University of Beira Interior
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Development of DNA nanovaccines based on functionalized RALA and Chitosan nanoparticles bearing HPV-16 oncogenes
No full textCervical cancer (CC), a leading cause of cancer mortality among women, is mainly caused by persistent high-risk human papillomavirus infections, particularly HPV-16 and -18. These viruses possess the oncoproteins E6 and E7, which interfere with p53 and retinoblastoma protein (pRB), respectively, contributing to tumorigenesis. Current vaccines prevent infection but have no therapeutic effect. Moreover, the aggressiveness and lack of specificity of current treatments require innovative targeted therapeutics. DNA vaccines targeting the E6 and E7 oncogenes can be a safer and more promising option for CC eradication, providing preventive and therapeutic effects. The optimal DNA vaccine scenario includes the use of minicircle DNA (mcDNA), a safer and efficient vector than the conventional plasmid DNA (pDNA). So, in this study, we explored the complexation of mcDNA encoding one or both mutated HPV-16 oncogenes (E7mut or E6mut) with biocompatible materials, such as cellpenetrating peptides (CPPs) like RALA, and chitosan (CS). These delivery systems were functionalized with ligands of R8-mannose (R8M), which can enhance DNA delivery and targeting to antigen-presenting cells (APCs). Additionally, we investigated the powder conversion of the DNA/CS-based vaccine using thin-film freeze-drying (TFFD) to enhance vaccine stability. Pure mcDNA (2 µg) was used to optimize the amine-to-phosphate (N/P) ratios of RALA, with and without R8M, and nanoparticles (NPs) were characterized for size, polydispersity index (PDI), zeta potential, complexation efficiency (CE), stability, morphology, and Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR). In vitro studies assessed biocompatibility and gene expression in JAWSII dendritic cells after 24 h transfection. For CS-based systems, NPs were prepared with CS, sodium tripolyphosphate (TPP), and 2 µg of parental plasmid (PP)/pDNA or mcDNA encoding both genes, and R8M was also included. The same characterization and biocompatibility assays were performed. Powder conversion of CS NPs was done using TFFD, optimizing conditions for suitable and stable powders. For RALA-based NPs, a N/P ratio of 1.25 was optimal, resulting in homogeneous NPs under 150 nm, negative surface charge, and high CE (>97%). Their morphology was spherical/oval, and incorporation of components was confirmed by FTIR. The NPs were stable under cell culture conditions and biocompatible with JAWSII cells. Expression of the E6 gene was significantly higher in RALA-mannosylated systems, with no differences between the E6mut and multigenic vectors’ gene expression. For CS-based NPs, promising characteristics were obtained, with sizes under 120 nm, homogeneity, positive charges (>20 mV), and CE >98%. Incorporation of PP or mcDNA and R8M did not affect NP properties, indicating feasibility for formulation. The NPs exhibited spherical/oval morphology, and FTIR confirmed the presence of all components. The systems were stable under cell culture conditions and biocompatible with JAWSII cells. Powder conversion of CS-based NPs was optimized with sucrose (1% solid content) as a lyoprotectant, yielding the best results with 0.5 mL per vial. For scale-up with higher NP batches, a solid content of 5.05% with sucrose and leucine was optimal, where R8M incorporation and mcDNA usage showed consistent results, with no changes in NP properties after TFFD. The powders had porous, brittle matrices typical of TFFD. Stability tests over 14 days showed the best result of the powder vaccine at 4°C, supporting improved vaccine storage and distribution in low-resource settings. In conclusion, R8M functionalization enhanced cellular transfection and gene expression in RALA-based systems. Both peptide- and polymer-based delivery systems, with and without R8M, exhibited suitable physicochemical characteristics and biocompatibility. TFFD successfully converted liquid vaccines into stable powders while preserving NPs properties and producing highly porous powders with the potential for good aerosol properties. These findings support further studies exploring intranasal administration for cervical cancer immunization.O cancro do colo do útero (CCU), uma das principais causas de mortalidade por cancro entre as mulheres, resulta maioritariamente de infecções persistentes pelo vírus do papiloma humano (HPV) de alto risco (hrHPV), particularmente os HPV-16 e -18. As oncoproteínas E6 e E7 destes vírus contribuem para a tumorogénese das células infetadas. A oncoproteína E6 vai induzir a degradação da p53 e interferir na apoptose, e a E7 vai afetar a proteína do retinoblastoma (pRB), levando à desregulação do ciclo celular e consequente proliferação celular descontrolada. Embora a prevenção por meio das vacinas profiláticas atuais contra o HPV seja fundamental, estas vacinas não têm qualquer efeito terapêutico quando o paciente já se encontra infetado. A deteção precoce do cancro melhora os resultados de tratamento, mas não é efetivamente implementada em países em desenvolvimento, contribuindo para alta incidência e mortalidade. Os tratamentos convencionais geralmente carecem de especificidade, causando efeitos colaterais significativos a nível sistémico, o que tem levado ao desenvolvimento das vacinas de DNA como alternativas mais seguras e eficazes. Vacinas de DNA que codifiquem os oncogenes E6 e E7 do HPV-16 podem ativar respostas imunes, mas o DNA plasmídico (pDNA) sozinho tem uma internalização celular limitada e pode desencadear reações adversas. O DNA minicircular (mcDNA) oferece uma solução promissora ao remover os genes bacterianos, enquanto que sistemas de entrega biocompatíveis baseados em quitosano (CS) e péptidos de penetração celular (CPPs) como o RALA, juntamente com a funcionalização com ligandos de R8-mannose (R8M), podem melhorar a entrega e o direcionamento do DNA para células apresentadoras de antigénios (APCs). Neste estudo, foi explorada a funcionalização de sistemas de entrega baseados em RALA e CS com R8M, para o transporte e entrega de vetores de DNA, codificando um ou ambos os oncogenes mutados do HPV-16 (E6mut e/ou E7mut). Além disso, foi investigada a conversão em pó da vacina baseada em DNA/CS usando a técnica de liofilização por filme fino (TFFD) para melhorar a estabilidade da vacina. Os vetores de pDNA e mcDNA codificando um ou dois genes foram produzidos numa estirpe de Escherichia coli geneticamente modificada, ZYCY10P3S2T, adequada para produção de mcDNA por recombinação plasmídica. Os vetores foram extraídos de pellets bacterianos e purificados por técnicas cromatográficas. O mcDNA puro (2 µg) foi utilizado para otimizar as proporções/rácios de amina versus fosfato (N/P) de RALA, com e sem R8M. Após a formulação de nanopartículas (NPs) estas foram caraterizadas avaliando o tamanho, índice de polidispersidade (PDI), potencial zeta, eficiência de complexação (EC), estabilidade, morfologia e composição por Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR). Também foram realizados estudos in vitro para avaliar a biocompatibilidade, estabilidade e o nível de transcritos dos respetivos antigénios em células dendríticas JAWSII transfetadas com as NPs. Para sistemas de entrega baseados em CS, foi combinado este polímero com fosfato de trimetilamina (TPP) e 2 µg de PP ou mcDNA codificando ambos os genes, e o R8M também foi incluído. A mesma caracterização e os testes de biocompatibilidade realizados com as NPs de RALA foram realizados com as NPs de CS. As NPs de CS foram convertidas em pó usando o TFFD na Universidade do Texas em Austin, otimizando as condições para obtenção de um pó adequado e estável. A condição ótima para as NPs baseadas em RALA foi um rácio N/P de 1,25, resultando em NPs com tamanho inferior a 150 nm, distribuição homogênea, carga superficial negativa e alta EC (>97%). As NPs apresentaram morfologia esférica/oval, e o FTIR confirmou a incorporação de todos os componentes. As NPs mostraram-se estáveis sob condições de cultura celular, e os ensaios de citotoxicidade demonstraram sua biocompatibilidade com células JAWSII após 24 e 48 h de transfeção. A expressão do gene E6 foi maior nos sistemas manosilados, superando os sistemas não manosilados e os controlos. Não foram observadas diferenças entre os vetores de DNA E6mut e multigénicos, confirmando a eficácia das NPs baseadas em RALA para entrega direcionada às APCs, especialmente quando funcionalizadas com R8M. As NPs baseadas em CS mostraram características promissoras, com tamanho inferior a 120 nm, distribuição homogênea, cargas positivas (>20 mV) e EC >98%, sendo semelhantes quando complexadas com PP ou mcDNA, e com ou sem adição de R8M. As NPs apresentaram morfologia esférica/oval, e o FTIR confirmou a presença de todos os componentes. Os sistemas foram estáveis sob condições de cultura celular e biocompatíveis com as células JAWSII, confirmando serem adequados para entrega de vacinas. A conversão em pó das NPs PP/CS-TPP foi otimizada com sacarose (1% de teor sólido) como lio-protector, obtendo os melhores resultados com 0,5 mL por frasco. Para aumento de escala com maior lote de NPs, foram utilizados teores sólidos mais elevados (2,525% ou 5,05%), sendo 5,05% de sacarose o ideal. A leucina foi adicionada à formulação para melhorar o desempenho do aerosol e a estabilidade do pó. Nesta formulação final (5,05% sacarose + leucina) com uso de maior lote de NPs, a incorporação de R8M e o uso de mcDNA mostraram resultados consistentes, sem alterações nas propriedades das NPs após TFFD. Os pós apresentaram matrizes porosas e quebradiças típicas de pós obtidos por TFFD. Testes de estabilidade ao longo de 14 dias a -20°C, 4°C e 20°C mostraram a melhor estabilidade a 4°C para a vacina em pó, evidenciando uma mais valia dessa vacina ao requerer condições de armazenamento e distribuição mais económicas. Em conclusão, a funcionalização com R8M melhorou a transfeção celular e a expressão génica nos sistemas baseados em RALA. Ambos os sistemas de entrega baseados em péptidos e polímeros, com ou sem R8M, apresentaram características físico-químicas adequadas e biocompatibilidade. A técnica TFFD converteu com sucesso vacinas líquidas em pós estáveis, preservando as propriedades das NPs e produzindo pós altamente porosos, com potencial para boas propriedades de aerosol. Esses achados apoiam estudos adicionais sobre a administração intranasal para imunização contra o CCU
Relação entre dispositivos digitais e dor cervical nos estudantes de Medicina: A scoping review
Get PDFA dor musculoesquelética é cada vez mais um problema de saúde prevalente em todas
as partes do globo, sendo a dor cervical uma das formas mais comuns. A dor cervical
tem tido particular destaque nos estudantes universitários, nomeadamente entre os
estudantes de medicina. Alguns fatores como a elevada exigência do curso e prevalência
de condições como depressão, ansiedade, problemas de sono, entre outras, parecem
estar relacionados com o desenvolvimento destes processos dolorosos e a sua
perpetuação.
A utilização de dispositivos digitais como smartphones, tablets e computadores,
começam a liderar os recursos de estudo utilizados por estes estudantes. No entanto,
ainda há poucos estudos sobre o seu impacto no desenvolvimento da dor cervical.
Neste âmbito, o objetivo desta scoping review é estudar o impacto do uso dos
dispositivos digitais na dor cervical em estudantes de medicina.
A pesquisa foi efetuada na base de artigos PubMed, sendo a população alvo os
estudantes de Medicina e os artigos foram selecionados tendo em conta os que
especificam a prevalência e fatores de risco. Foram encontrados 233 artigos, sendo
considerados para a realização desta scoping review apenas 6, de acordo com os
critérios de inclusão. Os dados recolhidos de cada artigo elegível para este estudo
suportam a discussão deste trabalho, sobre a literatura disponível acerca desta
temática. Dos 6 artigos, apenas 3 suportam a associação entre o uso de dispositivos
digitais e o desenvolvimento de dor cervical nos estudantes de medicina.
Os resultados obtidos permitem inferir a escassez de estudos que permitam perceber o
impacto do uso crescente dos dispositivos digitais na dor cervical nos estudantes de
Medicina numa perspetiva global.Musculoskeletal pain is increasingly becoming a prevalent health issue worldwide, with
neck pain being its second most common form. Neck pain has been particularly
highlighted among university students, especially medical students. Certain factors,
such as the high demands of medical education and the prevalence of conditions like
depression, anxiety, sleep disorders, among others, seem to be associated with the
development and perpetuation of these painful processes.
The use of digital devices such as smartphones, tablets, and computers is becoming
dominant among the study resources utilized by these students. However, there are still
few studies on their impact on the development of neck pain.
In this regard, the objective of this scoping review is to study the impact of digital
device usage on neck pain in medical students.
The research was conducted using the PubMed database, targeting medical students,
and articles were selected based on those specifying prevalence and risk factors. A total
of 233 articles were found, but only 6 were considered for this scoping review according
to the inclusion criteria. The data collected from each eligible article for this study
supports the discussion of this work on the available literature regarding this topic. Of
the 6 articles, only 3 (6,10,15) support the association between digital device usage and
the development of neck pain in medical students.
The results obtained suggest a global scarcity of studies that would allow for a broader
understanding of the impact of the increasing use of digital devices on neck pain among
medical students
Relatório de Estágio Na Empresa Façanha Joalharia/Ourivesaria
No full textA área de estágio escolhida foi em acessórios de moda, especificamente em ourivesaria/joalharia, pois, durante todo o curso de Design de Moda, foi uma das vertentes menos exploradas e de grande interesse para a aluna, possibilitando-a assim aprender mais sobre este universo, que, também está ligado à Moda e ao Design. Neste relatório será possível perceber a evolução da joalharia, de uma forma geral, bem como, algumas especificidades, referindo temas inerentes tanto à joalharia como à ourivesaria, bem como, as técnicas desta arte, sendo possível, assim, perceber melhor este mundo interessantemente imersivo. Falar em joalharia não poderia ser possível sem falar nos materiais trabalhados, como são exemplo, o ouro, a prata, e as gemas. Será igualmente possível perceber as etapas de trabalho para obter uma peça final, todo o seu processo de realização. Ao longo de estágio foram realizados diferentes trabalhos, com o intuito de preparação para a realização da peça final de estágio, produzida pela estagiária. Desta forma, foi possível, adquirir conhecimentos e experiência nesta área, capacitando a aluna para, futuramente, ter a possibilidade de trabalhar e exercer na área de estágio, bem como na área de estudosThe internship area chosen was fashion accessories, specifically goldsmithing/jewelry, since throughout the Fashion Design course it was one of the least explored yet most interesting fields for the student. This choice provided the opportunity to gain deeper knowledge of this world, which is also intrinsically linked to Fashion and Design. This report presents the evolution of jewelry, from its origins to the present day, in a general perspective and, more specifically, addressing themes inherent to both jewelry and goldsmithing. It also explores the techniques of this art, from the most basic to the most specialized, allowing for a better understanding of this fascinating and immersive field. Speaking of jewelry necessarily involves discussing the materials employed, such as gold, silver, and, not to forget, gemstones—precious stones widely used in this art—together with other metals. The report also details the stages of work required to achieve a final piece, covering the entire production process. Throughout the internship, different projects were carried out as preparation for the creation of the final internship piece, designed and produced by the intern. This experience enabled the acquisition of knowledge and practical skills in the field, equipping the student with the ability to pursue future professional work in this area. Moreover, it highlights how the internship area and the academic field of study
CFD analysis of the combustion of natural gas and biogas in a can type combustor
Get PDFIn this work, a CFD analysis was conducted on pollutant emissions from the combustion
of natural gas and biogas in a can-type combustion chamber. The fuels evaluated
included natural gas, used as a reference, a mixture of natural gas with biogas, and three
types of biogases with distinct compositions, where the percentage of CH4 was
progressively reduced while the percentages of CO2 and N2 increased. Additionally,
considering that biogas may contain oxygen in its composition, two biogases with
different O2 percentages were also analysed. The numerical study was performed using
ANSYS Fluent 2023 R2 software, employing the standard k - e turbulence model and
the P-1 radiation model. The geometry of the combustion chamber was designed using
CATIA V5 software. To evaluate the emissions of chemical species such as CO2, CO, UHC,
and NOx, the detailed combustion mechanism GRI Mech 3.0 was used. The results show
the variation in pollutant emissions as a function of the change in fuel, while maintaining
the initial heat input constant. It was found that the presence of a central recirculation
zone plays a crucial role in pollutant formation, as it contributes to flame stability and
promotes a more efficient air-fuel mixture. With the increase in the percentages of CO2
and N2 in the fuel, a significant reduction in NOx emissions was observed, although
accompanied by an increase in CO2 emissions. Regarding CO and UHC emissions, the
values obtained were nearly zero, although a decreasing trend was identified as the
percentages of CO2 and N2 increased. When O2 was present in the biogas, an increase in
NOx emissions was recorded, while CO2 emissions remained constant. On the other
hand, CO and UHC emissions remained nearly zero, with a slight decreasing trend. It was
concluded that biogas, despite the increase in CO2 emissions, is an alternative to natural
gas, as it not only has a more sustainable and ecological production process but also
results in lower NOx emissions. However, the presence of O2 in biogas did not prove to
be advantageous, as NOx emissions increased and it did not contribute to a significant
reduction in other pollutant gases.Neste trabalho foi realizada uma análise em CFD das emissões poluentes provenientes
da combustão de gás natural e biogás numa câmara de combustão do tipo "can". Os
combustíveis avaliados incluíram gás natural, utilizado como referência, uma mistura de
gás natural com biogás e três tipos de biogás com composições distintas, nos quais a
percentagem de CH4 foi progressivamente reduzida, enquanto as percentagens de CO2 e
N2 aumentaram. Adicionalmente, considerando que o biogás pode conter oxigénio na
sua composição, foram também analisados dois biogases com diferentes percentagens
de O2. O estudo numérico foi realizado com o software ANSYS Fluent 2023 R2, utilizando
os modelos de turbulência standard k - e e de radiação P-1. A geometria da câmara de
combustão foi desenhada no software CATIA V5. Para avaliar as emissões de espécies
químicas, como CO2, CO, UHC e NOx, foi utilizado o mecanismo detalhado de combustão
GRI Mech 3.0. Os resultados mostram a variação das emissões poluentes em função da
mudança de combustível, mantendo constante a potência térmica inicial. Verificou-se
que a presença de uma zona de recirculação central desempenha um papel crucial na
formação de poluentes, pois contribui para a estabilidade da chama e promove uma
mistura mais eficiente de ar e combustível. Com o aumento das percentagens de CO2 e
N2 no combustível, observou-se uma redução significativa nas emissões de NOx,
acompanhada, no entanto, por um aumento nas emissões de CO2. Relativamente às
emissões de CO e UHC, os valores obtidos foram praticamente nulos, embora tenha sido
identificada uma tendência de diminuição com o aumento de CO2 e N2. Quando presente
O2 no biogás, registou-se um aumento nas emissões de NOx, enquanto as emissões de
CO2 permaneceram praticamente constantes. Por outro lado, as emissões de CO e UHC
mantiveram-se praticamente nulas, com uma ligeira tendência para diminuir. Concluiuse que o biogás, apesar do aumento nas emissões de CO2, é uma alternativa ao gás
natural, apresentando não só uma formação mais sustentável e ecológica, como também
menores emissões de NOx. Contudo, a presença de O2 no biogás não se revelou vantajosa,
uma vez que que as emissões de NOx aumentaram e não contribui para uma redução
significativa dos restantes gases poluentes
Corpo, Mente e Desejo: Benefícios da Sexualidade no Envelhecimento
Get PDFEsta dissertação explora os benefícios e barreiras da sexualidade no envelhecimento,
destacando-a como componente essencial para o bem-estar físico, mental e social dos
idosos. A pesquisa foca-se no impacto da sexualidade na melhoria da qualidade de vida,
nomeadamente, na promoção da saúde cardiovascular, cognitiva e emocional. Por outro
lado, enfatiza as barreiras enfrentadas pelos idosos como os preconceitos sociais, a falta de
representatividade nos mídia e educação, os sentimentos de vergonha e culpa e o luto
associado à perda dos seus parceiros.
Ao longo desta análise são propostas medidas de intervenção, das quais se
salientam, a formação dos profissionais de saúde na área da sexualidade, a criação de
políticas inclusivas, campanhas públicas de sensibilização desta faixa etária e a integração
do tema da sexologia no seguimento geriátrico. Também foi possível identificar a escassez
de investigação desta área no envelhecimento e que, dentro dos poucos recursos existentes,
grupos como idosos institucionalizados ou homossexuais são mais negligenciados.
Como perspetivas futuras, sugere-se um maior aprofundamento na pesquisa da
sexualidade no envelhecimento e o desenvolvimento de ferramentas digitais para o apoio
emocional e educação sexual dos idosos.This dissertation explores the benefits and barriers of sexuality in aging, highlighting
it as an essential component for the physical, mental, and social well-being of older adults.
The research focuses on the impact of sexuality on improving quality of life, particularly in
promoting cardiovascular, cognitive, and emotional health. On the other hand, it
emphasizes the barriers faced by the elderly, such as social prejudices, the lack of
representation in media and education, feelings of shame and guilt, and grief associated
with the loss of their partners.
Throughout this analysis, intervention measures are proposed, including the
training of healthcare professionals in the field of sexuality, the creation of inclusive
policies, public awareness campaigns targeting this age group, and the integration of
sexology into geriatric care. The study also identifies a lack of research in this area regarding
aging and notes that within the scarce resources available, institutionalized or homosexual
elderly populations are among the most neglected.
As future perspectives, it is suggested to further deepen the research on sexuality in
aging and develop digital tools to provide emotional support and sexual education for older
adults
Study of the bioaccessibility, biodisponibility and cytotoxicity of Salvia divinorum: method development and in vitro evaluation
No full textSalvia divinorum is a psychoactive plant traditionally used in spiritual and medicinal contexts in Mexico, whose main active constituent is salvinorin A (SA). This diterpene exhibits a unique pharmacological profile, acting as a potent and selective agonist of the ?-opioid receptor, which distinguishes it from classical psychedelic substances. Due to these properties, the plant has attracted attention both as a recreational drug, particularly among young people in Europe and the United States, and within scientific research, given its potential therapeutic applications in the management of pain, depression, anxiety, and addiction. However, adverse effects and the absence of clear regulation raise toxicological concerns. The present study aimed to investigate the bioaccessibility and bioavailability of SA, with particular focus on absorption through the oral mucosa, one of the common routes of consumption. To this end, an in vitro model simulating the oral digestive process was developed, employing artificial saliva. Plant extraction was carried out from dried S. divinorum leaves, subjected to maceration and subsequent incubation with artificial saliva at 37 °C under agitation for 3 hours. The resulting extracts were analysed by highperformance liquid chromatography coupled to diode array detector (HPLC-DAD), confirming the presence of SA, but not its metabolite salvinorin B (SB). In parallel, human tongue carcinoma cells (UPCI:SCC154) were used to assess both permeability and cytotoxicity of the extract. The MTT assay revealed a dose- and timedependent effect, with reduced cell viability after prolonged exposures. The bioaccessibility assay further demonstrated that oral digestion markedly decreases the fraction of SA available for systemic absorption. The results confirmed that SA is effectively absorbed through the oral mucosa, accounting for the rapid and intense effects reported in the plant’s consumption. Nevertheless, a significant cytotoxic impact was also observed in cellular models, underscoring the need for caution in repeated or chronic use. From an analytical perspective, HPLC-DAD proved to be a robust technique for quantifying SA in complex matrices. In conclusion, S. divinorum combines considerable pharmacological potential with risks associated with uncontrolled use. The evidence gathered in this study highlights the need for further clinical investigations to evaluate safety and efficacy, as well as the development of formulations that could enable therapeutic applications of SA while minimising its adverse effects.A Salvia divinorum é uma planta psicoativa tradicionalmente utilizada em contextos espirituais e medicinais no México, cujo principal constituinte ativo é a salvinorina A (SA). Este diterpeno apresenta um perfil farmacológico singular, sendo um potente agonista seletivo do recetor ?-opioide, o que o distingue das substâncias psicadélicas clássicas. Devido a estas características, a planta despertou interesse tanto no consumo recreativo, especialmente entre jovens na Europa e nos Estados Unidos da América, como na investigação científica, dado o seu potencial terapêutico na gestão da dor, depressão, ansiedade e dependências. Contudo, os efeitos adversos e a ausência de regulamentação clara levantam preocupações toxicológicas. O presente trabalho teve como objetivo estudar a bioacessibilidade e a biodisponibilidade da SA, com particular enfoque na absorção a nível da mucosa oral, uma das vias usuais de consumo. Para tal, foi desenvolvido um modelo in vitro que simulou o processo digestivo oral, recorrendo a fluido salivar artificial. A extração da planta foi realizada a partir de folhas secas de S. divinorum, submetidas a maceração, seguida de incubação com fluido salivar artificial a 37 °C, sob agitação durante 3 horas. Os extratos resultantes foram analisados por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a um detetor de fotodiodos (HPLC-DAD), confirmando a presença de SA, mas não do seu metabolito salvinorina B (SB). Em paralelo, células humanas cancerígenas da língua (UPCI:SCC154) foram utilizadas para avaliar a permeabilidade e a citotoxicidade do extrato. O ensaio MTT demonstrou um efeito dependente da dose e do tempo, com redução significativa da viabilidade celular após exposições prolongadas. O ensaio de bioacessibilidade evidenciou ainda que a digestão oral provoca uma diminuição acentuada da fração de SA disponível para absorção sistémica. Os resultados obtidos confirmam que a SA é eficazmente absorvida pela mucosa oral, justificando os efeitos rápidos e intensos reportados no consumo da planta. No entanto, também foi observado um impacto citotóxico relevante nos modelos celulares, reforçando a necessidade de cautela em situações de uso repetido ou crónico. Do ponto de vista analítico, a aplicação do HPLC-DAD demonstrou robustez na quantificação de SA em matrizes complexas. Em conclusão, a S. divinorum combina um elevado potencial farmacológico com riscos associados ao consumo não controlado. A evidência recolhida neste trabalho sublinha a importância de aprofundar estudos clínicos que avaliem a segurança, a eficácia e o desenvolvimento de formulações que potenciem o uso terapêutico da SA, minimizando simultaneamente os seus efeitos adversos
Pesquisa de marcadores químicos para o aroma a caudas, um defeito de aroma em aguardentes vínicas: abordagem olfactométrica
No full textO aroma a caudas constitui um defeito sensorial em aguardentes vínicas, geralmente originado por práticas inadequadas de destilação. Este defeito compromete a qualidade organolética da aguardente, sendo caracterizado por aromas intensos a oleoso, suado e desagradáveis, que se manifestam nas frações finais do processo de destilação. O presente estudo teve como principal objetivo identificar potenciais marcadores químicos responsáveis pelo aroma a caudas, recorrendo a uma abordagem sensorial e química. Foram obtidos destilados vínicos a partir de dois vinhos monovarietais, das castas ‘Tália’ e ‘Palomino Fino’, bem como de um vinho com defeito, utilizando um alambique tradicional do tipo Charentais, tendo se recolhido para análise, as frações de destilação. Procedeu-se à análise sensorial por um painel treinado, com vista à avaliação da intensidade do aroma a caudas. As amostras selecionadas, com maior intensidade no defeito caudas, foram submetidas a várias análises de cromatografia: cromatografia de gases associada à olfatometria (GC-O), cromatografia de gases com deteção por ionização de chama (GC-FID) e cromatografia de gases acoplada a espectrometria de massa (GCMS). Entre os principais compostos odorantes identificados nas frações de caudas destacaram-se diversos ácidos voláteis, como os ácidos hexanóico, octanóico, decanóico e isovalérico, com descritores de aroma como “suor”, “ranço” e “queijo”. Apesar destas notas desagradáveis, foram igualmente identificados compostos com aromas agradáveis, como o 2-feniletanol, o diacetil e o 1-propanol, evidenciando que as caudas apresentam um perfil aromático complexo. Os resultados obtidos apoiam a hipótese de que o aroma a caudas resultará do efeito combinado de diversos compostos odorantes, tanto agradáveis como desagradáveis. Estes resultados contribuem para a definição de marcadores químicos com potencial aplicação no controlo de qualidade do processo de destilaçãoThe “tails” aroma constitutes a sensory defect in wine spirits, typically arising from inadequate distillation practices. This defect compromises the organoleptic quality of the spirit, being characterised by intense, fatty, sweaty, and unpleasant aromas that emerge in the final fractions of the distillation process. The main objective of the present study was to identify potential chemical markers responsible for the “tails” aroma, through a combined sensory and chemical approach. Wine distillates were obtained from two monovarietal wines — ‘Tália’ and ‘Palomino Fino’ grape varieties — as well as from a faulty wine, using a traditional Charentais-type alembic still. Distillation fractions were collected in 150 mL volumes. Sensory analysis was carried out by a trained panel to evaluate the intensity of the “tails” aroma. The samples identified as having the highest intensity were then subjected to chromatographic analysis, including gas chromatography-olfactometry (GC-O), gas chromatography with flame ionisation detection (GC-FID), and gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). Among the main odour-active compounds identified in the tail’s fractions were several volatile acids, including hexanoic, octanoic, decanoic, and isovaleric acids, described as having “sweaty”, “rancid”, and “cheesy” odours. Despite these unpleasant notes, some compounds with pleasant aromas were also identified, such as 2-phenylethanol, diacetyl, and 1-propanol, indicating that the tails exhibit a complex aromatic profile. The results support the hypothesis that the “tails” aroma arises from the cumulative effect of various odour-active compounds, both pleasant and unpleasant. These findings contribute to the identification of chemical markers with potential application in quality control during the distillation process
Desenvolvimento de uma Impressora 3D de Grande Volume para Prototipagem Rápida de Corpos Aerodinâmicos
No full textNa Universidade da Beira Interior existe uma necessidade crescente de ferramentas disponíveis para o fabrico de protótipos que são utilizados em variados projetos e trabalhos desenvolvidos. Com ênfase na construção de corpos aerodinâmicos em materiais compósitos, através de laminação em moldes, surge a falta de ferramentas e métodos de fabrico de moldes de forma rápida e barata. Uma solução passa pela criação de uma máquina de fabrico aditivo, para produzir moldes ou modelos das peças desejadas. Esta máquina será de grande volume pois as mais comuns não têm tamanho suficiente para fabricar as peças pretendidas de uma só vez. O principal objetivo deste trabalho foi o desenvolvimento e montagem de uma impressora 3D com 900 x 900 x 1000 mm3 de volume, do tipo FDM, tendo por base a história da impressão 3D e os fundamentos teóricos desta tecnologia que são apresentados. Foi tida em conta a minimização dos custos e a minimização do movimento das peças com maior massa. Esta impressora usa o chão e o teto da sala para benefício estrutural e tem uma configuração de movimento Core XY. A máquina foi desenvolvida e montada com sucesso respeitando os parâmetros iniciais e foram feitos testes de impressão que validam o seu bom funcionamento. Contudo, ainda existe margem de melhoria e de implementação de outras configurações. É também descrito um processo de moldagem que usa gesso e juta como materiais, sendo o resultado de uma das aplicações da impressora 3D desenvolvida.At the Universidade da Beira Interior, there is a growing demand for accessible tools to facilitate the creation of prototypes for various projects. Focusing on the construction of aerodynamic bodies using composite materials through lamination on molds, a noticeable gap in tools and methodologies for efficient and costeffective production of molds is evident. One proposed solution involves designing an additive manufacturing machine dedicated to producing molds or models of the intended bodies. Characterized by its substantial volume, this machine will be capable of fabricating an entire object in a single operation. The primary objective of this undertaking was to design and construct an FDM type 3D printer with dimensions of 900 x 900 x 1000 mm3 , grounded in the historical context of 3D printing and the theoretical principles underlying this technology. Considerations for minimizing costs and reducing the movement of heavy components were incorporated into the design. This printer utilizes the floor and ceiling of the workspace for structural support and features a Core XY motion configuration. The machine was successfully designed and constructed according to the original specifications, with printing trials conducted to ascertain its operational efficacy. Nevertheless, opportunities for enhancement and integration of additional configurations remain. Furthermore, a molding process using plaster and jute as materials has also been described
Obstrução do trato urinário inferior fetal: Diagnóstico, abordagem e seguimento
Get PDFA obstrução do trato urinário inferior é uma das mais frequentes anomalias congénitas
do trato urinário. Trata-se de uma perturbação geniturinária fetal complexa, que abrange
um grupo heterogéneo de anomalias. Esta condição ocorre quando a saída da bexiga fetal
encontra-se bloqueada. A obstrução desencadeia uma sequência de eventos que pode
resultar na interrupção do fluxo urinário normal do feto, levando a oligoidrâmnio, entre
outras complicações. Estas contribuem para uma maior morbimortalidade neonatal e
podem acarretar efeitos negativos, a longo prazo, no funcionamento renal, além de
aumentar o risco de prematuridade e hipoplasia pulmonar neonatal.
Avanços no diagnóstico e na gestão dessas anomalias são cruciais para melhorar os
desfechos fetais. Uma compreensão mais aprofundada da fisiopatologia, aliada ao
desenvolvimento de ferramentas diagnósticas e terapêuticas, possibilita, atualmente, a
oferta de terapias in utero para determinadas malformações. Além disso, a previsão
precisa da gravidade da doença influencia significativamente a eficácia das intervenções
fetais e constitui um dos fatores mais determinantes do prognóstico pré-natal e pós-
-natal. Contudo, a raridade desta condição, a falta de uniformização no diagnóstico e
abordagem, bem como o precário seguimento dos desfechos pós-natais, prejudicam
esses fundamentos e logo o estado de conhecimento atual.
Contextualizando a epidemiologia e causas de LUTO pré-natal, esta monografia tem
como principais objetivos caracterizar os métodos e sinais de diagnóstico e identificar
possíveis ações e os seus prognósticos quando na presença de LUTO pré-natal.
Para a introdução e contextualização complementar desta revisão da literatura, foi
realizada, de forma não sistemática, uma análise de um conjunto de artigos científicos
publicados nas bases de dados “PubMed” e “Scopus”, utilizando os termos de pesquisa
“LUTO”, “CAKUT” e “hydronephrosis”, além de operadores booleanos (“AND” e “OR”).
Para a realização dos objetivos estabelecidos, foram utilizados os seguintes termos e
operadores booleanos:
(("lower urinary tract obstruction" OR "fetal lower urinary tract obstruction" OR LUTO)
AND (diagnos* OR "diagnos* and examination*" OR "diagnostic techniques and
procedures" OR treatment* OR therap* OR "follow-up" OR methods OR "treatment
outcome") NOT (adult* OR aged OR elderly)). Para este fim, foram selecionados apenas artigos de revisão, revisão sistemática e meta-
-análises, pois procurou-se analisar conteúdos concisos e relevantes. Considerando
maior interesse pelos últimos 20 anos, foram aferidos 44 artigos.The obstruction of the lower urinary tract is one of the most frequent congenital
anomalies of the urinary system. It is a complex fetal genitourinary disorder
encompassing a heterogeneous group of abnormalities. This condition occurs when the
fetal bladder's outlet becomes blocked. The obstruction triggers a sequence of events that
may disrupt the fetus's normal urinary flow, leading to oligohydramnios and other
complications. These complications contribute to increased neonatal morbidity and
mortality and can have long-term negative effects on renal function, while also
heightening the risk of prematurity and neonatal pulmonary hypoplasia.
Advances in the diagnosis and management of these anomalies are crucial for improving
fetal outcomes. A deeper understanding of the pathophysiology, combined with the
development of diagnostic and therapeutic tools, currently enables the provision of in
utero therapies for specific malformations. Furthermore, an accurate assessment of
disease severity significantly impacts the efficacy of fetal interventions and is one of the
most critical determinants of prenatal and postnatal prognosis. However, the rarity of
this condition, the lack of standardized diagnostic and management approaches, and the
insufficient follow-up of postnatal outcomes undermine these foundations and,
consequently, the current state of knowledge.
In the context of prenatal LUTO epidemiology and causes, this monograph aims to
characterize diagnostic methods and indicators and identify possible actions and their
prognoses in the presence of prenatal LUTO.
For the introduction and complementary contextualization of this literature review, a
non-systematic analysis was conducted on a set of scientific articles published in the
"PubMed" and "Scopus" databases, using the terms “LUTO,” “CAKUT,” and
“hydronephrosis,” along with Boolean operators (“AND” and “OR”).
To achieve the established objectives, the following terms and Boolean operators were
used:
(("lower urinary tract obstruction" OR "fetal lower urinary tract obstruction" OR LUTO)
AND (diagnos* OR "diagnos* and examination*" OR "diagnostic techniques and
procedures" OR treatment* OR therap* OR "follow-up" OR methods OR "treatment
outcome") NOT (adult* OR aged OR elderly)). For this purpose, only review articles, systematic review articles and meta-analysis were
selected, as the aim was to analyze concise and relevant content. Considering a greater
interest in the last 20 years, 44 articles were assessed
Classificador de Artrite com Dados Funcionais
Get PDFA análise de dados funcionais tem ganhado destaque nas últimas décadas como uma abordagem poderosa para lidar com dados que podem ser representados por funções contínuas, como o movimento ao longo do tempo. Este trabalho apresenta uma revisão das técnicas estatísticas para a análise de dados funcionais e consequente aplicação a dados do momento de força do tornozelo direito e esquerdo, obtidos durante o caminhar, em mulheres com e sem artrite reumatoide. Adicionalmente, foi desenvolvido um classificador de artrite reumatoide com um modelo de regressão logística funcional. Espera-se que os resultados contribuam para o uso de métodos estatísticos funcionais na biomecânica.Functional data analysis has gained prominence in recent decades as a powerful approach to dealing with data that can be represented by continuous functions, such as movement over time. This work presents a review of statistical techniques for the analysis of functional data and consequent application to force moment data of the right and left ankle, obtained during walking, in women with and without rheumatoid arthritis. Additionally, a rheumatoid arthritis classifier with a functional logistic regression model was developed. It is expected that the results will contribute to the use of functional statistical methods in biomechanics