    The use of microbial bioproducts in the production of common bean (Phaseolus vulgaris L.) is an alternative to the lack of fertilizers and pesticides. The objective of this work was to evaluate the effect of the application of the bioproduct IBP-T45 (Trichoderma sp.) on morphological variables, the incidence of pests and agricultural yield in a crop cycle of Phaseolus vulgaris L. cv. ‘CUFIG-110’. The application of IBP-T 45 was carried out on the seeds before sowing and an absolute control was also used. From 25 days after sowing (das), the height was measured and the number of leaves per plant was quantified. Also, the incidence of pests present in the plants from germination was determined. The agricultural yield was estimated and its components were evaluated. The application of the bioproduct IBP-T45 in the treatment of seeds of common bean cv. ‘CUFIG-110’ stimulates leaf development in plants, reduces the incidence of Fusarium spp. and contributes to increased agricultural yield.La utilización de bioproductos de origen microbiano en la producción de frijol común (Phaseolus vulgaris L.) es una alternativa ante la falta de fertilizantes y plaguicidas. Este trabajo tuvo como objetivo evaluar el efecto de la aplicación del bioproducto IBP-T45 (Trichoderma sp.) sobre variables morfológicas, la incidencia de plagas y el rendimiento agrícola en un ciclo de cultivo de Phaseolus vulgaris L. cv. ‘CUFIG-110’. La aplicación de IBP-T 45 se realizó a las semillas antes de la siembra y se utilizó, además, un control absoluto. A partir de los 25 días después de la siembra (dds) se midió la altura, se cuantificó el número de hojas por planta. También, se determinó la incidencia de plagas presentes en las plantas desde la germinación. Se estimó el rendimiento agrícola y se evaluaron sus componentes. La aplicación del bioproducto IBP-T45 en el tratamiento de semillas de frijol común cv. ‘CUFIG-110’ estimula el desarrollo foliar de las plantas, disminuye la incidencia de Fusarium spp. y contribuye al  aumento del rendimiento agrícola

    Diferenciación de la respuesta in vitro de Phaseolus vulgaris cv. ‘ICA Pijao’ y cv. ‘Tío Canela- 75’ a altas temperaturas

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     To develop an in vitro selection protocol, it is necessary to differentiate between tolerant and susceptible cultivars to the studied factor. The present work was carried out with the objective of selecting the temperature that allows to in vitro differentiating the response of the Phaseolus vulgaris cultivars 'ICA Pijao' (susceptible) and 'Tío Canela-75' (tolerant) to high temperatures. Different temperatures (30, 35, 40, 45 and 50 ºC) were applied to seeds of the two cultivars. In vitro seed germination percentage, radicle and plumule length, number of explants that formed callus and number of shoots per callus were evaluated. It was possible to differentiate between cv. ‘ICA Pijao’ (susceptible) and ‘Tío Canela- 75’ (tolerant) with the variables radicle length, plumule length, percentage of calli formed and number of regenerated shoots. It was selected 35 °C as the selective agent.Para desarrollar un protocolo de selección in vitro se hace necesario lograr la diferenciación entre cultivares tolerantes y susceptibles al factor estudiado. El presente trabajo se realizó con el objetivo de seleccionar la temperatura que permita diferenciar in vitro la respuesta de los cultivares de Phaseolus vulgaris ‘ICA Pijao’ (susceptible) y ‘Tío Canela- 75’  (tolerante) a altas temperaturas. Se aplicaron diferentes temperatura (30, 35, 40, 45 y 50 ºC) a semillas de los  dos cultivares. Se evaluó in vitro, el porcentaje de germinación de las semillas, longitud de la radícula y la plúmula, número de explantes que formaron callos y número de brotes por callo.  Se logró diferenciar entre el cv. ‘ICA Pijao’ (susceptible) y ‘Tío Canela- 75’ (Tolerante) con las variables longitud de la radícula, longitud de la plúmula, porcentaje de callos formados y número de brotes regenerados.  Se seleccionó 35 ºC como agente selectivo

    Protocolo para la micropropagación de Kalanchoe blossfeldiana Poelln. a partir de segmentos nodales

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    Kalanchoe blossfeldiana Poelln. is a plant with great ornamental value due to its growth habit and flowering. It can be used as a pot plant and garden, both outdoors and indoors. It is considered the best-selling species after orchids in Europe and America, reaching high numbers of commercialized plants and monetary incomes. Due to their importance, methods for obtaining large numbers of individuals, in order to satisfy the existing demands on the market are necessary. This could be possible through the use of plant biotechnology. Although there are studies focused on the propagation of this species at the laboratory level, a methodology for its micropropagation has not been described yet. In the present work, a protocol for in vitro propagation of K. blossfeldiana from nodal segments was developed.Kalanchoe blossfeldiana Poelln. es una planta con gran valor ornamental por su hábito de crecimiento y floración. Puede ser usada como planta para macetas y jardín, tanto en exteriores como interiores. Se considera la especie más vendida después de las orquídeas en Europa y América donde alcanza altas cifras de plantas comercializadas y de recaudaciones monetarias. Por su importancia son necesarios métodos que permitan obtener grandes cantidades de individuos a fin de satisfacer las demandas existentes en el mercado. Lo anterior pudiera ser posible a través del empleo de la biotecnología vegetal. A pesar de que se encuentran trabajos enfocados en la propagación de esta especie a nivel de laboratorio, no ha sido descrito aun una metodología para su micropropagación. En el presente trabajo se desarrolló un protocolo para la propagación in vitro de K. blossfeldiana a partir de segmentos nodales

    Protocolo para la propagación in vitro de Zingiber officinale Roscoe vía organogénesis

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    Ginger (Zingiber officinale Roscoe) is traditionally propagated by rhizomes and can carry diseases that decrease production. In vitro propagation allows healthy seed to be obtained, in high volumes and in less time. The objective of this work was to present a protocol for the in vitro propagation of Z. officinale via organogenesis. Procedures for in vitro establishment from axillary buds of primary rhizomes of field-grown plants are included. In addition, the in vitro multiplication and planting in the ex vitro acclimatization phase with high survival rates.El jengibre (Zingiber officinale Roscoe), se propaga tradicionalmente por medio de rizomas y se pueden transmitir enfermedades que disminuyen la producción. La propagación in vitro permite obtener semilla sana, en volúmenes elevados y en un menor tiempo. Este trabajo persiguió como objetivo presentar un protocolo para la propagación in vitro de Z. officinale vía organogénesis. Se incluyen procedimientos para el establecimiento in vitro a partir de yemas axilares de rizomas primarios de plantas cultivadas en casa de cultivo. Además, su multiplicación in vitro y la plantación en la fase de aclimatización ex vitro con altos porcentajes de supervivencia

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