Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine

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    An epidemiological survey of zoonotic Babesia species in questing ticks in Hokkaido, Japan, using a newly developed PCR-sequencing approach

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    Human babesiosis caused by tick-borne zoonotic Babesia species is a public health concern. However, the absence of diagnostic assays for several Babesia species limits surveillance efforts, leading to knowledge gap on endemic species and vectors. The present study aimed to develop a PCR-sequencing-based method for detecting zoonotic Babesia species and use it to survey questing ticks in Hokkaido, Japan. Through phylogenetic analysis of 18S rRNA sequences, we grouped zoonotic Babesia species into three: 1) Babesia microti and Babesia duncani, 2) Babesia divergens, Babesia venatorum, and Babesia odocoilei, and 3) Babesia crassa-like species and Babesia sp. KO1. Three 18S rRNA-based PCR assays were then developed for each group and used to screen DNA samples from 1456 questing ticks collected in Hokkaido, Japan. Of these ticks, 10 were positive in B. microti/B. duncani-PCR assay, including five Ixodes persulcatus, three Ixodes ovatus, and two Haemaphysalis japonica. Phylogenetic analysis of 18S rRNA sequences derived from the PCR amplicons confirmed that these three tick species harboured US- and Hobetsu-types of B. microti. Additionally, one I. persulcatus tested positive in B. divergens/B. venatorum/B. odocoilei-PCR assay, with phylogenetic analyses of 18S rRNA and beta-tubulin sequences suggesting the presence of a B. divergens-like species. All ticks were negative in B. crassa-like/Babesia sp. KO1 PCR assay. In conclusion, the present study, which developed a novel diagnostic approach to detect major zoonotic Babesia species, not only detected zoonotic Babesia in known tick vectors, but also identified H. japonica as a new potential vector of B. microti in Hokkaido. c 2025 Elsevier B.V., All rights reserved

    My twenty-four years with the symposium on wildlife and traffic : A look back at 49 presentations

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    application/pdfjournal articl

    STUDY ON THE ROLE OF INTESTINAL FERMENTATION OF TURMERIC STARCH IN RATS

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    帯広畜産大学博士(農学)Doctor of Agriculture2024application/pdf博士学位論文大学院畜産学研究科 畜産科学専攻Doctoral Program of Animal Science and Agriculturedoctoral thesi

    Study on the improvement of domestic animal production efficiency in South American Camelids

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    帯広畜産大学博士(農学)Doctor of Agriculture2024application/pdf博士学位論文大学院畜産学研究科 畜産科学専攻Doctoral Program of Animal Science and Agriculturedoctoral thesi

    Effects of diet mixing on the survival and performance of the brachypterous grasshopper Podisma sapporensis (Orthoptera: Acrididae) nymphs and adults

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    This study examined the effects of diet mixing during the nymphal stage on the performance of the brachypterous grasshopper Podisma sapporensis during both the nymphal and adult stages. This species mainly feed on the leaves of Japanese butterbur, Petasites japonicus var. giganteus (Pjg), and also feed on the leaves of giant knotweed, Reynoutria sachalinensis (Rs), wormwood leaves, Artemisia montana, and angular Solomon's seal, Polygonatum odoratum var. maximowiczii. We investigated whether diet mixing with Pjg during the nymphal stage enhances the survival or fecundity of this grasshopper. It was revealed that feeding nutritionally inferior Rs to nymphs extended the adult lifespan. The reproductive speed per lifespan was reduced in females fed the mixed diet, as there was no significant difference in the number of eggs laid per lifespan regardless of the Rs ingested. These results indicate that diet mixing, or the additional Rs intake, had an opposite effect on the life history in the form of higher nymphal mortality and longer adult lifespan of P. sapporensis, altering the reproduction schedule. © 2025 The Entomological Society of Japan

    目的に合った土壌改良が重要 : 日本も世界も真理は同じ

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    application/pdf土壌断面に学ぶ No.47journal articl

    北海道芽室町におけるゴイシシジミの追加記録

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    application/pdfjournal articl

    Noradrenergic Regulation of the Medial Prefrontal Cortex Mediates Stress Coping in Postpartum Female Mice

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    The prevalence of depression in women increases during the postpartum period. We previously reported that subchronic exposure to social stress decreased passive coping in postpartum female mice. This study aimed to investigate whether noradrenaline regulation might regulate coping styles in mice. We first determined whether a different type of stress, subchronic physical stress, decreases passive coping in postpartum females. Postpartum female, virgin female, and male mice were exposed to subchronic restraint stress (restraint stress for 4 h for 5 consecutive days). Subchronic restraint stress decreased passive coping in postpartum females but not in virgin females and males in the forced swim and tail suspension tests. We next examined the neuronal mechanism by which subchronic stress decreases passive coping in postpartum female mice. Neuronal activity and expression of noradrenergic receptors in the medial prefrontal cortex (mPFC) were analyzed using immunohistochemistry and reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction, respectively. The mPFC was manipulated using chemogenetics, knockdown, or an α2A adrenergic receptor (AR) antagonist. Immunohistochemistry revealed that subchronic restraint stress increased glutamatergic neuron activation in the mPFC via forced swim stress and decreased α2A AR expression in postpartum females. Chemogenetic activation of glutamatergic neurons in the mPFC, knockdown of α2AAR in the mPFC, and the α2A AR receptor antagonist atipamezole treatment decreased passive coping in postpartum females. Subchronic restraint stress decreased passive coping in postpartum females by increasing glutamatergic neuron activity in the mPFC through α2A AR attenuation. The noradrenergic regulation of the mPFC may be a new target for treating postpartum depression. © The Author(s), under exclusive licence to Springer Science+Business Media, LLC, part of Springer Nature 2024

    A diversity of uterine immune response to peptidoglycans (PGNs) derived from different bacterial species in cattle

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    帯広畜産大学博士(農学)Doctor of Agriculture2025application/pdf畜産・酪農業によるウシ生産は世界の食料安全保障および農業経済において重要な役割を果たしているが、生殖機能不全、特に不妊症と子宮の炎症は、母体の免疫機能を阻害し妊娠率を低下させる。ウシ子宮内の微生物生態系の多様性は、子宮の健康に影響を与える。大腸菌や黄色ブドウ球菌等の病原体は子宮内膜炎を引き起こし、炎症と子宮内膜の損傷によって受胎能力を損なわせる。一方、ヒトにおいては、乳酸菌はその産生する乳酸と抗菌性化合物が病原体のコロニー形成を防ぎ免疫反応を調節することによって、子宮の健康を促進すると考えられている。ウシにおいても、乳酸菌が子宮の炎症と健康をコントロールしている可能性が示されており、受胎性に関係する可能性がある。 大腸菌のリポ多糖(LPS)はTLR4と関係し、黄色ブドウ球菌のペプチドグリカン(PGN-Sa)はTLR2を介した炎症を活性化する。特に、PGN-Saは子宮の炎症を誘導し、ウシの子宮内膜上皮細胞(BEEC)における正常な生理的精子誘導性炎症を阻害する。対して、乳酸菌由来のPGN(PGN-L)はマクロファージにおいて抗炎症作用を示すが、ウシの子宮における役割は未解明である。本研究では、BEECsにおけるTLR2アゴニスト(PAM3CSK4:PAM3)で誘起したTLR2を介した炎症に対する、L.rhamnosus 由来のPGN-LrおよびL.acidophilus 由来のPGN-Laの免疫調節効果を、毒性のあるPGN-Saと比較検討した。 第1章では、培養した乳酸菌株からPGN-LrおよびPGN-Laを抽出・単離して、PGN-Saと比較し化学構造を解析した。また、炎症反応の原因となるPGN-LおよびPGN-Sa内のリガンドを同定するために、In silico解析を行った。結果、PGN-SaはTLR2/1に対して安定した親和性を示し、PAM3と同様にヘテロ二量体化を安定化させる可能性があることが明らかになった。しかし、PGN-LはTLR2のみと結合し、TLR2/1の二量体化を活性化できない。これらの知見は、PGNSaとPAM3がTLR2/1シグナル伝達経路を介した炎症反応を引き起こすのに対し、PGN-LはTLR2/1アンタゴニストとして働く可能性があり、潜在的に炎症を予防する機能を持つことを示している。 第2章では、炎症刺激としてPAM3を用い、BEECにおけるTLR2/1介在性炎症に対するPGN-L免疫調節作用について検討した。初めに、LPS およびPAM3 が誘発する炎症反応に対するPGN の効果を細胞レベルで評価するため、in vitro 実験を行った。BEEC を、PGN-Lr、PGN-La、またはPGN-Saで24時間刺激した後、LPS(1 ng/mL)で1時間、またはPAM3(100 ng/mL)で3時間刺激した。また、炎症遺伝子(TNF、CXCL8、IL1B、PTGES)およびTLR(TLR1、TLR2、TLR4、TLR6)の発現をRT-qPCR で定量した。TNF、PTGES、TLR2 のタンパク質発現は免疫蛍光法で検出し、培養液中のPGE2 濃度はELISA 法で測定した。結果、LPS、PGN-Sa、PAM3 は炎症性メディエーターの発現を有意に上昇させたが、PGN-Lr とPGN-La は単独ではBEEC の炎症反応を誘導しなかった。重要なことに、PGN-Lr 処理群とPGN-La 処理群のどちらでも、PAM3 による炎症性遺伝子の発現増加が抑制され、培養上清中のPGE2 分泌が減少した。しかしながら、PGN-Lr とPGNLaどちらの処理群も、BEEC におけるLPS 誘導性の炎症性遺伝子発現増加は減少しなかった。これらの結果から、TLR2/1 のヘテロ二量化を促進して拮抗剤として働き炎症を引き起こすPGN-SaやPAM3 に対し、PGN-L はPAM3 によるTLR2/1 二量体化を阻害することにより、炎症反応を抑制する可能性が示された。すなわち、PGN-Lr およびPGN-La はBEECs においてTLR2/1 シグナルを調節し、子宮炎を抑制して子宮の健康を維持する作用をもつこととの関連が示唆された。 以上の結果から、PGN-LrおよびPGN-Laはin vitroにおいてTLR2/1経路を介する子宮炎を抑制する能力を有し、子宮上皮におけるTLR2/1シグナルの調節を通じて、その作用を発揮していると考えられる。今後、乳牛を対象としたin vivo研究によって、PGN-Lの生殖効率改善に向けた予防または治療的応用の可能性について検証することが重要だと考えられる。博士学位論文大学院畜産学研究科 畜産科学専攻Doctoral Program of Animal Science and Agriculturedoctoral thesi

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