23 research outputs found

    Somatic embryogenesis in Pinus taeda L.

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    Com o objetivo de determinar um protocolo viável para a biotecnologia de embriogênese somática, analisando os fatores que afetam o processo e suas interações, e fornecer subsídios para sua utilização em processos de melhoramento florestal, foram estabelecidas culturas de embriões imaturos de 4 diferentes clones de Pinus taeda L., coletados em 7 diferentes épocas e utilizando-se 5 diferentes meios de cultura de tecidos, como meios de estabelecimento ou indução. Das espécies de Pinus conhecidas e utilizadas no setor florestal, Pinus taeda é considerada a espécie florestal, sob o aspecto econômico, mais importante do sul dos E.U.A. e a segunda mais importante no mundo. No Brasil, foi introduzida com grande sucesso. Devido a sua excelente adaptação na região sul, principalmente nos Estados do Paraná e Santa Catarina, é utilizada em programas de reflorestamento. O experimento foi conduzido no laboratório de cultura de tecidos da Escola de Recursos Florestais "Daniel B. Wamell", da Universidade da Georgia, em Athens, Estado da Georgia, E.U.A., sob supervisão do prof. Dr. Harry E Sommer e com a colaboração da Comissão Florestal da Georgia e do Serviço Florestal, do Departamento de Agricultura dos Estados Unidos. Os resultados obtidos permitem concluir que o protocolo para indução de embriogênese somática desenvolvido mostrou-se viável, resultando na indução de calos com características embriogênicas. A frequência de indução de calos foi da ordem de 36,6%. Foram também demonstrados efeitos de 3 fatores (clone, meio de cultura e época de coleta) e da interação entre eles sobre a percentagem de indução, indicando que genótipo, ambiente físico e estádio de desenvolvimento afetam a regeneração in vitro. As técnicas de embriogênese somática podem resultar, se bem adequadas, manejadas e incrementadas, em taxas de indução maiores, sendo uma ferramenta auxiliar nos processos de melhoramento florestal.In·order to determine a viable protocol for the biotechnology of somatic embryogenesis, analysing the factors which affect the process and their interactions, and provide subsidies for its use in processes of forest improvement, immature embryos cultures were established from 4 different clones of loblolly pine (Pinus taeda L.), collected in 7 different dates and using 5 different tissue culture media as establishment or induction media. From all the pine species known and used in forestry, loblolly pine is considered, under economical aspects, the most important forest tree in the south of the United States and the second most important in the world. It was successfully introduced in Brazil due to its excellent adaptation in the south, in particular the States of Paraná and Santa Catarina, being used in reforestation programms. The experiment was carried out in the tissue culture laboratory, of the Daniel B. Wamell School of Forest Resources, of The University of Georgia, in Athens, State of Georgia, U.S.A., under supervision of prof. Dr. Harry E. Sommer, and with the collaboration of the Georgia Forestry Comission and the U.S.D.A. Forest Service. The results obtained allow us to conclude that the protocol developed for the induction of somatic embryogenesis was viable, having as result the induction of calli with embryogenic characteristics. The frequency of induction was around 36.6%. The techniques of somatic embryogenesis can result, if well adjusted, managed and improved, in higher induction rates, being a helpful tool for the process of tree improvement

    Somatic embryogenesis in Pinus taeda L.

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    Com o objetivo de determinar um protocolo viável para a biotecnologia de embriogênese somática, analisando os fatores que afetam o processo e suas interações, e fornecer subsídios para sua utilização em processos de melhoramento florestal, foram estabelecidas culturas de embriões imaturos de 4 diferentes clones de Pinus taeda L., coletados em 7 diferentes épocas e utilizando-se 5 diferentes meios de cultura de tecidos, como meios de estabelecimento ou indução. Das espécies de Pinus conhecidas e utilizadas no setor florestal, Pinus taeda é considerada a espécie florestal, sob o aspecto econômico, mais importante do sul dos E.U.A. e a segunda mais importante no mundo. No Brasil, foi introduzida com grande sucesso. Devido a sua excelente adaptação na região sul, principalmente nos Estados do Paraná e Santa Catarina, é utilizada em programas de reflorestamento. O experimento foi conduzido no laboratório de cultura de tecidos da Escola de Recursos Florestais "Daniel B. Wamell", da Universidade da Georgia, em Athens, Estado da Georgia, E.U.A., sob supervisão do prof. Dr. Harry E Sommer e com a colaboração da Comissão Florestal da Georgia e do Serviço Florestal, do Departamento de Agricultura dos Estados Unidos. Os resultados obtidos permitem concluir que o protocolo para indução de embriogênese somática desenvolvido mostrou-se viável, resultando na indução de calos com características embriogênicas. A frequência de indução de calos foi da ordem de 36,6%. Foram também demonstrados efeitos de 3 fatores (clone, meio de cultura e época de coleta) e da interação entre eles sobre a percentagem de indução, indicando que genótipo, ambiente físico e estádio de desenvolvimento afetam a regeneração in vitro. As técnicas de embriogênese somática podem resultar, se bem adequadas, manejadas e incrementadas, em taxas de indução maiores, sendo uma ferramenta auxiliar nos processos de melhoramento florestal.In·order to determine a viable protocol for the biotechnology of somatic embryogenesis, analysing the factors which affect the process and their interactions, and provide subsidies for its use in processes of forest improvement, immature embryos cultures were established from 4 different clones of loblolly pine (Pinus taeda L.), collected in 7 different dates and using 5 different tissue culture media as establishment or induction media. From all the pine species known and used in forestry, loblolly pine is considered, under economical aspects, the most important forest tree in the south of the United States and the second most important in the world. It was successfully introduced in Brazil due to its excellent adaptation in the south, in particular the States of Paraná and Santa Catarina, being used in reforestation programms. The experiment was carried out in the tissue culture laboratory, of the Daniel B. Wamell School of Forest Resources, of The University of Georgia, in Athens, State of Georgia, U.S.A., under supervision of prof. Dr. Harry E. Sommer, and with the collaboration of the Georgia Forestry Comission and the U.S.D.A. Forest Service. The results obtained allow us to conclude that the protocol developed for the induction of somatic embryogenesis was viable, having as result the induction of calli with embryogenic characteristics. The frequency of induction was around 36.6%. The techniques of somatic embryogenesis can result, if well adjusted, managed and improved, in higher induction rates, being a helpful tool for the process of tree improvement

    Influence of silicon and in vitro culture systems on the micropropagation and acclimatization of "Dwarf Cavendish" banana.

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    In vitro culture systems based on liquid culture media are considered to be more effective than semisolid culture medium systems. Liquid culture media systems provide better nutrient availability for plant tissues, easier culture handling, and the potential for scaling up and automation. However, in vitro liquid culture requires more careful handling due to the potential for contamination and the possibility of negative effects, such as hyperhydricity or vitrification, that hinder the growth and development of the plant material

    Technological advancements in seed conservation and production of Handroanthus spp. seedlings

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    A demanda por técnicas que visam aprimorar a qualidade de sementes e mudas é constante, especialmente quando se trata de espécies nativas, nas quais o investimento geralmente é reduzido. O trabalho buscou estudar algumas inovações tecnológicas nas espécies de ipê-amarelo - Handroanthus chrysotrichus (Mart. ex DC.) Mattos e ipê-roxo - Handroanthus impetiginosus (Mart. ex DC.) Mattos. Para isso, foram estudadas três metodologias: a primeira foi o uso de bactérias promotoras de crescimento vegetal, a segunda foi o uso de imagens de raio-X em sementes e a terceira foi o uso da criopreservação em sementes. O uso de bactérias promotoras de crescimento vegetal, que tem recebido destaque devido à crescente busca por tecnologias sustentáveis que impulsionem a produção agrícola global. Notadamente, as bactérias dos gêneros Azospirillum e Bacillus, frequentemente encontradas na rizosfera, demonstram uma capacidade adicional de colonizar os tecidos da parte aérea das plantas. Esse processo contribui para a resistência das plantas a estresses abióticos, além de melhorar a disponibilidade e absorção de nutrientes. Já o uso de imagens de raio-X em sementes, técnica não destrutiva amplamente empregada para avaliar características internas das sementes sem comprometer sua viabilidade ou integridade. Essa técnica permite a visualização e análise de características como tamanho, forma, integridade interna, presença de danos, estágio de desenvolvimento embrionário, teor de água e uniformidade de preenchimento. Já a terceira técnica é o uso da criopreservação em sementes que busca a conservação a longo prazo da diversidade genética de espécies vegetais. A criopreservação envolve o armazenamento das sementes em temperaturas ultrabaixas, geralmente abaixo de -196 °C em nitrogênio líquido, o que interrompe o metabolismo celular e reduz os danos causados pelo envelhecimento das sementes. Ao preservar a variabilidade genética dessas espécies, a criopreservação contribui para a conservação da biodiversidade e para a restauração de ecossistemas naturais. O primeiro objetivo foi avaliar o efeito de rizobactérias promotoras de crescimento de plantas na produção de mudas de ipê-amarelo e ipê-roxo. Para ambas as espécies, o delineamento experimental foi o inteiramente casualizado e os tratamentos consistiram nos microrganismos Bacillus subtilis, Bacillus megaterium, Bacillus amyloliquefaciens e Azospirillum brasilense mais a ausência de microrganismos – controle; em quatro repetições e dez plantas por parcela. A inoculação de B. amyloliquefaciens promoveu incremento na altura da muda, no diâmetro do coleto, no comprimento de raiz, na área foliar, na MSPA, MSR e MST, além de ter aumentado o IQD para o ipê-amarelo, o que demonstra que o uso de rizobactérias é promissor para produção de mudas dessa espécie, sendo a bactéria B. amyloliquefaciens o inoculante mais eficiente. Já para o ipê-roxo os inóculos A. brasilense e B. subtilis promoveram aumento no crescimento, acúmulo de biomassa, maiores níveis de qualidade e melhorias na fluorescência da clorofila em comparação com o tratamento controle, evidenciando que as rizobactérias utilizadas no presente estudo promovem o desenvolvimento, aumentam a eficiência fotossintética. O segundo objetivo deste trabalho foi investigar a eficácia do uso da técnica de raio-X para avaliar a viabilidade de sementes de ipê-roxo. Foi utilizado equipamento de raio-X 2D KUBTEC® XPERT® 80. Após a exposição à radiação de raio-X, as sementes foram submetidas ao teste de germinação. A análise das imagens permitiu identificar que as sementes que apresentavam alto grau de desidratação ou ausência do eixo-embrionário não germinaram ou teve a formação de plântulas anormais. O terceiro objetivo do estudo foi avaliar a eficiência da criopreservação sem e com uso de soluções crioprotetoras (PVS2 e PVS3) combinadas com o floroglucinol para a preservação de sementes de ipê-roxo. Os resultados mostraram que o uso de soluções PVS2 e PVS3 não é recomendado para a espécie, no entanto, o uso somente do nitrogênio líquido é promissor para criopreservação das sementes de ipê-roxo.The demand for techniques aimed at improving the quality of seeds and seedlings is constant, especially when it comes to native species, where investment is usually limited. The study sought to investigate some technological innovations in the species Handroanthus chrysotrichus (Mart. ex DC.) Mattos and Handroanthus impetiginosus (Mart. ex DC.) Mattos, commonly known as golden and lavender trumpet tree, respectively. For this purpose, three methodologies were studied: the first was the use of plant growth-promoting bacteria, the second was the use of X-ray imaging in seeds, and the third was the use of seed cryopreservation. The use of plant growth-promoting bacteria has received attention due to the increasing demand for sustainable technologies that boost global agricultural production. Notably, bacteria of the genera Azospirillum and Bacillus, often found in the rhizosphere, demonstrate an additional ability to colonize plant aerial tissues. This process contributes to plant resistance to abiotic stresses, as well as improving nutrient availability and absorption. X-ray imaging in seeds is a non-destructive technique widely used to evaluate internal seed characteristics without compromising their viability or integrity. This technique allows visualization and analysis of characteristics such as size, shape, internal integrity, presence of damage, embryonic development stage, moisture content, and filling uniformity. The third technique, seed cryopreservation, aims at long-term conservation of the genetic diversity of plant species. Cryopreservation involves storing seeds at ultra-low temperatures, usually below -196 °C in liquid nitrogen, which halts cellular metabolism and reduces damage caused by seed aging. By preserving the genetic variability of these species, cryopreservation contributes to biodiversity conservation and restoration of natural ecosystems. The first objective was to evaluate the effect of plant growth-promoting rhizobacteria on the production of golden and lavender trumpet tree seedlings. For both species, the experimental design was completely randomized, and treatments consisted of the microorganisms Bacillus subtilis, Bacillus megaterium, Bacillus amyloliquefaciens, and Azospirillum brasilense plus the absence of microorganisms - control; in four replicates and ten plants per plot. Inoculation of B. amyloliquefaciens promoted an increase in seedling height, stem diameter, root length, leaf area, photosynthetic rate, transpiration rate, and stomatal conductance, as well as increased seedling quality index for golden trumpet tree, demonstrating that the use of rhizobacteria is promising for seedling production of this species, with B. amyloliquefaciens being the most efficient inoculant. For lavender trumpet tree, inoculants A. brasilense and B. subtilis promoted growth enhancement, biomass accumulation, higher quality levels, and improvements in chlorophyll fluorescence compared to the control treatment, showing that the rhizobacteria used in this study promote development and increase photosynthetic efficiency. The second objective of this work was to investigate the effectiveness of using X-ray technique to evaluate the viability of lavender trumpet tree seeds. A KUBTEC® XPERT® 80 2D X-ray equipment was used. After exposure to X-ray radiation, the seeds were subjected to germination testing. Image analysis allowed identification that seeds with high dehydration or absence of the embryonic axis did not germinate or had the formation of abnormal seedlings. The third objective of the study was to evaluate the efficiency of cryopreservation with and without the use of cryoprotective solutions (PVS2 and PVS3) combined with floroglucinol for the preservation of lavender trumpet tree seeds. The results showed that the use of PVS2 and PVS3 solutions is not recommended for the species; however, the use of only liquid nitrogen is promising for cryopreservation of lavender trumpet tree seeds.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)88887.512498/2020-0

    Seed germination and conservation of orchids native from Americas

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    A propagação in vitro e conservação ex situ, são técnicas, que podem ser aprimoradas através da escolha adequada da fonte luminosa, das formulações do meio de cultivo e de crioprotetores. O presente estudo teve por objetivos: (i) estudar fontes de luz a partir de lâmpadas fluorescentes e diodos emissores de luz (LEDs) e formulações de meio de cultivo na germinação e no desenvolvimento inicial da espécie de orquídea Brassavola perrinii e (ii) avaliar a eficiência da solução vitrificante (PVS2) combinada ao floroglucinol 1% em nitrogênio líquido para a criopreservação de sementes maduras das espécies Encyclia cordigera e Epidendrum ciliare. Os experimentos foram instalados em delineamento inteiramente casualizado e ambos foram duplicados. No primeiro os tratamentos foram arranjados em esquema fatorial 5x4 com cinco condições de luz: LF - lâmpada fluorescente; LB - LED branco; LA - LED azul; LV- LED vermelho e LAV – LED azul (50%) e vermelho (50%) e quatro formulações de meio de cultivo (MS, ½MS, VW e K), com quatro repetições e média de 125 sementes por parcela. Aos 90 dias após a semeadura foram avaliadas a porcentagem de germinação, de protocormos clorofilados e o desenvolvimento dos protocormos através das classes: P1, P2, P3 e P4 para cálculo do índice de desenvolvimento protocormos. No segundo experimento foram oito tratamentos: 1) germinação in vitro direta; 2) imersão direta em nitrogênio líquido, sem crioprotetores; 3) PVS2 por 60 min; 4) PVS2 por 120 min; 5) PVS2 por 180 min; 6) PVS2 + floroglucinol1% por 60 min; 7) PVS2 + floroglucinol1% por 120 min; 8) PVS2 + floroglucinol1% por 180 min, com cinco repetições e média de 120 sementes por parcela. Imersão em nitrogênio líquido, à temperatura de -196 C por 72 horas. Foram avaliadas a viabilidade e a porcentagem de germinação das sementes, antes e após a aplicação dos tratamentos. Aos 45 dias após a recuperação da criopreservação foi avaliado o desenvolvimento dos protocormos através das classes morfológicas P1, P2 e P3. Os dados foram submetidos à análise de variância e aqueles com valor percentual foram previamente transformados em arco-seno (x/100)1/2. As médias foram comparadas pelo teste de Tukey p0,05. Para B. perrinii, concluiu-se que o percentual de germinação não foi influenciado pelos espectros de luz, mas foi maior nas formulações ½ MS e VW. O maior índice de desenvolvimento dos protocormos de B. perrinii foi observado quando submetidos ao espectro de luz da fonte de iluminação com lâmpadas fluorescentes em meio de cultivo Vacin e Went. A utilização da solução vitrificante (PVS2) combinado ao floroglucinol 1% foi eficiente na recuperação de sementes criopreservadas em nitrogênio líquido, elevou a porcentagem de germinação e desenvolvimento dos protocormos para as duas espécies em estudo. Os resultados observados indicam o uso de PVS2 combinado com floroglucinol 1% por 60 min para a criopreservação de sementes de E. cordigera, e PVS2 com floroglucinol 1% por 180 min para sementes de E. ciliare. O presente estudo também indica que a resposta à criopreservação após o armazenamento à frio é específica da espécie e requer ajustes no tempo de exposição ao PVS2 a 0 °C antes da imersão em nitrogênio líquido.In vitro propagation and ex situ conservation, are techniques that can be improved through the appropriate choice of light source, formulations of the culture medium and cryoprotectants. The aims this work was: (i) study the effect of light sources from fluorescent lamps and light-emitting diodes (LEDs) and cultivation medium formulations on the germination and initial development of Brassavola perrinii orchid and (ii) evaluate the efficiency of the vitrify solution (PVS2) combined with phloroglucinol 1% in liquid nitrogen for the cryopreservation of mature seeds of the species Encyclia cordigera and Epidendrum ciliare. The experiments were installed in a completely randomized design and both were duplicated. In the first, the treatments were arranged in a 5x4 factorial scheme with five light conditions: LF - fluorescent lamp; LB - white LED; LA - blue LED; LV- Red LED and LAV - Blue LED (50%) and red (50%), and four cultivation medium formulations (MS, ½MS, VW and K), with four replications and an average of 125 seeds per plot. At 90 days after sowing, the percentage of germination, of chlorophyll protocorms and the development of protocorms through the classes: P1, P2, P3 and P4 to calculate the protocorms development index. In the second experiment, there were eight treatments: 1) direct in vitro germination; 2) direct immersion in liquid nitrogen, without cryoprotectants; 3) PVS2 for 60 min; 4) PVS2 for 120 min; 5) PVS2 for 180 min; 6) PVS2 + floroglucinol1% for 60 min; 7) PVS2 + floroglucinol1% for 120 min; 8) PVS2 + floroglucinol1% for 180 min, respectively), with five repetitions and an average of 120 seeds per plot. Immersion in liquid nitrogen, at a temperature of -196 C for 72 hours. Viability was evaluated using the tetrazolium test, and the germination percentage of the seeds, before and after the application of the treatments. 45 days after the recovery of cryopreservation, the development of the protocorms was evaluated through the morphological classes P1, P2 and P3. The data were submitted to analysis of variance and those with percentage values were previously transformed into arc sine (x/100)1/2. The means were compared using the Tukey test p0,05. For B. perrinii, he concluded that the germination percentage was not influenced by the light spectra but was higher in the ½ MS and VW formulations. The highest rate of development of B. perrinii protocormos was observed when using the light spectrum of the light source with fluorescent lamps in the Vacin and Went culture medium. The use of the vitrify solution (PVS2) combined with phloroglucinol 1% was efficient in the recovery of cryopreserved seeds in liquid nitrogen, increasing the percentage of germination and development of protocorms for the two species under study. The observed results indicate the use of PVS2 combined with 1% floroglucinol for 60 min for the cryopreservation of E. cordigera seeds, and PVS2 with 1% phloroglucinol for 180 min for E. ciliare seeds. The present study also indicates that the response to cryopreservation after cold storage is species-specific and requires adjustments in the time of exposure to PVS2 at 0 ° C before immersion in liquid nitrogen.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)CNPq: 142567/2016-7. Capes: 88882.330276/2018-01 e 99991.187808/2018-0

    Innovation in Propagation and Cultivation of Ornamental Plants

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    Ornamental plants are constantly being improved by new technologies and cultivation systems to provide new, high-quality plant material for one of the most demanding markets in the horticulture sector [...

    Paclobutrazol no crescimento e desenvolvimento de Zygopetalum crinitum Lodd. e Cattleya schilleriana Rchb.f. (Orchidaceae) durante as fases in vitro e de aclimatização

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    As plantas da família Orchidaceae são muito apreciadas pelo potencial ornamental, ecológico e econômico. O domínio de técnicas para a domesticação e propagação em massa das espécies é extremamente importante, visto que possibilita diminuir a coleta predatória, além de reduzir o custo de produção das plantas. O cultivo in vitro é uma técnica que permite produzir grande número de plantas; entretanto, ocorrem muitas perdas durante o período de aclimatização (ex vitro). O retardante de crescimento paclobutazol (PBZ) atua como inibidor de giberelinas, diminuindo a parte aérea das plantas, promovendo engrossamento nas raízes e aumentando a resistência a estresses, características estas relevantes para aclimatização de mudas com sucesso, contribuindo para altas taxas de sobrevivência. Este trabalho teve como objetivo estudar o efeito da suplementação do meio de cultura Murashige e Skoog com PBZ, no crescimento e desenvolvimento in vitro, e na aclimatização de plantas de Zygopetalum crinitum e Cattleya schilleriana, visando aumentar a taxa de sobrevivência ex vitro. O delineamento experimental (in vitro e ex vitro) foi inteiramente casualisado, com quatro tratamentos (três concentrações de paclobutrazol: 0,5; 1,0; 1,5 mg L-1 e controle); na fase in vitro foram 5 repetições com 5 plântulas/parcela, e na fase ex vitro, 5 repetições com 15 plântulas/parcela. A suplementação do meio de cultivo com PBZ promoveu em plântulas de Z. crinitum redução no comprimento da parte aérea e do sistema radicular, e engrossamento das raízes durante a fase in vitro; na fase ex-vitro, verificou-se engrossamento das raízes, redução no comprimento e na massa de matéria seca da parte aérea. As alterações morfofisiológicas promovidas nas plântulas pela aplicação de PBZ não implicaram melhores taxas de sobrevivência...The plants from Orchidaceae family are very much appreciated by their ornamental, ecologic and economic potential. The mastery of domestication techniques and mass propagation of the species is extremely important since it would decrease the predatory collecting and also reducing the production cost of the seedlings. The in vitro cultivation is a technique that allows the production in large scale; however, the losses during the acclimatization process (ex vitro) can be considerable. The growth retardant paclobutrazol (PBZ) act as gibberellin synthesis inhibitor, reducing the growth of the aerial part and promoting root thickening of the plants, which may increase their resistance to stress conditions; and also being considered good characteristics for plant survival in the acclimatization phase. This work has aimed to study the effect of PBZ supplementation on Murashige and Skoog culture media in the growth and development in in vitro and acclimatization process of Zygopetalum crinitum and Cattleya schilleriana, aiming to increase the survival rate. The experimental design (in vitro and ex vitro) was totally randomized, with four treatments (three paclobutrazol doses: 0.5, 1.0, 1.5, mg L-1 and a control); in the in vitro phase were performed 5 replications with 5 seedlings per plot and in the ex vitro one, 5 replications with 15 seedlings per plot. The paclobutrazol supplementation promoted, for Z. crinitum seedlings, reduction in aerial part and root length and root thickening in the in vitro process; in the ex vitro phase, it was observed root thickening and reduction in length and dry mass of the aerial part. The morphophysiological changes in the seedlings due to the PBZ application did not cause an increase in survival rates for this orchid. For C. schilleriana seedlings, the PBZ promoted root thickening in vitro; and in the acclimatization... (Complete abstract click electronic access below

    Desenvolvimento in vitro e criopreservação de sementes de orquídeas

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    Orchids are well appreciated by ornamental, ecological and economic potential. The improvement of genetic resources conservation methods through seeds and protocorms cryopreservation is an important strategy for the conservation of germplasm and plant breeding programs of this family. The domain of techniques for domestication and mass propagation of species is very important because, enables decreasing predation and reduce the cost of production of plants. The in vitro culture is a technique that allows the production of a large numbers of plants; however, there are many losses during the acclimatization period (ex vitro). This work aimed to evaluate different protocols for cryopreservation of Ionopsis utricularioides seeds, as well as the in vitro development of seedlings in alternative culture media and different environments of the orchids, Amblostoma amblostomoides and Cattleya percivaliana. In experiments on cryopreservation of seeds for each species, the experimental design was completely randomized with eight treatments and four replications each. The treatments were: T1) seeds without cryopreservation (control 1); T2) seeds cryopreserved without cryoprotectants (Control 2); T3) glycerol + PVS2; T4) glycerol + PVS2 + phloroglucinol; T5) sucrose + PVS2; T6) sucrose + PVS2 + phloroglucinol; T7) glycerol + sucrose + PVS2; and T8) + sucrose + glycerol + PVS2 + phloroglucinol and 10 repetitions. The variables analyzed were germination percentage, number of seedlings and protocorms and development of the seedlings formed. In the experiments on in vitro development of seedlings in an alternative culture media and in different environments, the experimental design was completely randomized for each species. There were six treatments [T1: MS medium (Murashige e Skoog) - under laboratory conditions; T2: ACM (Alternative Culture Medium) - under laboratory conditions; T3: MCA - black net with 50% shading; T4: MCA - black net with ...As plantas da família Orchidaceae são muito apreciadas pelo potencial ornamental, ecológico e econômico. O domínio de técnicas para a domesticação e propagação em massa das espécies é extremamente importante, visto que, possibilita diminuir a coleta predatória, além de reduzir o custo de produção das plantas. O cultivo in vitro é uma técnica que permite produzir grande número de plantas; entretanto, ocorrem muitas perdas durante o período de aclimatização (ex vitro). O aprimoramento dos métodos de conservação de recursos genéticos por meio de criopreservação de sementes em desenvolvimento é uma importante estratégia para a conservação de germoplasma e programas de melhoramento genético de plantas desta família. Este trabalho teve como objetivos avaliar o desenvolvimento in vitro de plântulas em meio de cultura alternativo e diferentes ambientes das orquídeas Amblostoma amblostomoides e Cattleya percivaliana, bem como, diferentes protocolos para a criopreservação de sementes da orquídea Ionopsis utricularioides. Nos experimentos sobre desenvolvimento in vitro de plântulas em meio de cultura alternativo e diferentes ambientes, para cada espécie, o delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado. Inicialmente foram seis tratamentos (T1 - meio MS (Murashige e Skoog) + sala de crescimento - Controle; T2 - MCA (meio de cultura alternativo) + sala de crescimento; T3 - MCA + tela preta com 70% de sombreamento; T4 - MCA + tela azul com 50% de sombreamento; T5 - MCA + tela preta com 50% de sombreamento e T6 - MCA + tela vermelha com 50% de sombreamento) e quatro repetições com 10 plântulas por parcela avaliando-se porcentagem de sobrevivência; para avaliação dos dados biométricos, em razão do alto índice de mortalidade, foram avaliados quatro tratamentos para A. amblostomoides e três tratamentos para C. percivaliana, com 12 repetições para ambas as espécies, sendo uma plântula..

    In vitro viability of pollen grain of fiji dwarf coconut accession.

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    Lethal yellowing is a disease that causes severe damages to coconut palms and it has devastated the coconut canopy of several Caribbean islands, and areas of southern Florida. The Fiji dwarf coconut accession has demonstrated tolerance to this disease. Pollen storage and germination provides useful information for conservation strategy and genetic improvement programs. The objective of this study was to evaluate pollen viability of Fiji dwarf coconut by in vitro germination under different nutritional and abiotic conditions. For the first experiment, two liquid culture media were evaluated for in vitro germination of Fiji dwarf coconut pollen; the Lora culture medium and the Armendariz culture medium combined with four temperature levels. In the second experiment, different sucrose concentrations in the Lora culture medium (4, 8, 12 and 16%) were evaluated combined with two incubation times (6 and 24 h) in the presence or absence of light. The highest in vitro germination of pollen grain was obtained in Lora culture medium by 24 h incubation period at 28 ºC. The light condition does not influence the germination process. In vitro germination percentage improved as the sucrose concentration increased according to a linear regression. In contrast, damage pollen grain percentage reduced according to a quadratic regression
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