1,721,027 research outputs found
Lymphocystis virus disease
No full textLymphocystis disease (LCD) is a chronic self-limiting disease involving a number of teleost species throughout the world. It is caused by the lymphocystis disease virus (LCDV) and characterized by white nodules affecting the fish's skin/fins. Although LCD is frequently benign, it may be responsible for economic losses related to poor growth, nonmarketability of diseased fish, and secondary bacterial infections. Currently, no specific prevention or therapeutic methods are available, and the control is based on the application of a biosecurity program including disinfection procedures, screening and quarantine of fish stocks that have to be introduced. Recent studies showed that LCDV causes systemic infection, and surviving fish can become asymptomatic carriers, thus presenting new challenges in the control of LCD. This chapter reviews the literature providing an overview of this insidious disease, including recent insights on pathogenesis and epidemiology, available methods for the diagnosis and future prospects to improve LCD control
Short note: Infliximab recovery in a simulated intestinal fluid of the upper intestine tract
No full textBACKGROUND: The oral administration of Infliximab (IFX) antibody would ensure a direct action on inflamed intestinal tissues without side effects. Thus, investigations about its resilience within the intestinal environment are required. OBJECTIVE: Quantify the IFX recovery in a simulated upper intestinal environment. METHODS: IFX was incubated for different times until 120 min in simulated intestinal fluid (SIF) which differed (i) for pH (7.2 vs 6.8, Exp 1), (ii) for addition or not with pancreatin (Exp 2) and (iii) for addition or not with bovine serum albumin in presence of pancreatin (BSA, Exp 3). RESULTS: In Exp 1 the IFX incubated without pancreatin was degraded by about 15% by SIF pH change from 7.2 to 6.8 and after 120 min it was reduced by about 20%. In Exp 2 the presence of pancreatin determined an intense and rapid IFX degradation (recovery < 33%, within 30 min), but when BSA was added to simulate the presence of food protein (Exp 3) the IFX half-life ranged between 59 and 70 min. CONCLUSIONS: A discrete in vitro stability of IFX in the upper intestine environment was demonstrated, if food protein is available and competes with pancreatin proteases
Monitoraggio dell'espressione citochinica in corso di vaccinazione polivalente della spigola (Dicentrarchus labrax, L. 1758) contro Photobacterium damselae subsp. piscicida e Listonella anguillarum
No full textSea bass (Dicentrarchus labrax, L. 1758) is the most important fish species in the Mediterranean aquaculture and the fight against Vibriosis and Pasteurellosis is a prior objective for the economy in marine aquaculture. Vaccination would be an ideal tool to prevent these infectious diseases, but it still requires optimization. The study of the immune response induced by infection and vaccination is an important tool for evaluation of vaccine protocol efficacy. Cytokine expression analysis, in this respect, can provide a useful contribution to the study of the mechanisms involved in the immune response activated by infections and vaccinations.
This research was aimed to develop an assay for absolute quantification of 3 seabass cytokines and to apply it during polyvalent vaccination against Photobacterium damselae subsp. piscicida (Phdp) and Listonella anguillarum to measure immune response. The method has proved to be sensitive, reproducible and accurate for the quantification of mRNA coding IL-1β, IL-6 and IL-8 seabass cytokines. The analysis of cytokine gene expression during polyvalent vaccination against Phdp and L. anguillarum showed a correlation between cytokine gene upregulation and the percentage of survival after challenge with L. anguillarum in subjects vaccinated intraperitoneally suggesting the involvement of these cytokines in the immune mechanisms protecting the fish against this infection. Upregulation of the three cytokines investigated was also observed in the seabass during Phdp infection in analogy with what has been previously observed in other species. Further studies will be necessary to identify effective methods for the administration of polyvalent vaccine other than intraperitoneal route
Rilievi istopatologici in corso di infezione spontanea da Enteromyxum leei in sarago pizzuto (Diplodus puntazzo, Cetti 1777).
No full textEnteromyxum leei è un parassita intestinale responsabile di severi episodi di malattia in sarago pizzuto (Diplodus puntazzo). Questo mixosporidio ha determinato una notevole riduzione dell’allevamento di questa specie mediterranea, che rappresentava una valida alternativa zootecnica per la diversificazione della produzione in maricoltura. In quest’ottica, recentemente è stato ultimato un progetto per studiare i fattori limitanti la produzione del sarago pizzuto, con particolare riferimento alle epizoozie causate da questo mixosporidio. Tra
le finalità del progetto era compresa la descrizione dei quadri anatomopatologici enterici, con la descrizione
dettagliata delle diverse enteriti, osservate durante infezioni spontanee da E. leei in sarago pizzuto, verificatesi in
due allevamenti italiani (A e B, rispettivamente sud e nord Italia). A ogni campionamento (7 in totale), 10 soggetti sono stati sacrificati tramite dose letale di anestetico e, durante la necroscopia, sono stati prelevati porzioni di organi viscerali, rene, cuore e branchie. In particolare dal tratto gastroenterico, isolato dal resto degli organi viscerali, sono stati prelevati la porzione pilorica dello stomaco e tratti di intestino corrispondenti al 5, 50 e
95% della lunghezza totale. I campioni sono stati fissati in formaldeide tamponata al 4% o in soluzione di Bouin e
processati secondo le comuni tecniche istologiche. Sezioni seriali in paraffina sono state colorate con
ematossilina-eosina e, alternativamente, caratterizzate istochimicamente. Allo scopo di standardizzare
l’interpretazione dei preparati e confrontare i campioni è stato messo a punto un sistema di valutazione a parametri punteggiati. I quadri infiammatori prevalenti erano enterite proliferativa e enterite diffusa linfocitaria cronica
Application of in vitro lymphocyte stimulation test to investigate the immunoreactvity of sea bass (Dicentrarchus labrax)
No full textA rapid tetrazolium (MTT) based colorimetric assay was used to evaluate the in vitro cellular immune reactivity of sea bass (Dicentrarchus labrax) lymphocytes obtained from peripheral blood, head kidney and spleen, and separated on Hystopaque gradients. Dose response assays were performed using lectins (phytohemagglutinin, concanavalin-A) and bacterial lipopolysaccharide as stimulants. In the leukocyte microtitration assays the best results were observed in head kidney cell cultures maintained in the presence of PHA-P in 12.ìg/ml end concentration, but LPS also caused a definite proliferation, while Con-A proved to lack effect. Peripheral blood .5lymphocytes were stimulated by all three mitogens Con-A, LPS and PHA-P, the highest values were given also by PHA-P in cultures containing the drug in 6.25 ìg/ml concentration. Spleen lymphocytes reacted least to the mitogens, only mild, statistically non significant responses were observed in the presence of the superantigens
ESTRATTI DI ALOE, CURCUMA, ECHINACEA, GINSENG, LAVANDA, ORIGANO E RABARBARO MODULANO IL RILASCIO DI ROS E LA PROLIFERAZIONE DEI LEUCOCITI DI TROTA IRIDEA (ONCORHYNCHUS MYKISS)
No full textL'impiego di piante medicinali è oggetto di una crescente attenzione sia in medicina umana che
veterinaria per le loro proprietà antiossidanti e immunostimolanti. Anche in acquacoltura la possibile
applicazione di immunostimolanti naturali a base di erbe sta suscitando notevole interesse, allo scopo
di ridurre l'impiego di antibiotici nel trattamento delle malattie infettive, garantendo al tempo stesso
produzioni ecocompatibili e sicure per il consumatore. Peraltro la Comunità Europea ha vietato l’uso
di antibiotici di sintesi come promotori della crescita nell'alimentazione degli animali (1831/2003 CE),
quindi approcci alternativi vengono studiati anche in questo campo. Numerose prove sperimentali in
vivo sono state effettuate per indagare l’effetto della somministrazione di prodotti ottenuti da piante su
risposta immunitaria e resistenza alle malattie di diverse specie ittiche (Bulfon et al., 2014), mentre
sono limitati gli studi in vitro dedicati alla valutazione delle proprietà immunomodulanti di fitoestratti
o composti bioattivi sulle cellule immunitarie dei pesci. Le recenti linee guida comunitarie
(2010/63/UE) e nazionali (D.L. n. 26 del 4 marzo 2014) impongono di limitare l'uso di animali a fini
scientifici, di conseguenza un approccio preliminare in vitro viene sempre più raccomandato.
L'obiettivo di questo studio è stato quello di indagare in vitro gli effetti degli estratti di Aloe vera,
Curcuma longa, Echinacea purpurea, Lavandula officinalis, Origanum vulgare, Panax ginseng e
Rheum officinale (E.P.O. srl, Milano) sul rilascio di specie reattive dell’ossigeno (ROS) e sulla
proliferazione dei leucociti di trota iridea (Oncorhynchus mykiss).
Sei soggetti adulti sani sono stati selezionati e utilizzati per l’analisi di ciascun parametro. Le cellule
sono state purificate da rene anteriore e incubate a 18°C in terreno L-15 con dosi crescenti di estratto
per 2 h o 72 h, quindi è stata misurata l’attività di “burst respiratorio” dopo stimolazione con PMA,
mediante chemiluminescenza, e la proliferazione in presenza e assenza del mitogeno PHA, mediante
saggio con MTT. Gli estratti di L. officinalis, O. vulgare e R. officinale hanno fortemente ridotto il
rilascio di ROS dei leucociti PMA-stimolati, in modo dose-dipendente. Anche gli estratti di A. vera, C.
longa, E. purpurea e P. ginseng hanno mostrato effetti inibitori, ma meno evidenti e inversamente
proporzionali alla dose. La più alta concentrazione di estratto di ginseng ha invece stimolato il rilascio
di ROS dei leucociti. Le proprietà antiossidanti dimostrate da origano, lavanda e rabarbaro sono
dovute probabilmente al loro contenuto di composti fenolici, che penetrano nelle cellule e
interferiscono con l'attivazione di molecole coinvolte nella trasduzione del segnale o alternativamente
esplicano un’azione di “scavenging” intra-cellulare. Gli estratti di aloe, curcuma, echinacea e ginseng
contengono una varietà di composti chimici bioattivi, che plausibilmente interferiscono in modi
diversi sull'attività di “burst respiratorio”. Gli estratti di C. longa, E. purpurea, P. ginseng, L.
officinalis e R. officinale hanno mostrato, inoltre, un evidente effetto stimolante, dose-dipendente, la
proliferazione dei leucociti. Tale proprietà potrebbe essere attribuita a componenti di tipo
polisaccaridico, la cui presenza è nota in alcune delle specie vegetali utilizzate.
I risultati suggeriscono che queste piante medicinali sono in grado di modulare alcune attività dei
leucociti di trota iridea e rappresentano la base conoscitiva per ulterior
Histological and ultrastructural description of benign adipocytic tumors in farmed striped sea bream (Lythognathus mormyrus)
No full textCutaneous neoplasms affecting wild striped bream (Lythognathus mormyrus) have been recorded after their introduction in a marine aquaculture farm in the Adriatic Sea. The tumors were evident on 24% of the reared fish, showing single or multiple nodules, with a diameter ranging between 0.5–4.0 cm. Histologically, all the neoplastic lesions were located in the stratum spongiosum of the dermis and were surrounded by a thin capsule of connective tissue. The tumors were predomi-nantly composed of adipocytes grouped and surrounded by a thin net of fibroblasts and collagen fibers. In some lipomas a mixture of adipocytes and uniform spindle cells were also observed. Fibroblasts and collagen fibers, or spindle cells, showing few mitotic figures were mainly observed in other nodules. Three of the tumors showed bands of cells with elongated nuclei. Five neoplasms differed from the classic spindle cell lipoma due to the presence of scattered giant cells. These cells presented acidophilic abundant cytoplasm with multiple hyperchromatic nuclei showing a concentric “floret-like” arrangement. The tumors were further characterized by ultrastructural observations that allowed ruling out the presence of virus-like particles within the lesions. Histological features of the masses lead to the identification of four prevalent patterns of neoplasms: lipoma, fibrolipoma, spindle cell lipoma (SCL), and atypical spindle cell-like lipoma (ASCL). The different neoplasms could arise from the transformation of mesenchymal cells of dermal origin. To the author’s knowledge, this is the first report describing key differential histological and ultrastructural features of these neoplasms in striped sea bream
IMMUNOHISTOCHEMICAL DEMONSTRATION OF CD35 AND CD16 RECEPTORS IN DEVELOPMENTAL STAGES OF SEA BASS (D. LABRAX)
No full textThe study of teleosts immune system is useful to better understand its involvement inthe prevention of infectious diseases. Additionally, such studies are important from aphylogenetic point of view, since fish are the first animals that, in the evolutionaryprocess, show aspects of innate and adaptive immune response comparable to thosepresent in higher vertebrates. In mammals, phagocytosis is a prerogative ofmacrophages and neutrophil granulocytes. At the moment, some fish cell populationsinvolved in this activity are still under investigation, due to the evident morphologicalheterogeneity of leucocytes among different species and to the lack of specific surfacemarkers for fish phagocytes. A crucial role in the phagocytosis activation can beattributed to the membrane receptors for complement and immunoglobulin Fc. Inmammals four types of receptors for C3 have been identified, namely CR1, CR2, CR3and CR4. CR1 (CD35) is expressed by neutrophils, eosinophils and some B and Tsub-populations. It promotes the link to and phagocytosis of particles opsonised byC3b and C4b fractions. FcR" (CD16) is expressed by several hemopoietic cells(macrophages and lymphocytes) and its role is fundamental for the cellular immuneresponse mediated by immunoglobulins (removing of immune-complexes oropsonised particles by phagocytosis). Investigations dealing with the identification ofthese receptors in teleosts are recent and concern a limited number of species:rainbow trout, catfish, carp, zebrafish. These studies have mainly focused on aspectsof CR1 and FcR phylogenesis, as well as structural/functional homologies withmammalians. From the literature there is no evidence of investigations dedicated tothe identification of CR1 and FcR in marine teleosts, and also there are no dataregarding the immunohistochemical localization of cells presenting these CDs. Thepresent paper is aimed to the demonstrations of CD16 and CD35 immune-receptors intissues of sea bass (Dicentrarchus labrax) at different developmental stages.Histological sections obtained from tissue specimens collected from sea bassfingerlings were submitted to immunohistochemical analysis by use of the followingantibodies: goat polyclonal to CD35 (CR1); rabbit polyclonal to CD16 (FcR). Thereaction was developed by ABComplex peroxidase and DAB. As a result of theantibodies employed, even if specific for mammalian receptors, allowed the detectionof cell populations in different tissues, and also the chronology of appearance wasdescribed. In synthesis, CD16 was detectable in thymus, gills and skin starting from50dph, and in the digestive system starting from 90 dph. CD35 was detectable inseveral organs (thymus, gills, pancreas, skin, stomach, gut) starting from 47 dph, andlater in spleen and pyloric caeca. Moreover, the morphology of CD16+ and CD35+cells colonizing various tissues was described, allowing the discrimination of at leastthree different cell populations: CD16+ cells, morphologically similar to macrophagesor dendritic cells (APCs), with non granular cytoplasm; CD35+ cells,morphologically similar to macrophages or dendritic cells (APCs), with non granularcytoplasm; CD35+ cells, morphologically similar to eosinophilic granulocytes orEGCs, with granular cytoplasm. These populations were particularly consistent inthymus (among the primary lymphoid organs), skin and digestive tract (mucosaeassociate lymphoid tissue). Based on their morphology and specific localization, ahypothesis concerning their role as phagocytes and antigen presenting cells will bediscussed.[...
STRUTTURE A CORONA (CROWN-LIKE STRUCTURES) NEL TESSUTO ADIPOSO VISCERALE DI GIOVANILI DI ORATA (SPARUS AURATA): CONSIDERAZIONI SULLA LORO RILEVANZA NEI PESCI
No full textL'accumulo di grasso viscerale nei mammiferi è un fenomeno determinante nell'insorgenza di disturbi metabolici associati all'obesità, condizione provocata da uno squilibrio nutrizionale prolungato che induce il tessuto adiposo bianco ad accumulare trigliceridi nelle cellule adipose, causandone ipertrofia e iperplasia. Nel tessuto adiposo, con adipociti ipertrofici in degenerazione, sono presenti macrofagi che provocano un'infiammazione cronica, ampiamente considerata come fattore causale dell'insulino-resistenza e, infine, del diabete. I macrofagi che infiltrano il tessuto adiposo di mammiferi obesi sono distribuiti attorno agli adipociti morti, formando caratteristiche strutture a corona (crown-like structures-CLS). Istologicamente le CLS sono facilmente riconoscibili, ancor più quando i macrofagi sono immunomarcati con anticorpi specifici. La presenza e il numero di CLS sono considerati, quindi, indicatori di obesità sia in medicina umana sia veterinaria. Nei teleostei, sebbene le funzioni del tessuto adiposo attirino l'attenzione della ricerca, ad oggi non esistono studi sulle CLS e la loro eventuale correlazione con un eccessivo stato d’ingrassamento e conseguenti disturbi metabolici.
Durante il progetto Horizon PerformFISH, 293 giovanili di orata (0,8-1,5g), provenienti da avannotterie europee, sono stati sacrificati con una dose letale di MS-222 (50-100mg/L), fissati in soluzione di Bouin e processati al fine di ottenere sezioni istologiche, in seguito colorate con ematossilina-eosina e Schmorl. La valutazione istologica ha previsto l’utilizzo di un sistema semi-quantitativo multiparametrico, punteggiando da 1 a 5 la quantità di tessuto adiposo viscerale; i soggetti sono stati poi ripartiti in base al punteggio ottenuto e conteggiati quelli che presentavano CLS. Infine, per identificare i tipi cellulari osservati nella CLS sono stati eseguiti saggi immunoistochimici con anticorpi mono o policlonali (CD68, CD83, GM-CSFR, G7 e TNFα).
Istologicamente i giovanili presentavano un tessuto adiposo viscerale abbondante, a carico del quale si notavano processi infiammatori diffusi, con infiltrato cellulare misto composto principalmente da granulociti acidofili (78%) e mastociti (17%), ma anche da linfociti (9%). Nel tessuto adiposo del 41,6% dei soggetti, sono stati riscontrati adipociti morti o in degenerazione, identificabili grazie a confini cellulari indistinti, circondati da cellule arrangiate a formare una corona. Il citoplasma di tali cellule si presenta vacuolizzato o schiumoso e sono tipicamente raggruppate a formare uno strato singolo, talvolta multicellulare. Nella struttura a corona alcune di queste cellule sono positive alla colorazione di Schmorl, dimostrando la presenza di lipidi ossidati come tipicamente nei macrofagi. Sebbene nessuna immunomarcatura ha tipizzato le cellule componenti le CLS, queste lesioni del tessuto adiposo viscerale osservate nei giovanili di orata sono istomorfologicamente analoghe a quelle descritte nei mammiferi e, inoltre, la loro prevalenza è correlata all'aumentare della quantità di tessuto adiposo. Questa, a nostro avviso, è la prima descrizione in teleosteo di CLS nel tessuto adiposo viscerale, le quali potrebbero rappresentare un indicatore istologico di problemi metabolici come nei mammiferi, quindi sarebbe opportuno approfondirne il significato nei teleostei e la loro rilevanza in termini di benessere
Expression of infection-related immune response in European sea bass (Dicentrarchus labrax) during a natural outbreak from a unique dinoflagellate Amyloodinium ocellatum
No full textIn the Mediterranean area, amyloodiniosis represents a major hindrance for marine aquaculture, causing high mortalities in lagoon-type based rearing sites during warm seasons. Amyloodinium ocellatum (AO) is the most common and important dinoflagellate parasitizing fish, and is one of the few fish parasites that can infest several fish species living within its ecological range. In the present study, A. ocellatum was recorded and collected from infected European sea bass (Dicentrarchus labrax) during a summer 2017 outbreak in north east Italy. Histological observation of infected ESB gill samples emphasized the presence of round or pear-shaped trophonts anchored to the oro-pharingeal cavity. Molecular analysis for small subunit (SSU) rDNA of A. ocellatum from gill genomic DNA amplified consistently and yielded 248 bp specific amplicon of A. ocellatum, that was also confirmed using sequencing and NCBI Blast analysis. Histological sections of ESB gill samples were addressed to immunohistochemical procedure for the labelling of ESB igm, inos, tlr2, tlr4, pcna and cytokeratin. Infected gills resulted positive for igm, inos, pcna and cytokeratin but negative to tlr-2 and tlr-4. Furthermore, ESB immune related gene response (innate immunity, adaptive immunity, and stress) in the course of A. ocellatum infection using quantitative polymerase chain reaction (qpcr) for infected gills and head kidney was analysed. Among the twenty three immune related gene molecules tested, cc1, il-8, il-10, hep, cox-2, cla, cat, casp9, and igt were significantly expressed in diseased fish. Altogether, these data on parasite identification and expression of host immune-related genes will allow for a better understanding of immune response in European sea bass against A. ocellatum and could promote the development of effective control measures
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