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    Next-generation technologies and systems biology for the design of novel vaccines against apicomplexan parasites

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    Parasites of the phylum Apicomplexa are the causative agents of important diseases such as malaria, toxoplasmosis or cryptosporidiosis in humans, and babesiosis and coccidiosis in animals. Whereas the first human recombinant vaccine against malaria has been approved and recently recommended for wide administration by the WHO, most other zoonotic parasitic diseases lack of appropriate immunoprophylaxis. Sequencing technologies, bioinformatics, and statistics, have opened the “omics” era into apicomplexan parasites, which has led to the development of systems biology, a recent field that can significantly contribute to more rational design for new vaccines. The discovery of novel antigens by classical approaches is slow and limited to very few antigens identified and analyzed by each study. High throughput approaches based on the expansion of the “omics”, mainly genomics and transcriptomics have facilitated the functional annotation of the genome for many of these parasites, improving significantly the understanding of the parasite biology, interactions with the host, as well as virulence and host immune response. Developments in genetic manipulation in apicomplexan parasites have also contributed to the discovery of new potential vaccine targets. The present minireview does a comprehensive summary of advances in “omics”, CRISPR/Cas9 technologies, and in systems biology approaches applied to apicomplexan parasites of economic and zoonotic importance, highlighting their potential of the holistic view in vaccine development.Instituto de PatobiologíaFil: Tomazic, Mariela Luján. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Tomazic, Mariela Luján. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Tomazic, Mariela Luján. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Catedra de Biotecnología; ArgentinaFil: Marugan-Hernandez, Virginia. University of London. The Royal Veterinary College; Reino UnidoFil: Rodriguez, Anabel Elisa. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Rodriguez, Anabel Elisa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

    Evaluación del efecto del tratamiento con alta presión hidrostática y de la formulación sobre la inactivación de cepas nativas de STEC O157 en hamburguesas de carne bovina

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    El mercado actual ofrece al consumidor distintas formulaciones de hamburguesas reflejadas en productos tradicionales o más saludables (reducidos en contenidos de grasa y cloruro de sodio). En este contexto, el objetivo de este estudio fue evaluar la aplicación de la tecnología de APH y de la formulación sobre la inactivación de un coctel de cepas nativas de STEC O157 inoculado en hamburguesas, así como sobre la microbiota natural.Instituto de Tecnología de los AlimentosFil: Eccoña Sota, Amparo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Tecnología de los Alimentos; ArgentinaFil: Cap, Mariana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Tecnología de los Alimentos; ArgentinaFil: Rodriguez, Anabel Elisa. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Tecnología de los Alimentos; ArgentinaFil: Sancho, Ana Maria. Instituto de Tecnología de los Alimentos; ArgentinaFil: Vaudagna, Sergio Ramon. Instituto de Tecnología de los Alimentos; Argentin

    Secuenciación masiva de genes candidatos vacunales de Eimeria sp.

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    Mediante una estrategia de vacunología reversa, se identificaron posibles candidatos vacunales de Eimeria tenella y E. acervulina. Se diseñaron oligonucleótidos específicos para su amplificación a partir de distintos aislamientos geográficos con el fin de identificar -o no- polimorfismos y posteriormente analizar la conservancia de los genes. Los amplicones fueron secuenciados utilizando tecnología de nueva generación (NGT).Fil: Tomazic, Mariela Luján. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Patobiologia Veterinaria. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Patobiologia Veterinaria.; ArgentinaFil: Britez, Jesica. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Patobiologia Veterinaria. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Patobiologia Veterinaria.; ArgentinaFil: Rodriguez, Anabel Elisa. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Patobiologia Veterinaria. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Patobiologia Veterinaria.; ArgentinaFil: Poklépovich Caride, Tomás Javier. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; Argentin

    Expresión heteróloga y localización subcelular del candidato vacunal GPI4 de babesia bovis en el ciliado tetrahymena thermophila

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    Los glicosilfosfatidilinositoles (GPIs) se encuentran en abundancia en la superficie de protozoos parásitos como glicolípidos libres y como anclas de proteínas de superficie a la membrana plasmática. Se ha demostrado que las proteínas ancladas por GPIs están involucradas en el mecanismo de invasión a la célula huésped, por lo que representan blancos moleculares muy interesantes para el diseño de nuevas estrategias vacunales contra protozoos patógenos de importancia veterinaria. Además, los GPIs libres actúan como potentes moduladores de la respuesta inmunológica. Tetrahymena thermophila es un protozoo ciliado de vida libre que expresa en la superficie abundantes proteínas ancladas por GPI, y ha sido utilizado como plataforma biotecnológica para la expresión de antígenos recombinantes.Instituto de PatobiologíaFil: Montes, M. G. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Flores, Daniela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Rodriguez, Anabel Elisa. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: González Maglio, D. H. Universidad de Buenos Aires. Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral (IDEHU); Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Florin-Christensen, Monica. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiologia; ArgentinaFil: Nusblat, Alejandro David. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Nanobiotecnología; ArgentinaFil: Schnittger, Leonhard. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; Argentin

    Liposome applications in the veterinary field

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    In the field of veterinary medicine, liposomes are the most widespread nanotechnological tool. Already for some time, they have been applied in animal therapies to improve delivery of different drugs, comprising analgesic, antiviral, antimicrobial, antifungal, and anticancer agents. More recently, with the rise of recombinant DNA technologies, liposomes have been included in veterinary vaccine formulations to entrap antigen-coding DNAs, siRNAs, peptides, and recombinant antigens, as well as effectors of the innate immune system, in order to elicit protective responses against viruses, bacteria and parasites. Reported applications include their use in companion and productive animals, among others horse, dog, cattle, poultry, and fish. Liposomes are generally well tolerated and, in accordance with their purpose, may be delivered through the intramuscular, subcutaneous, intravenous, ocular, and/or intranasal route to their desired target. In order to achieve a more specific tissue targeting, engineering of liposomes has also been described in the veterinary field. Besides therapeutics, liposomes have also been applied in transfection technologies and in the cryopreservation of stallion or bull semen. Use of liposomes can be limited by the high manufacturing costs of lipid synthesis or purification. Therefore, the formulation of low-cost liposomes made of non-purified lipid mixtures will open the possibility of large-scale applications in animal productive systems. This chapter presents an overview on possibilities, advantages, and perspectives of liposome employment for veterinary use.Fil: Florin Christensen, Mónica. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Rodriguez, Anabel Elisa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Tomazic, Mariela Luján. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Schnittger, Leonhard. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; Argentin

    Modelo Agroecológico para la Coccidiosis aviar (18136-RG) Producto 1 : Nota técnica conteniendo dos informes técnicos de la caracterización de la Agricultura Familiar

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    La coccidiosis aviar es una parasitosis intestinal causada por un protozoo del género Eimeria spp. que ocasiona pérdidas en la productividad, siendo la principal causa de merma en los rendimientos productivos en todo el mundo. Además, provoca problemas sanitarios en las granjas. El parásito es eliminado por las heces, en el estadio de ooquiste, se disemina y persiste en el medio ambiente por largos períodos. El control actual en la agricultura familiar (AF) se lleva a cabo con medidas de bioseguridad y manejo y drogas anticoccidiales. La relevancia de la coccidiosis en el ámbito de la AF tanto en Argentina como en Chile es poco conocida, por lo que la falta de información y las pocas estrategias de control disponibles inciden negativamente en el estatus sanitario de los establecimientos y por ende en la productividad y rentabilidad. El objetivo general de este trabajo fue caracterizar los sistemas productivos de la AF en aspectos socioculturales vinculados al manejo de las aves, las instalaciones, la prevalencia de la coccidiosis y las principales especies de Eimeria circulantes. Para relevar y caracterizar a los y las productoras de Argentina (región Metropolitana de Buenos Aires y provincia de Buenos Aires) y Chile (Región Metropolitana de Santiago y O’Higgins), se diseñaron encuestas para los 76 establecimientos incluidos en el estudio, se elaboraron protocolos de muestreos; se diagnosticó la coccidiosis y se identificaron las especies de Eimeria mediante técnicas de biología molecular. Mientras que en Argentina coexisten producciones destinada a carne de pollo y de huevos de gallinas en Chile únicamente se hallaron producciones de huevos. Los principales hallazgos fueron: 1. El manejo de las granjas y corrales presentó simetría de género, aunque en Chile el 38% de las granjas son manejadas por mujeres jefas de hogar, siendo la avicultura la principal fuente de ingresos. En el manejo de químicos y en la capacitación se observó una asimetría de género, siendo en Chile las mujeres expuestas a químicos y en Argentina los hombres y en Chile las mujeres se capacitan en mayor proporción que los hombres; 2. El manejo de los corrales se realiza en forma manual, con muy poca automatización e infraestructura básica, lo que lleva a un trabajo de cuidado diario; 3. Se observó una diversificación en la venta, principalmente a través de venta ambulante, mercados de proximidad y ferias populares; 4. La prevalencia global de la coccidiosis fue muy elevadas, siendo del 84,2 % lo cual indica que la ocurrencia de la parasitosis es muy alta en las regiones estudiadas; 5. Hay diferencias significativas entre la cantidad de parásitos hallados en producciones de carne y huevo en Argentina, siendo más elevada en pollos de engorde, y en las producciones de huevo de Argentina comparada con Chile; 6. Se detectaron las 7 especies de Eimeria,siendo más prevalentes tres especies subclínicas (E. acervulina, E. maxima, E. mitis) y una clínica, siendo una de las más patógenas (E. tenella); 8. Se hallaron diferencias significativas en la frecuencia de limpieza en las granjas destinadas a huevos de Argentina y Chile, siendo más frecuente en Chile; 9. Dentro del porcentaje de productores y productoras que utiliza drogas químicas para el control de enfermedades, el 54% usan sulfonamidas, lo cual indica un impacto ambiental; 10. El 94,74 % de los/as productores/as en Chile no conocen a la parasitosis, indicando un elevado grado de desconocimiento para evitar tanto la diseminación ambiental del patógeno como para la aparición de brotes; 11. En Argentina menos de la mitad de productores/as hacen tratamiento y en Chile el 100% no lo realiza ni diagnostica, lo cual guarda relación con el alto desconocimiento de la parasitosis. En conclusión, este informe constituye el primer reporte de coccidiosis en la agricultura familiar en Argentina y Chile y generó conocimiento para caracterizar a los y las productoras, identificando las oportunidades de mejoras que permitirán diseñar estrategias de intervención adaptadas a la región para una enfermedad omnipresente que constituye una potencial amenaza para este importante sector pecuario que aporta a la seguridad alimentaria. Asimismo, aporta el conocimiento necesario para el desarrollo de un modelo agroecológico para el control de esta parasitosis y para la reducción del uso de anticoccidiales, mejorando el impacto ambiental y aportando a la transición de sistemas productivos más sustentables y eficientes y promoviendo la igualdad de género. ABSTRACT Chicken coccidiosis is an intestinal disease caused by a protozoan of the genus Eimeria spp., which causes economic losses, impairing productivity worldwide. In addition, it impairs chicken health. The parasite is excreted in the feces, through the oocyst stage, disseminating and persisting in the environment for long periods. Current control in familiy poultry production systems (FPPS) is carried out with biosecurity and management measures, and anticoccidial drugs. The relevance of coccidiosis in BPS in both Argentina and Chile is little known; thus, the lack of information and the few control strategies available negatively impact the health status of farms, productivity, and profitability. The general objective of this work was to characterize the productive systems of the backyard related to sociocultural aspects, poultry management, facilities, the prevalence of coccidiosis, and the main circulating Eimeria species. A questionnaire was designed for the 76 farms included in this study that were located in Argentina (Buenos Aires Metropolitan Region and Buenos Aires Province) and Chile (Santiago Metropolitan Region and O'Higgins). Also, sampling protocols were designed; a diagnostic of Coccidiosis was performed and Eimeria species were identified using molecular tools. Whereas in Argentina was found broiler and layer chicken production, in Chile only layer chicken production was found. The main findings were: 1. Farm management presented gender symmetry, although in Chile 38% of farms were managed by women, where poultry is the main source of income. In the handling of chemicals and training, a gender asymmetry was observed. Women in Chile were exposed to chemicals while in Argentina men were more exposed than women, in Chile women were training more than men; 2. The poultry management is done manually, which leads to daily care work and with very little automation and rudimentary infrastructure; 3. Diversification was observed in the market, mainly through street sales, local markets, and popular fairs; 4. The global prevalence of coccidiosis was very high, 84.2%, which indicates that the occurrence of parasitosis is very high in the regions studied; 5. There are significant differences between the number of parasites excreted, being higher in broilers than in layers in Argentina, and in layers of Argentina than Chile; 6. The 7 chicken-Eimeria species were detected, and the most prevalent were three subclinical species (E. acervulina, E. maxima, E. mitis) and one clinical and pathogenic species (E. tenella); 8. Significant differences were found in the frequency of cleaning in layer farms in Argentina and Chile, being more frequent in Chile; 9. Among the percentage of farmers that apply chemical drugs, 54% use sulfonamides, which indicates an environmental impact; 10. A 94.74% of farmers do not know the parasitosis, indicating a high lack of knowledge to avoid environmental dissemination of the parasite and the occurrence of outbreaks; 11. In Argentina, less than half of producers treat coccidiosis and in Chile, 100% do not perform treatment or diagnostics possibly due to the lack of knowledge of the disease. In conclusion, this study constitutes the first report of coccidiosis in FPPS in Argentina and Chile and generated knowledge to characterize farmers, identifying opportunities for improvements. This will allow the design of intervention strategies adapted to BPD for an omnipresent parasite that constitutes a potential threat to this important livestock sector that contributes to food security. Likewise, it provides the necessary knowledge for developing an agroecological model to control this parasitosis and reduce the use of anticoccidial drugs, improving the environmental impact and contributing to the transition of more sustainable and efficient production systems and promoting gender equality.Instituto de PatobiologíaFil: Rodriguez, Anabel Elisa. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología Veterinaria; ArgentinaFil: Rodriguez, Anabel Elisa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Tomazic, Mariela Luján. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología Veterinaria; ArgentinaFil: Tomazic, Mariela Luján. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Tomazic, Mariela Luján. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Cátedra de Biotecnología; Argentin

    Reproducción experimental de la infección de Eimeria spp. en pollos parrilleros a partir de un aislamiento de campo

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    La coccidiosis es la afección parasitaria de mayor trascendencia económica en explotaciones avícolas. La producen protozoarios del género Eimeria que afectan el intestino delgado y los ciegos de las aves. Su control se logra mediante la administración continua de coccidiostáticos y coccidicidas suministrados en el alimento o con vacunas. El SENASA en su última resolución (1119/2018) prohibió la comercialización de alimentos para animales con antibióticos -entre otros- debido a la resistencia antimicrobiana que pueden generar. La implementación de un modelo de infección experimental además de evaluar la patogenia de distintos aislamientos, servirá para la evaluación de alternativas de control existentes (compuestos naturales, aditivos, vacunas).Instituto de PatobiologíaFil: Tomazic, Mariela Luján. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Delgado, Fernando Oscar. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Balbiani, Facundo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Jauregui, Gloria R. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Chacana, Pablo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Schapiro, Javier Hernan. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; Argentina. Universidad del Salvador. Escuela de Veterinaria; ArgentinaFil: De Franceschi, M. Universidad Nacional de Luján (UNLU); ArgentinaFil: Palacios, L. Universidad Nacional de Luján (UNLU); ArgentinaFil: Rodriguez, Anabel Elisa. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; Argentin

    Detección y diferenciación molecular en simultáneo de especies de eimeria spp. que infectan aves comerciales

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    La producción de carne aviar enfrenta en la actualidad nuevos desafíos por lo cual los productores requieren de mejores técnicas diagnósticas para adoptar a tiempo medidas de control. La coccidiosis aviar es una parasitosis intestinal, altamente contagiosa que causa pérdidas económicas significativas en los sistemas de producción intensiva. La coccidiosis subclínica, de difícil diagnóstico, causa el 80% de las pérdidas económicas ya que influye directamente en la ganancia de peso de los animales de producción. La coccidiosis es causada por parásitos del género Eimeria y se transmiten vía fecal-oral a través del ooquiste esporulado. Hasta el momento se conocen siete especies que infectan a las aves.Instituto de PatobiologíaFil: Tomazic, Mariela Luján. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Delgado, Fernando Oscar. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Balbiani, Facundo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Jauregui, Gloria R. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Schapiro, Javier Hernan. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; Argentina. Universidad del Salvador. Escuela de Veterinaria; ArgentinaFil: Palacios, L. Universidad Nacional de Luján (UNLU); ArgentinaFil: De Franceschi, M. Universidad Nacional de Luján (UNLU); ArgentinaFil: Rodriguez, Anabel Elisa. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Patobiología; Argentin

    Delivery of recombinant vaccines against bovine herpesvirus type 1 and Babesia bovis to mice using liposomes derived from egg yolk lipids

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    Liposomes prepared from total egg yolk lipid extracts were used to deliver experimental DNA vaccines to mice consisting of pCI-neo plasmids encoding bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) gD or Babesia bovis MSA-2c. A significantly higher proportion of mice in the B. bovis MSA-2c group, but not those in the BoHV-1 gD group, developed detectable immunoglobulin G responses when vaccinated with liposome encapsulated DNA in comparison with mice vaccinated with naked DNA. In both groups, antibody titres were similar between mice vaccinated with liposome encapsulated DNA and naked DNA.Fil: Rodriguez, Anabel Elisa. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Zamorano, Patricia Ines. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Wilkowsky, Silvina Elizabeth. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Torrá, Florencia Lucia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Ferreri, Lucas. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Dominguez, Mariana Gabriela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Jacobsen, Monica Ofelia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

    Babesia bovis contains an abundant parasite-specific protein-free glycerophosphatidylinositol and the genes predicted for its assembly

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    Autonomous glycosylphosphatidylinositol (GPI) molecules (also protein-free GPIs or free GPIs) have been reported to be particularly abundant in some parasitic protozoa and mediate strong immunomodulatory effects on the host immune system. In the work at hand we have investigated the existence of free GPIs in B. bovis. Comparative thin layer chromatographic analysis of the protein-free glycolipid fraction of in vitro cultured B. bovis merozoites and erythrocyte membranes demonstrated the presence of an abundant parasite-specific band. Its chemical analysis revealed a GPI species containing a chain of two mannose residues, N-glucosamine and non-acylated inositol. The lipid moiety linked to inositol was diacylglycerol. The total fatty acid composition showed predominantly long-carbon chain molecules (12 % of C22:0 and 45% of C24:0). The potential of B. bovis to assemble the presented free GPI species was verified by the existence of seven genes in its genome that putatively encode the following GPI biosynthetic enzymes:  PI N-acetyl-GlcN-transferase (PIG-A and GPI-1), N-acetyl-GlcN-PI-de-N-acetylase (PIG-L), acyltransferase (PIG-W), dolichyl-phosphate mannosyl transferase (DPM-1), GPI mannosyltransferase I (PIG-M), and GPI mannosyltransferase II (PIG-V). GPI biosynthesis is vital for the intraerythrocytic parasite stage as mannosamine, an inhibitor of GPI biosynthesis, impaired in vitro growth of B. bovis merozoites. Absence of the vast majority of N-glycan metabolism encoding genes in the B. bovis genome underscores that the growth inhibitory effect of mannosamine is attributable to its interference with GPI biosynthesis and not with assembly of N-linked oligosaccharides, as has been described for higher eukaryotes. Elucidation of the structure and biosynthesis of GPI may allow to facilitate the development of future immune interventions against bovine babesiosis.Fil: Rodriguez, Anabel Elisa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Couto, Alicia Susana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Orgánica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Echaide, Ignacio Eduardo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Santa Fe. Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; ArgentinaFil: Schnittger, Leonhard. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Florin Christensen, Monica. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; Argentin
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