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PIPERITENONE OSSIDO E FARMACI ANTIMICOTICI: INTERAZIONI E LORO IMPIEGO NELLA FARMACO RESISTENZA
Attività antimicrobica, immunostimolante e antinfiammatoria degli oli essenziali di lamiaceae
La complessa composizione degli oli essenziali è una caratteristica peculiare che ne prospetta l’uso alternativo o integrativo agli antibiotici di sintesi, il cui utilizzo nella pratica clinica spesso porta allo sviluppo di una resistenza specifica da parte dei microbi nei confronti dei farmaci
Characterization of biofilms in drug-sensitive and drug-resistant strains of Candida albicans
In this study, we investigated the biofilm formation in strains of Candida albicans susceptible (CO23) or resistant to fluconazole (CO23RFLC) or micafungin (CO23RFK). The effect of drug resistance on biofilm formation was investigated through the cell surface hydrophobicity and the mannan content. Moreover, biofilm formation was evaluated after 24, 48 and 72 hours with crystal violet assay, dry weight, as well as scanning electron microscopy. Our results showed an increase in hydrophobicity, polysaccharides content, metabolic activity and dry weight. Observation of sensitive and resistant strains confirmed the differences in cell morphology. Finally, the expression of genes involved in biofilm formation, such as HWP1 and EFG1, evaluated with relative real-time RT-PCR. Resistant strains proved to up- regulate the expression of HWP1. These results demonstrated the existence of important differences between drug-susceptible and drug-resistant strains biofilm of C. albicans
Remote loading of aloe emodin in gemini-based cationic Liposomes
Anthraquinone compound aloe-emodin (AE)
has shown antineoplastic, antibacterial, antiviral, and antiinflammatory
properties and scavenging activity on free
radicals. Because of these therapeutic features, AE has been
attracting increasing interest and could be applied in the curing
of many diseases. However, until now the physicochemical
features of this compound have not been fully investigated;
furthermore, its wide application might be hindered by its
scarce solubility in aqueous media (∼19 μM). The inclusion of
AE in nanocarriers, such as cationic liposomes, could allow its
delivery effectively and selectively to target sites, reducing side
effects in the remaining tissues. In this work, the weak acid nature of AE, because of its two phenolic functions, was exploited to
load it remotely in the internal aqueous phase of liposomes in response to a difference in pH between the inside and outside of
the liposomes, pHin > pHout. The inclusion of AE in gemini-based cationic liposomes b
Localisation of Bgl2p upon antifungal drug treatment in Candida albicans
Several proteins are covalently bound to the cell wall glucan (glucan-associated proteins (GAPs)) in Candida albicans and different drugs may cause their modulation. Proteomic analysis is a suitable approach to study differential GAP patterns between control and drug-treated cells. Since antimycotics induce variation in GAP content, we investigated the effect of a sublethal dose of micafungin and observed a clear increase in Bgl2p, an enzyme with glucanosyltransferase activity, with respect to a general decrease in cell wall protein content. Immunoelectron microscopy using mouse antiserum confirmed this increase of Bgl2p on the outer cell wall but also revealed a dramatic increase in the immature Bgl2p isoform in the cytoplasm of drug-treated cells. Since this increased expression of Bgl2p is clearly dependent upon micafungin treatment, this enzyme appears to be one of the survival strategies of C. albicans and thus could be considered the molecular basis of antifungal resistance and also as a potential valuable candidate for future vaccine development. © 2008 Elsevier B.V. and the International Society of Chemotherapy
Meccanismo di azione e proprietà terapeutiche dell’olio essenziale di Melaleuca alternifolia su ceppi farmacosensibili e farmacoresistenti di Candida albicans
Le malattie infettive sono causate da microrganismi che interagiscono in modo
complesso con l’ospite. La scoperta degli antibiotici e il loro impiego sono risultati molto
efficaci nel trattamento delle infezioni batteriche e fungine, ma il loro uso indiscriminato ha
purtroppo causato lo sviluppo di ceppi patogeni resistenti.
Infatti, negli ultimi anni le terapie anticancro (chemio e radio-terapia) e l’AIDS hanno
pesantemente contribuito all’aggravarsi dell’immunocompromissione dei pazienti che
vivono a lungo in questo stato. Difatti, in questi pazienti sono ricorrenti le infezioni fungine
localizzate e sistemiche e per prevenire l’evolversi di tali patologie viene incrementato l’uso
di farmaci antimicotici anche per la profilassi. Purtroppo, con l’uso eccessivo di questi
farmaci si è registrato anche un significativo incremento dei fenomeni di resistenza agli
antimicotici (1). Storicamente la resistenza clinica è stata definita come persistenza o
progressione di un’infezione nonostante la terapia antimicrobica appropriata. Una
successiva risposta clinica alla terapia antimicrobica, tipicamente, non solo dipende dalla
suscettibilità dell’organismo patogeno, ma molto dal suo sistema immunitario, dalla
penetrazione e distribuzione del farmaco e da complicanze nel paziente. La resistenza in
vitro di un isolato può essere descritta come primaria o secondaria. Un organismo che
risulta resistente ad un farmaco prima dell’esposizione presenta resistenza primaria
intrinseca. La resistenza secondaria si sviluppa in risposta all’esposizione ad agenti
antimicotici (2). Una correlazione di suscettibilità rivelata in vitro con quella riscontrata in
vivo, è stata osservata per infezioni mucosali di Candida in pazienti HIV positivi (3).
Candida albicans (C. albicans) è un fungo diploide che vive solitamente come
colonizzatore innocuo e commensale del tratto gastrointestinale e genitale dell’uomo,
oppure come patogeno opportunista in presenza di uno o più fattori predisponenti (4).
La sua patogenicità è dovuta alla capacità di invadere tessuti e organi e di dar luogo a
difficili, talvolta intrattabili, infezioni superficiali.
Anche l’abilità di C. albicans nel formare biofilm sulle superfici (cellule endoteliali e
cateteri) è considerata responsabile della “resistenza clinica”. È noto infatti, che la
formazione dei biofilms può conferire protezione al microrganismo all’interno degli strati,
portando al fallimento della terapia antimicotica (5)
Attività antimicotica dell’olio essenziale di Mentha suaveolens
Tra i funghi di interesse medico Candida albicans, fungo dimorfo, ricopre un ruolo di rilievo
in quanto normalmente presente come commensale a livello del tratto gastrointestinale
nell’ospite sano, ma in condizioni di immunosoppressione diviene predominante e patogeno.
Altri miceti di rilievo sono rappresentati dal Criptococcus neoformans, lievito capsulato, la cui
capsula costituisce il principale fattore di virulenza e dai generi Microsporum e Tricophyton,
funghi filamentosi dermatofiti, generalmente trasmessi dagli animali all’uomo, invadendo i
tessuti cutanei e si nutrendosi di cheratina.
Il trattamento spesso inappropriato e prolungato con farmaci di sintesi ha determinato in alcuni
casi il fallimento terapeutico a causa dello sviluppo della farmaco-resistenza. Tutto ciò ha spostato
l’interesse verso l’utilizzo di sostanze naturali come valida alternativa ai farmaci di sintesi, verso i
quali è più difficile lo sviluppo di farmacoresistenza per la loro composizione più complessa.
Uno studio svolto precedentemente sull’olio essenziale di Mentha suaveolens proveniente
dal Marocco, i cui principi attivi sono stati identificati come pulegone, piperitenone ossido
(PEO) e piperitone ossido (PO) in concentrazioni differenti a seconda della sottospecie
esaminata (1, 2), ha messo in evidenza l’attività antimicrobica di quest’olio essenziale. Poiché
questa pianta cresce spontaneamente nell’area mediterranea, ne abbiamo voluto studiare in
particolare l’attività antimicotica del suo olio essenziale
Meccanismo di azione e proprietà terapeutiche degli oli essenziali su ceppi di Candida albicans farmacosensibili e farmacoresistenti
Effects of Mentha suaveolens Essential Oil Alone or in Combination with Other Drugs in Candida albicans
Candidosis is the most important cause of fungal infections in humans. The yeast Candida albicans can form biofilms, and it is known that microbial biofilms play an important role in human diseases and are very difficult to treat. The prolonged treatment with drugs has often resulted in failure and resistance. Due to the emergence of multidrug resistance, alternatives to conventional antimicrobial therapy are needed. This study aims to analyse the effects induced by essential oil of Mentha suaveolens Ehrh (EOMS) on Candida albicans and its potential synergism when used in combination with conventional drugs. Morphological differences between control and EOMS treated yeast cells or biofilms were observed by scanning electron microscopy and transmission electron microscopy (SEM and TEM resp.,). In order to reveal the presence of cell cycle alterations, flow cytometry analysis was carried out as well. The synergic action of EOMS was studied with the checkerboard method, and the cellular damage induced by different treatments was analysed by TEM. The results obtained have demonstrated both the effects of EOMS on C. albicans yeast cells and biofilms and the synergism of EOMS when used in combination with conventional antifungal drugs as fluconazole (FLC) and micafungin (MCFG), and therefore we can hypothesize on its potential use in therapy. Further studies are necessary to know its mechanism of action.Candidosis is the most important cause of fungal infections in humans. The yeast Candida albicans can form biofilms, and it is
known that microbial biofilms play an important role in human diseases and are very difficult to treat. The prolonged treatment
with drugs has often resulted in failure and resistance. Due to the emergence of multidrug resistance, alternatives to conventional
antimicrobial therapy are needed. This study aims to analyse the effects induced by essential oil ofMentha suaveolensEhrh (EOMS)
on Candida albicans and its potential synergism when used in combination with conventional drugs. Morphological differences
between control and EOMS treated yeast cells or biofilms were observed by scanning electron microscopy and transmission electron
microscopy (SEM and TEM resp.,). In order to reveal the presence of cell cycle alterations, flow cytometry analysis was carried out
as well. The synergic action of EOMS was studied with the checkerboard method, and the cellular da
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