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n-3 Dietary supplementation and lipid metabolism: Differences between vegetable- and fish-derived oils
Get PDFThe effect of flaxseed oil rich in linolenic acid (ALA), and a mixed oil (flaxseed oil and fish oil) rich in eicosapentaenoic acid (EPA) and docosahexaenoic acid (DHA), on the lipid clearance and peroxisome proliferator activated receptors (PPARs) in liver and adipose tissue of rats fed for 30 days with the two oils was evaluated. The results showed that after treatment with the mixed oil the hematic triacylglycerol content was significantly decreased compared to control animals. Regarding the tissue distribution of the major omega-3 fatty acids, both oils were able to increase ALA, EPA, docosapentaenoic acid (DPA) in liver and adipose tissue; and DHA solely in the adipose tissue. Finally the treatment with either flaxseed or mixed oil increased hepatic PPAR-γ expression but only the mixed oil enhanced the hepatic expression of PPAR-α. No effect on adipose tissue PPAR-γ expression was observed with both oils’ treatment
Polyunsaturated fatty acid levels in rat tissues after chronic treatment with dietetic oils
No full textBACKGROUND: The essential fatty acids can be helpful in the prevention of several pathologies. The purpose of this study was to quantify the major n-3 and n-6 fatty acids in tissues of rats fed with flaxseed oil and with a dietetic oil in order to evaluate how their chronic supplementation could influence the correspondent in vivo levels and to study the effectiveness of the dietetic oil compared to flaxseed oil. RESULTS: Fatty acids were successfully extracted from biological samples, subjected to derivatization procedure and analysed by high-performance liquid chromatography with UV detection under gradient elution mode. The developed method showed good linearity, precision and accuracy with recoveries ranging from 89% to 92%. Animals treated with flaxseed and dietetic oils showed enhanced levels of n-3 fatty acids compared to control groups, with a significant higher levels of EPA and DHA in the brain and in the adipose tissue of the dietetic groups compared to the flaxseed groups. CONCLUSION: The obtained data underline that the tested oils can effectively enhance the tissue levels of n-3 fatty acids and therefore they could be successfully used in the dietetic treatment of lipid related diseases
Morphological and Receptorial Changes in the Epididymal Adipose Tissue of Rats Subjected to a Stressful Stimulus.
No full textObesity is nowadays related to other pathological conditions such as inflammation, insulin resistance, and diabetes, but little is known about the relationship between psychological stress and adipocytes. We decided to study the expression of the translocator protein (TSPO) 18-kDa, peroxisome proliferator-activated receptor-γ (PPAR-γ), mitochondrial uncoupling protein-1 (UCP-1), and adipocyte morphology in the adipose tissue of rats subjected to stress conditions. In our model of stress, rats fasted for 24 h were placed in a restraint cage and then immersed vertically to the level of the xiphoid process in a water bath at 23 °C for 7 h. After that period, we removed the epididymal adipose tissues for the subsequent analysis. The optical and electron microscopy revealed that adipocytes of control rats formed a continuous epithelial-like cell layer; on the contrary in the adipocytes of stressed rats some cells have merged together and the number of vessels formed seems to increase. Stressed adipocytes presented unilocular cells with numerous mitochondria with a morphology ranging between that of brown adipose tissue (BAT) and white adipose tissue (WAT). Interestingly, when we investigated the subcellular distribution of UCP-1 by immunogold electron microscopy, the adipose tissue of stressed rats was positive for UCP-1. From the immunoblot analysis with anti-PPAR-γ antibody, we observed an increased expression of PPAR-γ in the adipocytes of stressed group compared with control group (P < 0.05). Stress induced the expression of TSPO 18-kDa receptor (B(max) = 106.45 ± 5.87 fmol/mg proteins), which is undetectable by saturation-binding assay with [(3)H]PK 11195 in the control group
Variazione degli acidi grassi W3 e W6 e plasticità del recettore attivante la proliferazione dei perossisomi (PPAR-a) dopo trattamento cronico con olio di lino e olio dietetico nel fegato.
No full textLo scopo del presente lavoro è stato di quantificare l’acido α-linolenico (ALA), eicosapentaenoico (EPA), docosapentaenoico (DPA), docosaesaenoico (DHA), linoleico e arachidonico nel fegato di ratti trattati cronicamente con olio di lino e con un’associazione di oli vegetali e pesce. Si è valutata inoltre, la plasticità dell’isoforma α del recettore PPAR nel fegato.I PPAR sono dei recettori nucleari, eterodimerizzati con il recettore per l’acido 9-cis retinoico [1]. Questi agiscono come fattori di trascrizione per geni coinvolti nel metabolismo. Molti composti si legano con alta affinità ai recettori PPARs, tra questi troviamo gli acidi grassi insaturi a lunga catena (acido linoleico e linolenico), acidi grassi ramificati, acidi grassi ossidati o coniugati, ed infine eicosanoidi, leucotrieni e fibrati.Il tessuto epatico degli animali trattati per un mese con i suddetti oli è stato omogeneizzato con una miscela estraente costituita da ispropanolo/eptano/acido solforico secondo la metodica descritta da Mehta et al. [2]. Dopo aver aggiunto uno standard interno costituito dai 6 acidi grassi da analizzare, i campioni sono stati portati a secco in corrente di azoto e derivatizzati secondo la metodica descritta da Puttmann et al. [3] per ottenere i corrispondenti p-bromofenacil bromuri derivati. I campioni così ottenuti sono stati analizzati mediante HPLC a 35°C, colonna RP-18 endcapped (125 x 4 mm; 5 μm), detector UV a 254 nm.Successivamente il tessuto è stato omogeneizzato in buffer di lisi RIPA, addizionato di inibitori delle proteasi e centrifugato. I campioni così ottenuti sono stati caricati su gel di poliacrilamide bis-tris 4-12% e sottoposti ad analisi di Western blot.Dall’analisi HPLC si è riscontrato per quanto riguarda l’olio di lino un aumento significativo di ALA (p<0,001; one way Anova, Bonferroni’s post test), EPA (p<0,05) e DPA (p<0,05). Per quanto riguarda l’olio dietetico si è avuto un aumento significativo di ALA ed EPA, mentre si è avuto una diminuzione significativa dell’acido linoleico (p< 0,01) e dell’acido arachidonico (p<0,001). I risultati dei Western blot condotti sul tessuto epatico non evidenziano un aumento dell’espressione recettoriale del PPAR-α nei ratti trattati con olio di lino ed olio dietetico
EFFETTI DELLA SUPPLEMENTAZIONE DIETETICA CON OLIO DI LINO SULLA SINTESI DELLE KINURENINE IN ANIMALI CON IL MORBO DI HUNTINGTON.
No full textE’ stato ipotizzato che il pathway delle kinurenine abbia un ruolo importante nel morbo di Huntington, una patologia neurodegenerativa causata dall’espansione del tratto di poliglutamina della proteina huntingtina. Durante la fase iniziale della patologia, i livelli cerebrali di due metaboliti della via delle kinurenine, l’acido chinolinico e il suo precursore la 3-idrossi chinurenina sono risultati elevati. Inoltre in uno studio clinico è stato dimostrato che il trattamento con acido eicosapentenoico aveva effetti benefici sulla corea e sui sintomi motori.Lo scopo della ricerca è stato quello di valutare gli effetti della supplementazione di acidi grassi della serie omega 3 nell’Huntington studiando in particolare il pathway delle kinurenine.Topi transgenici con morbo di Huntington (R6/2 - HD) e topi wild-type (WT) sono stati alimentati cronicamente per un mese con olio di oliva (utilizzato come controllo) e con olio dietetico costituito da un’associazione di olio di lino, ricco in acido linolenico (ALA), olio di girasole e olio di pesce ricco in acido eicosapentenoico (EPA) e docosaesanoico (DHA).Nel cervello è stato determinato un significativo aumento (p<0,05) dei livelli di ALA, EPA e DHA nel topo WT trattato con olio dietetico rispetto al corrispondente trattato col olio di oliva: lo stesso andamento è stato determinato nel topo HD trattato con olio dietetico con un aumento significativo in EPA e DHA (p<0,01). Non è stata determinata nessuna variazione nel livelli di acido linoleico e di acido arachidonico né nei topi WT né in quelli HD. Nei topi HD è stato determinato un minore livello di DHA (p<0,01) e un maggiore livello di acido arachidonico (p<0,01) rispetto ai topi WT. Il profilo degli acidi grassi nel tessuto adiposo riflette quello cerebrale mentre nel fegato è stato misurato un aumento significativo di EPA e DHA sia nel topo WT che nel topo HD dopo trattamento cronico con olio dietetico. EPA e DHA sono maggiori nel topo HD (p<0,001) al WT (p<0,05).Per quanto riguarda gli esperimenti sul pathway delle kinurenine, l’3H-kinurenina è stata iniettata nello striato e si sono misurati i metaboliti prodotti mediante analisi HPLC. Non è stata determinata alcuna variazione nelle concentrazioni di acido chinurenico, acido chinolinico e 3-idrossi chinurenina.Concludendo il trattamento dietetico con olio arricchito in acidi grassi delle serie omega 3 ha mostrato benefici nella patologia di Huntington
Valutazione LCA degli interventi per la conservazione e manutenzione delle superfici di facciata
No full textIl contributo restituisce i risultati di una valutazione LCA condotta su alcune tecniche di intervento per la conservazione e la manutenzione delle superfici di facciata, sia di edifici monumentali sia nell'ambito dell'edilizia diffusa
La supplementazione di olio di lino aumenta la concentrazione plasmatica e tissutale dell'acido linolenico e cambia l'espressione dei recettori attivanti la proliferazione dei perossisomi (PPAR)
No full textE’ stata studiata la biodisponibilità dell’olio di lino dopo supplementazione acuta analizzando i livelli di acido linolenico (ALA), acido linoleico, EPA, DPA e DHA nel siero e nei tessuti (adiposo, epatico e cerebrale) di ratti dopo 2-4-8-16 ore dalla somministrazione. La quantità di olio di lino somministrata è stata corrispondente a 1-2,5-5 g di ALA/kg. Gli esteri metilici degli acidi grassi ottenuti mediante metilazione diretta con MeOH/HCl, sono stati quantificati mediante GC/MS (GC Varian 3400/ Finnigan MAT SSQ 710 A) ad impatto elettronico a –70 eV su colonna capillare HP-INNOWAX (30 m x 0,25 mm DI x 0,25 m).I livelli serici di ALA nel gruppo trattato con olio di lino alla dose di 1 g/kg, dopo 2h aumentano del 70% andando da 0,067 ± 0,007 a 0,096 ± 0,008 mg/mL (P<0.001 Anova, post test Bonferroni) mentre nessuna variazione significativa è stata riscontrata nel gruppo trattato con 2,5 g/kg (0,142 ± 0,009) o con 5 g/kg dopo 2 h (0,140 ± 0,008). Un aumento significativo di ALA è stato determinato nel tessuto adiposo e nel fegato dopo 4 ore dalla somministrazione di 1 g/kg mentre le dosi maggiori (2,5-5 g/kg) non producono nessun cambiamento significativo. Per quanto riguarda l’acido linoleico non è stato determinato nessun aumento significativo confermando che l’olio di lino è soprattutto una fonte di acidi grassi della serie -3.Alla luce dei risultati ottenuti dopo trattamento acuto, si è reso necessario valutare la biodisponibilità dell’olio di lino dopo trattamento cronico di un mese alla dose ottimale di 1 g di ALA/kg. In questo caso la quantificazione degli acidi grassi è stata effettuata mediante HPLC/UV con una colonna a fase inversa C18 previa derivatizzazione con p-bromofenacil bromuro [1]. Si è potuto notare un significativo incremento nel siero e nel fegato dei valori di ALA, EPA e DPA in conformità con studi precedenti [2]. Non ci sono significative variazioni dei livelli serici di colesterolo totale, HDL, LDL mentre si nota una diminuzione significativa della trigliceridemia.E’ stata inoltre valutata mediante tecnica di Western blot l’espressione dei recettori PPAR nelle due isoforme α, e γ rispettivamente nel fegato e nel tessuto adiposo dopo trattamento cronico con olio di lino.Le bande relative a PPAR e e -actina sono state quantificate e l’espressione di PPAR è stata valutata come rapporto PPAR- e /-actina.[1] Metha et al. J. Chromat. B 1998, 719: 9-23[2] Harper C.R. et al. J. Nutr. 2006, 136: 2844-2848
Endogenous benzodiazepines and intestinal bacterial flora in normal and pathological conditions
No full textEvidence has been provided that benzodiazepine (BZD)-like substances are increased in the brains of animals with experimental HE, as well as in serum and in cerebrospinal fluid of patients with HE due to liver cirrhosis and fulminant hepatic failure. Thus, BDZ-like compounds can be regarded as precipitating factors of hepatic encephalopathy requiring the presence of a cerebral supersensitivity to these compounds. The endogenous biosynthetic pathway for the production of natural benzodiazepines has not yet been found while their presence in food has been already described. Furthermore it has been demonstrated by in vitro experiments that microorganims can synthesise molecules with BDZ structures and by in vivo studies that intestinal bacterial flora contributed by 40% to level of total natural benzodiazepines in serum of cirrhotic patients. The aim of the present study was to: 1) confirm the partial contribution of intestine to the level of circulating natural BDZ in commercial BDZ free patients, 2) to study the influence of the chronic administration of a symbiotic compound (Zyrfos-Alfa Wassermann) on the serum concentration of BDZ-like compounds in rats.The serum samples obtained by acid precipitation was chromatographed at 0.8 ml/min on a LiChrospher 100 RP-18 column (250x4.0 mm; 5 m) equilibrated with 80% water/0.1% TFA and 20% acetonitrile. The sample was analysed using a water/0.1% TFA and acetonitrile gradient at 0.5% from 20 to 58% acetonitrile. 75 fraction were collected, lyophilised and tested for their ability to inhibit [3H]RO 15-1788 specific binding to central BDZ binding site.The concentration of BDZ-like substances in portal vein of cirrhotic patients (n=10) reach levels of 1024.24 ± 22.78 ng diazepam equivalent (DE)/mL in comparison with the circulating value of 162.44 ± 10.89 ng DE/mL. These data further demonstrate that there is a intestinal source of the above mentioned compounds. As far as regard the influence of the symbiotic which is composed by probiotic, prebiotic and B vitamins, herein we report that after 14 days of chronic administration the level of BDZ-like compounds decreased from level of 173.5 ± 43.76 ng DE/mL present in controls to level under the detection limit (0.5 ng DE/mL).The reported experiments and data seem to further demonstrate that the intestinal bacterial flora contribute to the amount of circulating natural BDZs both in normal and pathological conditions. Moreover it might be possible to modulate the level of these compounds by the administration of dietary supplements
HPLC determination of fatty acid levels in rats after chronic supplementation of flaxseed oil and dietetic oil.
No full textEssential fatty acids (EFAs) belonging to -3 and -6 families play an important role in vivo, supporting the cardiovascular, reproductive, immune and nervous system functions; an inappropriate balance of these EFAs contributes to the development of diseases, while a proper balance helps maintain and even improve health.The purpose of this research was to study the levels of the principal -3 (ALA: n-lino-lenic acid; EPA: eicosapentaenoic acid; DPA: docosapentaenoic acid; DHA: docosa-hexaenoic acid) and -6 (LA: linoleic acid; AA: arachidonic acid) fatty acids in rat serum and tissues (liver, brain, adipose tissue) after a chronic treatment with flaxseed oil and with a dietetic oil, containing flaxseed oil, fish oil and sunflowers oil. The treatment was planned in order to give to rats the same ALA amount.The biological samples were subjected to liquid-liquid extraction, followed by derivatisation with p-bromophenacyl bromide and then analysed by HPLC/UV on a C18 reversed-phase column under gradient mobile phase conditions.Rats treated with flaxseed oil and dietetic oil showed enhanced levels of n-3 fatty acids compared to the correspondent control group. In serum, ALA levels were slightly higher in the dietetic oil group than in the flaxseed oil group; this fact is probably due to an enhanced absorption and also a decreased metabolism of ALA. The EPA, DPA and DHA serum levels, higher in the dietetic than in the flaxseed group, could derive both from ALA through its metabolism and also from EPA and DHA contained in the fish oil. Brain and adipose tissue showed EPA and DHA levels higher in the dietetic than in the flaxseed group, as occurred for serum samples. Concerning liver samples, the treatment with flaxseed or dietetic oil caused an enhancement for ALA, EPA and DPA levels, while no variations were found for DHA compared to control groups.The data obtained underline that the tested oils can enhance the levels of -3 fatty acids and therefore they could be successfully used in the dietetic treatment of lipid related diseases
HPLC analysis of n-3 and n-6 fatty acid levels in rat serum after chronic treatment with dietetic oils
No full textHigh-performance liquid chromatography HPLC analysis of the major fatty acids of the n-3 family and n-6 family in rat serum was carried out. To perform sample cleanup, existing techniques of lipid extraction were tested and modified to achieve maximal free fatty acids recovery in a reasonable time. Concerning chromatographic analyses, p-bromophenacyl bromide was used as ultraviolet (UV)-derivatizing agent followed by reversed-phase HPLC/UV under mobile phase gradient conditions. The optimized and validated procedure was then applied to rats fed with flaxseed oil and a combination of flaxseed, fish and sunflower oils, defined as "dietetic oil", in order to evaluate how their chronic supplementation can influence serum levels of n-3 and n-6 fatty acids
