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    Study of genetic variability of Haemonchus contortus in alpine Italian ruminant populations

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    Haemonchus contortus, a generalist abomasal nematode, has been shown to affect the livestock productivity in domestic ruminants and the health status of wild hosts. Molecular techniques are useful to investigate genetic differentiation in parasite populations, host specificity and evolutionary history of parasite species. In total 77 adult males of H. contortus collected from isolates of 3 different Italian alpine areas were used for partial mitochondrial NADH dehydrogenase subunit 4 gene (ND4) analysis. Sequences were compared with 49 GenBank sequences, obtained from sheep in United States. On the basis of the results on ND4, a subset of isolates was examined also for Internal Transcribed Spacers 1 and 2 (ITS1 and ITS2) nuclear genes. Analyses on ND4 gene showed 2 clusters, in which isolates appear from each considered host species (chamois, roe deer, goat, sheep) and geographical origin. American sequences are aligned in only one group. A high intra-specific variability was pointed out even in each cluster. However molecular data on ITS1 and ITS2 have not confirmed the mitochondrial results. For this reason, to assess if it could be referred to an ancestral polymorphism or due to host-adaptation mechanisms, a further work using microsatellites is in progress. Moreover, the low host-specificity and the high gene flow among the H. contortus populations, led us to further check the a priori assumption that domestic sheep is the reservoir of this parasite. It arises the importance of managing parasite infections of domestic flocks to prevent spill-over to wildlife

    Helminth community of an alpine rock partridge (Alectoris græca) population in demographic crash

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    Alpine rock partridge (Alectoris græca) populations are drastically decreasing mainly due to habitat degradation and climate change. From 2003 to 2011, we investigate the helminth community of a rock partridge population from Lepontine Alps (Western Alps), showing a demographic crash in the last few years (2009-2010-2011), to analyse the helminth distribution within population in relation to different factors (sampling year, age, gender) and to disclose the parasites’ role in this population trend. From 213 intestinal contents of hunted rock partridges we recorded Ascaridia compar, Heterakis gallinarum and Aoncotheca caudinflata: the most abundant species is H. gallinarum with a significant greater abundance in adults. A significant increase of abundance of all the three helminths was recorded in 2010. Juveniles and females were infected by the three helminths while in males we recorded H. gallinarum and A. caudinflata with lower abundances and prevalence. Data show a temporal association between the demographical population crash and the abundance peak of all the three helminths suggesting a possible health impact of parasites. Even if data did not show any effect of parasites on body weights, the known effects of these parasites on fecundity indicate the likely effect of parasites as a predisposing factor for the observed demographic crash and points out the importance of the health monitoring in wildlife

    Helminths communities of rock partridge (Alectoris Graeca) in Western Alps : effect of age and sex

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    Alpine rock partridge (Alectoris græca) populations are drastically decreasing since 50ies. That is mainly ascribed to land-use change and progressive habitat degradation. Here we investigate their helminths communities, as population health index in relation to age classes and gender. This study considers 208 rock partridge from Lepontine Alps (VB) gathered during seven hunting seasons (2003-09), with details collected on culling site, age classes, sex and weight. The intestinal contents of the total sample (90 adults, 39 males and 51 females, and 118 young), have been examined for helminths. In females and young were identified respectively: Ascaridia compar (prevalence (p)=12%, mean intensity (i)=2,5 and p=15%, i=2), Heterakis gallinarum (p=76%, i=6,5 and p=63%, i=7) and Aoncotheca caudinflata (p=24%, i =1,7 and p=18%, i=2,3). In males two species were recorded with lower intensities and prevalence H. gallinarum (p=58%, i=11,7) and A. caudinflata (p=7%, i=1). These data suggest a possible health impact on young, even if any effect has been observed on weight. The adult females higher infestation could be related to an immune-mediated effect consequent of hatching and post hatching energy expenditure. Moreover females raise chicks taking care of their feeding involving earthworms which are responsible for the transmission of the three helminths species, and the parasitological difference observed could be ascribed to a different feeding behavior. This is supported by the total absence of A. compar in males, despite the habitat shared by the three host groups

    Elmintofauna dei galliformi alpini : indici epidemiologici e status di popolazione

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    INTRODUZIONE: Studi di ordine ecologico ed evoluzionistico hanno dimostrato come i parassiti, oltre ad avere un impatto sulla dinamica di popolazione, possano fornire importanti indicazioni a livello di salute ambientale. In particolare è stato evidenziato come un ecosistema con elevata richness parassitaria sia indice di salubrità dello stesso (Hudson et al., 2006). In questo senso è stata condotta un’indagine sui parassiti gastro-intestinali dei galliformi alpini, al fine di ricavare indicazioni di ordine gestionale e conservazionistico. MATERIALI E METODI: Si è investigata l’elmintofauna intestinale di 281 fagiani di monte (Tetrao tetrix), 142 coturnici (Alectoris graeca) e 42 pernici bianche (Lagopus mutus) prelevati in soggetti abbattuti durante le stagioni venatorie 2003/2007. I dati sono stati quindi rapportati con l’attuale distribuzione sul territorio di ciascuna specie ospite (Alpi Lepontine -VB-). RISULTATI: Il fagiano di monte è risultato infestato da Ascaridia compar (p=64,8%; i=12,5) e da Capillaria caudinflata (p=52,3%; i=14,3). Un unico esemplare di Heterakis gallinarum è stato rinvenuto in un fagiano di monte nella stagione 2007. Nella coturnice, sono stati riscontrate tutte e tre le specie elmintiche sopra citate; H. gallinarum (p=64,1%; i=8,5) assume maggior importanza rispetto alle altre, sia per diffusione che per intensità (A. compar p=11,3%; i=3,4; C. caudinflata p=12,7%; i=2,8). Nelle pernici bianche, sul totale delle esaminate, sono risultate infestate due femmine adulte, ciascuna da un’esemplare di C. caudinflata (p=4,8%; i=1,0). A titolo di raffronto si sono esaminate inoltre 19 pernici bianche prelevate durante la stagione 2007 in Canton Grigioni (CH), nelle quali sono stati rinvenuti sia A. compar (p=10,5; i=4,0) che C. caudinflata (p=31,6%; i=3,3). Relativamente ad A. compar è stata eseguita una caratterizzazione molecolare1, che ha consentito un’identificazione puntuale rispetto anche all’assenza di chiavi di lettura esaustive. Tale approccio va considerato anche in rapporto alla possibilità di sviluppare indagini di ordine evoluzionistico circa le popolazioni di galliformi alpini. CONCLUSIONI: La ricchezza in specie elmintiche nelle tre popolazioni ospite indagate risulta estremamente bassa, e, nonostante in linea con quanto registrato in altre realtà alpine, va assunta quale espressione di un’instabilità delle popolazioni stesse. L’indice di richness appare correlato alla presenza e distribuzione delle stesse sul territorio. Infatti mentre fagiano di monte e coturnice sono segnalati con consistenze stabili sul territorio, la pernice bianca è presente in piccoli nuclei isolati. In effetti risulta emblematico il rinvenimento sporadico di soli 2 esemplari di C. caudinflata in quest’ultima specie, a maggior ragione se si considera che la presenza di ascaridi e capillarie in tale ospite è segnalata con indici epidemiologici considerevoli in altri settori dell’arco alpino. Tale assenza non appare riferibile a particolari condizioni climatico-ambientali sfavorevoli al ciclo biologico degli elminti, ma piuttosto a problematiche legate a densità e frammentazione sul territorio della popolazione ospite. 1 Estrazione del DNA e amplificazione con i primer generali Ascaridoidea della regione ITS1 e con i primer universali per nematodi per l’amplificazione parziale della regione CO1

    Analysis of helminth communities of black grouse and ptarmigan in the Western Alps : conservation and management implications

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    In the Alps grouse populations have been declining in a more or less pronounced way, for several decades, and are endangered or extinct in many areas. Nevertheless, sanitary data are still poor and those concerning macroparasites usually derive from limited data collection and do not deepen ecological aspects. The present research has been carried out in Lepontine Alps (VB) in order to evaluate level of spatial interaction between black grouse (Tetrao tetrix) and ptarmigan (Lagopus mutus) populations which are in sympatric conditions in some periods of the year considering parasites as indicators for the environmental suitability and host’s health in order to compare their parasitological communities.Altogether the analyzed sample consists of 158 intestinal contents of black grouse and 42 of ptarmigan harvested between 2003 and 2007. Moreover 19 ptarmigan sampled in Canton Grigioni (CH) during the 2007 hunting season have been examined.Black grouse was infested by Ascaridia compar (p = 18,5% / 50%) and Aoncotheca caudinflata (p = 0,0% / 45%). As regards the 42 ptarmigan, only two adult females were infested by a single parasite identified as A. caudinflata. The Swiss sample shows A. compar (p = 11,7%, i = 4,0, a = 0,4) and C. caudinflata (p = 32,0%, i = 3,3 a = 1,1) as invasive species. Data collected on black grouse show a steady situation. Yet must be underlined the necessity of an in-depth study of the parasites’ role in the population’s dynamics and the fact that only two species of helminths have been found. The extremely depauperate parasite community of ptarmigan is an unusual picture which could be expression of an alteration in the host - parasite - environment relationship. This hypothesis is supported by the results of Swiss sample, collected in an area with a good ptarmigan population dynamics, which show a richer parasite community. It has to be considered that ptarmigan may suffer more than black grouse anthropic impact, destruction of the habitat and climatic changes. In this way it is desirable to increase the monitoring (demography, morpho-biometric measures, parasitological situation) in order to understand its possible predictive evaluation. It is necessary to struggle in defence of tetraonids populations not only through a strict regulation/prohibition of hunting but also through the protection/restoration of the habitats, preservation of the territory, regulation of the anthropic impact especially in critical periods for the biology of these populations

    Monitoraggio di Toxoplasma gondii nei cervi (Cervus elaphus) della Valfurva (Parco Nazionale dello Stelvio) : quadro epidemiologico e potenziale rischio zoonosico

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    L’effettiva circolazione di Toxoplasma gondii nelle popolazioni di ungulati selvatici e la definizione del relativo quadro epidemiologico sono aspetti tutt’ora da approfondire. In effetti tali problematiche, a prescindere da una valenza faunistica, vanno valutate in rapporto sia alle possibili interazioni tra specie selvatiche e domestiche, che al potenziale rischio zoonosico. Peraltro questo problema va considerato in rapporto alle nuove direttive UE in tema di commercializzazione delle carni di selvaggina (Reg. CE 853/2004, recepimento da parte della Regione Lombardia delle linee guida applicative Reg. 8537047ce) e al consistente aumento demografico degli ungulati selvatici, con conseguente disponibilità di ingenti quantitativi di carne. Sulla base di queste considerazioni, durante gli abbattimenti contenitivi del cervo (Cervus elaphus) in Val Furva nel Parco Nazionale dello Stelvio, è stato avviato un monitoraggio su T.gondii nel gennaio-febbraio 2012. L’indagine è stata condotta a livello sieroepidemiologico, utilizzando un kit commerciale ELISA multi specie per la ricerca degli anticorpi anti-T. gondii, seguita da un’analisi molecolare sui soggetti risultati positivi, tramite pcr, per mettere in evidenza il DNA del patogeno da tessuto cardiaco e nervoso. Dall’indagine di 24 sieri implementati da 62 estratti di carne (spremuto cardiaco), per un totale di 86 soggetti, è emersa una prevalenza del 25% (22/86). Il valore è stato quindi analizzato in relazione a sesso ed età: 27% (14/52) nelle femmine, 23% (8/34) nei maschi; 9% (3/34) nei piccoli (animali di sei mesi), 25% (2/8) nei soggetti di un anno e 38% (17/44) negli adulti. La pcr sui tessuti dei soggetti positivi è tutt’ora in corso ma dall’analisi dei primi 10 individui non è risultata nessuna positività. I dati emersi provano la circolazione del patogeno nell’area di studio: in particolare l’aumento della prevalenza con l’età, dato confermato anche a livello statistico (GLM p<0.05), depone per una trasmissione orizzontale di T.gondii, legata all’assunzione di oocisti. Peraltro le positività riscontrate nei piccoli non escludono anche un’eventuale trasmissione verticale. Rispetto al rischio d’infezione legato all’età va considerato che l’elevata densità di animali nell’area di studio e la sua ridotta superficie comportano, specialmente nella stagione invernale, l’utilizzo di aree antropizzate con presenza del gatto ospite definitivo di T.gondii ed eliminatore delle oocisti nell’ambiente. Relativamente al potenziale rischio zoonosico legato al consumo di carne dei soggetti abbattuti, documentato in altre realtà territoriali ed alle negatività emerse finora dall’analisi molecolare, a prescindere dall’esito delle indagini sui campioni rimanenti sui tessuti degli individui sieropositivi, vanno considerate le difficoltà di isolamento del DNA patogeno per la sporadica localizzazione delle cisti di T.gondii nei tessuti infetti e quindi la necessità di disporre di un consistente campione. In questo senso, alla luce della primaria valenza sanitaria del protozoo, emerge l’esigenza di approfondire i dati finora scaturiti, considerando tra l’altro che la prevalenza riscontrata nell’area di studio è superiore a quella riportata nel cervo in altri contesti
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