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Evaluation de l'expression de la matrix métalloprotéinase 9 et de la neutrophil gelatinase associated lipocalin dans le sérum, l'urine et le tissu tumoral de chiennes atteintes de tumeurs mammaires
In human medicine, it has been shown recently that the level of expression of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) in serum, urine, and breast tissue were significantly increased in patients with breast cancer and correlated to several prognostic factors. In the first part, the author presents the MMP-9 and NGAL as a synthesis of current knowledge on their ability to serve as biomarkers of breast cancer in women. In the second, the author presents the production of canine MMP9 and NGAL recombinant proteins, the production of polyclonal antibodies, and their use in various techniques (ELISA, western blot, immunohistochemistry) to assess the level of expression of these proteins in the blood, urine and breast tissue of dogs suffering from mammary gland tumors and demonstrate a positive correlation between these proteins and the presence of a tumor disease of the mammary gland.TOULOUSE-EN Vétérinaire (315552301) / SudocSudocFranceF
The use of a multi disciplinary approach to investi gate the eti ology of clinical forms in an endangered avian species : the example of the Houbara Bustard
Dans le travail présenté ici, nous avons évalué l’intérêt une approche diagnostique multidisciplinaire pour l’investigation d’entités pathologiques mal caractérisées en utilisant l’Outarde Houbara comme espèce modèle. Cette espèce fait l’objet de plusieurs projets d’élevages conservatoires en Afrique du Nord, au Moyen Orient et en Asie centrale. Nous nous sommes intéressés à trois entités pathologiques ayant toutes le potentiel de mettre en péril les efforts de conservation : l’influenza aviaire hautement pathogène (IAHP), les infections génitales chez les oiseaux inséminés artificiellement et un syndrome respiratoire affectant les oiseaux élevés à l’extérieur et devant à terme renforcer les populations sauvages. Pour la première entité, nous avons validé l’utilisation de l’hybridation in situ par RNAscope pour détecter le gène de matrice des virus influenza aviaires dans des tissus fixés au formol et inclus en paraffine. Cela nous a permis de décrire de manière exhaustive et pour la première fois un épisode infectieux à virus IAHP H5N8 chez l’Outarde Houbara, qui s’est manifestée par des formes cliniques suraigues à aigues de la maladie, associées à un pantropisme tissulaire, avec endothéliotropisme et neurotropisme viral. Pour la seconde entité pathologique, nous avons caractérisé une série de cas de péritonite et salpingo-péritonie associés à des infections par Escherichia coli. La diversité des profils de virulence de la bactérie, identifiée par biologie moléculaire, suggère l’implication de nombreuses souches. Les formes chroniques étaient prédominantes et une infection ascendante a été suspectée. De plus, l’examen histologique a permis l’identification de modifications tissulaires compatibles avec une hyperplasie cystique endométriale, pouvant intervenir comme facteur de risque dans le développement des infections génitales chez l’Houbara. Enfin, pour la troisième entité pathologique, nous nous sommes concentrés sur un syndrome respiratoire multifactoriel d’évolution essentiellement chronique. Divers agents pathogènes ont été détectés chez les oiseaux affectés, y compris une espèce potentiellement nouvelle de Mycoplasme. Des facteurs environnementaux, comme le stress thermique et l’exposition à des tempêtes de sable sont considérés comme des facteurs contributifs importants. Nous avons montré dans ce travail que nous améliorions considérablement le diagnostic étiologique des affections émergentes et réémergentes chez l’Outarde Houbara par une approche multidisciplinaire. Cette approche devrait être encouragée pour étudier la santé d’autres espèces menacées, notamment lors d’une disponibilité limitée en échantillons.In the present work, we assessed the use of a multidisciplinary diagnostic approach to successfully investigate poorly characterized pathological entities using an endangered avian species as a model: the Houbara Bustard. This species is the object of several captive breeding operations located in North Africa, the United Arab Emirates and Central Asia. We focused our attention on three conditions that could potentially jeopardize conservation efforts: high pathogenicity avian influenza (HPAI), genital infections in artificially-inseminated breeders and a respiratory syndrome affecting outdoor birds destined to be released. For the first condition, we successfully validated an RNA scope in situ hybridization (ISH) assay for the detection of the avian influenza A virus matrix gene in formalin-fixed and paraffin-embedded (FFPE) tissues. We then provided the first comprehensive description of HPAI H5N8 natural infection in the Houbara, resulting in hyperacute and acute forms exhibiting marked tissue pantropism, endotheliotropism and neurotropism. For the second condition we characterized a series of cases of peritonitis and salpingo-peritonitis. Chronic forms predominated and an ascending infection was highly suspected. Most of the cases were associated with the isolation of Escherichia coli. The identification of a variety of virulence profiles by molecular analysis of selected bacterial isolates suggested the involvement of multiple strains. Furthermore, histopathology allowed the identification of changes consistent with cystic oviductal hyperplasia, expanding the list of potential risk factors involved in the development of genital infections in the Houbara Bustard.For the third condition, we were able to shed some light on a multifactorial respiratory syndrome, focusing on long-lasting, chronic forms. A variety of viral and bacterial pathogens were detected, including potentially a novel Mycoplasma species. Environmental conditions, such as heat stress and exposure to dust storms, were considered significant contributing factors. We showed that combining classical and novel diagnostic tools we were able to significantly improve the etiological diagnosis of emerging and re-merging conditions in the Houbara. This approach should be promoted to study sanitary issues in other endangered species, characterized by a limited availability of samples
Détection immunohistochimique de p53 chez les animaux domestiques (étude méthodologique)
Les mutations du gène p53 sont les altérations génétiques les plus fréquentes des cancers chez l'homme. Ces mutations entraînent généralement une stabilité accrue de la protéine, rendant sa détection possible par immunohistochimie. Deux anticorps monoclonaux (DO-7 et PAb-240) et polyclonaux (CM-1 et Ab-7) ont été testés chez les animaux domestiques sur des carcinomes épidermoïdes (CE) dans toutes les espèces et des lésions précancéreuses chez le chien et le chat. Une immunoréactivité a été detectée avec les anticorps CM-1 et PAb-240, pour des CE félins, bovin, équin et ovin, ainsi que pour la kératose actinique féline. Aucun marquage n'a été obtenu pour l'anticorps Ab-7, et DO-7 n'a pas réagi dans les espèces féline et canine. L'immunodétection de p53 est donc possible dans les principales espèces domestiques, essentiellement avec les anticorps CM-1 et PAb-240. En outre, les altérations de p53 semblent être, comme chez l'homme, un phénomène précoce dans la cancérogenèse des CE félins.TOULOUSE3-BU Santé-Centrale (315552105) / SudocTOULOUSE-EN Vétérinaire (315552301) / SudocSudocFranceF
Protéine C-kit (données structurales, fonctions et implications en pathologie tumorale chez l'homme et le chien)
La découverte du proto-oncogène c-kit a permis d'identifier un couple récepteur c-kit/ ligand SCF impliqué dans la régulation de l'hématopoïèse et dans la survie et la prolifération des mastocytes, des gamètes et des mélanocytes. Les mutations identifiées des gènes c-kit et SCF sont : 1) Les mutations responsables d'un phénotype spécifique chez les hétérozygotes du à une inhibition du c-kit (anémie, défaut de pigmentation, stérilité, déficience en mastocytes) et d'une létalité périnatale chez les homozygotes 2) Les mutations qui provoquent une activation constitutive et autonome du récepteur, identifiées dans des tumeurs chez le chien (tumeurs mammaires, mastocytomes) et l'homme (mastocytoses, GIST). Le c-kit joue un rôle dans le développement tumoral et constitue un marqueur tumoral utilisé pour leur diagnostic et leur pronostic. Le développement d'un inhibiteur de son activité tyrosine kinase, le STI 571, ouvre de nouvelles perspectives dans le traitement des tumeurs résistantes à la chimio et/ ou radio thérapies.TOULOUSE3-BU Santé-Centrale (315552105) / SudocTOULOUSE-EN Vétérinaire (315552301) / SudocSudocFranceF
Étude comparée de facteurs pronostiques du mastocytome cutané canin (grading histologique de patnaïk, index de prolifération KI-67, profil d'expression de l'onco-protéine kit)
Le mastocytome cutané canin est une tumeur à comportement biologique très variable, fréquente chez le chien. Des facteurs pronostiques comme le grading de Patnaïk, l'index de prolifération Ki-67 et le profil d'expression immunohistochimique de l'oncoproteine KIT, sont utilisés afin de préciser ce comportement et d'adapter le traitement. L'objectif de cette étude se subdivise en trois points : l'étude de la variabilité des réponses données sur une même tumeur par quatre pathologistes lors de la détermination de ces trois facteurs, leurs corrélations et les corrélations entre ces facteurs pronostiques et le taux de survie à un an. Il en résulte une grande variabilité entre les quatre pathologistes dans l'utilisation de ces trois facteurs pronostiques. Le grading de Patnaïk et l'index de prolifération KI-67 sont de bons facteurs pronostiques. Tandis que le profil d'expression immunohistochimique de l'oncoproteine KIT est un outil pronostique difficile d'utilisation.Canine cutaneous mast cell tumor is a tumor with a very changing biologic behaviour, frequently encourtered in dogs. Pronostic factors as Patnaïk histological grading, proliferative marker Ki-67 and KIT oncoprotein immunochemical profile expression are used in order to describe precisely this behavior and then to adapt the treatment. The goal of this study had three points: look on the variability on the answers given by four pathologists using the three prognostic factors, the correlation betwin those factors and the correlation of those factors and the surviving rate at one year. There from results a big variability betwin the four pathologists in the use of the three prognostic factors. Patnaïk grading and proliferation index Ki-67 are good factors while KIT oncoprotein immunochemical profile expression is difficult to use.TOULOUSE-EN Vétérinaire (315552301) / SudocTOULOUSE3-BU Santé-Centrale (315552105) / SudocSudocFranceF
L'érythème polymorphe chez le chien et le chat (données bibliographiques récentes)
L'érythème polymorphe, dermatose rare, s'inscrit dans un complexe de maladies à médiation immune. Cette dermatose résulte d'une réaction d'hypersensibilité à divers allergènes (agents infectieux, médicaments, aliment ). La liste des allergènes est incomplète et le mécanisme pathogénique n'est pas totalement élucidé. Cette dermatose se caractérise dans les formes mineures par des lésions vésiculo-papuleuses subites et auto-limitantes. Plusieurs traitements ont été proposés mais aucun ne reste sans danger. L'érythème polymorphe est aussi connu chez l'homme, chez qui il est bien documenté. Plusieurs points communs frappent l'affection des carnivores domestiques et l'affection humaine.TOULOUSE-EN Vétérinaire (315552301) / SudocTOULOUSE3-BU Santé-Centrale (315552105) / SudocSudocFranceF
Immunohistochimie des tumeurs mésenchymateuses cutanées à cellules fusiformes du chat (complexe du fibrosarcome félin) (études préliminaires de marqueurs de différenciation)
Les sarcomes cutanés félins à cellules fusiformes (SCF) représentent 12 à 41 % des tumeurs cutanées et leur incidence est à la hausse depuis quelques années. Les tumeurs du "complexe fibrosarcome" félin (fibrosarcomes, fasciites nodulaires et fibrohistiocytomes malins) en représentent le premier type tumoral et tous sexes, tous âges et toutes races de chat sont atteints. Leur agressivité locale fréquente et leur haut pouvoir de récidive rendent leur traitement, souvent coûteux, difficile. Bien que ces tumeurs aient un aspect macroscopique similaire, leur pléomorphisme histologique fréquent amène les anatomopathologistes à leur donner des diagnostics différents. Le but de cette étude est donc, à l'aide d'un panel restreint d'anticorps spécifiques, d'aide à leur indentification afin de rendre le pronostic et ultérieurement l'orientation thérapeutique moins problématiques. Six marqueurs de différentiation (NSE,HHF35,MAC387,S100,NF et GFAP) ont été testés immunohistochimiquement, à l'aide d'une technique Streptavidinbiotine peroxidase standard, sur 35 SCF préalablement classés dans un groupe tumoral selon les critères morphohistopathogéniques habituellement utilisés dans la littérature.TOULOUSE3-BU Santé-Centrale (315552105) / SudocTOULOUSE-EN Vétérinaire (315552301) / SudocSudocFranceF
Etude des tumeurs équines à partir des cas autopsiés à l'Institut de pathologie du cheval (Dozule, France) de 1986 à 1998
TOULOUSE3-BU Santé-Centrale (315552105) / SudocTOULOUSE-EN Vétérinaire (315552301) / SudocSudocFranceF
Les dermatoses d'origine virale chez le chat domestique (données bibliographiques actuelles)
Les dermatoses d'origine virale chez le chat domestique (Felis domesticus) constituent un domaine mal connu de la dermatologie féline. Cependant, les nouvelles techniques de diagnostic (microscopie électronique, immunohistochimie et réaction de polymérisation en chaîne) ont permis le développement récent des connaissances de ces affections. L'auteur présente ces dermatoses félines en mettant en valeur les caractéristiques épidémiologiques, cliniques, diagnostiques et de traitement de chacune d'elles. Ces dermatoses sont assez rares mais restent importantes par leur caractère zoonotique pour certaines d'entre elles et le fait qu'elles entrent dans le diagnostic différentiel de très nombreuses affections dermatologiques chez le chatTOULOUSE3-BU Santé-Centrale (315552105) / SudocTOULOUSE-EN Vétérinaire (315552301) / SudocSudocFranceF
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