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IMMUNOSAGGIO PER L'IDENTIFICAZIONE DI ANTICORPI CONTRO IL VIRUS POLIOMA JC (JCPYV) MEDIANTE L'USO DI PEPTIDI SINTETICI
No full textLa presente invenzione si riferisce all’identificazione di nuovi peptidi sintetici, corrispondenti a specifici epitopi/antigeni della proteina virale capsidica 1, VP1, del virus Polioma JC (JCPyV), per rilevare nel siero e in altri fluidi umani anticorpi contro questo virus neurotropo, renetropico, potenzialmente patogeno ed ad attività oncogena, impiegando la tecnica immunologica ELISA indiretto
Gram-negative bacterial lipopolysaccharide retention by a positively charged new-generation filter.
No full textRemoving endotoxins is an important target in the pharmaceutical industry and in clinical practice. A filter
introduced into an intravenous line prevents microbiological contamination, but to date no filters have
retained bacterial endotoxins. In our study, we assayed a new-generation filter which is able to capture
endotoxins from solutions
IMMUNOSAGGIO PER L'IDENTIFICAZIONE DI ANTICORPI CONTRO IL VIRUS POLIOMA BK (BKPyV) MEDIANTE L’USO DI PEPTIDI SINTETICI
No full textLa presente invenzione si riferisce all’identificazione di nuovi peptidi sintetici, corrispondenti a specifici epitopi/antigeni della proteina virale capsidica 1, VP1, del virus Polioma BK (BKPyV), per rilevare nel siero e in altri fluidi umani anticorpi contro questo virus, potenzialmente patogeno inclusa l’attività oncogena, impiegando la tecnica immunologica ELISA indiretta
LINEE CELLULARI EPITELIALI DERIVATE DA CERVICE UTERINA SANA E PATOLOGICA PER LO STUDIO DEL MECCANISMO TRASFORMANTE E DI PROGRESSIONE NEOPLASTICA DEI VIRUS HPV.
No full textA novel mutation of HFE explains the classical phenotype of hereditary hemochromatosis in a C282Y carrier
No full textHereditary hemochromatosis (HH) is the most autosomal recessive disorder in Caucasians, affecting approximately 1 in 300 person. It is characterized by iron overload in many organs, leading to cirrhosis, hepatocellular carcinoma, diabetes, arthritis, heart failure and hypogonadism.
Most of HH patients are homozygous for the C282Y mutations. Some C282Y-carrier patients have been identified to be compound heterozygous for other mutations (H63D, S65C, G93R, IVS3+1G>T, 203delT).
We report a patient with classical HH who is compound heterozygous for C282Y and a novel missense mutation in the exon 4.
This is a 848A>C mutation that causes glutamine to proline substitution at position 283 (Q283P). We hypothesize that the Q283P variant may disrupt the beta2-microglobulin binding site in the HFE protein
Simulated Infusion of Paclitaxel with In-Line Filters
No full text<i>Background:</i> Paclitaxel is one of the most effective anticancer drugs ever developed. To prevent hazards associated with intravenous (IV) administration which include the formation of microbubbles, microbiological contamination and particulate matter, the suppliers recommend that an in-line IV filter should be used during the infusion of the chemotherapeutic agent. <i>Methods:</i> To rule out the possibility that polyethersulfone (PES) membranes retain the paclitaxel during filtration, we carried out specific tests. Paclitaxel retention by PES in-line IV filters was evaluated by a simulated-drug IV infusion and high-performance liquid chromatography analysis. <i>Results:</i> In our model of study, no variation of paclitaxel concentration was revealed before and after filtration using two different filter devices. <i>Conclusions:</i> The results suggest that, under our experimental conditions, paclitaxel concentration in saline solution remains constant before and after filtration. Indeed, our study indicates that the filters analyzed herein, other than preventing hazards associated with IV administration, do not retain paclitaxel, thus avoiding the reduction of the drug concentration and potency during filtration.</jats:p
Sequenze specifiche del DNA del virus oncogeno SV40 in buffy coats umani.
No full textCOMUNICAZIONE ORALE
Innovative methods for the detection of the oncogenic virus SV40 in human samples
No full textSimian virus 40 (SV40) is a potent DNA oncogenic polyomavirus, which seems to be also a human virus. Molecular biology and immunologic studies indicate that SV40 may be contagiously transmitted in humans by horizontal infection. Its spread in humans may occur by different ways, such as sexual, urine, haematogeneous, respiratory and orofecal.routes. SV40 is considered a co-factor in the onset/progression of specific human tumours. Indeed, SV40 DNA sequences have been found in human brain and bone tumors, mesotheliomas and lymphomas. Moreover, SV40 sequences and the expression of its oncoprotein, the large T antigen (Tag), were detected in blood and sperm specimens of neoplastic patients and normal individuals. SV40 infectious virions were found in urine and stool samples, suggesting that SV40 is also an environmental infectious agent. Recent studies show SV40 footprints in specimens from healthy children and adults. These data suggest that the oncogenic virus may be contagiously transmitted within the family. Altogether these results indicate that SV40 can be considered an emerging human viral agent and a putative new pathogenic virus. We believe that the presence of SV40 should be investigated in the human population, as well as in foods, beverages and in the environment. Our laboratory developed new molecular biology and immunologic assays, employing PCR and ELISA techniques. By PCR techniques, both qualitative and quantitative, we detected with a different prevalence SV40 DNA sequences in human tumors, and tissues from healthy individuals. The ELISA test, employing synthetic peptides corresponding to specific SV40 epitopes of the capsid and Tag proteins, was used to carry out epidemiologic and screening tests to verify the presence of SV40 antibodies in sera from oncologic patients and normal blood donors
Substance P in sputum of patients with chronic obstructive pulmonry disease and occupational exposure to respiratory irritants
No full textThe role of tachykininis in airway inflammation has been extensively demonstrated in experimental animal models, but evidence in humans is very sparse. The aim of this study was first to quantify the content of substance P (SP) in sputum of a group of patients, with chronic obstructive pulmonary disease and with exposure to occupational irritants. Secondly, to compare them with sputum SP content of a group of control subjects
ANALISI DI PCR QUALITATIVA E QUANTITATIVA DEL DNA DEL VIRUS ONCOGENO SV40 IN CAMPIONI DI SANGUE DI DONATORI DI CASALE MONFERRATO, CITTÀ CONTAMINATA DALL’AMIANTO
No full textL’amianto è considerato l’agente tumorale responsabile dell’insorgenza del mesotelioma maligno della pleura (MM). MM è un tumore molto aggressivo, attualmente privo di cura, la cui incidenza sta aumentando in molti Paesi, soprattutto nelle coorti di lavoratori ex esposti all’amianto. La predisposizione genetica e l’infezione da virus oncogeno SV40 sono considerati come altri fattori coinvolti nell’insorgenza e progressione del mesotelioma maligno della pleura,. SV40 è un potente virus oncogeno a DNA, accidentalmente somministrato alla popolazione umana su scala planetaria negli anni 1955-63 con i primi vaccini allestiti contro la poliomielite, sia di Salk che di Sabin. SV40 infetta naturalmente il macaco asiatico ed era presente nelle colture primarie di cellule di rene di scimmia impiegate per produrre i primi vaccini antipolio. Molti dati sperimentali indicano che SV40 è anche un virus umano. La trasmissione orizzontale dell’infezione sembra avvenire con diverse modalità, come per via sessuale, ematica, oro-fecale e respiratoria e con le urine contaminate. In condizioni sperimentali SV40 trasforma differenti linee cellulari animali e umane, mentre inoculato per diverse vie in animali da laboratorio induce specifici tumori, come tumori cerebrali, mesoteliomi, osteosarcomi e linfomi. Il potenziale trasformante ed oncogeno di SV40 risiede nella sua principale oncoproteina, l’antigene T grande (agT). Sequenze del DNA di SV40 e l’espressione dell’agT sono state evidenziate in specifici tumori umani, dello stesso tipo indotti negli animali. Ad esempio sequenze di SV40 e l’espressione dell’agT sono state mostrate in circa il 50% dei mesoteliomi maligni della pleura.
Scopo di questo studio è stato di verificare la presenza di sequenze del DNA di SV40 in cellule del sangue periferico di donatori sani provenienti dal Centro Trasfusionale di Casale Monferrato. In questa cittadina industriale, pesantemente contaminata dall’amianto, l’incidenza del mesotelioma maligno della pleura nella popolazione è di dieci volte superiore rispetto ad aree non contaminate con l’amianto. Il DNA estratto da buffy coats, raccolti presso il locale Centro Trasfusionale, è stato analizzato con saggi di PCR qualitativa e quantitativa.
La presenza di sequenze codificanti per la regione ammino-terminale dell’agT di SV40 è stata indagata mediante l’analisi di nested PCR. Tali sequenze specifiche sono state evidenziate in 24/148 (16%) campioni. In seguito, i campioni positivi per l’agT sono stati analizzati per le sequenze della regione di regolazione di SV40. L’analisi di nested PCR ha mostrato che 17/24 campioni sono positivi anche per queste sequenze virali. E’ interessante notare che la regione di regolazione del DNA di SV40 contiene sequenze specifiche che consentono di distinguere tra loro i tre principali virus polioma (SV40, BK e JC) e i diversi ceppi di SV40. Nove amplificati della regione di regolazione di SV40, di campioni diversi di buffy coats, sono stati sottoposti ad analisi di sequenziamento del DNA. La sequenza nucleotidica indica che i nove amplificati appartengono al ceppo selvatico 776.
Allo scopo di quantificare nei campioni di sangue SV40-positivi la carica del DNA virale sono state eseguiti saggi di Real-Time PCR su 22 DNA estratti da buffy coats. Questa analisi ha confermato che i 22 campioni erano SV40-positivi per le sequenze dell’agT, con un numero di copie di DNA virale comprese tra 10 e 104 per 100,000 cellule o genomi equivalenti.
La nostra ricerca indica che la prevalenza di SV40 in campioni di buffy coats di donatori sani di Casale Monferrato, è simile a quella riscontrata in altri donatori di sangue di aree non contaminate dall’amianto. I nostri risultati indicano che l’amianto presente nell’ambiente di Casal Monferrato non facilita la diffusione dell’infezione di SV40, almeno tra i donatori sani analizzati. Tuttavia, la presenza di sequenze di SV40 nei donatori suggerisce l’ipotesi che amianto e virus oncogeno agiscono come co-fattori nell’insorgenza dell’MM. Infatti, il minerale amianto oltre ad essere agente tumorale è anche un potente immunodeppressivo che potrebbe favorire la diffusione dell’infezione di SV40 nei tessuti dell’ospite. In condizioni peculiari dell’individuo/paziente si potrebbe quindi innescare l’azione combinata tra amianto e virus oncogeno durante il meccanismo multifase della tumorigenesi che nei lavoratori ex esposti all’amianto può durare decenni.
I nostri risultati relativi alla presenza di sequenze di SV40 nei donatori di sangue indicano che il virus oncogeno SV40 circola nella popolazione umana. La sua prevalenza è di circa il 15%-20%, mentre il numero di copie di DNA virale nei campioni positivi risulta essere di bassa entità
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