59 research outputs found
Neuronal expression in Drosophila of an evolutionarily conserved metallophosphodiesterase reveals pleiotropic roles in longevity and odorant response.
No full textEvolutionarily conserved genes often play critical roles in organismal physiology. Here, we describe multiple roles of a previously uncharacterized Class III metallophosphodiesterase in Drosophila, an ortholog of the MPPED1 and MPPED2 proteins expressed in the mammalian brain. dMpped, the product of CG16717, hydrolyzed phosphodiester substrates including cAMP and cGMP in a metal-dependent manner. dMpped is expressed during development and in the adult fly. RNA-seq analysis of dMppedKO flies revealed misregulation of innate immune pathways. dMppedKO flies showed a reduced lifespan, which could be restored in Dredd hypomorphs, indicating that excessive production of antimicrobial peptides contributed to reduced longevity. Elevated levels of cAMP and cGMP in the brain of dMppedKO flies was restored on neuronal expression of dMpped, with a concomitant reduction in levels of antimicrobial peptides and restoration of normal life span. We observed that dMpped is expressed in the antennal lobe in the fly brain. dMppedKO flies showed defective specific attractant perception and desiccation sensitivity, correlated with the overexpression of Obp28 and Obp59 in knock-out flies. Importantly, neuronal expression of mammalian MPPED2 restored lifespan in dMppedKO flies. This is the first description of the pleiotropic roles of an evolutionarily conserved metallophosphodiesterase that may moonlight in diverse signaling pathways in an organism
E-cadherin endocytosis promotes non-canonical EGFR:STAT signalling to induce cell death and inhibit heterochromatinisation
No full textSignalling molecules often contribute to several downstream pathways that produce distinct transcriptional outputs and cellular phenotypes. One of the major unanswered questions in cell biology is how multiple activities of signalling molecules are coordinated in space and time in vivo. Here, we focus on the Signal Transducer and Activator of Transcription (STAT) protein as a paradigm of signalling molecules involved in several independent signalling pathways. Using Drosophila wing discs as an in vivo model, we demonstrate an interplay of at least three STAT activities in this tissue. In addition to the ‘canonical’ pathways, in which STAT is phosphorylated and activated by Janus Kinases, STAT is involved in two ‘non-canonical’ pathways. In one pathway, STAT is activated by the Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR), promoting apoptosis. In the other, it binds the Heterochromatin Protein 1 (HP1) to enhance heterochromatin formation. We provide evidence that while the ‘canonical’ STAT signalling is dominant over ‘non-canonical’ pathways, EGFR:STAT and HP1:STAT pathways compete for the availability of unphosphorylated STAT. We also describe a central role for the cell-cell adhesion protein E-cadherin, with both EGFR and STAT colocalising with E-cadherin at cell-cell junctions and on intracellular vesicles. We show that elevated intracellular E-cadherin promotes EGFR:STAT pathway leading to apoptosis, which is prevented by inhibiting E-cad endocytosis. Taken together, we conclude that E-cadherin controls the balance between two non-canonical STAT activities. We hypothesise that this balance represents a tumour-suppressive mechanism, in which junctional disassembly in dysregulated epithelial-to-mesenchymal transitions would shift this balance towards the EGFR:STAT signalling to promote apoptosis.</jats:p
E-cadherin endocytosis promotes non-canonical EGFR:STAT signalling to induce cell death and inhibit heterochromatinisation
No full textSignalling molecules often contribute to several downstream pathways that produce distinct transcriptional outputs and cellular phenotypes. One of the major unanswered questions in cell biology is how multiple activities of signalling molecules are coordinated in space and time in vivo. Here, we focus on the Signal Transducer and Activator of Transcription (STAT) protein as a paradigm of signalling molecules involved in several independent signalling pathways. Using Drosophila wing discs as an in vivo model, we demonstrate an interplay of at least three STAT activities in this tissue. In addition to the ‘canonical’ pathways, in which STAT is phosphorylated and activated by Janus Kinases, STAT is involved in two ‘non-canonical’ pathways. In one pathway, STAT is activated by the Epidermal Growth Factor Receptor (EGFR), promoting apoptosis. In the other, it binds the Heterochromatin Protein 1 (HP1) to enhance heterochromatin formation. We provide evidence that while the ‘canonical’ STAT signalling is dominant over ‘non-canonical’ pathways, EGFR:STAT and HP1:STAT pathways compete for the availability of unphosphorylated STAT. We also describe a central role for the cell-cell adhesion protein E-cadherin, with both EGFR and STAT colocalising with E-cadherin at cell-cell junctions and on intracellular vesicles. We show that elevated intracellular E-cadherin promotes EGFR:STAT pathway leading to apoptosis, which is prevented by inhibiting E-cad endocytosis. Taken together, we conclude that E-cadherin controls the balance between two non-canonical STAT activities. We hypothesise that this balance represents a tumour-suppressive mechanism, in which junctional disassembly in dysregulated epithelial-to-mesenchymal transitions would shift this balance towards the EGFR:STAT signalling to promote apoptosis
Medidas de la viscosidad de vapor de H2O y D2O y cálculo de constantes moleculares
No full textCuando en un gas binario se produce un gradiente de alguna o detodas las variables que determinan su estado, es decir, P, T y N, seoriginan en el gas, fenómenos de transporte totales o parciales. Asípara un gradiente de N, se produce un transporte parcial de masa, caracterizado por un coeficiente de difusión. Para un gradiente de T seorigina un transporte de calor, que está relacionado con un coeficientede conductividad térmica. Para un gradiente de P, se produce un transporte de masa total,el cual tiene relación con el coeficiente de viscosidad de un gas. Seobserva que un gas que fluye a lo largo de un capilar experimenta unaresistencia al flujo, la cual aumenta del centro, hacia las paredes deltubo, llegando a ser cero la velocidad de la capa del gas en contactocon estas. La fuerza que se opone al movimiento es proporcional al gradiente de velocidad transversal, siendo el coeficiente de proporcionalidad,la viscosidad especifica del gas. Se puede explicar la existenciadel coeficiente de viscosidad específica, como debido al intercambiode impulso entre moléculas de una capa mas lenta y una mas rápidadel gas, durante el choque. Esta viscosidad se designa con . Para la primera aproximación sólo se consideran choques binarios. El coeficiente de viscosidad resulta así función de los parámetrosde choque, y de las fuerzas intermoleculares. Tanto los primeros comoestas últimas dependen del modelo molecular elegido; por lo tanto obtendremos expresiones distintas para la viscosidad según el tipo de moléculas consideradas. Inversamente, según los valores de la viscosidadobtenidos a distintas temperaturas, será posible calcular los parámetrosde choque y el potencial intermolecular, que definen un modelo. En este trabajo se ha medido el coeficiente de viscosidad por elmétodo de transpiración. Este consiste en medir el tiempo (t) que tardaun gas en escurrir a través de un capilar. Se verifica que el cociente η/t es igual a una constante, si el gas se puede considerar ideal. De no ser así, será necesario multiplicar este producto por un factorde corrección (γ) que depende del segundo coeficiente virial del gas. Comparando dos gases en iguales condiciones experimentales se verificaque:η/ηˈ=t/tˈ (1+ξ) ( ) El método de transpiración resulta así un método relativo ya, que conocidala viscosidad de un gas, y medidos los tiempos de escurrimiento,puede calcularse la viscosidad desconocida del "gas-problema". Se imponen sin embargo algunas precauciones en las condiciones detrabajo, para que la aplicación de la fórmula anterior sea válida. Estas son: a) el flujo debe ser isotermo b) el flujo debe ser laminar. Esto significa que la velocidad linealdel gas, debe ser tal que, el valor del número de Reynoldscalculado a partir de la misma, debe ser inferior a 2100. c) El flujo debe ser suficientemente pequeño como para no hacer necesarias correcciones por pérdida de energía cinética a la salida del capilar. d) La presión no debe ser tan baja, como para que el libre caminomedio de las moléculas sea del orden del diámetro del tubo ypredominen así los choques con las paredes, en lugar de los choques binarios. Habiéndose comprobado que ninguna de estas condiciones adversas ala aplicación de la fórmula (*) se cumple, de determinaron los tiemposde escurrimiento del vapor de H2O y de D2O a 74,4°C; 80,4°C y 89,9°Ctomándose como viscosidad standard la del aire a 23°C. Se hicieron dosseries de 60 medidas cada una, para cada sustancia y cada temperatura. Se tomó el valor mas probable del tiempo de escurrimiento, t, como elpromedio de cada serie de 60 determinaciones. Para todas las series de medidas se calculó el error cuadrático medio, el error medio del promedio y el error mas probable del promedio,y se estudió la distribución de los errores, en base a los momentos primero, segundo, tercero y cuarto de la función de distribución. Calculando el factor de corrección (1+ξ) se comprobó, que su omisiónintroduce un error, inferior al error experimental, por lo que sedespreció. Con la fórmula (*) se calculó la viscosidad de los vaporescitados a las temperaturas indicadas. Si la sustitución isotópica en las dos moléculas no cambia fundamentalmente el modelo molecular, debe cumplirse, aún aproximadamenteque:η(D2O)/η(H2O) = √[M(D2O)/M(H2O)] = 1,054 (**)siendo M(D2O) y M(H2O) pesos moleculares. Otros experimentadores han medido esta relación para las moléculas H2 y D2; y para el H2O y D2O a temperaturas levemente superiores alas muestras. (ver citas (1)(25)). Para el H2 y D2 la relación (**) se cumple al estado gaseoso y alestado líquido. Para el H2O y D2O ésta se cumple al estado gaseoso sólode una forma aproximada, obteniéndose valores diferentes de 1,054 para el estado líquido. Los valores de la relación (**) calculados en base a los datos experimentales obtenidos, confirman que esta se cumple aproximadamente para los vapores estudiados a todas las temperaturas experimentadas. Sin embargo, se observa que a los 80°C esta relación se cumple exactamente, obteniéndose en esta zona de temperaturas, un valor mínimo difícilde explicar en base a la teoría. La falta de datos en la regiónde temperaturas inferiores, impide hacer un estudio mas detallado de lacurva. Debido a las dificultades experimentales esto puede ser objetode otro trabajo. Se ha intentado el cálculo del diámetro de colisión (σ) y delpotencial de atracción (λ12) para el modelo de Lennard-Jones, sinéxito, con lo cual puede asegurarse, que el comportamiento de estas 2moléculas no se puede describir con este modelo. Una expresión que permite obtener valores correctos para el 2° coeficiente virial del vapor de H2O, fué calculada por Rowlinson (citasa partir del potencial de Stockmayer para moléculas polares. Por faltade datos numéricos en la literatura para moléculas de la polaridad del H2O, fué imposible calcular constantes moleculares, para este potencial. Por lo antedicho se supone, sin embargo que este potencial puede describir correctamente el comportamiento de las 2 moléculas estudiadas. Se han calculado los valores de los diámetros de colisión (σ)del potencial de atracción (λ12) y de la constante S, para elpotencial de Sutherland, obteniéndose valores que pueden considerarseiguales para ambas moléculas.Fil: Gerhardt de Wappner, Blanca. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina
Multiple roles of the F-box protein Slimb in Drosophila egg chamber development
No full textSubstrate-specific degradation of proteins by the ubiquitin-proteasome pathway is a precise mechanism that controls the abundance of key cell regulators. SCF complexes are a family of E3 ubiquitin ligases that target specific proteins for destruction at the 26S-proteasome. These complexes are composed of three constant polypeptides - Skp1, Cullin1/3 and Roc1/Rbx1 - and a fourth variable adapter, the F-box protein. Slimb (Slmb) is a Drosophila F-Box protein that fulfills several roles in development and cell physiology. We analyzed its participation in egg chamber development and found that slmb is required in both the follicle cells and the germline at different stages of oogenesis. We observed that in slmb somatic clones, morphogenesis of the germarium and encapsulation of the cyst were altered, giving rise to egg chambers with extra germline cells and two oocytes. Furthermore, in slmb somatic clones, we observed ectopic Fasciclin 3 expression, suggesting a delay in follicle cell differentiation, which correlated with the occurrence of ectopic polar cells, lack of interfollicular stalks and mislocalization of the oocyte. Later in oogenesis, Slmb was required in somatic cells to specify the position, size and morphology of dorsal appendages. Mild overactivation of the Dpp pathway caused similar phenotypes that could be antagonized by simultaneous overexpression of Slmb, suggesting that Slmb might normally downregulate the Dpp pathway in follicle cells. Indeed, ectopic expression of a dad-LacZ enhancer trap revealed that the Dpp pathway was upregulated in slmb somatic clones and, consistent with this, ectopic accumulation of the co-Smad protein, Medea, was recorded. By analyzing slmb germline clones, we found that loss of Slmb provoked a reduction in E2f2 and Dp levels, which correlated with misregulation of mitotic cycles during cyst formation, abnormal nurse cell endoreplication and impairment of dumping of the nurse cell content into the oocyte.Fil:Wappner, P. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina
Medidas de la viscosidad de vapor de H2O y D2O y cálculo de constantes moleculares
No full textCuando en un gas binario se produce un gradiente de alguna o detodas las variables que determinan su estado, es decir, P, T y N, seoriginan en el gas, fenómenos de transporte totales o parciales. Asípara un gradiente de N, se produce un transporte parcial de masa, caracterizado por un coeficiente de difusión. Para un gradiente de T seorigina un transporte de calor, que está relacionado con un coeficientede conductividad térmica. Para un gradiente de P, se produce un transporte de masa total,el cual tiene relación con el coeficiente de viscosidad de un gas. Seobserva que un gas que fluye a lo largo de un capilar experimenta unaresistencia al flujo, la cual aumenta del centro, hacia las paredes deltubo, llegando a ser cero la velocidad de la capa del gas en contactocon estas. La fuerza que se opone al movimiento es proporcional al gradiente de velocidad transversal, siendo el coeficiente de proporcionalidad,la viscosidad especifica del gas. Se puede explicar la existenciadel coeficiente de viscosidad específica, como debido al intercambiode impulso entre moléculas de una capa mas lenta y una mas rápidadel gas, durante el choque. Esta viscosidad se designa con . Para la primera aproximación sólo se consideran choques binarios. El coeficiente de viscosidad resulta así función de los parámetrosde choque, y de las fuerzas intermoleculares. Tanto los primeros comoestas últimas dependen del modelo molecular elegido; por lo tanto obtendremos expresiones distintas para la viscosidad según el tipo de moléculas consideradas. Inversamente, según los valores de la viscosidadobtenidos a distintas temperaturas, será posible calcular los parámetrosde choque y el potencial intermolecular, que definen un modelo. En este trabajo se ha medido el coeficiente de viscosidad por elmétodo de transpiración. Este consiste en medir el tiempo (t) que tardaun gas en escurrir a través de un capilar. Se verifica que el cociente η/t es igual a una constante, si el gas se puede considerar ideal. De no ser así, será necesario multiplicar este producto por un factorde corrección (γ) que depende del segundo coeficiente virial del gas. Comparando dos gases en iguales condiciones experimentales se verificaque:η/ηˈ=t/tˈ (1+ξ) ( ) El método de transpiración resulta así un método relativo ya, que conocidala viscosidad de un gas, y medidos los tiempos de escurrimiento,puede calcularse la viscosidad desconocida del "gas-problema". Se imponen sin embargo algunas precauciones en las condiciones detrabajo, para que la aplicación de la fórmula anterior sea válida. Estas son: a) el flujo debe ser isotermo b) el flujo debe ser laminar. Esto significa que la velocidad linealdel gas, debe ser tal que, el valor del número de Reynoldscalculado a partir de la misma, debe ser inferior a 2100. c) El flujo debe ser suficientemente pequeño como para no hacer necesarias correcciones por pérdida de energía cinética a la salida del capilar. d) La presión no debe ser tan baja, como para que el libre caminomedio de las moléculas sea del orden del diámetro del tubo ypredominen así los choques con las paredes, en lugar de los choques binarios. Habiéndose comprobado que ninguna de estas condiciones adversas ala aplicación de la fórmula (*) se cumple, de determinaron los tiemposde escurrimiento del vapor de H2O y de D2O a 74,4°C; 80,4°C y 89,9°Ctomándose como viscosidad standard la del aire a 23°C. Se hicieron dosseries de 60 medidas cada una, para cada sustancia y cada temperatura. Se tomó el valor mas probable del tiempo de escurrimiento, t, como elpromedio de cada serie de 60 determinaciones. Para todas las series de medidas se calculó el error cuadrático medio, el error medio del promedio y el error mas probable del promedio,y se estudió la distribución de los errores, en base a los momentos primero, segundo, tercero y cuarto de la función de distribución. Calculando el factor de corrección (1+ξ) se comprobó, que su omisiónintroduce un error, inferior al error experimental, por lo que sedespreció. Con la fórmula (*) se calculó la viscosidad de los vaporescitados a las temperaturas indicadas. Si la sustitución isotópica en las dos moléculas no cambia fundamentalmente el modelo molecular, debe cumplirse, aún aproximadamenteque:η(D2O)/η(H2O) = √[M(D2O)/M(H2O)] = 1,054 (**)siendo M(D2O) y M(H2O) pesos moleculares. Otros experimentadores han medido esta relación para las moléculas H2 y D2; y para el H2O y D2O a temperaturas levemente superiores alas muestras. (ver citas (1)(25)). Para el H2 y D2 la relación (**) se cumple al estado gaseoso y alestado líquido. Para el H2O y D2O ésta se cumple al estado gaseoso sólode una forma aproximada, obteniéndose valores diferentes de 1,054 para el estado líquido. Los valores de la relación (**) calculados en base a los datos experimentales obtenidos, confirman que esta se cumple aproximadamente para los vapores estudiados a todas las temperaturas experimentadas. Sin embargo, se observa que a los 80°C esta relación se cumple exactamente, obteniéndose en esta zona de temperaturas, un valor mínimo difícilde explicar en base a la teoría. La falta de datos en la regiónde temperaturas inferiores, impide hacer un estudio mas detallado de lacurva. Debido a las dificultades experimentales esto puede ser objetode otro trabajo. Se ha intentado el cálculo del diámetro de colisión (σ) y delpotencial de atracción (λ12) para el modelo de Lennard-Jones, sinéxito, con lo cual puede asegurarse, que el comportamiento de estas 2moléculas no se puede describir con este modelo. Una expresión que permite obtener valores correctos para el 2° coeficiente virial del vapor de H2O, fué calculada por Rowlinson (citasa partir del potencial de Stockmayer para moléculas polares. Por faltade datos numéricos en la literatura para moléculas de la polaridad del H2O, fué imposible calcular constantes moleculares, para este potencial. Por lo antedicho se supone, sin embargo que este potencial puede describir correctamente el comportamiento de las 2 moléculas estudiadas. Se han calculado los valores de los diámetros de colisión (σ)del potencial de atracción (λ12) y de la constante S, para elpotencial de Sutherland, obteniéndose valores que pueden considerarseiguales para ambas moléculas.Fil: Gerhardt de Wappner, Blanca. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina
Hypoxia activates IKK-NF-κB and the immune response in <em>Drosophila melanogaster</em>
No full textHypoxia, or low oxygen availability, is an important physiological and pathological stimulus for multicellular organisms. Molecularly, hypoxia activates a transcriptional programme directed at restoration of oxygen homoeostasis and cellular survival. In mammalian cells, hypoxia not only activates the HIF (hypoxia-inducible factor) family, but also additional transcription factors such as NF-?B (nuclear factor ?B). Here we show that hypoxia activates the IKK–NF-?B [I?B (inhibitor of nuclear factor ?B)–NF-?B] pathway and the immune response in Drosophila melanogaster. We show that NF-?B activation is required for organism survival in hypoxia. Finally, we identify a role for the tumour suppressor Cyld, as a negative regulator of NF-?B in response to hypoxia in Drosophila. The results indicate that hypoxia activation of the IKK–NF-?B pathway and the immune response is an important and evolutionary conserved response.</p
Regulation of the Drosophila hypoxia-inducible factor alpha Sima by CRM1-dependent nuclear export
No full textHypoxia-inducible factor alpha (HIF-alpha) proteins are regulated by oxygen levels through several different mechanisms that include protein stability, transcriptional coactivator recruitment, and subcellular localization. It was previously reported that these transcription factors are mainly nuclear in hypoxia and cytoplasmic in normoxia, but so far the molecular basis of this regulation is unclear. We show here that the Drosophila melanogaster HIF-alpha protein Sima shuttles continuously between the nucleus and the cytoplasm. We identified the relevant nuclear localization signal and two functional nuclear export signals (NESs). These NESs are in the Sima basic helix-loop-helix (bHLH) domain and promote CRM1-dependent nuclear export. Site-directed mutagenesis of either NES provoked Sima nuclear retention and increased transcriptional activity, suggesting that nuclear export contributes to Sima regulation. The identified NESs are conserved and probably functional in the bHLH domains of several bHLH-PAS proteins. We propose that rapid nuclear export of Sima regulates the duration of cellular responses to hypoxia.Fil: Romero, Nuria Magdalena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Irisarri, Maximiliano. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Roth, Peggy. Stockholms Universitet; SueciaFil: Cauerhff, Ana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Samakovlis, Christos. Stockholms Universitet; SueciaFil: Wappner, Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentin
design phenomenographies
No full textWhile intra-urban industrial ruins have been a focal point of architectural research and planning in Central and Western Europe over the past decades, Romania’s institutional culture has not yet aligned with contemporary discourse. “Until recently, heritage designation was mainly granted to sites pertaining to faith, the Romanian nation, and historic and prehistoric pasts. Industrial and mining heritage registered at the Ministry of Culture listed nothing production or labour-related” (Wicke, Christian et al., 2018, p. 126). This failure to launch and act calls for a novel method of approaching local industrial heritage.
The initial aim of the research was to counteract the widely occurring process of post-communist cultural amnesia and to reframe Romania’s particular relationship with its dilapidated industrial sites. The goal was to develop modes of action for the protection of intra-urban wastelands which could enable the local population’s engagement with their heritage so that these spaces, if maintained and occupied, could be extricated from predatory real estate development schemes. The post-communist industrial ruin was viewed through the lens of heterotopia (Foucault, 1970, p.10) in order to foster an understanding of the complex social, political and spatial entanglements it embodies and to facilitate a multi-layered methodological approach toward its potential for reanimation.
So far, the established methods that have been employed on Romanian derelict industrial sites have oscillated between invasive building practices or fetishisation masked as documentation through film or photography. From this, museumisation (Pușcă, 2010, p.10) was identified as a pivotal strategy, yet the practice is time stagnant and can be overridden by financial imperatives. The missing link lay in a design-oriented approach able to mediate between representation and architectural intervention, which would catalyse a “shift of the gaze” (Ranciere, 2005, p. 13-25) by showing modes of reflection as well as possibilities for further action.
Following these observations, the non-linear and process-oriented methods, as well as the emergent methodology proposed by this research, aim to facilitate the transfer of tacit knowledge by allowing the viewer, reader, as well as the immersed author to experience the “dirty concepts” (Frichot, 2019, p. 34) of representation, analysis, and design process, rather than compelling them to observe a final product which might obscure relevant insights discarded along the way and be impervious to change.
Self-authored design case studies, all located in the Transylvania region of Romania, constitute the base of the doctorate: one executed project could be observed as it functioned in real-time, while the other projects served as speculative design sites and were used as experimental playgrounds for various design tools, as well as allegoric canvases for the representation of the disruption of traditional narratives and approaches to industrial wastelands.
This research situates itself between auto-ethnographic study, atmospheric representation, and tactical design and operates in the voids that weave ruins and salvageable buildings into a non-binomial system of transitional objects (Pilia, 2019, p.71). Ultimately, the doctorate results illustrate a new methodology for engaging with neglected industrial heritage and present design strategies for approaching and transforming endangered cultural sites.Während die innerstädtischen Industrieruinen in den letzten Jahrzehnten in Mittel- und Westeuropa im Mittelpunkt der architektonischen Forschung und Planung standen, hat sich die institutionelle Kultur Rumäniens bislang nicht an den zeitgenössischen Diskurs angepasst. Bis vor Kurzem wurden vor allem Stätten, die mit dem Glauben, der rumänischen Nation und der historischen und prähistorischen Vergangenheit zu tun hatten, zum Kulturerbe erklärt. Das beim Kulturministerium registrierte Industrie- und Bergbauerbe hatte nichts mit Produktion oder Arbeit zu tun (Wicke, Christian et al., 2018, S. 126).
Die ursprüngliche Absicht der Forschung war es, dem weitverbreiteten Prozess der postkommunistischen kulturellen Amnesie entgegenzuwirken und die besondere Beziehung Rumäniens zu seinen verfallenen Industriestandorten neu zu gestalten. Ziel war es, Handlungsweisen für den Schutz innerstädtischer Brachen zu entwickeln, die es der lokalen Bevölkerung ermöglichen, sich mit ihrem Erbe auseinanderzusetzen, sodass diese Räume, wenn sie erhalten und genutzt werden, von räuberischen Immobilienentwicklungsplänen geschützt werden können. Die postkommunistische Industrieruine wurde durch die Linse der Heterotopie (Foucault, 1970, S.10) betrachtet, um das Verständnis für die komplexen sozialen, politischen und räumlichen Verflechtungen zu fördern, die sie verkörpert, und um einen vielschichtigen methodologischen Ansatz für ihr Potenzial zur Wiederbelebung zu ermöglichen.
Bislang schwankten die etablierten Methoden, die auf rumänischen Industriebrachen angewandt wurden, zwischen invasiven Baupraktiken und einer Fetischisierung, die als Dokumentation durch Film oder Fotografie getarnt wurde. Daraus wurde die Musealisierung (Pușcă, 2010, S.10) als eine zentrale Strategie abgeleitet, die jedoch zeitlich stagniert und durch finanzielle Zwänge außer Kraft gesetzt werden kann.
Das fehlende Bindeglied war ein entwurfsorientierter Ansatz, der zwischen Repräsentation und architektonischer Intervention vermitteln konnte, der eine „Verschiebung des Blicks“ (Ranciere, 2005, S. 13-25) katalysieren würde, indem er Modi der Reflexion sowie Möglichkeiten für weiteres Handeln aufzeigt. In Anlehnung an diese Beobachtungen zielen die nicht-linearen und prozessorientierten Methoden sowie die von dieser Forschung vorgeschlagene emergente Methodik darauf ab, den Transfer von stillschweigendem Wissen zu erleichtern, indem sie es dem Betrachter, dem Leser und der Autorin ermöglichen, die „schmutzigen Konzepte“ (Frichot, 2019, S. 34) der Darstellung, der Analyse und des Entwurfsprozesses zu erleben, anstatt sie zu zwingen, ein Endprodukt zu beobachten, welches relevante, auf dem Weg verworfene Einsichten verdecken könnte und für Veränderungen unempfänglich ist.
Selbst erstellte Design-Fallstudien, die alle in der rumänischen Region Transsilvanien angesiedelt sind, bilden die Grundlage der Arbeit: Ein ausgeführtes Projekt konnte in Echtzeit beobachtet werden, während andere Entwürfe als spekulative Studien dienten und als experimentelle Spielwiesen für verschiedene Designwerkzeuge sowie als allegorische Leinwände für die Darstellung des Bruchs traditioneller Narrative und Ansätze für Industriebrachen genutzt wurden.
Diese Forschung bewegt sich zwischen auto-ethnografischer Studie, atmosphärischer Darstellung und taktischem Design und operiert in den Leerräumen, die Ruinen und wiederverwertbare Gebäude zu einem nicht-binomischen System von Übergangsobjekten verweben (Pilia, 2019, S.71 ). Letztlich veranschaulichen die Ergebnisse der Forschung eine neue Methodik für die Auseinandersetzung mit vernachlässigtem Industrieerbe und präsentieren Entwurfsstrategien für die Annäherung an und die Transformation von gefährdeten Kulturstätten
Regulation of Drosophila hypoxia-inducible factor (HIF) activity in SL2 cells: Identification of a hypoxia-induced variant isoform of the HIFα homolog gene similar
No full textAlthough hypoxia-inducible factor-α (HIFα) subunit-specific hydroxylation and proteolytic breakdown explain the binary switch between the presence (hypoxia) and absence (normoxia) of HIFs, little is known of the mechanisms that fine-tune HIF activity under constant, rather than changing, oxygen tensions. Here, we report that the Drosophila HIFα homolog, the basic helix-loop-helix/PAS protein Sima (Similar), in hypoxic cultures of SL2 cells is expressed in full-length (fl) and splice variant (sv) isoforms. The following evidence supports the role of flSima as functional HIFα and the role of SL2 HIF as a transcriptional activator or suppressor. The pO2 dependence of Sima abundance matched that of HIF activity. HIF-dependent changes in candidate target gene expression were detected through variously effective stimuli: hypoxia (strong) > iron chelation, e.g. desferrioxamine (moderate) ≪ transition metals, e.g. cobalt ≃ normoxia (ineffective). Sima overexpression augmented hypoxic induction or suppression of different targets. In addition to the full-length exon 1-12 transcript yielding the 1510-amino acid HIFα homolog, the sima gene also expressed, specifically under hypoxia, an exon 1-7/12 splice variant, which translated into a 426-amino acid Sima truncation termed svSima. svSima contains basic helix-loop-helix and PAS sequences identical to those of flSima, but, because of deletion of exons 8-11, lacks the oxygen-dependent degradation domain and nuclear localization signals. Overexpressed svSima failed to transactivate reporter genes. However, it attenuated HIF (Sima-Tango)-stimulated reporter expression in a dose-dependent manner. Thus, svSima has the potential to regulate Drosophila HIF function under steady and hypoxic pO2 by creating a cytosolic sink for the Sima partner protein Tango.Fil:Wappner, P. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina
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