105 research outputs found
Desempenho físico de equinos soropositivos para anemia infecciosa equina
No full textEquine Infectious Anemia (EIA) is an incurable disease in equids, being endemic in the Pantanal mato-grossense region, where the disease control through euthanasia of seropositive animals is not mandatory. EIA-carrier equines are routinely used at work for beef cattle farming, which is the regions main economic activity. The objective of this study was to assess the athletic performance of EIA-seropositive animals and obtain data to incentive disease control in the region. We used 16 male Pantaneiro equines between 10 and 16 years old, being eight seronegative (G1) and eight seropositive (G2) for EIA. Both groups were kept separately, at a distance of over 200 meters, in nearby farms in the Nhecolândia region of Pantanal. They were kept free in natural pasture with mineral salt and water ad libitum. Tests were performed before (T1) and after (T2) 42 days of physical training. Tests included progressive effort on a plane 1500-meter grass track, with the same horseman guiding each horse in jog, trot, canter and gallop gaits. During tests, all animals wore heart rate monitors and at the end of each step we registered their heart rate (HR) and blood lactate concentration ([La]). When an animal reached a [La] equal to or higher than 4 mmol/L and HR over 150 bpm, the test was interrupted. The distance covered (DC) was measured by GPS, being the sum of all distances from the test start until it was interrupted. Hematocrit (Ht), total protein (PT), triglicerid (Tg) and uric acid (UA) was evaluated at rest and 0, 10, 30 and 60 min after the tests, along with HR, RR and temperature rectal. To evaluate creatine kinase (CK), aspartate aminotransferase (AST) and lactate dehydrogenase (LDH), samples were collected at rest and 6, 12 and 24 hours after the test. The training protocol was: work in alternate days for 1 h between walk and canter being an individual gallop speed, corresponding to the VLa3 of the 1st test. The individual canter speed was determined as the speed at which the animal reached 3 mmol/L of [La] in the first test. In both test, the DC was longer (p<0.05) in G1 animals. In T1, there was no difference between G1 and G2 regarding Ht, HR and [La], however, in T2, animals from G2 had lower (p<0.05) Ht, FC e [La]. Higher values of Tg were observed in T1 in relation to T2 and there was a reduction in UA concentration in both experimental groups. There was no indication of muscle injury. The results indicate the EIA affects the functional performance of Pantanal equines, whose main function in the region is the work in the cattle handling, and for that reason, its control in the Pantanal of Mato Grosso is importantA Anemia Infecciosa Equina (AIE) é uma enfermidade incurável que acomete os equídeos, sendo endêmica no Pantanal Mato-Grossense, onde o controle da doença, através da eutanásia dos animais soropositivos não é obrigatória. Os equinos portadores de AIE são rotineiramente utilizados nos trabalhos com a bovinocultura de corte, principal atividade da região. O estudo avaliou o desempenho físico dos animais soropositivos para AIE visando obter dados para incentivar o controle da doença no pantanal mato-grossense. Foram utilizados 16 equinos machos da raça Pantaneira, entre 10 e 16 anos, sendo 8 soronegativos (G1) e 8 soropositivos (G2). Os grupos foram mantidos separados, a uma distância superior a 200 m, em fazendas próximas, na região de Nhecolândia no Pantanal e permaneceram soltos em pastagem nativa, com sal mineral e água à vontade. Antes (T1) e após (T2) 42 dias de treinamento foram realizados testes de esforço progressivo, em pista gramada, com topografia plana e com 1.500 m de comprimento, onde, um mesmo cavaleiro percorreu com cada animal no trote, trote alongado, galope reunido e galope alongado. Durante os testes os animais usaram frequencímetro cardíaco e ao final de cada etapa foram monitoradas a frequência cardíaca (FC), frequência respiratória (FR) e concentração plasmática de lactato ([La]). Quando o animal atingia [La] igual ou superior a 4 mmol/L e FC acima de 150 bpm o teste era interrompido. A distância percorrida (DP) foi o período do início do teste até o momento em que ele foi interrompido e foi mensurada por GPS. Hematócrito (Ht), proteína total (PT), triglicerídeos (Tg) e ácido úrico (UA) foram avaliados em repouso e 0, 10, 30 e 60 min após os testes, junto com a FC, FR e temperatura retal. Para avaliar as enzimas creatina quinase (CK), aspartato aminotransferase (AST) e lactato desidrogenase (LDH), amostras foram coletadas em repouso e 6, 12 e 24h após o teste. O protocolo de treinamento foi: trabalho em dias alternados durante 1h no passo e galope sendo a velocidade do galope individual, correspondendo à VLa3 do 1º teste. Nos dois testes a DP foi maior (p<0,05) nos animais de G1. Em T1 não houve diferença entre os grupos experimentais no Ht, FC e na [La], mas, no T2, os animais de G2 apresentaram menor (p<0,05) Ht, FC e [La]. Maiores valores de Tg foram observados no T1 em relação ao T2 e houve redução da concentração de UA em ambos os grupos experimentais. Não houve indicativo de injúria muscular. Os resultados mostram que a AIE afeta o desempenho funcional dos equinos pantaneiros, cuja principal função na região é o trabalho na lida com o gado, e por isso, é importante seu controle no pantanal mato-grossens
Comparação entre testes IDGA (p26) e ELISA indireto (rgp 90) no diagnóstico da anemia infecciosa eqüina
No full textThe ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay) using recombinant rgp90 (Reis, 1997) and classical test AGID (Agar Gel Immunodiffusion) p26 were compared in order to validate the ELISA for use in the diagnosis of EIA. We collected 1007 serum samples from horses in different regions of Minas Gerais in a total of 32 municipalities and 156 properties. The results of the ELISA based on areas of serological interpretation. Sera which had optical density (OD) smaller than 0.220 were considered negative and those who showed OD equal to or greater than 0.220 indeterminate (to .263) and positive ( 0.264). The AGID test detected 95 positive sera (9.4%) while the ELISA 128 (12.7%). Sensitivity comparison of the two tests was 97.81% and specificity of 96.16%. Ten animals in the negative and indeterminate AGID / ELISA positive were traced to a second collection (three of them with suggestive signs of EIA) and tested by ELISA, AGID, and DOT BLOT CELISA. An animal became positive in AGID (CELISA, DOT p26 and gp90 positive) and in the first examination was detected by ELISA. The ELISA showed 90 rgp be sensitive, specific and rapid and can be used as screening tests and surveys enable state officialsO teste ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay), utilizando o antígeno recombinante rgp90 (Reis, 1997), e o teste clássico IDGA (Imunodifusão em Gel de Agar) p26 foram comparados com o objetivo de validar o ELISA para uso no diagnostico da AIE. Foram coletadas 1007 amostras de soros de eqüídeos de diversas regiões de Minas Gerais perfazendo um total de 32 municípios e 156 propriedades. Os resultados do teste ELISA basearam-se em áreas de interpretação sorológica. Os soros que apresentaram densidade ótica (DO) menores que 0,220 foram considerados negativos e os que apresentaram DO iguais ou maiores que 0,220 indeterminados (até 0,263) e positivos (0,264). O IDGA detectou 95 soros positivos (9,4%) enquanto que o ELISA 128 (12,7%). A sensibilidade comparada dos dois testes foi de 97,81% e especificidade de 96,16%. Dez animais negativos no IDGA e indeterminados/positivos no ELISA foram localizados para uma segunda coleta (três deles com sinais compatíveis de AIE) e testados pelo ELISA, IDGA, CELISA e DOT BLOT. Um animal tornou-se positivo no IDGA (CELISA, DOT p26 e gp90 positivos) e já no primeiro exame era detectado pelo ELISA. O ELISA rgp 90 mostrou ser sensível, específico e rápido podendo ser utilizado como teste de triagem e viabilizar os levantamentos oficiais do estad
Avaliação da reação em cadeia da Polimerase (PCR) em PBMC e lavado broncoalveolar para o diagnóstico da anemia infecciosa eqüina.
No full textEquine Infectious Anemia Virus (EIAV) is a retrovirus that causes Equine Infectious Anemia, a disease that strikes animals from family Eqüidae. In the present study, PCR (polymerase chain reaction) techniques were evaluated as a confirmation test for ELISA serologic tests and IDGA. Samples of bronchoalveolar lavage fluid (BALF), peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) and serum from IDGA-positive equids that were slaughtered in cold storage plants were analyzed. DNA samples from BALF and PBMCs were submitted to amplification by -Actin PCR, gag nPCR and gp90 PCR. -Actin PCR was found to be an efficient quality control resource for genomic DNA submitted to the other techniques. gp90 PCR was not able to amplify the Brazilian samples of DNA from BALF and PBMCs from AIE-positive animals. gag nPCR was efficient in the amplification of viral sequences in PBMCs samples and can be utilized as a confirmation diagnostic test for serologic techniques.O vírus da Anemia Infecciosa Eqüina (EIAV) é um Retrovírus causador da Anemia Infecciosa Eqüina, uma enfermidade que acomete somente animais da família Eqüidae. No presente estudo foram avaliadas técnicas de PCR (reação em cadeia da polimerase) como diagnóstico confirmatório para os testes sorológicos ELISA e IDGA. Foram analisadas amostras de lavado broncoalveolar (LBA), células mononucleares de sangue periférico (PBMCs) e soro, provenientes de eqüídeos com resultados positivos na IDGA encaminhados ao abate em frigoríficos de MG. Amostras de DNA provenientes do LBA e PBMCs foram submetidas à amplificação pela PCR -Actina, nPCR gag e PCR gp90. A PCR -Actina mostrou ser um controle eficiente da qualidade do DNA genômico submetido às demais técnicas. A PCR gp90 não foi capaz de amplificar amostras brasileiras do DNA proveniente de PBMCs e LBA de animais positivos para AIE. A nPCR gag mostrou ser eficiente em amplificar seqüências virais em amostras de PBMCs, podendo ser utilizada como diagnóstico confirmatório ou complementar para técnicas sorológicas
Diagnóstico molecular da Leucemia viral felina por meio da utilização de Swab Oral, conjuntival e retal
No full textFeline leukemia virus (FeLV) infection can lead to fatal neoplasms, degenerative diseases of the
hematopoietic system and immunosuppression. FeLV transmission is favored by close contact among cats
that share the same space and facilities. To perform diagnostic tests, blood and its derivatives are the main
specimens used currently. Blood collection, usually by venipuncture, requires physical or chemical
restraint. Making diagnoses of feline retroviruses more practical and easier is crucial to reducing negative
impacts on the cat’s health and will allow for an increased number of animals to be tested. The aim of this
study was to evaluate the use of oral, conjunctival and rectal swab samples for the molecular diagnosis of
FeLV infection. In addition to the whole blood used as reference sample, two oral swab, two conjunctival
swab and one rectal swab were collected from each animal. All serum samples were submitted to
immunochromatographic and PCR tests for amplification of the proviral DNA gag gene fragment. The
same PCR was also performed on all swab samples. A total of 145 random animals were selected for the
experiment. The occurrence of FeLV in the studied population was 49.66% by molecular diagnosis in
peripheral blood mononuclear cell samples and 22.76% through the identification of the antigenemia
(p27). The accuracy for each methodology evaluated was 91.72% for the PCR of samples obtained by oral
swabbing; 91.23% for those from conjunctival swab and 85.50% for those obtained by rectal swabbing.
The sensitivity and specificity of each PCR evaluated in relation to the reference PCR were, respectively,
86.11% and 97.26% for the oral swab PCR; 90% and 92.59% for conjunctival swab PCR; and 74.24%
and 95.77% for rectal swab PCR. Kappa values for oral swab PCR, conjunctival swab PCR and rectal
swab PCR were 0.89, 0.89 and 0.82, respectively. Sampling using oral, conjunctival and rectal mucosal
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swabs for the molecular diagnosis of FeLV infection is an excellent alternative to the venipuncture,
especially in places where the presence of trained and qualified professionals is limited or not available,
or even for shelters with a large feline population. In addition, the methodology is faster, less laborious,
less expensive and well accepted by the animal. Another relevant finding of this study was the detection of
FeLV proviral DNA in oral and conjunctival mucosal cells, allowing the diagnosis of animals in the
regressive phase of infection.A infecção pelo Feline leukemia virus (FeLV), agente causador da Leucemia Viral Felina, pode levar a
neoplasias fatais, doenças degenerativas do sistema hematopoiético e imunossupressão. O contato próximo
favorece a transmissão do FeLV entre gatos que compartilham o mesmo espaço e instalações. Para a
execução de testes diagnósticos, atualmente, o sangue e seus derivados são as principais amostras
biológicas utilizadas. A coleta de sangue é geralmente por punção venosa, exigindo contenção física ou
química do animal. Tornar o diagnóstico das retroviroses felinas mais prático e fácil é crucial para reduzir
os impactos negativos na saúde animal e aumentar o número de animais testados. O objetivo deste estudo
foi avaliar o uso de amostras de swab de mucosa oral, conjuntival e retal, no diagnóstico molecular da
infecção pelo FeLV. Além do sangue total utilizado como amostra de referência, foram coletados de cada
animal dois swab orais, dois conjuntivais e um retal. Todas as amostras séricas foram submetidas a testes
imunoenzimáticos e à reação em cadeia da polimerase (PCR) para a amplificação do fragmento do gene
gag do DNA proviral. A mesma PCR também foi realizada em todas as amostras obtidas por swab. Foram
selecionados para o experimento 145 animais de forma aleatória. A ocorrência para o FeLV na população
estudada foi de 49,66% por diagnóstico molecular em capa leucocitária, e 22,76% por identificação da
antigenemia (p27 circulante). A acurácia para cada metodologia avaliada foi igual a 91,72% para a PCR de
amostras obtidas por swab oral; 91,23% para as de swab conjuntival e de 85,50% para as obtidas por swab
retal. A sensibilidade e a especificidade de cada PCR avaliada em relação à PCR de referência foram,
respectivamente, 86,11% e 97,26% para a PCR de swab oral; 90% e 92,59% para a PCR de swab
conjuntival; e 74,24% e 95,77% para a PCR de swab retal. Os valores do coeficiente Kappa para PCR de
Swab Oral, PCR de Swab Conjuntival e PCR de Swab Retal foram, respectivamente, 0,89; 0,89 e 0,82. A
obtenção de amostras por meio de swab de mucosas oral, conjuntival e retal, para o diagnóstico molecular
da infecção pelo FeLV, constitui uma excelente alternativa à venopunção, especialmente em locais onde a
presença de profissionais treinados e habilitados é limitada ou inexistente, ou em abrigos onde a população
de felinos é grande. Além disso, trata-se de uma metodologia mais rápida, menos laboriosa, de menor custo
e melhor aceitação pelo animal. Outro achado relevante desse estudo foi a detecção do DNA proviral do
FeLV em células das mucosas oral e conjuntival, possibilitando o diagnóstico de animais em fase regressiva
da infecção
Monitoramento vetorial e do vírus dengue, Belo Horizonte, Minas Gerais.
No full textDengue Virus, agent of dengue fever, depends on the vector Aedes aegypti to complete his classical cycle, man vector man. Dengue epidemics are associated with high rates of infestation by the vector, whose control is the main way of prevention. The aim of the present study was monitoring the vector and the virus through the number of Aedes aegypti eggs collected as an auxiliary in the fight against the mosquito, control and prevention of Dengue epidemics. In Pampulha, the area that was monitored, 205 ovitraps were installed and, in the period from the 28th week of 2001 to the 27th week of 2005, were inspected weekly for maintenance, egg collection counting and specification. The three indexes obtained: (OPI) ovitrap positivity; (EDI) egg density and (VDI) vectorial density were associated to Dengue fever notifications and analyzed in graphics by time series, fact that enabled the identification of the levels of vector infestation connected to the favoring of viral circulation. The values for the indexes chosen to indicate the limit between risk and control situations were 40 for IDV and 60 for IPO and IDO. The viral monitoring, through the search of infected larva, did not detect any viral circulation in the vector samples, a result that is consistent with the low level of Dengue fever cases confirmed in that period. The association observed between the levels of vector infestation and viral circulation point out that vectorial monitoring by the use of ovitraps is an important tool in dengue surveillance for its ability to indicate risk of epidemics. The continuous follow-up of the levels of vectorial infestation and the possibility of monitoring viral circulation through the search of virus in the larva obtained from the eggs collected justify the set up and maintenance of this kind of procedure.O vírus dengue, agente da febre do dengue, depende do vetor Aedes aegypti para completar seu ciclo clássico homem vetor homem. Epidemias de dengue estão associadas a elevadas taxas de infestação pelo vetor, cujo controle é a principal forma de prevenção. O objetivo deste estudo foi avaliar o monitoramento vetorial e o viral por meio dos ovos de Aedes aegypti coletados, como ferramentas auxiliares no combate ao mosquito, no controle e na prevenção de epidemias por dengue. Na Pampulha, território monitorado, 205 ovitrampas foram instaladas e, no período compreendido entre a 28ª semana epidemiológica de 2001 e a 27ª de 2005, foram inspecionadas semanalmente para manutenção, coleta de ovos para contagem e eventual especificação. Os três índices obtidos: Índice de Positividade de Ovitrampas (IPO), Índice de Densidade Vetorial (IDV) e Índice de Densidade de Ovos (IDO) foram pareados com as notificações de casos de dengue e analisados em gráficos por séries temporais, o que possibilitou a identificação dos níveis de infestação vetorial associados ao favorecimento da circulação viral. Os índices sugeridos como limite entre situações de risco e controle foram, respectivamente, 40 para IDV e 60 para IPO e IDO. O monitoramento viral, resultante da pesquisa de larvas infectadas, não detectou circulação viral nos vetores amostrados, resultado coerente com os poucos casos de dengue confirmados no período. A associação observada entre os níveis de infestação vetorial e circulação viral confirma esse monitoramento como importante ferramenta de vigilância, pela capacidade demonstrada em indicar risco de epidemia. O acompanhamento contínuo dos níveis de infestação vetorial juntamente com a possibilidade de monitorar a circulação viral através de pesquisa viral nas larvas obtidas dos ovos coletados justificam a implantação e a manutenção desse tipo de monitoramento
Padronização e aplicação da PCR para detecção de contaminantes em cultivos celulares, soros e tripsinas
No full textThe aim of this study was the standardization of PCR and the evaluation of their use to detect contaminants in cell cultures, sera and trypsin. A total of six PCR reactions were developed for detection of Mycoplasma (Mollicutes), PPV, PCV1, BLV and BVDV (two assays). Two PCR assays were also standardized, for GAPDH and -actin genes, to evaluate the efficiency of genetic material extraction. During standardization the specificity of primers, the analytical sensitivity and the analytical specificity were evaluated by amplicon restriction analyses and sequencing. After standardization, the PCR were applied to 88 cell culture samples from eight laboratories, belonging to official laboratories network and to education and research laboratories. We also analyzed 10 different batchesof trypsin and 13 different batches of bovine sera, supplied by the same laboratories. Ourresults showed the occurrence of following DNA cell culture contamination: 34.1% forMycoplasma- Mollicutes; 59.1% for PPV; 35.2% for PCV1; 23.9% for BVDV and 3.4% for BLV. Inbovine sera and trypsin samples DNA of BVDV, PCV and PPV was detected. To confirm the specificity of the PCR reactions, some cell cultures samples (amplicons) were sequenced. The PCR reactions standardized in this study allowed the detection of contaminants incell cultures, sera and trypsin samples, and could be used in a routine basis in laboratories working with these materials.O presente trabalho objetivou a padronização e aplicação de PCR para detecção de contaminantes em cultivos celulares, soros e tripsinas. Foram padronizadas um total de seis PCR para avaliar a presença do material genético deMicoplasma (Mollicutes), Parvovírus Suíno (PPV), Circovírus Suíno tipo 1 (PCV1), vírus da Leucose Enzoótica Bovina (BLV) e vírus da Diarréia Bovina a Vírus (BVDV) (dois ensaios). Foram ainda padronizadas duas PCR para os genes GAPDH e -actina para avaliar a eficiência das extrações dosmateriais genéticos. A especificidade dos iniciadores, as sensibilidades e especificidades analíticas das PCR, com a realização de sequenciamento e análise de restrição enzimática foram avaliadas na etapa das padronizações das PCR. Após as padronizações, as PCR foram aplicadas em 88 amostras de cultura celular provenientes de oito laboratórios, pertencentes a redes oficiais e instituições de ensino e de pesquisa. Foram ainda analisadas 10 amostras de tripsinas de lotes diferentes e 13 amostras de soros bovinos de lotes diferentes de alguns dos laboratórios que enviaram as culturas celulares. A ocorrência dos materiais genéticos dos contaminantes celulares foi de 34,1% Micoplasma- Mollicutes; 59,1% PPV; 35,2% PCV1; 23,9% BVDV e 3,4% BLV. Nas amostras de soros bovinos e tripsinas avaliadas, foram detectados o material genético do BVDV, PCV e PPV. Para confirmar a especificidade dos produtos amplificados das PCR de algumas amostras de culturas celulares foi realizado o sequenciamento. As PCR padronizadas neste estudo permitiram detectar os contaminantes propostos nas amostras de culturas celulares, sorose tripsinas de forma rápida, específica e sensível, recomendando-se, pois, suas aplicações emcaráter de rotina para laboratórios que trabalham com culturas celulares e seus insumos
Padronização e aplicação da PCR para detecção de contaminantes em cultivos celulares, soros e tripsinas
No full textThe aim of this study was the standardization of PCR and the evaluation of their use to detect contaminants in cell cultures, sera and trypsin. A total of six PCR reactions were developed for detection of Mycoplasma (Mollicutes), PPV, PCV1, BLV and BVDV (two assays). Two PCR assays were also standardized, for GAPDH and -actin genes, to evaluate the efficiency of genetic material extraction. During standardization the specificity of primers, the analytical sensitivity and the analytical specificity were evaluated by amplicon restriction analyses and sequencing. After standardization, the PCR were applied to 88 cell culture samples from eight laboratories, belonging to official laboratories network and to education and research laboratories. We also analyzed 10 different batchesof trypsin and 13 different batches of bovine sera, supplied by the same laboratories. Ourresults showed the occurrence of following DNA cell culture contamination: 34.1% forMycoplasma- Mollicutes; 59.1% for PPV; 35.2% for PCV1; 23.9% for BVDV and 3.4% for BLV. Inbovine sera and trypsin samples DNA of BVDV, PCV and PPV was detected. To confirm the specificity of the PCR reactions, some cell cultures samples (amplicons) were sequenced. The PCR reactions standardized in this study allowed the detection of contaminants incell cultures, sera and trypsin samples, and could be used in a routine basis in laboratories working with these materials.O presente trabalho objetivou a padronização e aplicação de PCR para detecção de contaminantes em cultivos celulares, soros e tripsinas. Foram padronizadas um total de seis PCR para avaliar a presença do material genético deMicoplasma (Mollicutes), Parvovírus Suíno (PPV), Circovírus Suíno tipo 1 (PCV1), vírus da Leucose Enzoótica Bovina (BLV) e vírus da Diarréia Bovina a Vírus (BVDV) (dois ensaios). Foram ainda padronizadas duas PCR para os genes GAPDH e -actina para avaliar a eficiência das extrações dosmateriais genéticos. A especificidade dos iniciadores, as sensibilidades e especificidades analíticas das PCR, com a realização de sequenciamento e análise de restrição enzimática foram avaliadas na etapa das padronizações das PCR. Após as padronizações, as PCR foram aplicadas em 88 amostras de cultura celular provenientes de oito laboratórios, pertencentes a redes oficiais e instituições de ensino e de pesquisa. Foram ainda analisadas 10 amostras de tripsinas de lotes diferentes e 13 amostras de soros bovinos de lotes diferentes de alguns dos laboratórios que enviaram as culturas celulares. A ocorrência dos materiais genéticos dos contaminantes celulares foi de 34,1% Micoplasma- Mollicutes; 59,1% PPV; 35,2% PCV1; 23,9% BVDV e 3,4% BLV. Nas amostras de soros bovinos e tripsinas avaliadas, foram detectados o material genético do BVDV, PCV e PPV. Para confirmar a especificidade dos produtos amplificados das PCR de algumas amostras de culturas celulares foi realizado o sequenciamento. As PCR padronizadas neste estudo permitiram detectar os contaminantes propostos nas amostras de culturas celulares, sorose tripsinas de forma rápida, específica e sensível, recomendando-se, pois, suas aplicações emcaráter de rotina para laboratórios que trabalham com culturas celulares e seus insumos
Terapia antirretroviral: espectro de utilização e desenvolvimento de resistência
No full textAcquired Immunodeficiency Syndrome (AIDS) was described for the first time in The
the beginning of 80’s. Since then, thousands of people have died from the disease
every year. Since 1987, are being developed antiretroviral drugs with the function of
reducing the viral load of HIV-infected individuals. The implementation of
antiretroviral therapy highly active had a very significant effect in reducing mortality
and morbidity of HIV patients. These drugs act at different stages of the replication
cycle of HIV reducing the process for developing resistance, which occurs due to the
progressive accumulation of mutations in the process of transcription, the high
replication rate by recombination between virus strains and for selective pressures
that are subject in the host are used a combination of two or three classes of drugs.
Recent advances in understanding the mechanisms involved in the entry of HIV into
cells has made this stage of the replication cycle the main target of research into new
molecules for the treatment of HIV infection. The biggest challenge for researchers is
to combat the development of resistance to antiretroviral drugs and thus, new drugs
are under study and some of them are already in use. Another important detail in the
treatment of HIV-infected patients is adherence to treatment; that often becomes
difficult due to the lack of attention and information by health professionals.A Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (AIDS) foi descrita pela primeira vez no
início da década de 80. Desde então, milhares de pessoas morrem dessa doença
todos os anos. Desde 1987, estão sendo desenvolvidas drogas antiretrovirais com a
função de diminuir a carga viral de indivíduos infectados pelo vírus HIV. A
implementação da terapia antiretroviral altamente ativa teve um efeito bastante
significativo na redução da mortalidade e da morbilidade dos doentes HIV. Essas
drogas atuam em diversas etapas do ciclo de replicação do HIV e para diminuir o
processo de desenvolvimento de resistência, que se da pela progressiva
acumulação de mutações durante o processo de retrotranscrição, pela elevada taxa
de replicação, pela recombinação entre as estirpes virais e pelas pressões seletivas
a que está sujeito no hospedeiro, são utilizados a associação de dois ou até três
classes de drogas. Os recentes avanços na compreensão dos mecanismos
envolvidos no processo de entrada do HIV nas células, fez desta fase do ciclo de
replicação um dos principais alvos da investigação de novas moléculas para o
tratamento da infecção pelo HIV. O maior desafio de pesquisadores da área é
combater o desenvolvimento de resistência aos antiretrovirais e dessa forma, novas
drogas estão em estudo e algumas delas já estão em uso. Outro detalhe importante
no tratamento de pacientes infectados pelo HIV é a adesão ao tratamento, que
muitas vezes se torna difícil pela falta de atenção e informação por parte de
profissionais da área da saúde
Monitoramento vetorial e do vírus dengue, Belo Horizonte, Minas Gerais.
No full textDengue Virus, agent of dengue fever, depends on the vector Aedes aegypti to complete his classical cycle, man vector man. Dengue epidemics are associated with high rates of infestation by the vector, whose control is the main way of prevention. The aim of the present study was monitoring the vector and the virus through the number of Aedes aegypti eggs collected as an auxiliary in the fight against the mosquito, control and prevention of Dengue epidemics. In Pampulha, the area that was monitored, 205 ovitraps were installed and, in the period from the 28th week of 2001 to the 27th week of 2005, were inspected weekly for maintenance, egg collection counting and specification. The three indexes obtained: (OPI) ovitrap positivity; (EDI) egg density and (VDI) vectorial density were associated to Dengue fever notifications and analyzed in graphics by time series, fact that enabled the identification of the levels of vector infestation connected to the favoring of viral circulation. The values for the indexes chosen to indicate the limit between risk and control situations were 40 for IDV and 60 for IPO and IDO. The viral monitoring, through the search of infected larva, did not detect any viral circulation in the vector samples, a result that is consistent with the low level of Dengue fever cases confirmed in that period. The association observed between the levels of vector infestation and viral circulation point out that vectorial monitoring by the use of ovitraps is an important tool in dengue surveillance for its ability to indicate risk of epidemics. The continuous follow-up of the levels of vectorial infestation and the possibility of monitoring viral circulation through the search of virus in the larva obtained from the eggs collected justify the set up and maintenance of this kind of procedure.O vírus dengue, agente da febre do dengue, depende do vetor Aedes aegypti para completar seu ciclo clássico homem vetor homem. Epidemias de dengue estão associadas a elevadas taxas de infestação pelo vetor, cujo controle é a principal forma de prevenção. O objetivo deste estudo foi avaliar o monitoramento vetorial e o viral por meio dos ovos de Aedes aegypti coletados, como ferramentas auxiliares no combate ao mosquito, no controle e na prevenção de epidemias por dengue. Na Pampulha, território monitorado, 205 ovitrampas foram instaladas e, no período compreendido entre a 28ª semana epidemiológica de 2001 e a 27ª de 2005, foram inspecionadas semanalmente para manutenção, coleta de ovos para contagem e eventual especificação. Os três índices obtidos: Índice de Positividade de Ovitrampas (IPO), Índice de Densidade Vetorial (IDV) e Índice de Densidade de Ovos (IDO) foram pareados com as notificações de casos de dengue e analisados em gráficos por séries temporais, o que possibilitou a identificação dos níveis de infestação vetorial associados ao favorecimento da circulação viral. Os índices sugeridos como limite entre situações de risco e controle foram, respectivamente, 40 para IDV e 60 para IPO e IDO. O monitoramento viral, resultante da pesquisa de larvas infectadas, não detectou circulação viral nos vetores amostrados, resultado coerente com os poucos casos de dengue confirmados no período. A associação observada entre os níveis de infestação vetorial e circulação viral confirma esse monitoramento como importante ferramenta de vigilância, pela capacidade demonstrada em indicar risco de epidemia. O acompanhamento contínuo dos níveis de infestação vetorial juntamente com a possibilidade de monitorar a circulação viral através de pesquisa viral nas larvas obtidas dos ovos coletados justificam a implantação e a manutenção desse tipo de monitoramento
Epidemiologia molecular de amostras brasileiras do vírus da doença de Aujeszky
No full textAujeszky´s disease is a disease caused by Suid Herpesvirus 1 (SuHV-1) and responsible for considerable economic losses in the swine industry. The illness is marked by severe clinical signs with high letality in young animals and can establish latent infection in the neuronal ganglia. The first diagnostic in Brazil was done in 1912 in São Paulo (SP). New outbreaks occurred since then with an impact of one million reais per year in Santa Catarina State (SC). It is a notifiable disease since 1934 and an eradication program was approved in 2007. The objective of this work was to use molecular epidemiology as a tool to assist in the study of the outbreaks. Twenty five isolates from south and southeast regions, the standard strain Shope and the vaccine strain Bartha were multiplied in PK-15 cells and submitted to PCR for gE and gC genes. The strain Bartha (sB) only amplified for gC as expected. The amplicons were purified, quantified and sequenced using Big Dye Terminator Kit. Sequences were edited and aligned with Bioedit (v.7.0.5.3) and the phylogenetic trees constructed in MEGA 4.0 using the Neighbor-Joining Method. Sequences for gE were highly conserved and grouped in two major groups (A and B, divided in B1 and B2). A group were formed by Shope, isolates from 1983 and 1984 from Paraná (PR), Minas Gerais(MG) and two strains from SP. Isolates from SC and Rio Grande do Sul (RS) clustered in B1 group. The B2 group had three isolates, one from each southern state from outbreaks occurred in 1983 (SC), 2000 (PR) and 2003 (RS). Phylogenetic tree for gC had higher bootstraps values with almost all isolates in the same groups as in gE tree. Only two strains from RS (years 1954 and 2003) clustered in B2. All other strains from SC and two from SP clustered in B1 group. Strains Shope, Bartha and an isolate from SP (1990) clustered in a fourth and new group. Results showed that Brazilian isolates clustered in four different groups. The most recent outbreaks in PR and RS were caused by strains similar to those occurred in SC since 1984. Two alleles for gE were found and could be related to periods of outbreaks in southern states. The nonsynonymous mutations had no influence in the functional sites for N-glycosilation (N-g) in both genes. gC sequences had more variability, some triplets deletions and additions. None of the six N-g sites or the three heparin-binding domains were affected by the mutations. A hot spot region between nucleotides 535 and 559 resulted in a change from hydrophobic to a hydrophilic region in isolates related to Santa Catarina,Rio Grande do Sul and sB. Despite the many mutations in sB, these changes did not occur in 22-amino-acid N-terminal hydrophic domain. This domain functions as a signal sequence and was previous described that mutations in this region in sB were responsible for the reduction in N-g and maturation of gC, which would affect virulence. All Brazilian isolates, except for one sample from São Paulo, clustered in different clades from the international isolates. Results prove that Brazilian isolates diverge genetically from international strains but do not have significant mutations in amino acid compositon. It also showed a different result for the signal previously described for sBA doença de Aujeszky é uma enfermidade causada pelo Herpesvírus suídeo 1 (SuHV-1) e é responsável por perdas econômicas consideráveis na indústria de suínos. É caracterizada por sinais clínicos graves com alta letalidade em animais jovens e pode estabelecer infecção latente no glânglios neuronais. O primeiro diagnóstico no Brasil ocorreu em 1912 em são Paulo (SP). Novos focos ocorreriam depois com um impacto de um milhão de reais por ano somente no estado de Santa Catarina (SC). É uma doença de notificação obrigatória desde 1934 e um programa de erradicação foi aprovado em 2007. O objetivo desse trabalho foi utilizar a epidemiologia molecular como uma ferramenta para assistir no estudo dos focos. Vinte e cinco isolatos das regiões sul e sudeste, a estirpe padrão Shope e a estirpe vacinal Bartha foram multiplicadas em células PK-15 e submetidas a uma PCR para os genes de gE e gC. A estirpe Bartha (sB) amplificou apneas para gC como esperado. Os amplicons foram purificados, quantificados eseqüenciados utilizando-se o Big Dye Terminator Kit. As seqüências foram editadas e alinhados com Bioedit (v. 7.0.5.3) e as árvores filogenéticas foram reconstruídas no MEGA 4.0 usando o método de Neighbor-Joining. As seqüências para gE foram altamente conservadas e agrupadas em dois grupos maiores (A e B, divided in B1 and B2). um grupo foi formado por Shope, isolados de 1983 e 1984 do Paraná (PR), Minas Gerais (MG) e dois isolados de SP. Isolados de SC e do Rio Grande do Sul (RS) agruparam-se no grupo B. O subgrupo B2 foi formado por isolados de focos ocorridos em 1983 (SC), 2000 (PR) e 2003 (RS). A árvore filogenética para gC teve valores de bootstraps maiores com quase todos os isolados nos mesmos grupos que da árvore de gE. Apenas dois isolados de RS (anos 1954 e 2003) agruparam-se em B2. Todos os outros isolados de SC e dois de SP agruparam-se em B1. Shope e sB e um isolado de SP (1990) agruparam-se em um quarto e novo grupo. Resultados mostraram que os isolados brasileiros agruparam-se em quatro diferentes grupos. Os focos mais recentes no PR e RS foram causados por isolados similares aos encontrados em SC desde 1984. dois alelos para gE foram encontrados e podem estar relacionados com os períodos dos focos nos estados do Sul. As mutações não-sinônimas não tiveram influência nos sítios funcionais para N-glicosilação (N-g) em ambos os genes. Seqüências de gC tiveram maior variabilidade e adições e deleções de trincas de nucleotídeos. Nenhum dos três domínios de ligação à heparina foram afetados pelas mutações. Um sítio quente entre os nucleotídeos 535 e 559 resultou em uma mudança de uma região hidrofóbica para hidrofílica nos isolatos de SC, RS e sB. Apesar das muitas mutações em sB, as mesmas não ocorreram no domínio hidrofóbico N-terminal de 22 aminoácidos. Esse domínio funciona como uma seqüência sinal e já foi descrito anteriormente como mutado em sB de modo a participar na redução da virulência da estirpe. Todos os isolados brasileiros, exceto um de SP, agruparam-se em clados diferentes dos isolados internacionais. Os resultados provam que os isolados brasileiros divergemgeneticamente das estirpes internacionais, mas não possuem mudanças ignificativas na composição dos aminoácido
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